软膏剂中金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌检出率初探

本文按卫生部药政局《药品卫生检验方法》探讨了8种中药软膏剂的卫生学检查方法,对金黄色葡萄球菌阳性菌的检出率进行了研究。1.含汞的中药软膏剂中金黄色葡萄球菌的检查,在增菌液中加入0.1％硫乙醇酸盐,方可检出阳性菌。2.含防腐剂的软膏剂需采用离心沉淀集菌法。     

“玉容消痤颗粒”体外抗菌作用研究

目的：研究玉容消痤颗粒体外对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌及痤疮丙酸杆菌（P.acne）的抗菌作用。方法：金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌各取1个菌苔,接种在2 ml MH营养肉汤培养基中,培养6 h;P.acne取1个菌苔,接种在2 ml 硫乙醇酸钠培养基中,厌氧培养48 h;金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌取10-5、10-6倍稀释度的菌液0.05 ml涂布平皿37℃培养24 h计活菌数,P.acne取10-5、10-6倍稀释度的菌液0.05 ml放入平皿与培养基混匀37℃厌氧培养48 h计活菌数。选30-300个菌落/皿的平板计算结果。以丹参酮为对照药分别测定玉容消痤颗粒和丹参酮胶囊对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和P.acne最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。结果：玉容消痤组,各菌株的5.63-90 mg·ml-1药液的试管未见长菌,其MIC为5.63 mg·ml-1,丹参酮胶囊组,各菌株的45-90 mg·ml-1药液的试管未见长菌。其MIC为45 mg·ml-1;玉容消痤对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和P.acne的MBC均为11.25 mg·ml-1,丹参酮胶囊对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和P.acne的MBC均为90 mg·ml-1。结论：玉容消痤颗粒抗菌作用肯定,最低抑菌浓度及最低杀菌浓度均明显低于丹参酮胶囊。     

扁担杆提取物体外抑菌活性研究

目的研究药用植物扁担杆乙醇提取物的抑菌活性，寻找抗菌活性成分。方法制备扁担杆乙醇提取物及其不同极性溶剂萃取物，采用液体两倍稀释法对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、β-溶血性链球菌、表皮葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌进行体外抑菌实验。结果扁担杆乙醇提取物及其不同极性溶剂萃取物对上述6种细菌生长均有一定抑制作用，其中对β-溶血性链球菌的抑制作用最强，正丁醇萃取物对上述6种菌的抑制活性最好。结论扁担杆乙醇提取物有较强的抑菌活性，值得进一步研究开发。     

对藏药甘青青兰4种提取物抑菌作用的研究

目的：研究藏药甘青青兰4种不同提取物对4种临床常见标准菌株的抑菌活性。方法：通过体外抑菌实验,用琼脂扩散法测定甘青青兰4种提取物有无抑菌活性。结果：甘青青兰（炒制）水提取物、生药材水提取物、生药材乙醇提取物在一定浓度（0.15 g/mL,0.2 g/mL）对金黄色葡萄球菌有抑菌或杀菌作用,甘青青兰（炒制）的乙醇提取物对金黄色葡萄球菌无抑菌作用。高浓度甘青青兰（炒制）的水提取物和乙醇提取物对铜绿假单胞菌有抑菌作用,且乙醇提取物的抑菌效果更好。结论：甘青青兰提取物对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌有确切的抑菌作用,对大肠杆菌和粪肠杆菌无抑菌作用。     

紫花地丁的抗菌活性分析

目的：通过抑菌试验,了解中药紫花地丁的乙醇和水提取物的抗菌活性。方法：采用试管比浊法测定其最小抑菌浓度和最低杀菌浓度;采用纸片扩散法测定乙醇和水提取物对金黄色葡萄球菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌（分离）、绿脓杆菌、变形杆菌的抗菌活性。结果：紫花地丁水提取物无抑菌活性,乙醇提取物对除绿脓杆菌之外的其他五种细菌均具有抗菌活性,且提取物浓度越高抑菌活性越强。     

