牛磺酸对H2O2引起的大鼠血管平滑肌细胞核[Ca^2＋]及细胞浆[Ca^2＋]变化的影响

目的 毒性剂量H2O2可引起细胞坏死或凋亡,此过程是否与H2O2引起的核[Ca^2 ][Ca^2 ]n变化有关未见报导。本文研究牛磺酸对H2O2引起的血管平滑肌细胞（VSMC）[Ca^2 ]n与胞浆[Ca^2 ][Ca^2 ]c）的变化影响。方法 应用激光共聚焦显微镜对负载Fluo-3的培养在大鼠VSMC的[Ca^2 ]n及[Ca^2 ]c变化进行研究。结果 在0．5％H2O2作用下,[Ca^2 ]n及[Ca^2 ]c持续升高,用抗氧化细胞保护剂－牛磺酸20mmol.L^-1预处理细胞,可降低H2O2引起的[Ca^2 ]n升幅（P＜0．05）,但不影响[Ca^2 ]c升幅（P＞0．05）,表明[Ca^2 ]n变化与[Ca^2 ]c变化对牛磺酸反应性存在差异。结论 VSMC的核Ca^2 调控与胞浆Ca^2 调控各自具有一定的独立性。牛磺酸对H2O2引起的大鼠VSMC核Ca^2 的变化具有保护作用。     

科罗索酸对HepG2细胞糖消耗以及细胞内糖原的影响

目的：研究糖原磷酸化酶抑制剂科罗索酸对HepG2细胞的葡萄糖消耗以及对正常和应激状态下细胞内糖原含量的影响。方法：不同浓度的科罗索酸与HepG2细胞共同孵育24小时后,用葡萄糖氧化酶法测定单位细胞的糖消耗量,并分别测定正常和应激状态下细胞内糖原的含量。结果：1和10μmol.L-1的科罗索酸能显著增加HepG2细胞的单位细胞糖消耗量,提高HepG2细胞内的糖原含量（P〈0.05,P〈0.01）。HepG2细胞经去甲肾上腺素处理后,细胞内糖原降解明显增加1,0μmol.L-1的科罗索酸能显著升高细胞内糖原含量水平（P〈0.05）。结论：科罗索酸能够增加细胞的葡萄糖消耗,抑制糖原过度降解。     

六味地黄汤相关单体对HepG2细胞内PPARδ水平的影响

目的研究六味地黄汤中芍药苷、没食子酸、丹皮酚、梓醇、马钱苷、莫诺苷、桃叶珊瑚苷、23-乙酰泽泻内酯醇B、薯蓣皂苷元9种单体成分对过氧化物酶体增殖激活受体PPARδ水平的影响。方法通过建立HepG2(人肝癌细胞)细胞高脂模型,降低PPARδ的水平,再分别给予六味地黄汤中的9种单体成分(3个质量浓度/单体),考察各单体对PPARδ的作用。结果丹皮酚、薯蓣皂苷元、桃叶珊瑚苷3个单体在不同质量浓度下使PPARδ都有明显的增加,与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.01),其他单体作用不明显。结论丹皮酚、薯蓣皂苷元、桃叶珊瑚苷使PPARδ都有明显增加,可能是六味地黄汤降脂的有效成分。     

氧化苦参碱对HepG2细胞胰岛素抵抗模型的影响

目的 探讨氧化苦参碱对Hep G2细胞胰岛素抵抗(IR-Hep G2)模型的影响。方法 采用以棕榈酸为诱导剂建立IR-Hep G2细胞模型,给予不同剂量的氧化苦参碱溶液(12.5~100μg·m L-1),分别测定葡萄糖消耗量、己糖激酶活力、丙酮酸激酶活力和肝糖原含量。结果 与正常组相比,模型组细胞的葡萄糖消耗量、己糖激酶活力、丙酮酸激酶活力和肝糖原含量均显著降低,表明胰岛素抵抗模型建立成功;与模型组相比,25~100μg·m L-1的氧化苦参碱可显著增加IR-Hep G2细胞的葡萄糖消耗量,50~100μg·m L-1的氧化苦参碱可显著提高IR-Hep G2细胞的己糖激酶活力、丙酮酸活力和肝糖原合成量。结论 氧化苦参碱可通过增加葡萄糖消耗量、己糖激酶活力、丙酮酸活力和肝糖原合成量改善IRHep G2细胞的胰岛素抵抗。     

