血管内皮细胞生长因子和血管生成与胃癌发展的关系

目的探讨血管内皮细胞生长因子（ＶＥＧＦ）和血管生成与胃癌发展的关系。方法应用免疫组织化学和原位分子杂交技术,检测５６例人胃癌组织ＶＥＧＦ蛋白表达和微血管密度（ＭＶＤ）及部分胃癌ＶＥＧＦｍＲＮＡ表达,分析ＶＥＧＦ和ＭＶＤ、及其与胃癌组织学分型、浸润深度、生长方式、淋巴结转移、远处转移和预后的关系。结果ＶＥＧＦ阳性者ＭＶＤ值显著高于阴性者（Ｐ＜００１）,ＶＥＧＦ表达和ＭＶＤ与胃癌浸润深度（Ｐ＜００１）、淋巴结转移（Ｐ＜００５）和远处转移（Ｐ＜０．０５）密切相关,而与组织学分型和生长方式无关（Ｐ＞００５）;ＶＥＧＦ表达阳性或ＭＶＤ≥４３的胃癌患者５年生存率较低;ＶＥＧＦｍＲＮＡ表达与ＶＥＧＦ蛋白表达具有一致性,但其分布不同。结论ＶＥＧＦ与胃癌的血管生成密切相关,对胃癌的生长和浸润转移有促进作用,ＶＥＧＦ和ＭＶＤ可作为反映胃癌生物学行为的指标之一     

人肝癌组织中CD34和血管内皮生长因子的表达及微血管密度的 …

目的 探讨ＣＤ３４和血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）在人肝癌组织中的表达及微血管密度（ＭＶＤ）的病理意义。方法 对３０例人肝细胞肝癌９ＨＣＣ）及相应癌旁组织,１０例肝硬化,５例轻度慢性肝炎和４例正常肝组织,进行了ＣＤ３４、ＶＥＧＦ免疫组织化学ＳＰ法检测,对ＣＤ３４阳性血管进行ＭＶＤ计数,对ＶＥＧＦ进行半定量计数,并结合肝癌的病理特征进行分析。结果 ＨＣＣ组织中ＣＤ３４呈广泛,窦隙状阳性表达,而在正常及     

骨肉瘤组织中三种血管形成因子的表达

肿瘤性血管的形成受血管形成因子的特异性调节 ,肿瘤细胞及宿主细胞产生并释放多种血管形成肽 ,刺激血管内皮细胞分裂、增殖、迁移并吻合成新血管[1] 。本实验以人体骨肉瘤切除标本为材料 ,检测血管形成因子血管内皮细胞生长因子 (ＶＥＧＦ)、碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)、内皮生长因子 (ＥＧＦ)蛋白的表达 ,探讨各血管形成因子与肿瘤微血管密度、骨肉瘤远处转移的关系及对患者预后的意义。一、材料与方法1 手术切除的 5 8例骨肉瘤标本 ,常规 4%甲醛固定。石蜡包埋 ,4μｍ连续切片 ,分别进行ＨＥ及免疫组织化学染色。兔抗ＶＥＧＦ、…     

表皮生长因子受体在胃黏膜肠化及胃癌中表达的研究

表皮生长因子受体 (ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｒｅｃｅｒｐｔｏｒ,ＥＧＦＲ)是细胞信号传递系统的一部分。许多研究表明 ,在许多肿瘤中都有ＥＧＦＲ的过度表达 ,且ＥＧＦＲ表达与肿瘤的生物学行为密切相关〔1,2〕。本文应用免疫组织化学法及黏液组织化学法 ,检测胃黏膜肠化及胃癌组织中ＥＧＦＲ表达情况 ,探讨ＥＧＦＲ与胃黏膜肠化及胃癌生物学行为的关系。1　材料与方法1.1　材料　收集遵义医学院近 5年手术切除或胃镜活检标本。经病理证实 :慢性胃炎伴肠化 4 5例 ,胃癌癌旁肠化 2 6例及胃癌 76例 ,其中早期胃癌 18例 ,…     

