三七总皂苷对顺铂肾损害大鼠肾组织差异表达蛋白质的影响

目的 探讨三七总皂苷（panax notoginsenosides,PNS）对顺铂肾损害大鼠肾组织差异表达蛋白质的影响。方法 实验大鼠随机分为正常对照组、顺铂模型组和PNS治疗组,对大鼠给药处理10 d后,检测大鼠血清尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）和尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶（NAG）的水平,并做肾脏病理检查;采用SELDI-TOF-MS技术筛选大鼠肾组织的差异表达蛋白质,并通过MALDI-TOF-MS/MS、Western blot实验予以鉴定。结果 顺铂模型组大鼠血清BUN、Scr和尿NAG的水平均显著高于正常对照组（P均〈0.05）。电镜下可见肾小管上皮细胞的线粒体明显损伤,说明顺铂肾损害大鼠模型制作成功。PNS干预可使大鼠血清BUN、Scr和尿NAG的水平显著低于顺铂模型组（P〈0.05）,肾小管上皮细胞的线粒体损害程度较顺铂模型组明显改善,提示PNS对其有保护作用。筛选出顺铂模型组与正常对照组肾组织差异表达的蛋白质20个,其中7个蛋白质在顺铂模型组中的表达下调2倍以上;顺铂模型组与PNS治疗组肾组织差异表达的蛋白质18个,其中11个蛋白质在PNS治疗组中的表达下调;有6个共同的差异表达蛋白质在顺铂模型组较正常对照组的表达上调或下调,在PNS治疗组可回调到接近正常对照组水平。差异表达蛋白质m/z 10815.42被鉴定为线粒体热休克蛋白,m/z 16021.67被鉴定为血红蛋白β1亚基、血红蛋白β2亚基。结论 顺铂肾损害可伴随多种蛋白质的表达变化,这些差异表达蛋白质可能与顺铂损害肾脏以及PNS的保护作用有关。通过对其分离和鉴定,进一步了解其性质,将有助于全面、系统地探讨顺铂肾损害以及PNS保护作用的机制。     

大蒜素对顺铂肾毒性的保护作用

目的：研究大蒜素对顺铂（DDP）导致的人胚肾HEK293细胞氧化损伤的保护作用并探讨其作用机制。方法：体外培养HEK293细胞,MTT法分别测定不同浓度大蒜素和DDP对HEK293细胞生长的影响,以及大蒜素预处理对DDP诱发细胞毒性的影响。进一步将HEK293细胞分为对照组（未加入DDP和大蒜素）、DDP组（20 mg/L）、大蒜素组（2 mg/L）、大蒜素（4 mg/L）+DDP（20 mg/L）组,黄嘌呤氧化酶法检测各组细胞内超氧化物歧化酶（SOD）活力,硫代巴比妥酸法测定细胞内丙二醛（MDA）含量,二硫代二硝基苯甲酸法测定还原型谷胱甘肽（GSH）的含量。结果：与对照组相比,DDP导致细胞存活率显著降低,且呈剂量效应关系（P < 0.01）。大蒜素预处理后,对DDP（20 mg/L）所致细胞存活率的抑制作用有显著改善（P < 0.01）。与DDP组相比,大蒜素能显著抑制DDP所致细胞内MDA含量的升高以及SOD活力和GSH含量的下降（P < 0.01）。结论：大蒜素可拮抗DDP所致HEK293细胞氧化损伤,对顺铂肾毒性具有明显的保护作用。     

Cystatin C在预测顺铂所致早期肾功能损害诊断中的意义

 目的　探讨在非小细胞肺癌（NSCLC）患者中顺铂（DDP）所致肾毒性的早期诊断方法。方法　动态检测50例NSCLC患者接受DDP化疗（75 mg／m2）87个周期的血清尿素氮（BUN）、肌苷（Cr）、半胱氨酸蛋白酶抑制蛋白C（Cystatin C）以及尿β2-微球蛋白，筛选出有价值的早期诊断顺铂肾功能损害的指标。结果　化疗早期（第1天至第5天）患者Cystatin C出现异常增高的周期数明显多于其他指标（P＜0.001）；血清BUN、Cr异常增高的周期数在化疗后期（第10天或第15天）明显增多；血清BUN和Cr异常的患者，化疗早期均有Cystatin C异常增高（P＜0.05）。结论　测定血清Cystatin C对NSCLC患者接受DDP化疗肾毒性的早期诊断具有重要的临床应用价值。     

