番茄红素异构体对人卵巢癌HO-8910细胞增殖和凋亡的影响效果初探

目的研究番茄红素异构体对体外培养的人卵巢癌HO-8910细胞增殖和凋亡的影响。方法观察含不同比例的顺、反式异构体番茄红素对人卵巢癌HO-8910细胞的增殖抑制作用;采用PI流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果番茄红素异构体对人卵巢癌HO-8910细胞有一定程度的抑制增殖和诱导凋亡的作用,且呈浓度依赖性。结论对人卵巢癌HO-8910细胞,含较高比例顺式番茄红素的Ⅱ号药组抑制增殖与诱导凋亡的作用比全反式番茄红素的I号药组具更强的生物活性。     

顺铂、紫杉醇对人卵巢癌HO-8910细胞端粒酶活性表达的影响

目的　探讨顺铂和紫杉醇对卵巢癌细胞端粒酶活性表达的影响。方法　用TRAP ELISA法分别检测顺铂 (5 μg/ml)和紫杉醇 (10 6M )作用不同时间后卵巢癌HO 8910细胞端粒酶活性改变 ,并以TUNEL法同步检测细胞凋亡。结果　随着药物作用时间的延长 ,HO 8910细胞株的凋亡率逐渐增加 ,而端粒酶活性逐渐降低。在紫杉醇作用 6 0h后 ,细胞凋亡达 (88 30± 1 0 0 ) %时 ,端粒酶才完全丧失活性 ;而顺铂作用 12h后 ,该细胞株的端粒酶活性完全消失时细胞凋亡率仅有(11 4 3± 0 2 3) %。结论　端粒酶活性抑制可能是顺铂诱导卵巢癌细胞凋亡的机制之一 ,临床监测端粒酶活性表达有助于对抗卵巢癌化疗药物的疗效进行客观评价。     

参一胶囊联合顺铂对高转移人卵巢癌细胞系 HO-8910PM的抑制作用

［摘要］目的观察参一胶囊（Rg3）对高转移人卵巢癌细胞系HO 8910PM的抑制作用。方法细胞分成6组：阴性对照组（A组）：只加新鲜的全培养液；低浓度组（B组）：含10 μg•mL 1 Rg3培养液；中浓度组（C组）：含20 μg•mL 1 Rg3培养液；高浓度组（D组）：含40 μg•mL 1 Rg3培养液；顺铂阳性对照组（E组）：含10 μg •mL 1顺铂的培养液；顺铂+Rg3联合用药组（F组）：含10 μg•mL 1顺铂+20 μg•mL 1 Rg3培养液。分别从台盼蓝活细胞计数法、细胞的增殖抑制（CCK 8法）进行观察。结果Rg3对人卵巢癌HO 8910PM细胞有明显的抑制作用，显示了较好的细胞毒活性作用（P＜0.05）。Rg3与顺铂联合用药时，细胞毒作用与高浓度Rg3和顺铂组相似，但在微观结构上能造成更大的细胞形态结构损伤。结论Rg3对高转移人卵巢癌细胞有一定的抑制作用，Rg3与顺铂联合用药在细胞结构破坏上可能有相加或协同作用，这将为临床卵巢癌患者进行抗肿瘤治疗提供依据。     

半边旗提取物5F对高转移卵巢癌细胞HO-8910PM侵袭转移的影响

目的研究半边旗提取物5F(以下简称5F)对人高转移卵巢癌细胞HO8910PM转移相关能力的影响及其作用的机制。方法以MTT法检测5F对高转移卵巢癌细胞HO8910PM细胞增殖的影响;以细胞粘附人工重组基底膜实验检测5F对HO8910PM细胞粘附能力的影响;用Transwell小室法检测5F对HO8910PM细胞的侵袭能力和趋化运动能力的影响;Westernblot法检测5F对HO8910PM细胞NFκB(P65)和VEGF蛋白表达的影响。结果50μmol·L-1的5F作用细胞6h后能抑制HO8910PM细胞体外侵袭人工基底膜、趋化运动和粘附能力,抑制率分别为(37.57±0.62)%,(28.42±0.67)%,(46.07±4.49)%;5F能明显下调HO8910PM细胞中NFκB(P65)和VEGF蛋白的表达。结论5F能抑制高转移卵巢癌细胞HO8910PM的侵袭、运动和粘附能力。5F抗肿瘤侵袭转移的作用机制与NFκB(P65)和VEGF蛋白的表达下调有关。     