白藜芦醇抑制HepG2细胞生长及诱导细胞凋亡的初步研究

目的　研究白藜芦醇 (Res)对人肝癌HepG2细胞生长增殖的影响 ,进而探讨Res诱导HepG2细胞凋亡的作用。方法　用不同浓度的Res处理HepG2细胞 ,MTT法检测Res对HepG2细胞生长增殖的抑制作用 ,通过HE染色、透射电子显微镜、原位末端标记法 (TUNEL)和流式细胞术观察凋亡细胞的形态结构变化以及定性、定量检测细胞凋亡。结果　Res能抑制HepG2细胞的生长增殖 ,并呈浓度依赖性 ;Res能诱导HepG2细胞凋亡。 结论　Res能够通过诱导HepG2细胞凋亡抑制HepG2细胞的增殖。     

HDL对HepG2细胞糖原合成的影响及机制研究

目的探讨HDL对Hep G2细胞糖原合成的影响及其机制。方法采用肝糖原/肌糖原试剂盒测定HDL对糖原合成的影响,并用Western blot实验探讨其机制。结果 HDL可以促进Hep G2细胞对糖原的合成。此过程中发生了PI3K-AKT-GSK-3蛋白通路的磷酸化。结论 HDL促进Hep G2细胞糖原的合成有胰岛素信号途径及其下游PI3K/AKT-GSK-3的参与。     

FGF21对HepG2细胞TGF-β信号通路的影响

目的研究FGF21对TGF-β/Smads信号通路中相关蛋白和mRNA表达的影响。方法采用Western blot法检测HepG2 cells的TGF-1,TGF-βRⅡ,Smad 2,3,4,7的蛋白表达水平和采用Q-PCR方法检测HepG2 cells的TGF-β1,TGF-βRⅡ,Smad 2,3,4,7的mRNA表达水平。结果在不同FGF21浓度下,TGF-β1,TGF-βRⅡ,Smad 2,3,4,7蛋白和mRNA表达水平不同(P<0.05)。结论 FGF21通过促进TGF-β信号通路中的信号分子或受体的表达,或者通过下调此信号通路的阻断分子而抑制肿瘤发生。     

香叶木苷对人肝癌HepG2细胞凋亡及Bcl-2/Bax基因表达的影响

目的 研究香叶木苷对人肝癌HepG2细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用,并探讨其相关分子机制。方法 将HepG2细胞分为对照组和香叶木苷组,香叶木苷组分别加入终质量浓度为1、5、25 μg/mL的香叶木苷DMSO溶液,对照组加入等体积的DMSO。药物处理24 h后,台盼蓝染色及Live/Dead染色检测香叶木苷对HepG2细胞活性的影响;CCK-8及EdU染色检测香叶木苷对HepG2细胞增殖的影响;TUNEL染色检测香叶木苷对HepG2细胞凋亡的影响;实时荧光定量PCR（qRTPCR）及Western blotting法检测香叶木苷对Bcl-2、Bax mRNA和蛋白水平的影响。结果 与对照组比较,香叶木苷降低HepG2细胞活力、抑制细胞增殖,5、25 μg/mL组差异显著（P<0.05、0.01、0.001）;促进HepG2细胞凋亡,各浓度组均差异显著（P<0.01、0.001）,且均呈剂量相关性。经5 μg/mL香叶木苷处理后,HepG2细胞中抗凋亡蛋白Bcl-2的mRNA水平显著降低（P<0.001）,而促凋亡蛋白Bax的mRNA水平显著升高（P<0.001）,Bcl-2/Bax蛋白水平显著降低（P<0.001）。结论 香叶木苷抑制HepG2细胞活力和增殖、促进凋亡,作用机制与调控Bcl-2/Bax表达有关。     