七种中药软膏剂中金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌检测方法的探讨

本文对我院七种中药软膏剂进行了金黄色葡萄球菌和绿肝杆菌检测，有的出现假阴性反应，经研究发现含汞的中药软膏剂中的金葡萄球菌需在增菌液中加入０．１５％的硫乙醇酸盐，方可检出加入过阳菌种的阳性菌，含有防腐剂的软膏剂需采用离心沉淀集菌法，才能检出加入过阳性菌种的阳性菌。     

蒙药玉簪花乙醇提取物体外和体内的抑菌活性研究

目的研究蒙药玉簪花乙醇提取物的体外、体内抑菌活性,为寻找新的抗菌药物提供药理学参考依据。方法体外实验分为空白对照组(Ⅰ组)、青霉素对照组(Ⅱ组)、链霉素对照组(Ⅲ组)和玉簪花乙醇提取物的不同质量浓度组(0.01、0.10、1.00、10.00 g/m L)组(Ⅳ~Ⅶ组)。醇提法制备玉簪花的乙醇提取物,沟槽法和含药琼脂培养基法检测玉簪花乙醇提取物对乙型溶血性链球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、肠球菌、白色念球菌的体外抑菌活性。体内实验分为空白对照组、模型组和玉簪花低、中、高剂量组(0.02、0.20、2.00 g/kg),以乙型溶血性链球菌和金黄色葡萄球菌作为指示菌种,小鼠灌胃给予玉簪花乙醇提取物7d后,腹腔注射乙型溶血性链球菌和金黄色葡萄球菌,通过观察小鼠死亡率衡量玉簪花乙醇提取物的体内抗菌活性。结果体外抑菌试验显示,当玉簪花质量浓度高于1.00g/mL,玉簪花乙醇提取物对乙型溶血性链球菌和金黄色葡萄球菌具有抑制作用。在体内抑菌实验中,玉簪花乙醇提取物中、高剂量具有抑制乙型溶血性链球菌和金黄色葡萄球菌的作用,与空白对照组的小鼠死亡率相比,小鼠死亡率明显降低(P0.05,P0.01)。结论蒙药玉簪花乙醇提取物中含有抑菌的活性成分。     

中药研究常用三种体外抑菌方法的比较

目的：比较中药研究中常用的三种体外抑菌方法。方法：以黄连水煎液为实验药物,以标准金黄色葡萄球菌为实验菌株,采用琼脂平板扩散法（打孔法）、液体培养基连续稀释法（试管法）和固体培养基连续稀释法,观察三种不同抑菌方法对中药抑菌效果的影响,并对结果影响较大的关键因素（菌液浓度、接菌方法、结果判定等）进行了优化。结果：药物固体培养基连续稀释法较其它两方法相比,敏感性高,重复性好。结论：药物固体培养基连续稀释法更适于中药抑菌作用的研究。     

五倍子乙醇提取物对金葡菌的体外抗菌研究

目的观察五倍子乙醇提取物对金黄色葡萄球菌(MRSA和MSSA)的体外抗菌活性.方法采用中药抑菌实验方法对五倍子乙醇提取物进行了112株金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度测定.结果五倍子乙醇提取物对84株耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)和28株甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(methicillin-sensitive staphylococcus aureus,MSSA)的MIC50、MIC90分别为0.315、0.315和0.63、0.315 mg/mL.结论五倍子乙醇提取物对金黄色葡萄球菌(84株MRSA和28株MSSA)具有较强的抑菌活性.     

民间草药臭灵丹抑菌作用的实验研究

目的：研究臭灵丹茎、叶乙醇提取物抑菌作用.方法：乙醇超声提取臭灵丹叶、茎流浸膏,供试菌为金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌,滤纸扩散法研究臭灵丹相对抑菌活性,试管稀释法测量臭灵丹药物的最低抑菌浓度（MIC）.结果：臭灵丹茎、叶提醇液对金黄色葡萄球菌平均抑菌圈直径最大分别为8.92mm、12.71mm;茎、叶两部位醇最小抑菌浓度分别为茎1g/mL、叶0.125g/mL.结论：臭灵丹茎、叶醇提物对金黄色葡萄球菌抑菌作用较强,叶醇提物抑菌效果更佳.     

