乙酰半胱氨酸对急性酒精性肝损伤大鼠的保护作用

目的探讨乙酰半胱氨酸对酒精所致大鼠急性肝损伤的保护作用。方法采用酒精灌胃法制作急性酒精性肝损伤大鼠模型。50只雄性Wistar大鼠随机分为5组（n=10）：正常对照组、急性酒精性肝损伤模型组、乙酰半胱氨酸低、中、高剂量（150,300,600mg／kg）组。测定并比较各组大鼠肝脏指数,血清中丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）活性以及肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）活性与丙二醛（MDA）含量;并观察光镜下肝组织病理学改变。结果与正常组比较,模型组大鼠肝组织SOD、GSH—Px活性降低（均P〈0．05）,血清ALT、AST活性和肝组织MDA含量增加（均P〈0．05）。治疗结束后,与模型组比较,乙酰半胱氨酸各剂量组急性酒精性肝损伤大鼠肝组织SOD、GSH—Px活性均升高（均P〈0．05）,血清A岍、AST活性和肝组织MDA含量降低（均P〈0．05）,并能不同程度地改善肝脏组织病理损伤。结论乙酰半胱氨酸能够有效地改善肝功能,降低脂质过氧化物水平,对酒精所致大鼠急性肝损伤具有保护作用。     

黄芪甲苷对大鼠脓毒症肝损伤疗效及对TNF-α、IL-6的影响

【目的】研究黄芪甲苷对 SD大鼠脓毒症致肝损伤的保护作用。【方法】采用盲肠结扎穿孔（Cecal ligation and puncture ,CLP）诱导形成脓毒症大鼠肝损伤模型,黄芪甲苷分别于大鼠 CLP术前1 h灌胃给药。30只SD大鼠随机分为三组,分别为假手术组、CLP模型组、CLP＋黄芪甲苷（50 mg／kg）治疗组。记录一般情况并检测CLP术后24 h各组大鼠的存活率,血清中谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平及各组大鼠肝脏组织中TNF‐α、IL‐6水平及其 HE染色的病理变化情况。【结果】各时间点假手术组大鼠均无死亡。术后12 h ,模型组、黄芪甲苷组大鼠存活率分别为80％和100％,术后24 h ,模型组大鼠无存活,而黄芪甲苷组大鼠存活率为40％,经比较有显著性差异（χ2＝8．4,P＜0．05）,显示黄芪甲苷能提高实验性脓毒症大鼠的存活率;术后24 h ,大鼠血清AST、ALT值脓毒症模型组较假手术组显著升高（ P ＜0．05）,黄芪甲苷治疗组则明显改善（ P ＜0．05）;脓毒症模型组较假手术组肝组织 TNF‐α、IL‐6值显著升高（ P ＜0．05）,黄芪甲苷治疗组则明显改善（ P＜0．05）;病理切片显示假手术组大鼠肝脏结构轻微改变,脓毒症模型组肝组织点灶状坏死、混合炎细胞浸润、肝细胞脂肪变性,黄芪甲苷治疗组肝脏组织病理损伤情况均较模型组明显改善。【结论】黄芪甲苷对CLP诱导的SD大鼠肝损伤具有一定的保护作用。     

还原型谷胱甘肽对胰腺炎相关性腹腔积液诱导的大鼠肝损伤的疗效及其机制

目的建立大鼠经腹腔内注射胰腺炎相关性腹腔积液（PAAF）诱导的急性肝损伤模型并研究还原型谷胱甘肽（GSH）对该损伤的疗效及机制。方法先制备急性出血坏死性胰腺炎模型（AHNP）并收集PAAF。A组（对照组）腹腔内注射生理盐水,B组（模型组）腹腔内注射PAAF,C组（GSH治疗组）在向腹腔内注射PAAF前1h于尾静脉注射GSH。腹腔注射后6h、12h分批处死大鼠,每时间点8只。测定大鼠ALT、AST、血清淀粉酶（AmYL）浓度,TBA法检测肝组织丙二醛（MDA）含量,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子（TNF—α）、白细胞介素（IL-6）,苏木精-伊红染色后光镜观察胰腺及肝损伤情况。结果B组血清ALT、AST、AmYL较同时间段A组升高（P〈0．05）,血清TNF-α、IL-6浓度及肝组织MDA含量明显升高（P〈0．05）,B组肝细胞水肿、炎性细胞浸润;C组与同时间段B组相比上述各指标均有降低（P〈0．05）,肝病理损害较轻。结论GSH通过抗氧自由基、炎症递质的作用减轻PAAF诱导的肝损伤。     