胃癌细胞凋亡与巨噬细胞浸润的关系及其意义

有研究表明细胞凋亡与肿瘤发生、发展及治疗有关 ,有资料证实多种基因参与了细胞凋亡调控[1,2 ] 。我们应用原位ＤＮＡ末端转移酶标记法 (ＴＵＮＥＬ)和免疫组织化学技术 ,就细胞凋亡与巨噬细胞浸润的关系进行研究 ,为胃癌治疗和预后预测提供帮助。一、材料和方法1 病例及取材 :6 7例胃癌根治术标本 ,其中 11例乳头状腺癌 ,2 1例管状腺癌 (乳头状腺癌和管状腺癌以下简称为分化腺癌 ) ,2 8例低分化腺癌和 7例未分化癌。分别在癌灶中心和癌灶四周 (癌和癌旁组织各半 )切取 4块。患者中男42例 ,女 2 5例。标本经 4%甲醛固定 ,石蜡包埋 ,4μｍ厚…     

血管内皮细胞生长因子受体KKR胞外配基结合区单？…

目的 研制能封闭血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）受体ＫＤＲ的单克隆抗体（ＭｃＡｂ）?探讨其抑制ＶＥＧＦ诱导的体内外活性。方法 以原核表达的ＫＤＲⅠ￣Ⅳ区融合蛋白免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，用杂交瘤技术制备抗ＫＤＲⅠ￣Ⅳ的ＭｃＡｂ，并用免疫双扩、ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印迹鉴定其亚类和抗原结合特异性，用ＶＥＧＦ刺激内皮细胞增殖及鸡胚血管形成实验检测该抗 的中和活性。结果 通过筛选和鉴定获得了２株ＫＤＲⅠ     

原位检测新基因SNC66在胃癌组织与正常胃粘膜中的表达

目的: 观察新基因SNC66在胃癌组织中的表达水平,分析SNC66表达水平与胃癌发生的相关性。 方法:以β-actin为对照,对20例胃癌组织及其配对正常胃粘膜的石蜡切片,进行原位cRNA/mRNA分子杂交和原位RT-PCR扩增。 结果:两种检测方法表明,SNC66在正常胃粘膜组织中都呈强阳性表达。而在胃癌组织中,原位分子杂交检测表明,20例标本SNC66不表达和弱阳性表达各8例,强阳性表达4例。原位RT-PCR检测表明,当循环数为10时,此20例胃癌标本中不表达、弱阳性和呈强阳性表达数分别为6,9和5;而当循环数为25时,则4例不表达,16例呈强阳性表达。 结论:SNC66基因在胃癌组织中存在明显的表达降低和表达缺陷。SNC66可以作为一个胃癌负相关基因加以进一步研究。     

单纯疱疹病毒荧光标记单克隆抗体的临床应用

为了探讨单纯疱疹病毒 (ＨＳＶ)荧光标记单克隆抗体 (ＭｃＡｂ)的临床应用价值 ,我们采用自制ＨＳＶ荧光标记ＭｃＡｂ以直接免疫荧光法 (ＤＦＡ)检测了来源于本院及广州市皮肤病防治所的各类临床疱疹性疾病标本共 136份 ,并与微量间接荧光法 (Ｍｉｃｒｏ ＩＦＡ)、组织培养分离法作了初步比较 ,以期可获得一种用于临床应用的快速检测ＨＳＶ抗原的方法。其病例分布及检测结果如下 :(1)宫颈作者单位 :5 10 12 0广州医学院第一附属医院检验科 (肖庆忠 ,陈柏铭 ) ;中山医科大学免疫学教研室 (宁波 )通信作者 :肖庆忠炎、宫颈糜烂病人中 ,ＨＳＶ…     

