NF—κB及其相关分子在变应性鼻炎中的作用

变应性鼻炎的发病率近年来呈上升趋势,严重影响人类的健康与生活质量。随着基础和临床免疫学的进展,变应性鼻炎的发病不仅仅是传统观念所认为的IgE介导的鼻黏膜I型变态反应,而且是易感个体接触致敏变应原后导致的包含IgE介导的炎症递质的释放和多种免疫活性细胞、细胞因子参与的鼻黏膜慢性炎症性疾病。Th1／Th2细胞因子网络的失衡,引发了以鼻腔黏膜Th2免疫反应为主的变态炎症反应,后者启动了相关黏附分子（如ICAM-1）、趋化因子（如eotaxin）等的表达,促使炎症细胞如肥大细胞和嗜酸粒细胞向鼻黏膜移行、聚集,     

雷公藤红素对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织中NF-κB和Eotaxin表达的影响

目的:观察雷公藤红素对变应性鼻炎大鼠鼻黏膜组织中核因子-κB(NF-κB)和Eotaxin的作用,以及它们之间的关系,从而探讨雷公藤红素治疗变应性鼻炎的可能机制。方法:健康SD大鼠40只随机分为4组:卵清蛋白(OVA)致敏组,雷公藤红素处理组,地塞米松处理组和生理盐水组。以OVA致敏法建立变应性鼻炎大鼠模型,苏木精-伊红染色观察鼻黏膜组织病理学变化,免疫组织化学SP法测定鼻黏膜组织中NF-κB、Eotaxin的表达。结果:生理盐水组病理学未见异常表现;雷公藤红素处理组和地塞米松处理组可见鼻黏膜轻度肿胀,少量炎性细胞浸润;OVA致敏组可见鼻黏膜高度肿胀,大量炎性细胞浸润。OVA致敏组与其他3组比较,NF-κB和Eotaxin表达强度差异均有统计学意义(均P<0.01);雷公藤红素处理组和地塞米松处理组间差异无统计学意义(P>0.05);OVA致敏组大鼠鼻黏膜组织中NF-κB的表达强度与Eotaxin呈正相关(r=0.908,P<0.01)。结论:雷公藤红素可通过抑制鼻黏膜NF-κB的活性抑制Eotaxin的表达。     

变应性鼻炎鼻黏膜组织中NF-κB p50表达及其与DNA结合活性的研究

目的:探讨核转录因子-κB亚单位p50(NF-κB p50)在季节性变应性鼻黏膜中的表达及活性状态.方法:采用免疫组织化学方法检测16例季节性变应性鼻炎(SAR组)下鼻甲黏膜组织中NF-κB p50的表达,其中6例为非发作期患者,10例为发作期患者;并与10例鼻中隔偏曲患者下鼻甲黏膜进行对照.采用电泳迁移率滞后分析(EMSA)检测鼻黏膜组织中核蛋白提取物与特异性NF-κB探针的结合活性.结果:NF-κB p50在SAR组及对照组中均有表达,p50阳性表达主要分布在2组鼻黏膜的上皮细胞、炎性细胞、腺上皮细胞及血管内皮细胞的胞质和部分胞核中;SAR组p50胞核阳性染色的阳性细胞百分率发作期是(41.83 ±4.43)%,非发作期是(37.19±3.93)%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05).对照组p50胞核阳性染色的阳性细胞百分率仅(8.89±1.32)%.SAR组(包括发作期和非发作期)与对照组p50胞核阳性染色的阳性细胞百分率间比较差异有统计学意义(P<0.01);SAR组NF-κB的DNA结合的32P标记电泳带密度扫描值为32.14±8.73,与对照组(11.12±3.42)比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论:在对照组鼻黏膜中保持低水平的表达,在SAR鼻黏膜中表达显著增高,且其与DNA-蛋白结合活性增高,提示NF-κB p50可能参与维持鼻黏膜的生理功能,并在SAR鼻黏膜持续慢性炎症反应中起重要作用.     