TNF-α在大鼠脓毒症肝损伤发病机制中的作用及丹参的干预影响

目的采用大鼠盲肠结扎穿孔(CLP)复制脓毒症模型造成急性肝损伤,探讨肿瘤坏死因子(TNF-α)在脓毒症肝损伤发病机制中的作用及丹参的干预影响。方法将W istar大鼠随机分为对照组(Control)、假手术组(Sham)、模型组(CLP)及丹参干预组(Salvia)。动态观察血清丙氨酸转氨酶(ALT)、血清及肝组织中TNF-α的变化。结果CLP组与Sham组相比,血清和肝组织TNF-α水平在12 h升高,于24 h达到峰值。Salvia组峰值滞后于CLP组,在48 h达其峰值,并在12 h及24 h分别显著低于CLP组。结论脓毒症所致的肝细胞损伤与TNF-α增加有关,丹参对脓毒症肝细胞损伤保护作用可能与抑制TNF-α生成有关。*     

脾气虚证自由基导致DNA损伤变化探析

目的：探讨脾气虚状态下模型大鼠体内DNA受到自由基攻击和氧化损伤的程度,了解脾气虚在中医脾病发展过程中的地位,进一步为脾气虚证提供实验学依据。方法：采用“饮食不节＋疲劳过度”复合方法造模14天后,取大鼠最后24h尿样测定8-OHdG的含量,取脑皮质和血清测定SOD、GSH—Px、T—AOC、MDA的含量。结果：脾气虚模型组大鼠血清和脑皮质中SOD、GSH—Px、T—AOC和MDA含量与正常组相比均有显著差异（P〈0．05）。模型组尿样中8-OHdG含量也有明显上调趋势（P〈0．05）。结论：脾气虚模型大鼠体内存在着明显的自由基损伤和抗氧化酶活性的降低,但脾气虚状态处于脾病全程的何种阶段尚需深入研究了解。     

升降散对脓毒症大鼠肾功能的影响

目的：探讨升降散对脓毒症大鼠肾功能的影响。方法：采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症模型。健康SD大鼠80只按随机数字表法分为正常组、假手术组、脓毒症组和升降散治疗组,后三组又分为术后6 h、12 h和24 h 3个时间点亚组,每组8只。在造模前72 h开始灌胃给药或生理盐水,连续3 d。术后按各时间点观察存活率,检测各组血清肌酐（Cr）,采用放射免疫分析法测定血清胱抑素C（Cys-C）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,通过HE染色后光镜观察各组大鼠肾组织形态学变化。结果：与脓毒症组比较,CLP 24 h升降散治疗组大鼠存活率较高,差异有统计学意义（P〈0.05）;CLP 6 h时血清Cys-C、TNF-α和CLP 12 h、24 h时血清Cys-C、TNF-α、IL-6水平明显下降,差异均具有统计学意义（P〈0.05）;升降散可减轻肾组织形态学损伤,阻止损伤范围进一步扩大。结论：升降散对脓毒症大鼠肾功能具有保护作用,其作用环节可能与抑制TNF-α、IL-6等炎症因子的释放有关。     

