铝暴露对大鼠海马蛋白激酶Cγ亚型影响

目的通过研究慢性铝暴露大鼠海马蛋白激酶Cγ亚型（PKCγ）的蛋白和mRNA表达的变化，观察大鼠海马CA1区长时程增强（LTP）形成，探讨铝暴露对学习记忆机制的影响。方法选择断乳后Wistar大鼠，以含有不同浓度A1Cl3的水进行饲养。3个月后，测量大鼠海马LTP，用改良的Takai法测定PKC活性的变化，蛋白印迹（Westernblotting）法检测PKCγ的蛋白表达；RT-PCR检测PKCγ的mRNA表达。结果（1）各染铝组PKC活性与对照组比较均降低，差异有统计学意义（P〈0.01）；（2）各染铝组PKCγ蛋白表达与对照组比较有降低趋势（P〈0．05）；（3）各染铝组PKCγmRNA表达与对照组比较均降低（P〈0．05），0．2％与0．4％，0．6％组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论慢性铝暴露影响大鼠海马PKCγmRNA和PKCγ蛋白表达。使PKC活性降低。导致LTP的下降，从而影响学习记忆的功能。     

慢性染铝对大鼠海马长时程增强及Ca2+浓度影响

目的 探讨慢性铝暴露对断乳后大鼠海马CA1区长时程增强及细胞内Ca²⁺浓度的影响.方法 54只大鼠随机分为3组,对照组(蒸馏水)和实验组(0.2%,0.6%AlCl3溶液).采用自由饮水方式染毒,连续80~90 d.测定血铝和脑铝含量、大鼠海马CA1区群体锋电位和大鼠海马细胞内Ca²⁺浓度.结果 各铝暴露组血铝和脑铝均明显高于对照组(P<0.01);高频刺激后,0.2%AlCl3组海马CA1区群体锋电位幅值增强率为117.70%;0.6%AlCl3组为109.77%,均明显低于对照组(P<0.01);且有随铝暴露浓度增加,群体锋电位幅值增强率逐渐降低的趋势;0.2%与0.6%AlCl3组海马细胞内Ca²⁺浓度分别为(228.38±51.74)和(195.43±36.95)nmol/L,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).结论 铝所致海马细胞内Ca²⁺浓度的降低可能是其影响长时程增强的机制之一.     

铝作用于cAMP-蛋白激酶A途径及对学习记忆的影响

铝是一种常见的金属元素,其神经毒性可能是影响学习记忆机制的因素之一。突触传递长时程增强(LTP)是研究学习记忆的一个可用电生理模型,cAMP蛋白激酶A(PKA)途径是神经元重要的信号传导通路,在学习记忆形成过程中起重要的作用。铝可以影响学习记忆机制中某些环节(如神经递质、钙离子浓度、蛋白激酶等),导致智力及认知能力的下降。该文根据近年来国内外在该领域的研究进展,从电生理学、生物化学等方面阐述了铝对学习记忆机制的影响及与cAMP/PKA途径的关系。     

间歇性低氧对大鼠海马区磷酸化JNK表达影响

目的 探讨间歇性低氧对大鼠海马区磷酸化c-Jun氨基末端激酶(JNK)表达及学习记忆影响。方法 120只雄性SD大鼠随机分成对照组及轻、重度低氧组,对照组暴露于空气中,低氧组分别暴露于不同低氧条件下(100、50 ml/L),暴露时间8 h/d,连续2、4、6、8周,Morris水迷宫检测学习记忆功能,光镜观察海马区神经细胞形态变化,免疫印迹和免疫组化法检测海马区磷酸化JNK表达。结果 与对照组比较,随低氧时间延长,低氧组大鼠海马区脑组织结构损伤,磷酸化JNK表达增多;水迷宫检测动物逃避潜伏期延长、穿越原平台次数减少,与轻度低氧组比较,重度低氧组变化更为明显(P＜0.05);轻、重度低氧组暴露后6、8周大鼠海马区磷酸化JNK表达分别为(5.84±1.17)、(3.58±1.0)和(7.86±1.56)、(9.78±3.41),与轻度低氧组比较,重度低氧组大鼠海马区磷酸化JNK表达升高,差异有统计学意义(t=5.63,P＜0.05)。结论 间歇性低氧可导致大鼠学习和记忆功能障碍,其机制可能与磷酸化JNK不同时间和强度差异表达有关。     