醉香含笑树皮提取物诱导HepG2细胞凋亡的作用机制

目的 探讨醉香含笑树皮提取物（extrat of barks of Michelia macclurei Dandy.,EBMMD）诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的作用及相关机理。方法 采用倒置生物显微镜、流式细胞仪、Western-blotting等技术,考察EBMMD对HepG2细胞凋亡及COX-2蛋白表达的影响。结果 流式细胞术分析可见,EBMMD能明显诱导HepG2细胞凋亡,且呈浓度依赖关系;倒置生物显微镜观察可见细胞凋亡的形态学改变;随EBMMD浓度增高,细胞内COX-2蛋白的表达逐渐减少,且当EBMMD浓度达25.00μg.mL 1时,能明显抑制COX-2蛋白表达。结论 EBMMD可以明显诱导HepG2细胞凋亡,其作用机理可能与下调细胞内COX-2蛋白表达进而诱导其凋亡有关。     

橙皮苷对胰岛素抵抗HepG2细胞体外糖代谢的影响

目的探讨橙皮苷(hesperidin)对胰岛素抵抗HepG2细胞体外糖代谢的影响。方法采用高浓度胰岛素(INS)持续作用HepG2 12h建立胰岛素抵抗(IR-HepG2)模型,同时培养液中给予不同质量浓度橙皮苷(10,40和60μg.mL-1)或盐酸二甲双胍(30μg.mL-1)干预。药物作用12h后,换含低浓度INS的培养液培养细胞12h,使细胞同步化。然后,测定各组细胞葡萄糖消耗量、细胞内肝糖原含量、己糖激酶(hexokinase,HK)和丙酮酸激酶(pyruvate kinase,PK)的活力。结果与正常组相比,模型组细胞葡萄糖消耗量、肝糖原含量及HK和PK酶活力显著下降(P<0.01);与模型组相比,40和60μg.mL-1的橙皮苷可极显著增加IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量、肝糖原合成量及HK酶活力(P<0.01),显著增加PK酶活力(P<0.05)。结论橙皮苷可增加IR-HepG2细胞对葡萄糖的利用,增加肝糖原合成量,提高HK、PK活力,从而促进IR-HepG2细胞糖代谢,改善胰岛素抵抗能力。     

辣木叶黄酮对肝癌HepG2细胞脂质代谢的影响及机制探究

目的 探究辣木叶黄酮对肝癌HepG2细胞脂质代谢的影响及其潜在作用机制。方法 构建脂质沉积肝癌HepG2细胞模型,用辣木叶黄酮(终浓度1、2、5及10μg/ml)处理细胞;细胞计数(cell counting kit,CCK)-8实验检测细胞活力;油红O染色检测细胞内脂滴染色情况;采用试剂盒检测细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)表达;实时荧光定量聚合酶链式反应法检测脂质代谢相关基因[低密度脂蛋白受体(low-density lipoprotein receptor,LDLR)]、固醇调节原件结合蛋白(sterol regulatory element binding protein,SREBP)-1c、小凹蛋白(caveolin,CAV)1及乙酰辅酶A胆固醇乙酰转移酶(acetyl-coenzyme A acetyltransferase,ACAT)1表达;免疫印迹法检测核因子E2相关因子(nuclearfactor-E2-related factor,Nrf)2/血红素加氧酶(he...     

基因芯片技术研究Z24对人HepG2细胞基因表达的影响

目的:利用芯片技术观察Z24对人HepG2细胞基因表达的影响,以探讨其毒性作用的分子机制.方法:不同浓度处理培养的HepG2细胞,H-E染色观察细胞形态;抽提细胞RNA,利用荧光标记ddUTP逆转录制备cDNA探针,与毒理表达谱基因芯片杂交,并对Cy3,Cy5荧光信号做扫描分析.结果:Z24处理实验组细胞呈现凋亡形态;芯片扫描显示在IC20浓度情况下,Z24作用HepG2细胞有15个基因发生显著的变化,其中细胞凋亡通路有关的基因TNFRSF5发生明显上调,与肝功能有关的基因(AKR1C2和INSIG1)发生明显的下调.随Z24浓度的增加,发生改变的基因数增加到244个,其中109个基因发生明显的上调,135个基因发生明显的下调,下调的基因多与细胞增殖调控功能、氨基酸、能量和脂肪代谢有关;而细胞凋亡通路中几个重要关键蛋白(DFFB,CASP6,DR4)的基因明显上调,并且与肝脏有关的基因(INSIG1,PHKA2,HPX)也发生了明显的改变.结论:Z24可以诱导HepG2细胞凋亡,并可能是其产生毒性的重要机制之一;毒性作用的靶器官可能是肝脏.     