水稻黄酮对大鼠实验性肝纤维化的作用

目的：研究水稻黄酮（4′，5－二羟基－3′，5′－二甲氧基黄酮－7－0－B－D－葡萄糖甙）对大鼠实验性肝纤维化的作用，并从自由基的产生及清除方面探讨其机理。方法:腹腔注射硫代乙酰胺诱导的大鼠肝纤维化模型和胆管结扎上引起大鼠肝纤维化模型，以γ－干扰素作对照，测定相应肝功能和肝纤维化指标，及肝组织中GSH－Px、MDA、SOD活力。结果：水稻黄酮可显著改善肝功能与肝纤维化，降低MDA含量，提高SOD、GSH－Px活力。结论：水稻黄酮对肝纤维化有明显的抑制作用，而水稻黄酮还可显著改善肝功能，提高肝组织中自由基清除系统的功能，加强肝组织清除自由基及MDA，减轻自由基对肝组织的损害。     

电针足三里对脓毒症大鼠促炎症因子所致肝损伤的保护作用

目的研究电针足三里（ST36）对脓毒症大鼠促炎症因子所致肝损伤的保护作用。方法雄性SD大鼠32只,采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备大鼠脓毒症模型,随机分为CLP＋电针（electr—acupanctrue,EA）足三里组（CLP／EA组）、CLP＋假电针（shame EA）组（CLP／SEA组）、迷走神经切断（vagotomy,VA）＋CLP组（VA／CLP）和迷切后CLP再电针组（VA／CLP／EA组）,每组8只。EA组持续针刺双侧足三里30min,强度为2mA,2—100Hz。CLP／SEA组采用相同频率和强度刺激非经非穴（足三里外侧旁开0．5cm）30min。VA组先手术切断腹腔迷走神经再行CLP。各组大鼠于CLP术后6h取血检测血浆谷丙转氨酶（ALT）活性,然后处死取肝组织,检测肿瘤坏死因子-α（TNF—α）和一氧化氮（NO）含量、髓过氧化物（MPO）活性以及肝组织含水率。结果CLP后6h,CLP／EA组肝组织促炎因子TNF—α、NO、MPO水平、ALT活性及肝组织含水率均显著低于其余3组（P〈0．05）：VA／CLP组和VA／CLP／EA组TNF-α、NO和ALT显著高于CLP／SEA组（P〈0．05）;VA／CLP／EA组与VA／CLP组上述指标的变化无统计学差别（P〉0．05）。结论电针足三里显著抑制CLP大鼠肝脏促炎症因子水平,减轻肝组织水肿和功能损害;切断腹腔迷走神经能显著减轻或消除EA的作用,上调肝组织促炎症因子水平、加重肝组织损害。电针足三里的抗炎和肝损伤保护机制可能与兴奋胆碱能抗炎通路有关。     

中药复方对大鼠酒精肝损伤防治中ALT，GSH—Px活性研究

目的：探讨中药对酒精性肝损伤的防治中ALT（谷丙转氨酶）,GSH－Px(谷光甘肽过氧化物酶）活性变化。方法：采用大鼠酒精性肝损伤模型,测定损伤大鼠全血GSH－Px和血清ALT水平,结果：损伤组ALT显著升高,GSH－Px明显下降;中药灌胃后,防治组与正常组ALT和GSH－Px 相似,而与损伤组有显著性差异,结论：提示中药复方使大鼠酒精性肝损伤ALT和GSH－Px趋向正常,提示中药复方制剂具有抗氧化作用。     

心导管留置术在脓毒症大鼠肝组织损伤中的应用

目的观察心导管留置术后脓毒症模型大鼠的肝组织损伤,为脓毒症模型的改进提供实验依据。方法采用改良的心导管留置术结合盲肠结扎穿孔术（CLP）制作脓毒症大鼠模型,分别于术前和术后2、6、122、4、48 h采血,动态浊度法鲎试验检测血浆内毒素（LPS）水平,ELISA法检测血浆TNF-α和IL-6的蛋白表达,同时测定血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平,光镜下观察48h肝组织形态学变化。结果术后大鼠的血浆LPS和细胞因子水平在6 h逐渐升高,12 h达到高峰,此后逐渐下降,     