铝暴露对哺乳期大鼠海马中钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ含量及活力的影响

目的 研究慢性铝暴露对哺乳期大鼠海马中钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(caMKⅡ)含量及活力的影响,探讨铝暴露损害学习、记忆的作用机制.方法 将清洁级孕期Wistar大鼠随机分为对照组、低剂量和高剂量组,每组6只.仔鼠出生后第1天,分别用含有0,0.2%和0.4%AlCl3的蒸馏水喂养母鼠.仔鼠出生后第21天(哺乳期结束),测定其全血和脑组织中的铝含量、海马中CaMKⅡ含量及活力.结果 高、低剂量组仔鼠血铝和脑铝含量均高于对照组,经q检验,差异有统计学意义(P＜0.05);且血铝及脑铝含量均随着铝暴露浓度的升高而升高.高、低剂量组仔鼠海马中α-CaMKⅡ的含量及活力均低于对照组,经q检验,差异有统计学意义(P＜0.05);且α-CaMKⅡ的含量及活力均随着铝暴露浓度的升高而降低.结论 铝暴露使仔鼠海马中α-CaMKⅡ的蛋白表达和活力降低,可能是造成学习、记忆功能损害的原因之一.     

铝对大鼠海马ERK蛋白及mRNA表达影响

目的研究慢性铝中毒对大鼠海马细胞外信号调节蛋白激酶（ERK）蛋白及mRNA表达水平的变化，探讨铝中毒对学习记忆机制的影响。方法选择断乳后Wistar大鼠，用不同浓度AlCl3的水饲养3个月。测量大鼠海马长时程增强（LTP），用改良的Takai法测定丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）活性的变化。蛋白印迹（Western blotting）方法检测ERK1／2的蛋白含量，RT-PCR方法检测ERK2的mRNA表达。结果（1）各染铝组MAPK活性降低且与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；（2）ERK1／2蛋白表达的比较：①ERK2在大鼠海马中的蛋白含量高于ERK1；②染铝组ERK1／2非磷酸水平与对照组比较均有所下降（P〈0．05），但染铝组之间差异无统计学意义（P〉0．05）；③染铝组ERK1／2磷酸化水平与对照组的比较均有下降（P〈0．05），染铝组之间的差异有统计学意义（P〈0．05）。（3）染铝组ERK2的mRNA表达与对照组比较明显降低，但染铝组之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论慢性铝中毒不仅影响大鼠海马中ERK2的mRNA表达水平，同时也影响ERK1／2的蛋白表达水平的降低，造成有丝分裂原活化蛋白激酶（MAPK）活性的下降，损害LTP的形成，从而影响学习记忆功能下降。     

电磁辐射对大鼠海马PKC转位和激活的影响

目的 探讨电磁辐射对PKC转位和激活的影响。方法 以峰值功率密度为5 W/cm²的微波持续辐照大鼠1,3,5,10,15 d,用改良的Takai法检测海马PKC活性,用Western-blot法检测海马AMPA受体磷酸化程度。结果 微波辐照后,大鼠海马中的PKC被激活,时间为3~5 d,随着辐照时间增加,这种激活形式一直延续至辐照15 d;对照组和辐照组各个时相点的AMPA Glu2-Ser⁸⁸⁰位点的磷酸化程度差异无显著性。结论 峰值功率密度为5 W/cm²的微波辐照对中枢神经系统的损伤可能不涉及PKC-AMPA途径的功能变化。     

铝对大鼠学习记忆及海马神经细胞凋亡影响

目的 研究三氯化铝对大鼠学习记忆及海马神经细胞凋亡的影响.方法 选择雄性SD大鼠,按体重随机分为4组,在基础饲料中添加三氯化铝,Al3+剂量分别为0,11.2,55.9和111.9mg/(kg·bw),连续染毒3个月.采用Y-电迷宫仪检测大鼠学习记忆能力,原位末端标记技术(TUNEL)和流式细胞术检测大鼠海马神经细胞凋亡,原子吸收法检测海马铝含量.结果 染毒Al3+111.9mg/(kg·bw)组大鼠逃避正确率为(0.83±0.115)%明显低于对照组(0.95±0.127)%,<0.05);5.9和111.9mg/(kg·bw)组大鼠逃避潜伏期分别为(4.81±1.33),(5.55±1.79)s,对照组(3.45±1.12)s明显延长(P<0.05);染毒组大鼠海马均出现TUNEL阳性细胞,且随剂量增加渐趋明显,各染毒组大鼠海马神经细胞凋亡率及铝含量明显高于对照组(P<0.01),且呈明显剂量-效应关系.结论 铝诱导海马神经细胞凋亡是导致大鼠学习记忆障碍的重要机制之一.     

