脑源性神经营养因子对神经干细胞增殖分化的影响

早在1992年,Reynolds等使用一种特殊技术法,分离出能够不断分裂增殖的细胞群落,这些具有多分化潜能的群落当时分离于纹状体,后来发现这些细胞来自室下区,与嗅神经的再生有关,便提出了神经干细胞（Nsc）的概念。无疑NSC概念的提出打破了神经元不能再生的传统观念。NSC是一组具有自我更新和多分化潜能的细胞,不仅能诱导分化为神经元,促进脑组织的修复,     

电针对阿尔茨海默病大鼠海马PKC和GDNF表达的影响

目的探讨电针对阿尔茨海默病（alzheimer’s disease,AD）大鼠海马蛋白激酶C（protein kinase C,PKC）和胶质细胞源性神经营养因子（glial cell linederived neurotrophic factor,GDNF）表达的影响。方法Morris水迷宫筛选40只健康Wistar大鼠随机分4组。正常组不给予任何处理,其余3组大鼠采用链脲霉素（STZ）所致AD模型,造模后模型组不治疗,电针组针刺双。肾俞、双太溪、双足三里、百会、大椎等穴位治疗,西药组氢溴酸加兰他敏灌胃,疗程为4周。免疫组化法检测PKC和GDNF的表达。结果免疫组化显示模型组大鼠PKC和GDNF表达减少,电针组和西药组大鼠表达增加,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论电针可能通过对AD大鼠海马PKC和GDNF表达增强的影响,对神经元起到保护作用。     

胶质细胞源性神经营养因子的表达、功能和在药物依赖中的作用

1993年,Lin等[1]从大鼠胶质细胞株B49中提纯到一种可促进胚胎中脑多巴胺能神经元存活的神经营养因子,并命名为胶质细胞源性神经营养因子(glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF).GDNF和后来发现的neurturin(NRTN)、persephin(PSPN)、artemin(ARTN)在结构和功能上有很大的相似性,共同构成一个家族,称为GDNF家族.     

糖尿病大鼠海马和大脑皮层GDNF蛋白表达的变化

目的 研究糖尿病大鼠不同血糖水平下脑内胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)表达的变化.方法 将30只Wistar大鼠随机均分为糖尿病血糖未控制(DMI)组、糖尿病血糖控制(DM2)组和对照(NC)组.12周后检测血糖与糖化血红蛋白(HbA1c)水平,免疫组织化学(SP)法检测GDNF蛋白表达,HE染色观察海马及大脑皮层神经元细胞计数和形态学变化.结果 海马CA区和大脑皮层的GDNF蛋白表达均按NC组＞DM2组＞DM1组依次减弱(P＜0.05),且均与HbA1c水平之间呈负相关(r分别为-0.961和-0.963,P＜0.05).与NC组相比,DM1组和DM2组海马CA区神经元无明显减少,而海马及大脑皮层神经元呈明显退形性形态学改变.结论 长期慢性高血糖可下调海马和大脑皮层GDNF蛋白表达,从而可能引起中枢神经病变.     

神经生长因子和脑源性神经营养因子对神经干细胞迁移的影响

目的:探讨神经生长因子(nervegrowth factor,NGF)与脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)体外实验对神经干细胞迁移的影响.方法:体外应用半固体培养法连续14d观察不同浓度的NGF、BDNF及NGF +BDNF组合诱导神经干细胞迁移的情况.结果:体外条件下不同浓度的神经营养因子的组间和组内比较显示,100μg/L BDNF诱导神经干细胞迁移作用最明显.BDNF+NGF联合组在诱导神经干细胞迁移方面未见协同效应.结论:NGF、BDNF二者皆有诱导神经干细胞迁移的作用,100μ g/L BDNF组诱导迁移作用最明显.     

氯胺酮对胚胎大鼠培养神经干细胞增殖和细胞周期的影响

目的　探讨氯胺酮对体外培养的大鼠神经干细胞细胞增殖、细胞周期的影响。方法　采用MTT法检测氯胺酮对体外培养的大鼠神经干细胞细胞生长的抑制作用 ,流式细胞仪检测细胞周期分布。结果　氯胺酮对体外培养的大鼠神经干细胞细胞具有生长抑制作用 ,并存在量效关系。流式细胞仪分析表明G0 /G1期细胞百分率上升 ,S期细胞百分率下降。结论　氯胺酮对大鼠培养神经干细胞的增殖有抑制作用 ,其机制与细胞周期阻滞有关。     