数控剪应力微流装置评价新加达原散对MRSA生物膜的影响

目的：通过XTT法和微流体系统观察评价新加达原散对耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌标准菌株生物膜内细菌数量生物膜形成的影响作用。方法：1）XTT法观测空白组、万古霉素组及新加达原散组（水提取、醇提取）对MRSA标准菌株生物膜成熟期膜内活菌的影响。2）Bioflux200系统中接种MRSA菌至观察区，细菌生物膜形成后分别在各进孔加入一定浓度的新加达原散水提物、醇提物及万古霉素，同时设立溶剂对照组和空白组。然后在0.5 dyne剪切力作用下连续培养30 h，观察各组生物膜的形成情况。结果：1）XTT法观测结果显示，新加达原散可明显减少形成期及成熟期MRSA生物膜膜内活菌数量。2）2种浓度新加达原散水提物、醇提物组生物膜形成面积明显减少，空白组、溶剂对照组生物膜面积增大，万古霉素组生物膜形成面积较前减少，但无新加达原散2组明显。结论：新加达原散减少了MRSA生物膜膜内细菌数量。在流动状态下，一定浓度新加达原散在剪切力的作用下可抑制MRSA生物膜的形成；Bioflux200可以用于抑制细菌耐药中药的疗效评价。     

参附青冻干粉针成型工艺研究

目的:将参附青注射液制备为冻干粉针.方法:用冷冻干燥方法将参附青注射液制备为粉针,试验筛选了冻干前药液的浓度、支架剂的种类和浓度,并对冻干粉针与注射液的稳定性进行了初步考察.结果:以10%甘露醇为支架剂,药液浓度为6%.结论:经冷冻干燥法制备的参附青冻干粉针成型性、水溶性好,较注射液稳定.     

痔瘘熏洗浸膏粉剂体外抗菌及局部抗感染作用的实验研究

目的:观察痔瘘熏洗浸膏粉剂体外抗菌及局部抗感染的作用。方法:采用肉汤稀释法测定痔瘘熏洗浸膏粉剂对金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、鲍曼不动杆菌等8种病原菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)。局部感染实验将24只新西兰兔按照随机数字表法分为对照组、模型组、金玄痔科熏洗散组和痔瘘熏洗浸膏组,每组各6只。以标准金黄色葡萄球菌造成家兔损伤皮区的急性感染模型,感染48 h后,对照组及模型组给予等量生理盐水外涂感染区域,每只3 mL,金玄痔科熏洗散组给予质量浓度为49.5%的金玄痔科熏洗散外涂感染区域,每只3 mL,痔瘘熏洗浸膏组给予质量浓度为43.2%痔瘘熏洗干浸膏外涂感染区域,每只3 mL,连续给药5 d。光镜下观察各组家兔感染区的病理组织变化,记录各组家兔感染区炎性相关评分及瘢痕组织评分。结果:痔瘘熏洗浸膏粉剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、粪肠球菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、鲍曼不动杆菌等8种病原菌具有良好的抑菌及杀菌作用。与对照组比较,其余各组炎性相关评分及瘢痕组织评分升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,痔瘘熏洗浸膏组及金玄痔科熏洗散组炎性相关评分降低,瘢痕组织评分升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:痔瘘熏洗浸膏粉剂对8种病原菌有一定的敏感性,在皮肤创伤愈合过程中有缓解过多表皮增生、减轻炎细胞浸润、促进幼稚的肉芽组织向成熟瘢痕组织转变的作用。     