血小板源生长因子对培养内皮细胞移行的影响及其与血管内皮细 …

一、材料与方法1 材料与试剂 :人脐静脉内皮细胞 (ＨＵＶＥＣ)株(ＥＣＶ30 4)由武汉大学菌种保存中心提供。ＰＤＧＦ ＢＢ、ＤＭＥＭ/Ｆ12 、胎牛血清 (ＦＢＳ)及青霉素 链霉素均为美国Ｇｉｂｃｏ公司产品。血管内皮细胞生长因子 (ＶＥＧＦ)抗血清为ＳａｎｔａＣｒｕｚ公司产品。ＰＤＧＦ ＢＢ、ＳＡＢＣ试剂盒抗血清及二氨基联苯胺(ＤＡＢ)由博士德公司提供。2 血小板源生长因子 (ＰＤＧＦ)对培养ＨＵＶＥＣ移行的影响 :参照Ｇａｊｄｕｓｅｋ等[1] 介绍的方法 ,并加以改进。选用生长良好的ＨＵＶＥＣ悬液 ,调整细胞密度为 2× 10 4 个 /…     

IL-12、IFN-γ在急性移植物抗宿主病发病中作用的临床研究

急性移植物抗宿主病 (ａＧＶＨＤ)是异基因造血干细胞移植 (ａｌｌｏ ＨＳＣＴ)的并发症之一 ,也是移植成功的主要障碍 ,因此 ,研究ａＧＶＨＤ的发病机制是当今移植免疫的热点课题。本文采用双夹心酶联免疫吸附法研究ａｌｌｏ ＨＳＣＴ患者的外周血单个核细胞 (ＰＢＭＣ)体外分泌的ＩＬ 12、ＩＦＮ γ浓度 ,以探明ＩＬ 12、ＩＦＮ γ在临床ａＧＶＨＤ发病中的作用。30例异基因移植患者 ,年龄 12～ 5 3岁 (中位年龄为 34岁 ) ,其中慢性粒细胞白血病 19例 ,急性髓细胞白血病 7例 ,急性淋巴细胞白血病 4例。ａＧＶＨＤ的诊断主要依据临床表现 ,…     

细胞周期调控基因p21WAF1/CIP1在膀胱移行细胞癌中的表达

一、材料和方法1材料:选取1998～1999年南昌地区手术切除的膀胱移行细胞癌标本56例。其中男性42例,女性14例,平均年龄64岁,病理分级按照ＷＨＯ标准:Ⅰ级9例,Ⅱ级21例,Ⅲ级26例。浅表性肿瘤(Ｔｉｓ～Ｔ1)17例,浸润性肿瘤(Ｔ2～Ｔ4)39例。经膀胱腔内灌注化疗药物后复发16例,初发40例。同时选取10例正常的膀胱粘膜组织作对照。全部标本经4%甲醛液固定,石蜡包埋,连续切片3张,4μｍ厚。分别做原位分子杂交、免疫组织化学和ＨＥ染色观察。2原位分子杂交(ｃＤＮＡｍＲＮＡ):生物素标记的ｐ21ｃＤＮＡ探针及原位分子杂交试剂盒均为武汉博士德生物工…     

培养的大鼠血管平滑肌细胞中bFGF基因表达与血管紧张素Ⅱ …

采用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测培养的自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）和正常血压ＷＫＹ大鼠的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）中碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）基因表达，用紫外法和放免法分别测定培养液中血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性和血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）含量，发现ＡｎｇⅡ能明显促进ＶＳＭＣ中ｂＦＧＦ基因表达，而ｂＦＧＦ则能明显诱导ＡＣＥ活性和提高ＡｎｇⅡ释放，且ＳＨＲＶＳＭＣ的ｂＦＧＦ基因表达，ＡＣＥ活性和Ａ     