维A酸通过上调脑源性神经营养因子促进小鼠胚胎干细胞向神经细胞分化的研究

目的 探讨维A酸对小鼠胚胎干细胞发生神经分化的影响及机制。方法 用1μmol·L^-1维A酸对小鼠胚胎干细胞E14Tg2A.4处理0和5 d,分别标记为对照组和实验组。用脂质体法将si-NC、si-BDNF、pcDNA、pcDNA-BDNF、si-BDNF+NS（转染si-BDNF并用0.9%NaCl处理5 d）、si-BDNF+RA(转染si-BDNF并用1μmol·L^-1维A酸处理5 d)转染至E14Tg2A.4细胞,转染成功后分别标记为si-NC组、si-BDNF组、pcDNA组、pcDNA-BDNF组、si-BDNF+NS组、si-BDNF+RA组。用实时荧光定量聚合酶链反应法检测sox2、nestin和tuj1 mRNA的表达水平,用Western blot法检测脑源性神经营养因子（BDNF）蛋白的表达水平。结果 对照组、实验组、si-NC组、si-BDNF组、pcDNA组、pcDNA-BDNF组、si-BDNF+NS组和si-BDNF+RA组的sox2 mRNA相对表达量分别为1.00±0.06,0.16±0.01,1.00±0.0...     

肝X受体激活对全脑缺血/再灌注小鼠海马神经干细胞增殖及认知功能的影响

目的研究肝X受体激活对全脑缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)小鼠的海马神经干细胞增殖及认知功能的影响,及其作用机制。方法将75只C57BL/6小鼠随机分为3组,即假手术组(Sham)、全脑缺血/再灌注组(I/R)、全脑缺血/再灌注+肝X受体激动剂TO901317干预组(I/R+TO90),每组25只。采用双侧颈总动脉夹闭方法建立全脑I/R小鼠模型;肝X受体激动剂TO901317(30 mg·kg^-1)在缺血后24 h腹腔注射(i.p,1次/天,连续14 d)。Morris水迷宫实验测定小鼠学习与记忆等认知功能的改变;HE染色观察小鼠海马CA1区病理形态学的改变;免疫组化观察小鼠海马齿状回区DCX阳性细胞的表达;免疫荧光观察海马齿状回区Brd U阳性细胞的表达;Western blot检测海马LXRα、LXRβ、ABCA1、p-ERK1/2、t-ERK1/2、p-CREB、tCREB、BDNF等蛋白的表达情况。结果LXR激动剂TO901317处理后,I/R小鼠的海马齿状回DCX与Brd U阳性细胞的表达数目均增加(P<0.01),认知功能得到了改善(P<0.01),同时,海马ABCA1、p-ERK1/2、p-CREB、BDNF等蛋白表达水平也上调(P<0.01)。结论肝X受体的激活促进了I/R小鼠海马齿状回颗粒下层神经干细胞的增殖和认知功能的改善,其机制可能与激活ERK1/2-CREB-BDNF信号通路,促进I/R小鼠海马DG区内源性神经发生有关。     

复合神经营养因子对大鼠视神经损伤后轴突数的影响

目的观察玻璃体腔注射复合神经营养因子[睫状神经营养因子(CNTF)+脑源性神经营养因子(BDNF)]对大鼠视神经损伤后轴突的形态和纤维数目变化的作用。方法60只雌性健康成年SD大鼠、体重200~225 g,随机分为对照组、CNTF治疗组、BDNF治疗组及复合神经营养因子(CNTF+BDNF)治疗组。各组又分为7、14、21 d 3个时间组,每组5只大鼠,每只动物进行单眼实验,另外一眼为正常对照。四组制成视神经损伤模型后分别向玻璃体腔内注射生理盐水、CNTF、BDNF、CNTF+BDNF。按视神经损伤后不同时间点,分别将动物灌注固定。完整取下视神经,固定,包埋,切片处理后进行图像分析,对正常大鼠视神经内的轴突数和夹伤后大鼠视神经内的轴突数的变化规律进行观察和分析。结果视神经轴突计数结果显示各组轴突数随时间推移逐渐减少。与对照组相比CNTF治疗组、BDNF治疗组及CNTF+BDNF治疗组7、14、21 d各组轴突数均明显多于对照组(P<0.01),且CNTF+BDNF治疗组轴突数亦明显多于单独应用CNTF治疗组、BDNF治疗组(P<0.01)。结论在对大鼠视神经损伤的治疗中,应用CNTF+BDNF明显优于单独应用CNTF或BDNF。     

骨髓基质细胞对脑创伤大鼠神经营养因子表达水平的影响

目的:研究骨髓基质细胞(BMSCs)治疗脑创伤大鼠后内源性的神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)的影响。方法:采用大鼠骨髓中提取出来的骨髓基质细胞,进行体外扩增后,静脉移植于大鼠脑创伤模型中,在治疗后1、3、5、7、14d,ELISA法检测损伤半球NGF和BDNF的浓度,并与对照组对比,进行统计学分析。免疫组化法检测骨髓基质细胞在损伤脑组织中的表达。结果:骨髓基质细胞经股静脉移植后可在损伤的脑组织中表达。治疗组NGF和BDNF的表达于伤后1d至7d逐渐增加,于第7天达到高峰,至第14天降至较低水平。结论:骨髓基质细胞经股静脉移植后可在损伤的脑组织中表达。移植后的骨髓基质细胞可增加损伤脑组织中的NGF和BDNF的表达,与时间有相关性。体外扩增的骨髓基质细胞对于创伤性脑损伤具有治疗作用。     