慢性铝暴露对大鼠海马细胞外调节蛋白激酶2及cAMP反应元件结合蛋白mRNA和蛋白表达的影响

目的 通过观察细胞外调节蛋白激酶2(ERK2)及cAMP反应元件结合蛋白(CREB)通路的变化,研究慢性铝暴露对大鼠学习记忆功能的影响机制.方法 将80只初断乳清洁级雄性Wistar雄性大鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组和2、4、6 mg/ml三氯化铝染毒组,每组20只.采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒3个月.测定大鼠脑铝和血铝含量,采用Western Blot法和Real-time PCR(RT-PCR)法分别检测海马组织中ERK2和CREB mRNA及蛋白的表达水平.结果 与对照组比较,各浓度铝染毒组大鼠血铝和脑铝含量均升高,海马组织中ERK2和CREB蛋白及mRNA的表达水平均下降,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着铝染毒浓度的升高,大鼠血铝和脑铝含量呈上升趋势,海马组织中ERK2和CREB蛋白及mRNA的表达水平均呈下降趋势.结论 慢性铝暴露可能通过抑制大鼠海马中ERK2/CREB通路而损伤大鼠的学习记忆能力.     

铝对大鼠学习记忆及海马神经元AchE活性的影响

目的观察铝对大鼠空间学习记忆的影响及海马神经元AchE活性的变化,为探讨铝的神经毒性提供实验依据。方法采用Morris水迷宫方法测试染铝大鼠空间学习记忆能力的改变;采用乙酰胆碱酯酶（AchE）组织化学方法对大鼠海马不同亚区AchE神经元活性进行观察。结果大鼠经多次训练后,无论是盐水对照组还是染铝组,其逃避潜伏期均呈缩短趋势。但是大鼠在染铝后30、35、40、45、50、55、60d逃避潜伏期明显大于盐水对照组,两者比较有显著性差异（P〈0.01）。染铝后60d大鼠海马不同亚区AchE活性明显降低。结论经多次训练后,大鼠空间学习记忆能力随训练次数增加而有所增强。结果提示铝可影响大鼠空间学习记忆能力,使学习记忆功能降低,其机制可能与海马乙酰胆碱神经元活性的改变有关。     

血管紧张素-2对内皮细胞和线粒体膜电位影响

目的 观察血管紧张-2(Ang-2)对血管内皮细胞(VEC)内[Ca²⁺]i及线粒体膜电位水平的影响。方法 将VEC分为空白对照组和Ang-2处理组。用激光共聚焦显微镜测量各组细胞的[Ca²⁺]i和线粒体膜电位。结果 空白对照组的细胞内[Ca²⁺]i为(24.781±1.350),Ang-2组的细胞内[Ca²⁺]i为(47.384±1.323),Ang-2组的细胞内[Ca²⁺]i,明显高于空白对照组(P<0.01)。空白对照组的线粒体膜电位水平为(36.578±1.1470),Ang-2组的线粒体膜电位水平为(9.016±1.124),Ang-2组的线粒体膜电位水平明显低于空白对照组(P<0.01)。结论 Ang-2可引起VEC内[Ca²⁺]i和线粒体膜电位水平的明显改变。     

新生儿缺氧缺血性脑病红细胞胞浆游离钙及脑血流动力学变化的临床意义

目的:探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)对红细胞胞浆游离钙(RBC[Ca2+]i)水平及脑血流动力学的影响及意义。方法:HIE组30例,正常对照组20例。HIE患儿于生后24h内采集静脉血2ml,采用Fura-2/AM法检测RBC[Ca2+]i水平;应用经颅彩色多普勒超声仪监测脑血流动力学参数,包括大脑中动脉收缩期峰值流速(PSFV)、舒张末期血流速度(EDFV)、平均血流速度(Vm)、阻力指数(RI)。并与正常对照组进行对比。结果:①HIE患儿RBC[Ca2+]i水平显著高于正常对照组[(2.68±0.05)vs(2.15±0.18);(2.80±0.17)vs(2.15±0.18),P<0.01]。HIE程度与患儿体内RBC[Ca2+]i水平具有相关性(r=0.453,P<0.05)。②HIE患儿PSFV、EDFV及Vm均低于正常对照组(P<0.01);RI高于正常对照组(P<0.01),存在明显的脑血流动力学紊乱,血流速度减慢,阻力指数增大。结论:RBC[Ca2+]i参与了HIE的病理生理过程,在HIE发病机制中可能起重要作用。监测RBC[Ca2+]i水平和脑血流动力学变化可能有助于HIE的早期诊断和预后判断,并指导临床治疗。     

除虫菊酯类农药对大鼠肝线粒体、微粒体~(45)Ca摄取的影响

为探讨除虫菊酯类农药对钙离子转运的影响，采用体外放射性同位素４５Ｃａ测定技术，观察了溴氰菊酯、氯氰菊酯对雄性ＳＤ大鼠肝线粒体、微粒体４５Ｃａ主动摄取的影响，以及对线粒体、微粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活力的影响。结果表明：溴氰菊酯、氯氰菊酯均能明显降低大鼠肝线粒体、微粒体４５Ｃａ主动摄取的能力，抑制肝线粒体、微粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶的活力，与对照组相比，差异均有显著或非常显著意义（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），且随剂量增加，线粒体、微粒体４５Ｃａ摄取率及Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶的活力有显著下降的趋势。提示：溴氰菊酯、氯氰菊酯对肝脏钙稳态影响的作用部位主要是线粒体和内质网钙隔离和调节系统，使其钙封闭作用失调、钙离子转运障碍、细胞正常生理生化功能紊乱。     