星形细胞瘤的胶质纤维酸性蛋白和波形蛋白免疫组织…

应用图像分析仪对２５例Ⅱ－Ⅳ级星形细胞瘤进行ＧＦＡＰ，ＶＩＭ免疫组织化学定量研究。结果表明：２５例星形细胞瘤全部呈ＧＦＡＰ，ＶＩＭ阳性反应，ＧＦＡＰ，ＶＩＭ免疫反应强度与肿瘤组织的分化程度有关，高分化的星形细胞瘤（Ⅱ级），ＧＦＡＰ反应强，ＶＩＭ反尖弱，而低分化的星形细胞瘤（Ⅲ，Ⅳ级）中，ＶＩＭ反应强，ＧＦＡＰ反应弱，即ＧＦＡＰ与肿瘤恶性度负相关；ＶＩＭ与肿瘤组织恶性程度正相关。     

星形细胞瘤的胶质纤维酸性蛋白和波形蛋白免疫组织化学定量研究

应用图像分析仪对２５例Ⅱ～Ⅳ级星形细胞瘤进行ＧＦＡＰ，ＶｌＭ免疫组织化学定量研究。结果表明：２５例星形细胞瘤全部呈ＧＦＡＰ、ＶＩＭ阳性反应，ＧＦＡＰ、ＶＩＭ免疫反应强度与肿瘤组织的分化程度有关，高分化的星形细胞瘤（Ⅱ级），ＧＦＡＰ反应强，ＶＩＭ反应弱，而低分化的星形细胞瘤（Ⅲ、Ⅳ级）中，ＶＩＭ反应强，ＧＦＡＰ反应弱，即ＧＦＡＰ与肿瘤恶性度负相关；ＶＩＭ与肿瘤组织恶性程度正相关。     

血栓调节蛋白在肺癌组织中的表达

我们应用免疫组织化学方法观察血栓调节蛋白 (Ｔｈｒｏｍ ｂｏｍｏｄｕｌｉｎ ,ＴＭ)在肺癌组织中的表达。现报告如下。一、材料与方法1.免疫组织化学染色 :采用ＳＰ法。抗ＴＭ单克隆抗体(ＤＡＫＯ公司 ) ( 1∶2 5 0 )由日本鹿儿岛大学医学部米泽杰先生惠赠 ,ＳＰ试剂盒购自福建迈新生物技术公司。每次染色均设阳性对照及阴性对照。2 .肺癌组织标本 :收集中国医科大学病理教研室存档肺癌蜡块 ,共 5 6例 ,其中肺鳞癌 35例 :高分化 2例 ,中分化 2 7例 ,低分化 6例 ;肺腺癌 18例 :高分化 3例 ,中分化 8例 ,低分化 7例 ;小细胞癌 3例。3 .ＴＭ阳…     

CD99在卵巢性索-间质肿瘤中的表达

一、材料与方法1.材料 :收集我院 2 0 0 0年 2月～ 2 0 0 1年 7月的石蜡组织标本 4 8份 (例 )。临床资料 :6例为正常卵巢 ,患者 2 3～ 5 9岁 ,2例已绝经 ;1例 17岁正常睾丸组织。 4 1例肿瘤中 2 9例为卵巢性索 间质肿瘤 ,年龄 17～ 73岁 ,平均 4 9.4岁 ,14例已绝经 ;12例为女性生殖道非性索 间质肿瘤 ,患者年龄 13～ 6 5岁 ,平均 4 2 .8岁。按ＷＨＯ 1999年卵巢肿瘤新分类诊断。2 .免疫组织化学检测 :ＣＤ99(Ｏ13)单克隆抗体为Ｚｙｍｅｄ公司产品 ,应用卵白素抗生物素结合法 (ＡＢＣ)法免疫组织化学染色 ,一抗工作浓度 1∶5 0 ,微波修复抗…     