洛铂和顺铂对血管内皮细胞及肝、肾细胞损伤的体外实验研究

目的分析洛铂（LBP）和顺铂（DDP）对传代培养的人脐静脉内皮细胞株（HUVECs）、人肝细胞株（QSG-7701）和人近端肾小管上皮细胞（HK-2细胞）的抑制作用,并初步探讨其可能机制。方法采用MTT法检测LBP和DDP对HUVECs、QSG-7701和HK-2细胞抑制作用的差异,并测定HK-2细胞培养液中丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）含量,观察LBP和DDP对HK-2细胞脂质过氧化过程的影响。结果在相同浓度、相同作用时间下,DDP组对HK-2细胞抑制率明显高于LBP组（P〈0.05）,而LBP组对HUVECs细胞的抑制率明显高于DDP组（P〈0.05）;LBP组和DDP组对QSG-7701抑制率的差异无统计学意义（P〉0.05）;此外,与空白对照组比较,LBP组和DDP组均使HK-2细胞培养液中MDA含量明显升高,SOD活性明显降低（P均〈0.05）,但LBP组和DDP组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 LBP和DDP均对肝、肾细胞有较强的抑制作用,LBP的肾细胞毒性较DDP低,LBP组对正常人脐静脉内皮细胞抑制作用明显强于DDP组,提示LBP可能具有更强的抑制血管形成的能力;氧化性损伤可能是两者造成肾毒性的机制。     

灯盏花素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的实验研究

目的探讨灯盏花素（erigeron breviscapus）对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 SD大鼠45只随机分为假手术组、缺血再灌注组和灯盏花素组。分别检测各组大鼠肝脏缺血60分钟,再灌注120分钟时血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肿瘤坏死因子α（TNF－α）水平,以及肝组织中超氧化物岐化酶（SOD）活性和bcl－2蛋白表达的变化;并观察肝脏病理组织学改变。结果与假手术组比较,缺血再灌注组血清中ALT、AST、TNF－α含量显著增加,肝组织SOD活性显著降低（均P＜0．05）;与缺血再灌注组比较,灯盏花素组血清中ALT、AST、TNF－α含量显著降低（均P＜0．05）,但SOD活性及bcl－2蛋白表达增加（均P＜0．05）。灯盏花素组肝脏炎症反应较缺血再灌注组明显减轻。结论灯盏花素对大鼠肝脏缺血再灌注损伤有保护作用,其机制可能与其增强SOD活性和上调bcl－2蛋白表达有关。     

细胞色素c 介导的半胱天冬氨酸蛋白酶-3活性改变与人卵巢癌顺铂耐药的关系

目的：探讨人卵巢癌顺铂耐药细胞株A2780／DDP、COC1／DDP中抗凋亡基因bcl-XL、细胞色素c的表达和半胱天冬氨酰蛋白酶－3（caspase-3)活性对人卵巢癌顺铂耐药的影响。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）和Western blot检测人卵巢癌顺铂敏感细胞株A2780、COC1和顺铂耐药株A2780／DDP、COC1／DDP中bcl-XL的表达,以及顺铂作用后细胞色素c的含量和caspase-3活性的变化,并应用流式细胞仪测定顺铂作用后A2780、COC1、A2780／DDP、COC1／DDP细胞的凋亡率。结果：bcl-XL在A2780/DDP、COC1／DDP细胞中的表达明显高于A2780、COC1细胞;顺铂作用后,细胞色素c在A2780／DDP、COC1／DDP细胞中的表达明显减少,caspase-3活性和凋亡率也较A2780和COC1细胞明显降低（P＜0．05）。结论：人卵巢部细胞对顺铂产生耐药可能与细胞内bcl-XL过度表达、细胞色素c释放受抑制和caspase-3活性下降有关。     