血清GDNF、BDNF水平监测在精神分裂症患者疗效评估中的应用价值

目的 探讨血清胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)及脑源性神经营养因子(BDNF)水平监测在精神分裂症患者疗效评估中的临床价值.方法 选取新乡医学院第二附属医院53例精神分裂症患者(2016年10月-2018年6月期间收治)设为观察组,接受为期8周的抗精神病药治疗,根据治疗效果分为(无效组、有效组、显效组、临床治愈组)...     

临床孤立综合征患者血清和脑脊液中脑源性与胶质细胞源性神经营养因子水平及其神经保护作用研究

目的 探讨多发性硬化（MS）的早期表现--临床孤立综合征（CIS）患者血清及脑脊液中脑源性神经营养因子（BDNF）、胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）水平及其神经保护作用.方法 对27例CIS患者及21例对照者进行研究,CIS患者发作期进行扩展残疾状态量表（EDSS）评分、寡克隆带测定及MRI检查,液相芯片分析技术检测血清及脑脊液BDNF、GDNF浓度.结果 CIS患者发作期血清及脑脊液BDNF[分别为（5.981±0.995）和（0.178±0.008）μg/L]、GDNF浓度[分别为（0.039±0.007）和（0.082±0.011）μg/L]与对照组[血清：（4.374±0.501）、（0.042±0.007）μg/L;脑脊液：（0.152±0.011）、（0.065±0.013）μg/L]比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）;脑脊液BDNF与GDNF浓度呈正相关（r=0.777,P=0.000）,血清BDNF与GDNF浓度无相关性（r=-0.375,P=0.126）.血清及脑脊液BDNF、GDNF浓度与EDSS评分、血脑屏障指数、Delpech指数、Tourtellotte合成率及脑萎缩无明显相关性（P＞0.05）.结论 CIS患者体内BDNF与GDNF水平相关,二者可能具有协同的神经保护作用.BDNF及GDNF与CIS患者血脑屏障破坏及中枢神经系统内IgG合成无关,与神经功能残疾及脑萎缩的关系仍需研究.     

神经营养因子介导人胚胎干细胞存活

作为多能性群体的人胚胎干细胞（hES），其生长要求在存活、增殖和自我更新信号之间保持平衡。本研究论证了hES细胞能表达介导抗凋亡信号的原肌凝蛋白相关性激酶（TRK）家族的受体。发现3种TRK配体——脑源性神经营养因子、神经营养因子3和4是hES细胞的存活因子。向hES细胞培养物中加入神经营养因子，可使其克隆的存活提高36倍。在含有神经营养因子的培养基中，hES细胞仍然为二倍体并保留了完整的发育潜力。在存在神经营养因子的条件下，hES细胞中的TRK受体被磷酸化；抑制TRK受体将导致hES细胞凋亡。hES细胞中神经营养因子的残留活性受磷脂酰肌醇-3-激酶途径而非分裂索激活的蛋白激酶途径介导。神经营养因子能提高hES细胞的存活能力并且可能有助于对它们的操控，据此可开发高通量筛选模型以鉴别负责hES细胞分化的因子。     

GM-1对新生大鼠神经干细胞增殖和分化的影响

目的:观察不同剂量神经节苷脂(GM—1)对神经干细胞增殖和分化的影响。方法:从新生大鼠海马组织分离出神经干细胞,分别培养于基础培养液(阴性对照组) ,加入三种不同剂量GM—1(实验组)及含有b FGF(阳性对照组)的神经干细胞培养液。采用神经干细胞球直接计数法测定细胞的增殖能力,并应用免疫细胞化学技术对神经干细胞分化情况进行鉴定。结果:3个实验组神经干细胞的增殖能力较阳性对照组无明显差异,较阴性对照组差异显著,贴壁培养细胞分化发现3个实验组分化能力明显低于阳性对照组。结论:GM—1对新生鼠神经干细胞的增殖起促进作用,对神经干细胞无明显的诱导分化作用。     