盲肠结扎穿孔脓毒症大鼠血浆神经肽Y水平变化与肠黏膜屏障损害相关性研究

目的研究脓毒症大鼠血浆NPY水平变化与肠黏膜屏障损害相关性。方法 60只SD大鼠随机分成假手术组(n=30),脓毒症组(n=30),假手术组仅行盲肠探查术,脓毒症组采用CLP制作大鼠脓毒症模型。2组术后即刻皮下注射生理盐水5ml。各组均于术后3、6、12、24、48 h时点,采集腹主动脉血液标本测NPY、DAO。结果血浆中NPY水平均高于正常值,在CLP术后3 h较正常对照组显著升高(P0.05),达最高值,以后逐渐降低,至48 h组仍高于正常组(P0.05);血浆二胺氧化酶(DAO)水平在CLP术后3 h开始升高,以后逐渐升高趋势,至48 h显著高于正常(P0.05)。NPY与DAO经过相关分析呈高度负相关(r=-0.974,P0.01)。结论脓毒症致急性肠道损伤后血浆中的NPY早期呈现高浓度状态,DAO亦高于正常水平,NPY升高可能是造成肠缺血缺氧的因素之一。     

盲肠结扎穿刺致脓毒性肺损伤大鼠血清MMP-9水平研究

目的 观察盲肠结扎穿刺（CLP）手术致大鼠脓毒性急性肺损伤（ALI）血清基质金属蛋白酶9（MMP-9）、IL-1、IL-8和IL-10表达的变化,探讨MMP-9在ALI形成及预后判断的作用机制.方法 50只SD大鼠随机分为假手术组（SHAM组）（n=8）和CLP手术组42只（6h n=8、12h n=8、24h n=10、48h n=16）.动物成模在各对应时间点取材,检测各组生存率、肺湿重系数、肺组织病理评分,以及MMP-9、IL-1、IL-8、IL-10血清水平.结果 MMP-9蛋白水平在CLP后24小时出现明显上升,显著高于对照组（P＜0.01）,48小时进一步升高（P＜0.01）;IL-1、IL-8、IL-10在CLP术后升高,48小时组均显著高于对照组（P＜0.01）;CLP术后大鼠明显肺损伤出现于24小时并持续加重,48小时组内大鼠均出现严重肺损伤;MMP-9与肺损伤病理程度存在正相关（r=0.704,P＜0.01）,相关性高于IL-1（P＜0.01）、IL-8（P＜0.01）和IL-10（P＜0.05）.结论 CLP手术致大鼠脓毒性ALI血清MMP-9显著升高,MMP-9升高水平与肺损伤病理程度呈显著正相关,提示MMP-9可能在脓毒症后肺损伤的形成过程中扮演着关键性角色,对肺损伤的早期诊断和预后判断具有潜在价值.     

脓毒症模型大鼠循环内皮细胞与肝功能状态间关系的相关性研究

目的 探讨大鼠脓毒症中循环内皮细胞(circulating endothelial cells, CEC)数量的变化及其与肝功能改变的关系.方法 利用盲肠结扎穿孔模型(CLP)在大鼠制作脓毒症模型.观察CEC数量、白细胞数量的变化、以及肝组织病理组织学、血天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)的改变.并探讨CEC数量与AST和ALT的相关关系.结果 CLP 6 h后动物肝细胞明显肿胀,24 h组肝细胞大量空泡变性,乃至坏死.CLP 3 h组白细胞和CEC数量比对照组明显升高.而CLP 6 h后AST、ALT才出现明显增高.CEC数量与AST和ALT水平呈负相关,Pearson相关系数(r)分别为-0.774 和-0.734(P＜0.01).用非线性回归分析CEC数量与AST和ALT的关系,发现CEC数量对ALT的最佳拟合曲线为幂函数(P＜0.05),其方程为ALT=33.052 681 24.097 309 CEC -1.CEC数量对AST的最佳拟合曲线为对数函数,但无统计学意义(P=0.607).结论 在大鼠脓毒症模型中,比起常规肝功能指标,CEC数量更能敏感反映肝脏病理进程.当肝功能指标高于正常阈值时肝细胞已经出现了显著损伤.因此,早期监测CEC数量结合已有的肝功能指标有助于早期提示肝功能损害,及时针对治疗.     