饮食控制对中老年糖耐量减低者红细胞[Ca2+]i水平的影响

目的 探讨饮食控制对中老年糖耐量减低者红细胞内游离钙浓度([Ca²⁺]i)的影响.方法 对42例中老年糖耐量减低者进行为期10个月的饮食干预.并在干预前后测定空腹血糖(FSG)、2小时餐后血糖(2HSG)、红细胞[Ca²⁺]i、血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、糖化低密度脂蛋白(G-LDL)和体质指数(BMI).结果 与糖耐量正常者比较,IGT患者红细胞[Ca²⁺]i显著升高(P<0.01).饮食干预后,红细胞[Ca²⁺]i显著下降(P<0.01).FSG、2HSG、TG、TC、G-LDL及BMI在干预后均显著下降.结论 饮食控制对IGT患者红细胞[Ca²⁺]i异常升高有明显的抑制作用.推测这一变化与血糖降低有关.     

胞外Ca2+浓度对辐射诱导HL-60细胞凋亡的影响

目的探讨胞外不同Ca^2＋浓度对辐射诱导HL-60细胞凋亡的促进作用.方法对体外培养的HL-60细胞经一定剂量的32P辐射后发现加入不同浓度的Ca^2＋继续培养24、48h,流式细胞仪检测凋亡率.结果胞外Ca^2＋作用于HL-60细胞24、48h后发现对辐射诱导细胞凋亡随Ca^2＋浓度的增加细胞凋亡率增大,Ca^2＋有明显的促凋亡作用,相关性很好r24=0.9001（P=0.0145）,r48=0.9343（P=0.0063）.结论胞外不同浓度的Ca^2＋对辐射诱导HL-60细胞有明显的促进凋亡的作用.     

铝暴露对大鼠认知能力及海马Ng蛋白表达影响

目的研究慢性铝暴露对大鼠海马神经颗粒素（Neurogranin,Ng）蛋白表达的影响,探讨慢性铝暴露损害大鼠认知能力的机制。方法选择断乳后Wistar大鼠,以含有不同浓度AlCl3水溶液进行饲养。3个月后,进行跳台行为测定,蛋白免疫印迹法检测Ng蛋白表达。结果染铝组大鼠的血铝分别为（6.0±0.9）,（6.1±1.2）,（17.7±1.4）μg/L,与对照组（4.1±1.3）μg/L比较均升高,差异有统计学意义（P〈0.01）;染铝组潜伏期分别为（166.00±21.33）,（120.23±15.44）,（79.86±10.35）S,与对照组（300S）比较均缩短（P〈0.01）;染铝组与对照组Ng的蛋白表达降低（P〈0.05）。结论不同浓度慢性铝暴露可以引起大鼠脑铝和血铝的含量增高,使海马Ng的蛋白表达下降,导致大鼠认知能力降低。     

乌贼墨对H22癌细胞内Ca2+浓度、核膜Ca2+/Mg2+-ATP 酶活性及c-jun表达的影响

利用荧光探针和免疫组织化学方法,研究了乌贼墨对Ｈ２２癌细胞内ＣＡ＾２＋浓度,核膜Ｃａ＾２＋／Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性及ｃ－ｊｕｎ表达的影响。结果发现,乌贼墨使Ｈ２２癌细胞内Ｃａ＾２＋浓度分别降低了６９％和７９％,核膜Ｃａ＾２＋／Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性分别降低了２１％和３７％,ｃ－ｊｕｎ表达明显减少。     

新生儿蛛网膜下腔出血时检测红细胞胞浆游离钙的临床意义

目的 探讨红细胞胞浆游离钙(RBC[Ca2+]i)水平在新生儿蛛网膜下腔出血(SAH)发病机制中的作用.方法 选择2006年6月至2010年12月住院的38例SAH患儿作为研究对象,于生后2～3d、5～7d及10～14 d后各采集静脉血一次,采用Fura-2/AM法检测RBC[Ca2+]i水平,并以同期出生的20例正常新生儿作为对照.结果 ①SAH患儿RBC[Ca2+]i水平显著高于对照组(P＜0.01),RBC[Ca2+]i水平与SAH程度存在明显正相关(r=0.631,P＜0.05).②SAH患儿RBC[Ca2+]i水平于生后5～7d达到较高水平,然后逐渐恢复,至10～14 d后仍较对照组增高(P＜0.05).结论 RBC[Ca2+]i参与了SAH的病理生理过程,在SAH发病机制中可能起重要作用,动态监测RBC[Ca2+]i水平可能有助于SAH的早期诊断和预后判断.