GDNF在大鼠急性脊髓损伤中的表达及变化规律

目的:探讨GDNF在大鼠急性脊髓损伤(SCI)中不同时间点表达的变化规律来辅助诊断脊髓损伤。方法:健康成年Wistar大鼠56只,雌雄不限,随机分为7组,其中6组大鼠用改良Allen法在胸段制作成急性脊髓损伤模型,另外1组作为对照组。分别于损伤0h、2h、12h、24h、48h、72h后采集脊髓,进行免疫组化检测不同时间点GDNF的变化用显微摄影图像分析系统分析各个时间阳性灰度值,进行统计学分析。结果:免疫组化法显示GDNF在脊髓损伤后2h表达达到最高,12h数量略减少,48仍有阳性表达依次降低72h表达恢复到正常水平。结论:GDNF在脊髓损伤后的时序性变化规律可能成为判断脊髓顺损伤的一种客观指标。     

简便快速获取鼠胶质细胞源性神经营养因子基因的RT-PCR方法

目的：建立一种简便快速地获取鼠胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）基因的RT-PCR方法。方法：Gene Bank中调出鼠的GDNF基因全序列设计引物，提取鼠基因组总RNA做模板进行RT-PCR，经酶切和凝胶电泳鉴定产物。结果：扩增出650bp鼠的GDNF基因，经EcoR Ⅰ酶切可见预期的650bp片段，证实获得正确的产物。结论：成功建立一种简便快速地从鼠基因组总RNA获取鼠GDNF基因的RT-PCR。     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后再修复作用的研究

目的探讨间充质干细胞（MSCS）移植对大鼠脊髓损伤后脑源性神经营养因子（BDNF）表达的影响。方法选取SD大鼠4只作骨髓间充质细胞的分离与培养，提取MSCS；制做脊髓横断损伤模型，细胞移植组24只，PBS（磷酸盐缓冲液）液组24只，空白对照组12只。于脊髓损伤后第7天，无菌条件下，细胞移植组以微量注射器缓慢注入含MSCS的培养液5μl，磷酸盐缓冲液组5μl，对照组未加任何干预因素。分别于术后7d、14d、28d麻醉下行心脏灌流固定取T10节段脊髓，细胞移植组与磷酸盐缓冲组取出损伤节段的脊髓，空白对照组于同一节段取出相应脊髓。应用免疫组化法观察MSCS移植后大鼠脊髓损伤区BDNF的表达变化。结果脑源性神经营养因子在正常大鼠脊髓组织中有一定表达，间充质干细胞移植术后7d、14d及28d，细胞移植组脑源性神经营养因子均高水平表达，与缓冲液组相比较差别明显，具有统计学意义。结论间充质干细胞在移植后通过上调脑源性神经营养因子的表达从而促进轴突的再生，可能是治疗脊髓损伤的重要机制。     

ZMS对老年大鼠脑内NGF和BDNF的影响

目的　研究自然衰老大鼠脑内两种神经营养素与学习记忆的关系 ,以及中药活性成分ZMS的作用。方法　用Y 迷宫测试动物的学习记忆功能 ,酶联免疫吸附分析法测定脑组织中BDNF和NGF的含量。结果　老年大鼠的学习和记忆成绩比青年大鼠差 (P <0 0 1) ,脑组织中BDNF的水平降低 ,NGF的变化无显著性。老年鼠喂服ZMS 2mon后 ,学习和记忆能力改善 ,正确次数 /反应总时间比值提高 (P <0 0 1) ,同时BDNF含量也高于老年组 (P <0 0 1)。但是ZMS对脑内NGF含量无影响。结论　ZMS能提高增龄引起的脑BDNF降低 ,从而对神经元起保护作用 ,这可能是ZMS改善老年大鼠学习记忆功能的重要机制之一     

左归丸对体外培养新生大鼠海马神经干细胞增殖分化的影响

左归丸具有滋阴补肾功效。笔者的在体实验表明左旋单钠谷氨酸模拟肾阴虚证大鼠神经干细胞(Nerve Stemceu，NSC)增殖分化和凋亡与正常组有明显差异。为探讨左归丸以及左旋单钠谷氨酸所致肾阴虚模型中有关NSC增殖分化的作用及机制，本实验从神经干细胞增殖分化方面作以下探讨。     

灵芝孢子粉对戊四氮致痫大鼠脑组织BDNF表达的影响

目的:观察使用灵芝孢子粉后,癫痫点燃大鼠模型皮质和海马区脑源性神经营养因子(BDNF)的含量及神经元形态学的改变,探索癫痫发病机制以及灵芝孢子粉对癫痫的干预作用.方法:采用戊四氮(PTZ)腹腔注射制作Wistar大鼠慢性点燃模型,并将其分为空白对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉组,点燃后断头取脑,免疫组化染色观察BDNF含量的变化及神经元形态学的改变.结果:所有大鼠均达到癫痫模型点燃标准.使用灵芝孢子粉的中药干预组与癫痫模型组相比,脑内BDNF含量明显升高,同时神经元形态学改变明显好转.结论:灵芝孢子粉能够增强脑源性神经营养因子的表达,从而减轻癫痫发作给神经系统带来的损伤,所以灵芝孢子粉可能具有减轻痫性发作、保护神经元的作用.