舒血宁对脓毒症大鼠心肌的保护作用

目的探讨舒血宁注射液对脓毒症损害的大鼠心肌是否具有保护作用。方法将30只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脓毒症组(CLP组)与舒血宁注射液组(SXN组),CLP组与SXN组采用大鼠盲肠结扎穿孔术制造脓毒症模型。SXN组于盲肠结扎穿孔术前1h经腹腔注射0.3ml/kg舒血宁注射液,Sham组和CLP组于相同时间点给予0.3ml/kg生理盐水。术后6h时经腹主动脉取血行肌钙蛋白T(TnT)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β检测;取部分心肌匀浆,制成10%心肌组织悬液,测定超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)含量;部分心肌行H-E染色观察病理变化。结果与CLP组比较,舒血宁可显著降低CLP后血浆TnT、TNF-α与IL-1β水平以及心肌组织MDA含量,并使心肌SOD活性增强(P<0.05或0.01);组织学观察可见舒血宁可明显改善脓毒症组大鼠心肌充血、水肿及炎性细胞浸润等病理改变。结论舒血宁对脓毒症大鼠心肌损伤具有保护作用,其机制可能与其对心肌氧自由基的清除作用及对炎性介质的影响有关。     

脓毒症大鼠血清乳酸、乳酸清除率及转氨酶水平与肝脏损伤关系的探讨

【摘要】目的探讨脓毒症大鼠血清乳酸水平、乳酸清除率及转氨酶水平与肝脏病理变化的关系,并研究乳酸水平、乳酸清除率与转氨酶水平是否存在相关性,评价是否能够作为预测评价脓毒症大鼠肝脏损伤指标。方法将清洁级SD大鼠150只分为正常组50只,假手术组50只,盲肠结扎术（CLP）手术组50只。CLP组于手术成功后的第6、12、24、48及72小时分别取10只处死,并于每个时间点取10只正常组大鼠和10只假手术组大鼠作为相应时间点的对照。在各时间点取肝脏组织进行病理学分析,测定乳酸水平及转氨酶水平,计算乳酸清除率。比较各时间点乳酸水平、转氨酶水平是否存在差异,并分析乳酸、乳酸清除率与转氨酶的相关性。结果CLP组大鼠肝细胞6h组开始出现损伤,12、24和48h损伤逐渐加重,损伤在CLP后48h最重;CLP组12、24h乳酸、谷丙转氨酶（ALT）水平明显增高,与正常组和假手术组相比差异均具有统计学意义（P〈0．05）;CLP组6、12、24、48、72h谷草转氨酶（AST）水平明显高于正常组及假手术组（P〈0．05）。乳酸与ALT水平呈正相关（r：0．766,P〈0．05）,乳酸清除率与ALT水平呈负相关（r=-0．712,P〈0．05）。结论在脓毒症中,大鼠乳酸水平与乳酸清除率都同谷丙转氨酶水平存在相关性;三者与肝脏病理损伤时间基本相同;乳酸清除率及乳酸均能反应脓毒症大鼠肝脏损伤。     

脓毒症的免疫损伤

目的观察脓毒症小鼠脾淋巴细胞凋亡情况。方法采用盲肠结扎穿孔术复制小鼠脓毒症模型,30只小鼠随机分为假手术组(Sham组)和模型组(CLP组),术后24h取脾组织,行HE染色,观察病理变化,TUNEL法检测细胞凋亡。结果 CLP组脾脏白髓淋巴滤泡内则见大量灶性分布的凋亡淋巴细胞,凋亡的严重程度以凋亡指数(Apoptosis Index,AI)计算,CLP组与Sham组比较差异具有统计学意义(P<0.01)。结论脓毒症脾淋巴细胞凋亡明显增加,成为脓毒症免疫抑制的重要机制。     