多西紫杉醇对卵巢癌HO-8910细胞的增殖抑制及诱导凋亡的研究

<正>多西紫杉醇(DTX)是一种广谱的、半合成紫杉类抗肿瘤的化疗药物。已有研究表明,多西紫杉醇可用于治疗多种癌症如乳腺癌、肺癌、胃癌和头颈部癌等。本实验通过研究不同     

五没食子酰基葡萄糖对卵巢癌HO-8910细胞凋亡调控基因表达与胱天蛋白酶凋亡途径的影响

目的探讨五没食子酰基葡萄糖(PGG)诱导卵巢癌HO-8910细胞凋亡的作用及诱导胱天蛋白酶凋亡途径的机制。方法 PGG 10,20,40和80μmol·L-1处理HO-8910细胞48,72和96 h后,MTT法检测细胞存活率;Hoechst 33258染色观察HO-8910细胞核形态改变,AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;Western印迹法检测细胞内胱天蛋白酶酶原及活性形式;RT-PCR检测凋亡调控基因Bax、Bcl-2、Bcl-XL、凋亡抑制因子1(CIAP-1)、CIAP-2、存活蛋白、神经元凋亡抑制蛋白(NIAP)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和细胞周期蛋白D1 mRNA表达。结果 PGG 10～80μmol·L-1分别作用48,72和96 h,随浓度的增加,细胞存活率明显降低,r分别为0.93,0.95和0.86(P<0.05)。PGG 40μmol·L-1使HO-8910细胞的细胞核染色质固缩,出现凋亡形态学改变,早期凋亡率从正常对照组的(0.6±0.1)%分别增加到(3.4±1.1)%,(9.8±3.7)%和(19±4.5)%,对晚期凋亡率影响不明显。PGG 20～80μmol·L-1使HO-8910细胞内胱天蛋白酶3,胱天蛋白酶7和胱天蛋白酶9及其底物多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的剪切水平增加,PGG20～80μmol·L-1均抑制死亡受体FAS的蛋白表达水平并使胱天蛋白酶8总剪切水平降低。PGG 20～80μmol·L-1抑制HO-8910细胞中细胞周期蛋白D1,Bcl-2,Bcl-XL和NIAP mRNA的表达,上调CIAP-1 mRNA的表达,对基因Bax,CIAP-2和XIAP mRNA表达影响不明显;PGG 20μmol·L-1抑制存活蛋白基因mRNA的表达,但是增加处理浓度却上调存活蛋白基因mRNA的表达。结论 PGG可能通过抑制凋亡抑制基因Bcl-2和Bcl-XL的表达从而诱导HO-8910细胞内胱天蛋白酶9依赖的内源性凋亡途径,并诱导细胞凋亡。     

半边旗提取物5F对人高转移肺癌细胞PGCl3侵袭转移的影响

目的研究半边旗提取物5F（以下简称5F）对人高转移肺癌细胞PGCl3转移相关能力的影响。方法MTT法检测5F对PGCl3细胞的增殖抑制作用;Transwellchamber法检测5F对PGCl3细胞侵袭能力和趋化性运动能力的影响;细胞粘附实验检测5F对PGCL3细胞粘附能力的影响。结果：5F对PGCL3细胞的生长和增殖都具有一定程度的抑制作用,当药物浓度为12．5、25、50、100μmol／L作用细胞24小时,抑制率分别为：（5．74&#177;0．20）％、（9．91&#177;0．58）％、（15．02&#177;0．42）％、（36．50&#177;1．15）％。当用浓度为25、50、100μmol／L的药物处理细胞6h后,能明显抑制细胞体外侵袭基底膜成分matrigel的能力,其抑制率分别为：（30．62&#177;0．42）％、（55．30&#177;4．53）％、（76．21&#177;3．21）％。当用浓度为25、50、100μmol／L的药物处理细胞6h后,能明显抑制细胞的趋化运动能力。其抑制率分别为：（18．91&#177;1．43）％、（43．72&#177;2．84）％、（59．614-4．01）％。当用上述浓度的药物处理细胞5h后,测定其在1h内与matrigel的粘附能力。结果表明：5F能使PGCL。     

半边旗二萜类化合物5F对高转移卵巢癌HO-8910PM细胞中癌相关基因表达的影响

目的深入探讨半边旗(Pteris semipinnataL,PsL)二萜化合物5F(PsL5F)抗癌作用的分子机制,全面了解其对卵巢癌中癌相关基因表达的影响。方法应用人癌相关基因芯片观察PsL5F对多种癌相关基因表达的影响,并用实时定量PCR和Western blot对部分基因和蛋白进行验证。结果在芯片所含440种基因中,PsL5F明显上调52个基因的表达,明显下调25个基因的表达。差异表达明显的基因可粗略分为3类:影响p53及相关基因;②影响TGF-β通路相关基因;③抑制细胞外基质和粘附分子的表达。结论芯片结果明显深化了对PsL5F抗癌分子机制的认识,其作用机制与p53、TGF-β相关基因及细胞外基质和粘附分子表达有关。     