MAPK、PI3K-AKT、NF-κB在小鼠过敏性鼻炎中的表达及意义

目的 通过构建小鼠过敏性鼻炎模型探讨多信号通路蛋白在过敏性鼻炎发生发展中的机制。 方法 40只昆明小鼠随机分为过敏性鼻炎组和对照组(每组20只)。分离两组小鼠头部各8只,4%多聚甲醛固定、石蜡包埋、切片、HE染色法观察小鼠鼻黏膜病理改变、免疫组化检测MAPK、NF-κB、PI3K-AKT信号通路蛋白的表达,24只小鼠鼻黏膜蛋白用于Western blotting分析。 结果 过敏性鼻炎组小鼠的抓挠、喷嚏、流鼻涕等均远多于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);HE染色过敏性鼻炎组黏膜出现假复层纤毛柱状上皮坏死,上皮结构重构,嗜酸性粒细胞浸润等典型鼻炎病理改变。过敏性鼻炎组三条通路关键蛋白的免疫阳性信号AOD值不同程度的高于对照组(P<0.05)。Western blotting结果显示过敏性鼻炎组与对照组相比MAPK、PI3K-AKT、NF-κB三条信号通路蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 在小鼠过敏性鼻炎发病过程中MAPK、NF-κB、PI3K-AKT三条信号通路蛋白的表达均升高,其激活在小鼠过敏性鼻炎过程中可能存在协同效应。     

核因子-κB及ICAM-1 mRNA在变应性鼻炎鼻黏膜中的表达

目的:检测变应性鼻炎(AR)患者鼻黏膜细胞中NF-κB的活化及其对ICAM-1 mRNA表达量的影响.方法:选取AR患者32例(AR组),同时以单纯鼻中隔偏曲患者20例为对照组,采用免疫组织化学法检测2组患者的中鼻甲黏膜NF-κB亚单位p50、p65的表达情况,用RT-PCR法检测2组患者的中鼻甲黏膜ICAM-1mRNA的表达量.结果:NF-κB在AR组表达为阳性或强阳性,其中NF-κB p50主要表达于细胞质和细胞核;NF-κB p65主要表达于细胞质,细胞核表达较少.对照组鼻黏膜组织中NF-κB有微弱的表达.2组NF-κB p50、NF-κB p65表达的差异有统计学意义(均P＜0.01).RT-PCR显示:对照组中ICAM-1 mRNA表达微弱,AR组ICAM-1 mRNA表达较强,与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).NF-κB p50、NF-κB p65的表达强度与ICAM-1 mRNA的表达强度均存在相关性(r=0.899 5,P＜0.01;r=0.7601,P＜0.01).结论:NF-κB在AR形成、发展中发挥重要作用.过度活化的NF-κB启动ICAM-1 mRNA的转录,上调黏附分子的表达.ICAM-1作为一种重要的炎性因子,与AR形成、发展有关.     

PKC-NF-κB信号传导系统对变应性鼻炎Th2细胞因子IL-4及IL-5表达的调控

目的:探讨PKC-NF-κB信号传导系统在调节变应性鼻炎(AR)T淋巴细胞的活化及IL-4、IL-5表达及其在发病过程中的作用.方法:24例急性发作期AR患者和24例健康成人为研究对象,分别从每位受试者的外周血中分离出T淋巴细胞并分成3组进行培养;第1组为空白对照(正常空白对照组及 AR空白对照组);第2组加入终浓度为20 nmol/L的PKC激动剂12-肉豆蔻酰-13-乙酸佛波酯(PMA)(加PMA 正常组及加PMA AR组);第3组同时应用PKC激动剂PMA和终浓度为100 μmol/L的NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC) (加PMA和PDTC 正常组及加PMA和PDTC AR组).将培养的T淋巴细胞涂片,用免疫组织化学染色方法检测NF-κB的表达,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测上清液中的IL-4及IL-5含量.结果:加PMA AR组T淋巴细胞NF-κB活化细胞百分比、培养上清液中的IL-4、IL-5与正常空白对照组及AR空白对照组比较,差异有统计学意义(均P<0.01);与加PMA正常组及加PMA和PDTC正常组T淋巴细胞比较,差异有统计学意义(均P<0.01);与加PMA和PDTC AR组T淋巴细胞比较,差异有统计学意义(P<0.01).同时,加PMA和PDTC AR组T淋巴细胞NF-κB活化细胞百分比、培养上清液中的IL-4、IL-5与加PMA AR组、AR空白对照组、正常空白对照、加入PMA正常组、加入PMA和PDTC正常组比较,差异有统计学意义(均P<0.01).T淋巴细胞NF-κB活化细胞的百分比与培养上清中IL-4和IL-5含量呈显著正相关性(r=0.88、0.85,均P<0.01).结论:T淋巴细胞PKC活化后使IL-4和IL-5的表达增加的生物信号能通过激活NF-κB来实现,T淋巴细胞的PKC-NF-κB信号传导系统可能是变应性鼻炎发病机制中的重要环节之一.     