白鲜碱对HepG2细胞的毒性作用及其机制

目的研究白鲜碱的肝细胞毒性作用及其毒性机制。方法白鲜碱2.5～800μmol·L-1与HepG2细胞作用24 h,用MTT法检测细胞存活率并计算IC50值,用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞膜损伤。白鲜碱25～100μmol·L-1与HepG2细胞作用4,24或48 h,用试剂盒方法分别检测细胞培养液中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)和谷氨酰转肽酶(GGT)活性。用倒置显微镜观察细胞形态变化;激光共聚焦扫描显微镜检测细胞线粒体膜电位的变化。结果白鲜碱25～800μmol· L-1与HepG2细胞作用24 h对HepG2细胞存活的抑制作用随着浓度的增加而降低(r=0.965,P<0.05),IC50值为(283±27)μmol·L-1。与溶剂对照组相比,白鲜碱12.5～50μmol·L-1作用24 h,HepG2细胞LDH释放率显著升高(P<0.01)。白鲜碱100和200μmol·L-1可引起HepG2细胞形态发生明显变化,细胞皱缩脱落,细胞数目减少,并使HepG2细胞线粒体膜电位下降(P<0.05,P<0.01)。白鲜碱100和200μmol·L-1与HepG2细胞作用24 h可使细胞培养液中ALT和AST活性显著升高,并呈浓度依赖性(r=0.995,P<0.05和r=0.996,P<0.05),线粒体膜电位亦明显下降(r=0.978,P<0.05)。与溶剂对照组相比,白鲜碱100和200μmol·L-1与HepG2细胞作用4 h,细胞培养液中GST活性明显升高(P<0.05);作用24 h,GST活性升高呈浓度依赖性(r=0.987,P<0.05)。白鲜碱200μmol· L-1作用48 h导致HepG2细胞培养液中GGT活性升高(P<0.05)。结论较高浓度的白鲜碱(≥100μmol· L-1)具有潜在的肝毒性,细胞膜损伤和线粒体损伤可能是其肝毒性作用机制之一。     

氯胺酮对HepG2细胞线粒体功能的影响

目的评价氯胺酮的线粒体毒性,从而探讨氯胺酮可能的毒性机制。方法 Hep G2细胞培养基中分别加入齐多夫定10~2000μmol·L-1培养7 d,或加入氯胺酮50~3000μmol·L-1培养24 h,CCK8细胞计数法测定细胞存活率。Hep G2细胞培养基中分别加入齐多夫定100μmol·L-1培养7 d后,或加入氯胺酮100和1200μmol·L-1培养24 h,化学发光法检测胞内ATP合成水平,荧光探针法检测胞内钙离子浓度、活性氧及线粒体膜电位(ΔΨm)的变化,同时设齐多夫定1000μmol·L-1用于实时荧光定量PCR检测线粒体DNA(mt DNA)表达水平的变化。结果与正常对照组相比,齐多夫定10~2000μmol·L-1可以抑制细胞存活,IC50为100μmol·L-1;氯胺酮1000~3000μmol·L-1抑制细胞存活,IC50为1200μmol·L-1。与正常对照组相比,齐多夫定100μmol·L-1组线粒体ATP合成水平显著下降(P<0.05),胞内钙离子浓度明显升高(P<0.05),活性氧水平显著升高(P<0.05),ΔΨm显著下降(P<0.05),而1000μmol·L-1可以明显干扰mt DNA表达水平(P<0.05)。氯胺酮100μmol·L-1组ATP合成水平明显下降(P<0.05),其他指标均无显著性差异;氯胺酮1200μmol·L-1组ATP合成水平显著下降(P<0.01),活性氧水平和胞内钙离子浓度显著升高(P<0.01),ΔΨm显著下降(P<0.05),mt DNA水平无明显改变。结论氯胺酮可以通过干扰线粒体代谢功能而诱导线粒体损伤。     