脓毒症大鼠DAO与TNF-α变化研究

目的研究TNF-α在脓毒症大鼠肠道损伤中的作用。方法 60只SD大鼠随机分成假手术组(n=30),脓毒症组(n=30)。假手术组仅行盲肠探查术,脓毒症组采用CLP制作大鼠脓毒症模型。各组均于术后3、6、12、24与48 h时相点,经腹主动脉采血检测血清DAO、TNF-α水平。结果血清DAO水平逐渐升高,于48 h时达到最高值,高于假手术组(P0.05);血清TNF-α水平在CLP术后即明显高于假手术组(P0.05),在24 h达峰值,随后虽有下降,但仍显著高于假手术组(P0.05)。TNF-α与DAO具有正相关(r=0.897,P0.05)。结论 TNF-α的异常升高,可能在脓毒症大鼠肠道损伤中具重要作用。     

依达拉奉对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用

目的  观察依达拉奉对脓毒症大鼠心肌损伤的保护作用。方法  78只清洁级SD大鼠随机分为正常组（Norm组）、假手术组（Sham组）、脓毒症组（CLP组）、小剂量依达拉奉治疗组（ED1组）（3 mg/kg,静脉注射）及大剂量依达拉奉治疗组（ED2组）（6 mg/kg,静脉注射）。盲肠结扎穿孔法制作脓毒症模型,ED1组及ED2组给予依达拉奉治疗。分别于术后3、6及12 h检测各组血清cTnI和心肌·OH-、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、肿瘤坏死因子（TNF-α）及白细胞介素1β（IL-1β）水平,并观察心肌病理形态改变。结果  Norm组与Sham组各指标差异无统计学意义（P >0.05）;CLP组与Norm组及Sham组比较,cTnI、·OH-、MDA、TNF-α及IL-1β水平明显升高,SOD水平明显降低（P <0.01）;ED1组及ED2组与CLP组比较cTnI、·OH-、MDA、TNF-α及IL-1β水平明显降低,SOD水平明显升高（P <0.01）;ED2组与ED1组比较,cTnI、·OH-、MDA、TNF-α及IL-1β水平明显降低,SOD水平明显升高（P <0.01）。CLP组心肌病理学改变包括间质充血水肿,炎症细胞浸润,心肌纤维断裂、坏死;ED1组及ED2组心肌损伤较CLP组明显减轻。结论  ①依达拉奉能减轻脓毒症心肌损伤,机制可能与抑制氧化应激及下调炎症因子水平有关;②大剂量依达拉奉（6 mg/kg）对脓毒症心肌损伤的保护作用较小剂量（3 mg/kg）更明显。

     

虎杖苷对脓毒症致急性肾损伤小鼠的保护作用

目的 观察虎杖苷对盲肠结扎穿孔（cecal ligation and puncture,CLP）所致脓毒症诱导的急性肾损伤小鼠的影响,并初步探讨其作用机制。方法 建立小鼠CLP诱导的脓毒症致急性肾损伤模型,随后用不同剂量的虎杖苷（50、100、300 mg/kg）干预,观察小鼠一般情况,并于手术24 h后,用试剂盒方法测定血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）水平,ELISA法测定血清白细胞介素-6（IL-6）表达量,Western blotting法检测肾脏诱导型一氧化氮合酶（iNOS）蛋白水平,并取肾脏组织进行病理分析。结果 与模型组相比,虎杖苷明显改善小鼠一般情况,同时降低血清BUN、Cr、IL-6及肾脏中iNOS蛋白水平,缓解肾脏组织损伤,并呈一定的剂量依赖关系。结论 虎杖苷对脓毒症致急性肾损伤具有保护作用,其作用机制可能与其抑制血清IL-6及肾脏中iNOS蛋白表达有关。