IL-16和IL-17在变应性及非变应性鼻炎中的表达水平及意义

目的：检测变应性鼻炎（AR）、非变应性鼻炎（NAR）患者和健康对照者在外周血及鼻分泌物中IL-16和IL-17的表达水平,初步探讨IL—16和IL-17可能参与AR发病的免疫学机制。方法：选取AR患者（AR组）与NAR患者（NAR组）各45例,健康对照者45例（对照组）,所有入组患者均进行过敏原皮肤点刺试验和血清特异性IgE检测。对入组的所有患者进行鼻部症状的视觉模拟量表评分（VAS）。采集患者外周血及鼻腔分泌物,检测其中IL-16和IL-17的表达水平。结果：AR及NAR组患者VAS评分差异无统计学意义（P〉0．05）;在外周血中,AR组中IL-16和IL-17表达水平高于NAR组（P〈O．05）;NAR组中IL-16和IL-17表达水平高于对照组（P〈0．05）。鼻分泌物中,AR组和NAR组中IL-16和IL-17表达均高于对照组（P〈0．05）。结论：IL-16和IL-17可能参与AR的病理过程,具体机制有待进一步探讨。     

P-EGFR、P-ERK和NF-κB在中耳胆脂瘤上皮中的表达和意义

目的研究磷酸化表皮生长因子受体(P-EGFR)、磷酸化细胞外信号调节激酶(P-ERK)和细胞核转录因子κB(NF-κB)在中耳胆脂瘤上皮组织中的表达情况,探讨EGFR/ERK/NF-κB信号通路在中耳胆脂瘤发病机制中的作用。方法应用免疫组织化学SP法及Western blot(WB)免疫印迹法检测30例中耳胆脂瘤标本及15例正常外耳道皮肤组织中P-EGFR、P-ERK和NF-κB蛋白的表达。结果(1)P-EGFR蛋白阳性表达主要定位于细胞质和(或)细胞膜,在胆脂瘤组的阳性表达率为63%,明显高于正常外耳道皮肤组的20%(P<0.05);P-ERK蛋白阳性表达主要定位于细胞质和(或)细胞核,在胆脂瘤组的阳性表达率为70%,明显高于正常外耳道皮肤组的20%(P<0.05);NF-κB蛋白阳性表达主要定位于细胞核,在胆脂瘤组的阳性表达率为60%,明显高于正常耳道皮肤组的13.3%(P<0.05)。在30例中耳胆脂瘤组织中,P-EGFR、P-ERK和NF-κB两两之间呈正相关关系(P<0.05)。(2)Western blot免疫印迹法检测结果显示:中耳胆脂瘤组中P-EGFR、P-ERK和NF-κB的表达量明显高于正常外耳道皮肤组的表达量。结论 P-EGFR、P-ERK和NF-κB在中耳胆脂瘤上皮中表达增强,EGFR/ERK/NF-κB信号通路可能在中耳胆脂瘤组织的形成和发展过程中起重要作用。     