锌α2糖蛋白对肝癌HepG2细胞增殖与侵袭能力的影响

目的：锌α2糖蛋白（ZAG）是一种具有复杂功能的蛋白。本研究探讨ZAG对肝脏肿瘤HepG2细胞增殖及侵袭能力的影响及其作用机理。方法：构建ZAG干扰质粒,并转染入HepG2肝癌细胞株,采用Western blot方法检测转染前后ZAG表达的变化;利用MTT和平板克隆实验检测ZAG对细胞增殖的影响,利用Transwell小室实验检测转染前后HepG2细胞侵袭能力的变化,同时检测转染前后细胞ATP含量的变化,以了解ZAG对细胞代谢的影响。结果与结论：ZAG干扰质粒成功转染入HepG2细胞并筛选出ZAG下调的稳定细胞株;转染后的HepG2细胞增殖能力、侵袭能力均有显著提高,同时ATP水平上调,肿瘤细胞恶性更强。     

晚期糖基化终产物对人肝癌细胞HepG2增殖的影响

目的探讨糖尿病晚期糖基化终产物(AGEs)对肝癌细胞HepG2增殖的影响及其机制。方法体外培养人肝癌细胞HepG2,以终浓度分别为100、200和400μg/ml的AGEs处理细胞24h,并设正常对照组进行比较。运用细胞计数试剂盒8研究AGEs对HepG2增殖的影响,流式细胞术检测细胞周期的改变,Western blot检测肝癌细胞抗凋亡基因表达。结果 AGEs呈浓度依赖性显著促进HepG2细胞增殖(P<0.05)。与对照组比较,200μg/ml AGEs干预24h后可以减少HepG2细胞G1期百分率,同时增加S期百分率(P<0.05)。AGEs可致细胞抗凋亡基因B细胞淋巴瘤-白血病2(Bcl-2)相关蛋白表达增加。结论 AGEs能促进HepG2细胞的增殖,其机制可能与上调Bcl-2相关蛋白表达,加速细胞G1期向S期转换相关。     

翻白草油对肝癌HepG2细胞CDK4蛋白的影响

目的:检测翻白草油对肝癌HepG2细胞CDK4蛋白表达的影响,探讨翻白草油抗肝癌的机制.方法:翻白草油作用肝癌HepG2细胞后,用噻唑蓝(MTT)比色法检测HepG2细胞增殖活性和IC50;western blot法检测CDK4蛋白的表达.结果:翻白草油能抑制HepG2细胞增殖,且呈剂量依赖性,IC50值为2.03mg...     

同分异构体补骨脂素和异补骨脂素对HepG2细胞及细胞色素 P450酶的影响

目的：观察补骨脂素和异补骨脂素对HepG2细胞增殖、CYP基因表达及蛋白定位和蛋白表达的影响。方法用噻唑蓝（ MTT）比色法、流式细胞术、实时定量PCR、免疫荧光法（ IF）和 Western blot 检测补骨脂素和异补骨脂素对CYP1A1和CYP3A4的影响。结果在梯度浓度作用后,2种药物对HepG2细胞均有抑制作用,且存在明显的浓度依赖关系;2种药物（50μg · mL-1）均阻滞HepG2细胞周期于G2-M期,都是CYP1A1、CYP3A4 mRNA的抑制剂,但抑制效果有差别;CYP3A4蛋白表达均明显低于对照组。2种药物均抑制HepG2细胞增殖,主要是由于两者阻滞其周期于G2-M期。结论相比于补骨脂素,异补骨脂素对CYP3A4 mRNA表达和蛋白表达的抑制作用更强,而对CYP1A1mRNA的抑制强度略低。     

羊栖菜多糖的制备及其对HepG2细胞的抑制作用

目的研究羊栖菜多糖对人肝癌细胞HepG2的抑制作用.方法用热水提取,乙醇、氯化钙沉淀分离及酸水解制备了6种羊栖菜多糖样品;采用MTT法测定各羊栖菜多糖样品对人肝癌细胞HepG2的生长抑制率.结果除2种多糖在低浓度对其抑制率有所增加外,其它样品对人肝癌细胞HepG2的抑制率均随其浓度增加而增加,当剂量＜2000mg·L-1时,其抑制率均未超过40%.结论各羊栖菜多糖样品对肝癌细胞HepG2均有一定的抑制作用.