大剂量顺铂为主方案治疗肺癌中的肾功能监测

目的：探讨顺铂（DDP）化疗中肾毒性的监测方法。方法：动态观察61例肺癌患者接受含大剂量DDP（80－120mg/m^2)联合化疗114个周期的血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr)，以及尿β2－微球蛋白（β2－MG）、尿α1－微球蛋白（α1－MG）、尿白蛋白（Alb)、尿转铁蛋白（TRF）和尿维生素A1结合蛋白（RBP）等指标，筛选出能早期监测顺铂肾毒性的指标。结果：（1）化疗早期（第1－5天）尿β2－MG和α1－MG异常率明显高于其它指标（P＜0．001）；（2）血清BUN和Cr异常率于化疗后期（第10天）增高明显；（3）化疗后期血清BUN和Cr异常者在化疗早期均有尿β2－MG和／或α1－MG异常。结论：在含DDP的肺癌联合化疗中，尿β2－MG和α1－MG具有肾毒性的早期诊断价值。     

黄芪多糖降低A549/DDP肺腺癌细胞顺铂耐药机制研究

目的:研究黄芪多糖对A549/DDP肺腺癌细胞顺铂耐药的影响及可能机制。方法:将A549/DDP顺铂耐药肺腺癌细胞分为CON组（未行黄芪多糖及顺铂处理）、APS组（仅用黄芪多糖处理）、DDP组（仅用顺铂处理）及A+D组（黄芪多糖联合顺铂处理）,比较四组细胞增殖、细胞周期及凋亡率和耐药基因表达的差异。结果:A+D组细胞d1-d7吸光度、S期、G2/M期和PI均显著低于CON组、APS组和DDP组细胞（均P<0.05）,G0/G1期和凋亡率均显著高于CON组、APS组和DDP组细胞（均P<0.05）;APS组和A+D组细胞MDR1和MRP基因mRNA表达无明显差异（均P>0.05）,且均显著低于CON组和DDP组（均P<0.05）。结论:黄芪多糖可显著改善A549/DDP肺腺癌细胞对顺铂耐药性,可能与黄芪多糖显著降低MDR1和MRP有关。     

儿茶素对顺铂所致人胚肾细胞氧化损伤的影响

目的：研究儿茶素对顺铂（DDP）所致人胚肾细胞（HEK293）氧化损伤的影响并探讨其作用机制。方法：体外培养HEK293细胞,分为对照组、DDP组、儿茶素组、儿茶素（5、10、20 mg/L）+DDP组。MTT法检测儿茶素和DDP分别作用后的HEK293细胞存活率,以及儿茶素预处理对DDP所致细胞存活率下降的影响。黄嘌呤氧化酶法检测细胞超氧化物歧化酶（SOD）活力,硫代巴比妥酸法测定细胞内丙二醛（MDA）含量,二硫代二硝基苯甲酸法测定还原型谷胱甘肽（GSH）的含量。结果：与对照组比较,随着浓度的增加,DDP导致HEK293细胞存活率逐渐降低,儿茶素导致细胞存活率先增加后降低。儿茶素预处理后,对DDP（20 mg/L）所致细胞存活率的抑制作用未见明显减弱（P > 0.05）,但与DDP组相比,能显著抑制DDP所致细胞内MDA含量的升高以及SOD活力和GSH含量的下降（P < 0.05）。结论：体外培养条件下,儿茶素预处理虽不能改变DDP对HEK293细胞存活率的影响,但可在一定程度上缓解DDP所致HEK293细胞的氧化损伤。     

蜕皮激素对顺铂诱导小鼠肝损伤的保护作用及机制研究

目的:探讨蜕皮激素对顺铂导致小鼠肝损伤的保护作用及机制。方法:采用昆明小鼠和AML12细胞构建顺铂肝损伤体内及体外模型,应用蜕皮激素对顺铂组进行干预,通过HE染色观察肝脏组织病理形态,ELISA和荧光染色观测细胞内ROS的产生及细胞凋亡,RT-qPCR检测组织及细胞内氧化应激、炎症和凋亡相关生物标志物的表达。转录组测序测定其作用靶点,RT-qPCR和Western blot验证靶基因mRNA和蛋白表达。结果:与空白组相比,顺铂组小鼠肝细胞排列疏松,部分细胞轻度肿胀,凋亡细胞数量、血清内ALT、AST、肝细胞内ROS、MDA含量明显增多（P<0.01）,GSH-PX、SOD含量明显降低（P<0.01）,提示顺铂对肝功能造成明显损伤;与顺铂组相比,蜕皮激素组小鼠肝细胞损伤程度明显减轻,上述各项指标均有不同程度改善,表明其对肝功能具有保护作用。RT-qPCR结果显示,蜕皮激素组NF-κB、TNF-α、IL-1β、Caspase-3、Caspase-9、Hmox1、PI3K、Nqo1 mRNA相对表达量均明显降低,Nrf2 mRNA相对表达量明显升高（P<0.01）。转录组测...     