斑蝥素对高转移卵巢癌细胞HO-8910PM中NF-κB(P65)、FAK表达及FAK磷酸化水平的影响

目的研究斑蝥素对HO8910PM细胞内NFκB(P65)、FAK表达及FAK磷酸化水平的影响,探讨其抗肿瘤侵袭转移的作用机制。方法MMT法测定斑蝥素对细胞增殖的影响;Westernblot分析NFκB(P65),FAK表达及FAK磷酸化水平。结果5～20μmol·L-1的斑蝥素作用HO8910PM细胞24h后,NFκB(P65)蛋白表达水平明显下降,并有一定的剂量效应关系;上调FAK表达,使FAK磷酸化水平降低。结论斑蝥素抗肿瘤侵袭转移与NFκB(P65)表达以及FAK磷酸化水平有关。     

辛伐他汀对K562细胞端粒酶活性及人端粒酶逆转录酶表达的影响

目的探讨辛伐他汀治疗慢性粒细胞白血病可能的作用机制。方法辛伐他汀10和20μmol.L-1与K562细胞作用48或72 h后,用流式细胞术AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡百分率;提取细胞端粒酶,用PCR-ELISA检测端粒酶活性;实时荧光定量PCR检测人端粒酶逆转录酶(hTERT),c-myc和bcl2-mRNA表达。结果辛伐他汀10和20μmo.lL-1与K562细胞作用48 h后,细胞凋亡率分别为(6.24±0.18)%和(9.41±0.22)%,与对照组(1.88±0.14)%比较明显增加;作用72 h后细胞凋亡率分别为(12.41±0.32)%和(19.08±0.26)%,与对照组(4.20±0.19)%比较明显增加。辛伐他汀10和20μmo.lL-1与K562细胞作用48或72 h后,端粒酶活性,hTERT,c-myc和bcl-2 mRNA表达明显低于对照组。结论辛伐他汀可使K562细胞端粒酶活性降低,其机制可能与下调hTERT mRNA表达有关。     

辛伐他汀对肺成纤维细胞凋亡的影响

目的研究羟甲基戊二酸单酰辅酶—A(HMG-CoA)还原酶抑制剂辛伐他汀对肺成纤维细胞凋亡的影响。方法以胎儿肺组织为材料，胰蛋白酶消化法培养肺成纤维细胞，免疫组化方法鉴定，以辛伐他汀5μM、10μM、20μM及不含辛伐他汀的溶剂作用72小时，另以辛伐他汀10μM作用24、48、72、96小时，TUNEL，及流式细胞仪定性及定量检测细胞凋亡。结果(1)成功培养出肺成纤维细胞，光镜下细胞成梭形，免疫组化显示细胞表达纤维粘连蛋白和波动蛋白，不表达角化蛋白和结合蛋白。(2）TUNEL检测结果证实辛伐他汀可诱导细胞凋亡，光镜下也显示凋亡细胞的形态改变。流式细胞仪检测结果显示细胞凋亡率随辛伐他汀浓度及作用时间的增加而增加。结论辛伐他汀能以时间和剂量依赖式诱导肺成纤维细胞凋亡。     

BNIP3介导的线粒体自噬对低氧环境下卵巢癌HO-8910PM细胞侵袭转移的影响#br#

目的　探讨常氧及低氧条件下卵巢癌HO-8910PM细胞线粒体外膜蛋白B淋巴细胞瘤-2基因/腺病毒E1B相互作用蛋白3（BNIP3）的表达变化及其对线粒体自噬和细胞侵袭转移的影响。方法　将人高转移性卵巢癌细胞株HO-8910PM分为常氧组、低氧组、低氧+BNIP3 siRNA组,各组细胞处理48 h后,应用吖啶橙染色及透射电镜观察细胞线粒体自噬的变化;划痕实验及Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力的改变;实时荧光定量PCR（qPCR）和Western blot分析BNIP3、自噬微管相关蛋白轻链3-Ⅱ（LC3-Ⅱ）的基因及蛋白表达变化。结果　在低氧条件下,吖啶橙染色结果显示HO-8910PM细胞线粒体自噬率显著增加,透射电镜结果显示HO-8910PM细胞线粒体自噬小体显著增多（P＜0.01）。转染BNIP3 siRNA后细胞线粒体自噬、细胞迁移率和侵袭率均显著受抑（P＜0.01）。低氧组BNIP3、LC3-Ⅱ的mRNA和蛋白表达明显增高,低氧条件下转染BNIP3 siRNA后BNIP3、LC3-Ⅱ的mRNA和蛋白表达明显下调（P＜0.01）。结论　在低氧条件下抑制卵巢癌HO-8910PM细胞BNIP3的表达可显著抑制线粒体自噬,降低细胞迁移和侵袭能力。     