白细胞介素5和核因子κB在变应性鼻炎动物模型骨髓中的表达

目的探讨白细胞介素5(interleukin-5,IL-5)和核因子κB(nuclear factor kappaB,NF-κB)在变应性鼻炎动物模型骨髓中表达的意义。方法采用6-8周雄性SD大鼠,随机分成实验组10只和对照组10只,以卵清蛋白致敏激发制成变应性鼻炎模型,免疫组化染色检测骨髓中IL-5和NF-κB的表达。结果大鼠变应性鼻炎模型骨髓涂片中IL-5阳性细胞和NF-κB比例都显著高于对照组(P<0.05),从形态上判断IL-5阳性细胞和NF-κB阳性细胞是嗜酸性粒细胞,IL-5阳性细胞比例和NF-κB阳性细胞比例呈显著正相关(r=0.79,P<0.01)。结论大鼠变应性鼻炎动物模型骨髓原位嗜酸性粒细胞能产生IL-5和NF-κB,可能调节骨髓中嗜酸性粒细胞的增殖和分化。     

黏附分子在实验性变应性鼻炎鼻黏膜中的表达

变应性鼻炎迟发相反应阶段是以嗜酸粒细胞为代表的大量的炎性细胞的浸润而导致的慢性炎症，血管细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1，VCAM-1)、细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1)在嗜酸粒细胞等炎性细胞的黏附、浸润到黏膜炎症区域起着重要作用。本研究观察实验性变应性鼻炎鼻黏膜中黏附分子的表达。     

变应性鼻炎对小鼠鼻黏膜核因子-κB p65和糖皮质激素受体表达的影响

目的探讨变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）小鼠鼻黏膜核因子-κB（nuclear factor kappat B,NF-κB）p65和糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor,GR）的表达,进一步了解NF—κB p65和GR在AR发病机制中的作用。方法清洁级C57BL6／J小鼠20只,随机分为AR组和对照组,每组10只。AR组用10％卵清蛋白（ovalbumin,OVA）200μl腹腔注射,6％OVA鼻腔局部激发建立AR模型。取鼻面骨,石蜡包埋,连续切片,行HE染色。分别运用免疫组化SABC法和SP法染色,观察鼻黏膜中NF-κB p65和GR的表达情况。结果AR组中10只动物均建模成功,鼻部AR典型症状明显;对照组无明显变化。①形态学改变：对照组鼻黏膜无明显炎症改变;AR组黏膜则显示不同程度水肿,黏膜下嗜酸粒细胞（eosinophils,Eos）、淋巴细胞和单核细胞浸润。②黏膜NF—κB p65表达：NF-κB p65主要表达于上皮细胞和腺上皮细胞的胞浆,偶见胞核。AR组中上皮细胞染色平均光密度值（0．40±0．12）强于对照组（0．23±0．05;P〈0．05）。③GR表达：2组中均有GR表达,主要表达于鼻黏膜上皮、腺上皮及血管内皮细胞的胞核或胞质。AR组中GR的平均光密度值（0．20±0．04）低于对照组（0．36±0．11;P〈0．05）。结论 NF-±κB p65在AR黏膜中表达增强,而GR的表达下降,提示两者的失衡在AR的发病中发挥重要作用。     

NF-κBp65、IκBα在人鼻息肉组织中的表达

目的通过检测鼻息肉组织、慢性鼻-鼻窦炎病人钩突黏膜及鼻中隔偏曲病人下鼻甲黏膜中NF-κBp65、IκBα的表达,探讨NFκ-Bp65、IκBα在鼻息肉、慢性鼻-鼻窦炎发病中所起的作用。方法采用免疫组化SP法检测NFκ-Bp65、IκBα在30例鼻息肉组织、20例慢性鼻-鼻窦炎病人单侧钩突黏膜及20例鼻中隔偏曲病人下鼻甲黏膜中的表达及分布,运用HPIAS-2000高分辨率图像分析系统分别对3种组织的黏膜上皮细胞、腺上皮细胞、血管内皮细胞、炎性细胞进行光密度测定。结果①NF-κBp65阳性表达主要分布在鼻息肉组织的黏膜上皮细胞、炎性细胞、腺上皮细胞及血管内皮细胞的胞浆和部分胞核中。②IκBα阳性表达主要分布在鼻息肉组织的黏膜上皮细胞、炎性细胞、腺上皮细胞及血管内皮细胞的胞浆中。③NFκ-Bp65在鼻息肉组、钩突组及下鼻甲组黏膜上皮细胞、炎性细胞、腺上皮细胞及血管内皮细胞中表达依次降低,且差异具有统计学意义。④IκBα在鼻息肉组、钩突组及下鼻甲组组织黏膜上皮细胞、炎性细胞、腺上皮细胞及血管内皮细胞的表达依次降低,且差异具有统计学意义。结论NF-κBp65、IκBα可能参与鼻息肉和慢性鼻-鼻窦炎的炎症反应过程。     