应用ELISA和滴金免疫测定法检测血清肌红蛋白

从人心肌提取肌红蛋白（ｍｙｏｇｌｏｂｉｎ，Ｍｂ）抗原，制备抗Ｍｂ血清和单克隆抗体，在此基础上建立了检测血清Ｍｂ的ＥＬＩＳＡ和滴金免疫测定法（ｄｏｔｉｍｍｕｎｏｇｏｌｄｆｉｌｔｒａｔｉｏｎａｓｓａｙ，ＤＩＧＦＡ）。ＥＬＩＳＡ法检测范围２５～８００ｎｇ／ｍｌ。批内ＣＶ＜５％，批间ＣＶ＜７％。健康男、女献血员各３２例和７４例老年人，血清Ｍｂ测定结果，参考值上限分别为５５．４０、５０．６７和６５．７５ｎｇ／ｍｌ。１５例急性心肌梗塞（ＡＭＩ）患者血清Ｍｂ含量均大于１３０ｎｇ／ｍｌ．滴金免疫测定法可在５ｍｉｎ内完成检测，Ｍｂ含量＞１００ｎｇ／ｍｌ为阳性。７例ＡＭＩ患者检测结果均为阳性。两种方法结合应用对ＡＭＩ的早期诊断及疗效观察极有价值。     

去甲二氢愈创木酸对胶质瘤诱导的血管内皮细胞成型的作用

目的 观察去甲二氢愈创木酸（ＮＤＧＡ）对胶质瘤细胞诱导的内皮细胞成型的影响并初步探讨其机理。方法 采用在Ｉ型胶原凝胶上的细胞立体培养和内皮－胶质瘤细胞的联合培养法,观测人恶性胶质瘤细胞系ＳＨＧ－４４细胞或其条件培养基对人脐静脉内皮细胞ＥＣＶ－３０４细胞形成管腔样结构的影响,同时以免疫组织化学结合图像分析的方法检测ＳＨＧ－４４细胞ＶＥＧＦ、ｂＦＧＦ蛋白的表达。结果 １００μｍｏｌ／Ｌ的ＮＤＧＡ作用１     

血管内皮生长因子及其受体flt-1在宫颈癌中的表达和意义

我们拟通过观察血管内皮生长因子 (ＶＥＧＦ)与其受体ｆｌｔ 1在宫颈癌中的表达 ,探讨其与宫颈癌的生长、浸润、转移的关系 ,及其在间质血管生成中的作用和相互关系。一、材料和方法收集 1998年 9月至 2 0 0 0年 8月白求恩医科大学第一、二临床学院及吉林省肿瘤医院手术切除宫颈癌标本 72例 ,慢性宫颈炎 6例 ,患者术前均未经任何抗癌治疗 ,确诊为宫颈癌 ,其中腺癌 7例 ,鳞癌 6 5例。患者平均年龄 45岁 ,最大为 5 6岁 ,最小为 2 7岁。组织经常规石蜡包埋后做 4μｍ连续切片 ,行ＨＥ和免疫组织化学链霉素抗生物素 过氧化酶 (ＳＰ)法染色。一…     

胃癌Ha-ras、APC基因的电镜原位标记

超微水平的电镜原位分子杂交 (又称电镜原位分子 )技术是近十余年发展起来的一种新的电镜技术。它能在超微水平对特异性ＤＮＡ或ＲＮＡ进行精确定位 ,给生物学及病理学研究提供了新的手段。为了对胃癌癌基因 (Ｈａ -ｒａｓ)和抑癌基因 (ＡＰＣ)进行定位 ,作者将电镜酶细胞化学有关技术〔1〕和原位分子杂交技术〔2〕结合起来 ,建立了电镜原位分子杂交技术 ,取得较为满意的结果。1　材料和方法胃癌手术切除标本 ,取材后经预冷的ＰＧ液 (4 %多聚甲醛 0 5 %戊二醛 )固定 4ｈ(0℃～ 4℃ )。用 0 1ｍｏｌ/ＬＰＢＳ漂洗后在该液中细切成条。应用…