中药补脑止痫散对癫痫大鼠海马神经元凋亡基因Bax和Bcl-2表达的影响

目的 通过观察中药补脑止痫散对戊四氮化学点燃癫痫模型大鼠海马神经元凋亡基因Bax和Bcl-2表达的影响,探讨补脑止痫散治疗癫痫的相关机制.方法 从78只正常Wistar大鼠中随机选取10只列为正常组,剩余68只大鼠腹腔注射戊四氮制作癫痫点燃模型,再随机选取50只造模成功大鼠随机分为5组:模型组、丙戊酸钠组、补脑止痫散高剂量组、补脑止痫散中剂量组和补脑止痫散低剂量组,每组10只.用免疫组化法检测药物治疗各组大鼠与正常组和模型组比较海马中神经元凋亡基因Bax和Bcl-2蛋白表达的变化.结果 各治疗组大鼠海马Bax和Bcl-2蛋白阳性目标面密度值与模型组相比分别出现明显降低和升高(P<0.05),而补脑止痫散低剂量组大鼠海马Bax和Bcl-2蛋白阳性目标面密度值改变不明显(P>0.05),并且补脑止痫散高剂量组和中剂量组比较,以及此二组与丙戊酸钠组相比大鼠海马Bax和Bcl-2蛋白阳性目标面密度值改变均无明显差异(P>0.05).结论 中药补脑止痫散高、中剂量能调整癫痫患者海马神经元凋亡基因Bax和Bcl-2蛋白的表达,从而抑制癫痫发作.     

四逆散镇静催眠作用的物质基础初步研究

目的初步确认四逆散镇静催眠作用的活性物质,为揭示其镇静催眠作用的机制提供依据。方法采用HPLC方法分析四逆散ig给药后大鼠血中及脑脊液中移行成分,色谱条件为Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),体积流量0.8 mL/min,柱温28℃,流动相A为乙腈,流动相B为磷酸水(pH值为3),梯度洗脱(10%～90%A),分析时间为140 min。结果 4种成分辛弗林、芍药苷、柴胡皂苷C、甘草次酸均可使脑脊液中内源性物质5-羟色胺(5-HT)峰面积大于空白脑脊液中峰面积,但作用不如四逆散冻干粉整方强,且混合物组(辛弗林-芍药苷-柴胡皂苷C-甘草次酸)脑脊液中5-HT峰面积是四逆散冻干粉组的3.2倍;在延长戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间方面,辛弗林、芍药苷、柴胡皂苷C、甘草次酸及其混合物和四逆散冻干粉组作用强于对照组,且混合物组优于四逆散冻干粉组。结论通过四逆散冻干粉血和脑脊液中移行成分分析及四逆散冻干粉对戊巴比妥钠所致小鼠睡眠时间影响的药效研究,初步确认了四逆散冻干粉的活性物质是血清中四逆散冻干粉的移行成分辛弗林、芍药苷、柴胡皂苷C及甘草次酸的混合物。     

柴胡疏肝散合金黄散加味治疗乳腺增生90例

观察柴胡疏肝散合金黄散加味治疗乳腺增生的疗效 ,随机分为治疗组 90例 ,以内服柴胡疏肝散合金黄散加味热敷 ,对照组 90例 ,以口服利邦平消片和 10 %硫酸镁水溶液热敷治疗 ,7天为 1个疗程 ,观察 1～ 3个疗程 ,结果治疗组治愈率 70 .0 % ,对照组 37 8% (P <0 0 1) ,治疗组总有效率 97 8% ,对照组 88 9% (P <0 0 1)。     