重组人红细胞生成素对卵巢癌HO-8910细胞表面转铁蛋白受体表达的影响

肿瘤患者常伴有明显的贫血,文献资料表明,肿瘤患者一旦出现贫血,对其危害是极大的,将严重影响患者的生活质量,是影响其预后的一个重要因素,因此,提倡将肿瘤相关性贫血的治疗作为肿瘤整体治疗的一部分[1-3].     

双氢青蒿素对卵巢癌细胞株HO-8910生长及Ang-2表达的影响

目的观察双氢青蒿素对人卵巢癌细胞HO-8910裸鼠移植瘤生长及Ang-2表达的影响。方法建立人卵巢癌细胞株系HO-8910裸鼠皮下移植瘤模型。实验分为空白组、顺铂组、青蒿素高剂量组、青蒿素低剂量组、青蒿素高剂量+顺铂组(各组n=5),观测各组小鼠成瘤情况,肿瘤重量差异以及常规病理检查变化,并采用免疫组化法检测肿瘤组织内Ang-2表达情况。结果与给药组比较,对照组小鼠体重大、生长快(P<0.05)。与青蒿素低剂量组比较,高剂量组、顺铂组和联合组肿瘤生长较慢,重量减轻,其抑瘤率分别为49.24%,56.06%,75.00%,差异有统计学意义(P<0.01)。其中联合用药组效果最好(P<0.05),而高剂量组和顺铂组差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化结果提示给药组中Ang-2的含量明显低于对照组(P<0.05),高剂量组比低剂量组更少(P<0.05),而联合处理组几乎未见Ang-2的表达。结论双氢青蒿素对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的生长具有抑制作用且成剂量依赖性,与化疗药联合应用效果更好,其机制可能是青蒿素下调Ang-2的表达,直接或间接影响肿瘤组织血管生成而发挥抗肿瘤作用。     

1,25二羟维生素D3与顺铂对卵巢癌细胞株HO-8910生长及凋亡影响

<正>本研究通过体外实验观察1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2VitD3]单独及其与顺铂合用对卵巢癌细胞株HO-8910生长及凋亡的影响,探讨1,25(OH)2VitD3作用机制及其与顺铂合用的效果,以期为临床防治卵巢癌提供新的思路和理论依据。     

共培养体系中小鼠囊胚对人卵巢癌细胞系HO-8910PM的影响

目的:观察两种具有侵袭特性的小鼠囊胚细胞与人卵巢癌细胞在相同的体外微环境下,动态的相互作用和整体生物学行为变化。方法:建立小鼠囊胚与人高转移卵巢癌细胞系HO-8910PM体外共培养模型,应用MTT法检测HO-8910PM细胞黏附率的改变;应用Transwell体外细胞侵袭实验观察HO-8910PM细胞体外侵袭及趋化性运动能力的变化;应用RT-PCR检测HO-8910PM细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1、TIMP-2mRNA的表达。结果:癌细胞与小鼠囊胚共培养24h后,大部分囊胚开始边脱带边黏附,推开底层的癌细胞,在囊胚与肿瘤细胞间形成了明显的界限。共培养组的HO-8910PM细胞的黏附率低于对照组。Transwell小室体外侵袭实验及体外趋化性运动实验显示,共培养组穿过滤膜的细胞数明显少于对照组。共培养组MMP-2、MMP-9mRNA的表达及MMP/TIMP较对照组明显下降,TIMP-1、TIMP-2mRNA的表达略有增加。结论:当人HO-8910PM细胞与小鼠囊胚共培养时,肿瘤细胞失去了特有的侵袭性;小鼠囊胚能显著降低HO-8910PM细胞的黏附、体外侵袭能...     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子对人卵巢癌SKOV3细胞凋亡和迁移侵袭的影响