ABCG2及NF-κB p65在下咽癌中的表达意义

目的 探讨乳腺癌耐药蛋白( BCRP/ABCG2)及NF-κB p65在下咽癌和正常下咽黏膜中的表达及意义.方法 采用免疫组化SP法,检测40例下咽癌和10例正常下咽黏膜中ABCG2和NF-κB p65的表达.结果 下咽癌组织中ABCG2及NF-κB p65的阳性表达率分别为65.0％及72.5％,在正常下咽黏膜中表达率分别为20％和10％,差异均有统计学意义(P＜0.05).ABCG2表达与肿瘤淋巴结转移呈显著正相关(P＜0.01),而NF-κB p65的表达与临床分期、分化程度和淋巴结转移均有统计学差异(P＜0.05),与患者年龄、性别无明显相关.ABCG2和NF-κB p65的表达呈显著正相关(P＜0.01).结论 ABCG2与NF-κB p65在下咽癌中均高表达,并与淋巴结转移显著相关,可作为临床预测喉癌转移及预后的参考指标.另外两者表达呈显著相关,提示在下咽癌中,NF-κB p65可能促进下咽癌的增殖和转移,并增强ABCG2的多药耐药功能.     

变应性鼻炎和非变应性鼻炎临床特征比较

目的探讨变应性鼻炎（allergic rhinitis,AR）和非变应性鼻炎（non-allergic rhinitis,NAR）临床特征的差异。方法选取2010年1月～2010年12月在我院门诊就诊的AR和NAR患者1647例,通过病史采集、皮肤点刺实验（skin fastinsertion test,SPT）、鼻分泌物涂片嗜酸性粒细胞计数和血清总IgE检查等评价分析两者的差异。结果鼻炎患者中AR占72.4%,NAR占2 7.6%;AR患者发病年龄（25.8±1 3.5）岁,显著低于NAR患者发病年龄（31.4±16.0）岁,两者比较差异有统计学意义（P〈0.001）;AR发病有明显的季节性,NAR发病受季节性影响不大。鼻部症状中,AR易出现打喷嚏（AR,88.4%;NAR,47.9%）,两组比较差异有统计学意义（P〈0.001）;鼻痒症状AR占8 4.4%,NAR占4 3.6%,两组比较有统计学意义（P〈0.001）;而NAR易出现鼻塞（NAR,9 6.3%,AR,9 1.2%）,两组比较差异有统计学意义（P〈0.001）和流涕（NAR,9 3.5%,AR,91.8%）,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。AR患者鼻分泌物涂片嗜酸性粒细胞比例占50.1%±33.1%,血总IgE（359.7±323.4）IU/ml,且显著高于NAR患者20.1%±30.5%,123.0IU/ml±205.6 IU/ml,两组比较差异有统计学意义（P均〈0.001）。结论 AR与NAR在发病年龄、发病季节、临床症状、鼻分泌物涂片嗜酸性粒细胞比例和血总IgE上有明显差异。     

IL-10,12,13,16在变应性鼻炎及血管运动性鼻炎患者血清中的表达

目的:探讨IL-10,12,13,16在变应性鼻炎及血管运动性鼻炎中的作用。方法:采用酶联免疫吸附法测定变应性鼻炎及血管运动性鼻炎患者血清中IL-10,12,13,16的浓度水平,并与正常对照组对比进行统计分析。结果:变应性鼻炎患者血清中IL-12明显低于正常对照组(P<0.01),而IL-13,16水平则明显高于正常对照组(均P<0.01)。血管运动性鼻炎患者血清中IL-10,13,16与正常对照组无明显差异,但IL-12水平明显低于正常对照组(P<0.01)。变应性鼻炎患者血清中IL-13与IL-16,IL-10与IL-12均存在明显正相关(r=0.94及r=0.73,均P<0.01)。结论:IL-12,13,16的失衡在变应性鼻炎发病机制中具有调节作用。IL-12在血管运动性鼻炎中的作用尚需进一步探讨。     