额力根-7抗肝纤维化作用机制研究及网络药理学分析

目的采用实验及网络药理学方法研究额力根-7抗肝纤维化的作用机制。方法将50只大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组及额力根-7低、中、高剂量组,每组10只。除空白组外,其余各组大鼠灌胃50%四氯化碳-花生油溶液制备肝纤维化模型。额力根-7低、中、高剂量组分别灌胃135、270、405 mg/kg额力根-7散剂0.5%羧甲基纤维素钠溶液(CMC-Na),1次/d,连续10周。采用赖氏法检测大鼠血清GPT、GOT含量,可见光比色法检测ALP含量,采用HE染色及Masson染色观察肝组织结构。提取肝星状细胞(HSCs)RNA及蛋白,采用q-PCR技术及Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(collagenⅠ)mRNA、蛋白表达水平,流式细胞术检测HSC凋亡情况。通过TCMID、TCMSP数据库及文献检索获得药物有效成分及靶点,通过OMIM和PubMed:Geen数据库获得肝纤维化靶点,运用Cytoscape 3.7.2构建“药物-有效成分-靶点-疾病”网络,运用STRING构建蛋白质相互作用网络(PPI)筛选中心靶标,运用R语言在线检索Bioconductor平台对靶点进行GO功能富集和KEGG通路富集分析。结果与模型组比较,额力根-7高、中、低剂量组GPT、GOT、ALP水平降低(P<0.01)。与对照组比较,含药血清低、中、高剂量组α-SMA[(0.24±0.12)、(0.25±0.12)、(0.41±0.15)比(1.00±0.00)]、collagenⅠ[(0.64±0.24)、(0.33±0.13)、(0.28±0.11)比(1.00±0.00)]mRNA水平降低(P<0.05或P<0.01),含药血清低、中、高剂量组α-SMA[(0.03±0.01)、(0.01±0.00)、(0.01±0.00)比(0.04±0.00)]、collagenⅠ[(0.08±0.01)、(0.10±0.01)、(0.13±0.01)比(0.18±0.01)]蛋白水平降低(P<0.01)。PPI结果显示,共筛选出额力根-7中35个有效成分,196个药物靶点,3740个疾病靶点,药物疾病共同靶点170个。GO富集分析获得159个条目,其中主要的分子功能包括DNA结合转录激活活性、RNA聚合酶Ⅱ特异性、细胞因子受体结合等;KEGG富集分析获得43条信号通路,其中排在前3位的通路为PI3K-Akt信号通路、MAPK信号通路、细胞凋亡。结论额力根-7可通过多成分、多靶点、多通路发挥抗肝纤维化作用。     

运用HPLC和GC-MS研究开心散有效抗抑郁成分大鼠吸收情况

目的:明确开心散提取物经大鼠灌胃后有效抗抑郁成分的吸收情况。方法:用水蒸气蒸馏法回收石菖蒲挥发油部分,用50%乙醇提取开心散复方有效成分,按原方比例予Wistar大鼠灌胃,分离含药血清和脑组织。含药血清经HPLC检测,定性分析有效抗抑郁成分人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、3,6,-二芥子酰基蔗糖;脑组织匀浆离心后分离上清液,经萃取后,GC-MS定性分析复方中石菖蒲挥发油有效抗抑郁成分α-细辛醚和β-细辛醚入脑情况。结果:HPLC得到人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、3,6,-二芥子酰基蔗糖;GC-MS得到α-细辛醚和β-细辛醚。结论:开心散的5种有效抗抑郁成分均能被大鼠吸收,进一步明确了开心散抗抑郁疗效的物质基础。     

银翘散在不同煎煮时间下对免疫抑制小鼠的免疫调节作用

目的 通过观察银翘散在不同煎煮时间下对免疫抑制小鼠免疫功能的影响探讨银翘散的最佳煎煮时间.方法 将88只小鼠随机分为11组:空白对照组,模型对照组,3分钟高、中、低浓度组,6分钟高、中、低浓度组,12分钟高、中、低浓度组.除空白组外均用环磷酰胺造成免疫抑制模型,银翘散灌胃给药7天后测定各组小鼠网状内皮系统对血流中惰性炭粒的吞噬廓清能力、游泳耐力时间、外周血中T细胞亚群、脾脏和胸腺器官重量.结果 3分钟高浓度组、3分钟中浓度组、6分钟高浓度组可显著提高免疫抑制小鼠的游泳耐力时间(P＜0.05),3组比较差异无统计学意义;除6分钟低浓度组、12分钟中、低浓度组外,其余各组均能显著增强免疫抑制小鼠网状内皮系统的吞噬功能、K值和α值均明显增高(P＜0.05),其中以3分钟高浓度和6分钟高浓度的效果为优;银翘散可显著提高各组小鼠外周血CD4+T细胞的数量(P＜0.05),银翘散各组有升高小鼠外周血CD8+T细胞数量的趋势,但作用不显著;3分钟高浓度组能显著性增加各组小鼠胸腺重量和脾脏重量(P＜0.05). 结论 银翘散对免疫抑制小鼠具有免疫增强作用,其效果以煮沸后3分钟效果为佳.