目的探究细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)对人卵巢癌SKOV3细胞凋亡和迁移侵袭的作用。方法建立稳定表达EMMPRIN基因的SKOV3细胞为实验组,分别以转染pc DNA3.0空载体的SKOV3细胞和正常卵巢上皮细胞IOSE80分别作为对照组和空白组。用流式细胞术检测凋亡率,用划痕实验和Transwell小室检测细胞迁移和侵袭能力,用免疫印迹法检测EMMPRIN、Bcl-2和Bax的表达水平。结果空白组、对照组和实验组的凋亡率分别为(10.27±1.35)%,(12.40±0.70)%和(5.67±0.96)%,平均相对迁移指数分别为(0.25±0.03),(0.64±0.03)和(0.83±0.02),平均侵袭细胞数分别为(45.75±2.87),(120.00±3.92)和(153.25±8.06),EMMPRIN表达量分别为(0.12±0.02),(0.22±0.01)和(0.34±0.02),Bcl-2表达量分别为(0.06±0.01),(0.55±0.02)和(0.87±0.03),Bax表达量分别为(0.37±0.02),(0.28±0.01)和(0.12±0.01)。实验组的上述指标与空白组和对照比较,差异均有统计学意义(P<0.001,P<0.01)。结论 EMMPRIN过表达后人卵巢癌细胞SKOV3细胞凋亡能力降低,细胞迁移和侵袭能力增强。     

rhEPO对卵巢癌HO-8910细胞表面TfR表达及细胞增殖的影响

目的:通过卵巢癌HO-8910细胞表面的TfR(CD71)在rhEPO干预前后的表达情况来观察rhEPO对细胞增殖的影响,探讨其在肿瘤相关性贫血中的治疗价值。方法:用RT-PCR法检测经不同浓度的rhEPO处理后的和未经rhEPO处理的HO-8910细胞表面的TfR mRNA表达情况:用流式细胞仪观察和检测处理前后的HO-8910细胞周期上的差异。结果:不同浓度的rhEPO培养HO-8910细胞48 h,72 h后,TfR表达均减少,与同期对照组相比差异有显著意义(P<0.01);经不同浓度的EPO在不同时间处理后的HO-8910及未经EPO处理的HO-8910在细胞周期上,与同期对照组相比差异有显著意义(P<0.01),且较对照组有所减少。结论:经过高浓度的rhEPO处理后,卵巢癌HO-8910细胞表面TfR的表达减少,S期细胞百分率也有所降低,间接提示了高浓度的rhEPO可能通过铁代谢抑制卵巢癌HO-8910细胞的生长、增殖。     

重组人CD40配体对卵巢癌细胞药物敏感性的影响

目的　研究重组人CD4 0配体对卵巢癌细胞增殖和凋亡的影响。方法　卵巢癌细胞株HO8910和SKOV3与干扰素 γ和碱性纤维母细胞生长因子 (bFGF)共同孵育 18h后 ,间接荧光标记流式细胞仪分析表面CD4 0和CD4 0配体的表达 ,并与重组人CD4 0配体、阿霉素及二者联合共同培养 72h ,MTT法测定细胞增殖 ,AnnexinV标记 ,流式细胞仪分析细胞凋亡。结果　SKOV3细胞表达CD4 0分子 ,但无CD4 0配体表达 ,干扰素 γ可上调SKOV3细胞CD4 0分子表达 ,但bFGF无此作用 ;HO8910细胞不表达CD4 0和CD4 0配体 ,与干扰素 γ及bFGF共同孵育后CD4 0分子表达也无明显改变 ;与重组人CD4 0配体作用后 ,SKOV3细胞体外生长受抑制 ;与抗肿瘤药物联合应用 ,其作用更为显著 (P <0 0 1) ,加入干扰素 γ后 ,由重组人CD4 0配体诱导的SKOV3细胞凋亡增加 ;重组人CD4 0配体对HO8910细胞无明显作用。结论　重组人CD4 0配体通过促进SKOV3细胞的凋亡发挥作用。干扰素 γ和重组人CD4 0配体提高阿霉素的抗肿瘤效应。     

塞来昔布顺铂对卵巢癌细胞HO-8910增殖与凋亡影响的研究

目的探讨选择性环氧化酶(COX)-2抑制剂塞来昔布联合顺铂对人卵巢癌细胞株HO-8910增殖与凋亡的影响及Survivin、增殖细胞核抗原(PCNA)、COX-2蛋白表达情况。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定不同浓度塞来昔布单用及其与顺铂联用时HO-8910细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率;免疫组织化学法检测Survivin、PCNA、COX-2蛋白的表达情况。采用方差分析和LSD-t检验进行统计分析。结果塞来昔布、顺铂均可抑制HO-8910细胞的生长(P<0.01);当两者合用时G0/G1期细胞增加,凋亡率增高更加明显(P<0.01),Survivin、PCNA、COX-2蛋白表达下调(P<0.01)。结论塞来昔布、顺铂对卵巢癌细胞株HO-8910均有抑制作用,塞来昔布能增强顺铂的抗卵巢癌作用。