变应性鼻炎患者血清IL-21检测及意义

目的 探讨IL-21在变应性鼻炎患者血清中的含量及其与变应原特异性IgE水平的相关性.方法 研究对象分为变应性鼻炎组(24例)和正常对照组(12例),分别采用ELISA法和ImmunoCAP 100全自动免疫荧光定量分析系统检测受试者血清中IL-21含量及常见吸入物变应原特异性IgE水平.结果 变应性鼻炎组血清特异性I...     

白介素-5在变应性鼻炎鼻黏膜中的表达及意义

目的：了解白介素 5（IL 5）在变应性鼻炎鼻粘膜内浸润的炎性细胞中的表达及分布,探讨IL 5与嗜酸性粒细胞积聚及发病机制的关系。方法：采用免疫组化染色法（SP法）对变应性鼻炎下鼻甲粘膜（A组）、单发鼻息肉组织（B组）、无变应性鼻炎下鼻甲粘膜组织（C组）切片进行IL 5染色,对IL 5染色阳性细胞计数分类,对统计结果行方差分析。结果：A、B两组组织中可见较多的IL 5阳性染色细胞,多见嗜酸性细胞、淋巴细胞、中性粒细胞等阳性染色,两组IL 5阳性细胞总数、Eos计数无统计学差异,但均高于C组（P＜0.01）。结论：IL 5在变应性鼻炎鼻粘膜、鼻息肉组织内浸润的多种炎性细胞中表达,能客观反映免疫或炎症反应的程度,可作为变应性鼻炎诊断评分系统的补充。     

免疫球蛋白游离轻链在变应性及非变应性鼻炎中的表达水平及意义探讨

目的 检测变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)、非变应性鼻炎(non-allergic rhinitis,NAR)患者和健康对照组在鼻分泌物及血清中的免疫球蛋白游离轻链(free light chain,FLC)的表达水平,初步探讨FLC可能参与AR及NAR发病的免疫学机制.方法 选取2009年9-12月就诊的AR 及NAR患者各30例以及健康对照组30例,所有入组病例均进行过敏原皮肤点刺试验(skin prick tests,SPT)及血清特异性IgE检测(specific IgE,sIgE).对入组的所有患者进行鼻部症状的视觉模拟量表评分(visual analogue scale,VAS),包括阵发性喷嚏、鼻涕、鼻塞及鼻痒,采集患者外周血及鼻腔分泌物,检测其中的总IgE、嗜酸粒细胞阳离子蛋白(eosinophil cationic protein,ECP)、肥大细胞类胰蛋白酶(mast cell tryptase,MCT)、κFLC、λFLC蛋白表达水平.结果 AR及NAR组患者喷嚏、鼻涕、鼻塞、鼻痒的VAS评分差异无统计学意义(t值分别为1.189、0.741、0.758、0.797,P值均＞0.05).血清中κFLC、λFLC、ECP、MCT蛋白表达水平在NAR组均高于健康对照组(P值均＜0.05);λFLC蛋白表达水平在NAR组高于AR组,差异有统计学意义(P＜0.05);κFLC、总IgE及ECP蛋白表达水平在AR 组高于健康对照组(P值均＜0.05).AR组及NAR组鼻分泌物中κFLC、λFLC、ECP及MCT的蛋白表达水平均较健康对照组明显升高(P值均＜0.05);ECP和总IgE蛋白表达水平在AR组较NAR组明显升高(P值均＜0.05).鼻分泌物中κFLC、λFLC分别与MCT呈正相关趋势(r值分别为0.518、0.484,P值均＜0.05).血清中κFLC、λFLC分别与ECP呈正相关趋势(r值分别为0.343、0.342,P值均＜0.05).结论 FLC可能参与了AR及NAR的发病,其在AR及NAR的发病过程中可能通过肥大细胞及嗜酸粒细胞参与并发挥一定的免疫学作用.