红景天提取物对顺铂致肾细胞毒性的保护作用

目的：研究红景天提取物（RE）对顺铂（DDP）诱导人胚肾细胞（HEK293）氧化损伤的保护作用。方法：体外培养HEK293细胞，将细胞分为对照组、不同浓度（0、0.5、1、2、4、8、16、32、64、128 mg/L）DDP组、不同浓度（0、0.25、0.5、1、2、4、8、16、32、64 mg/L）RE组和（2~16 mg/L）RE+20 mg/L DDP组。CCK-8法测定RE和DDP分别对HEK293细胞生长的影响，以及RE对DDP诱导细胞毒性的保护作用。二硫代二硝基苯甲酸法测定还原型谷胱甘肽（GSH）含量，硫代巴比妥酸法测定丙二醛（MDA）含量，黄嘌呤氧化酶法检测细胞超氧化物歧化酶（SOD）的活力。结果：与对照组比较，1~128 mg/L DDP导致细胞存活率显著降低（P < 0.01），且存在剂量-效应关系（r=0.85，P=0.002）；RE浓度在0.5~16 mg/L范围内细胞存活率逐渐升高（P < 0.01），但当RE浓度为64 mg/L时，可显著抑制HEK293细胞的生长（P < 0.01）；6~16 mg/L RE预处理后，对20 mg/L DDP所致细胞存活率的抑制有显著保护作用（与DDP组比较，P < 0.01）。与DDP组比较，RE能显著抑制DDP所致细胞内MDA含量的升高以及SOD活力和GSH含量的下降（P均 < 0.01）。结论：RE能提高HEK293细胞活力，并能拮抗DDP所致细胞氧化损伤，对DDP致肾细胞毒性具有明显的保护作用。     

Effects of the diuretics mannitol or acetazolamide on nephrotoxicity and physiological disposition of cisplatin in rats

Summary The anticancer drug cisplatin has been known to produce severe renal lesions characterized by high levels of blood urea nitrogen (BUN), toxic nephrosis, and platinum (Pt) retention in the kidney. The effect of IV pretreatment with acetazolamide (ACZ) 30 min before or mannitol (MAN) immediately prior to IP administration of 5 mg/kg cisplatin on Pt excretion, tissue distribution, and nephrotoxicity was investigated in male F344 rats.ACZ pretreatment reduced the cisplatin-induced nephrotoxicity, as indicated by only a slight elevation of BUN, a milder histopathologic lesion, and a more rapid recovery of renal function and structure. Although MAN-pretreated animals exhibited similar changes in BUN to ACZ-pretreated animals, the renal damage was similar to that seen in aninals treated with cisplatin alone. A reduction of kidney Pt content was observed with both diuretics, although there was significantly less retention after ACZ pretreatment.The diuretic ACZ was more effective than MAN in reducing the renal lesions induced by cisplatin and it might be clinically useful in preventing cisplatin nephrotoxicity.     

乏脂肪型肾错构瘤患者的CT灌注参数与肾功能生化检测指标的相关性

目的:探讨乏脂肪型肾错构瘤患者的CT灌注参数与肾功能生化检测指标的相关性。方法:选择在本院诊治的乏脂肪型肾错构瘤患者34例作为观察组,同期选择在我院进行体检的健康人34例作为对照组,两组都进行肾功能相关生化检测指标(BUN、Scr、TG、TC、HDL-C、LDL-C)的检测与CT灌注参数(BV、BF、PS、MTT)检测,同时进行相关性分析。结果:观察组的血清BUN、Scr、TG、TC和HDL-C值明显高于对照组,而LDL-C值明显低于对照组,对比差异都有统计学意义(P＜0.05)。观察组肾皮质的BV、BF、PS值明显低于对照组,而MTT值明显高于对照组,对比差异都有统计学意义(P＜0.05)。乏脂肪型肾错构瘤发生的主要危险因素包括BV、PS、BUN与TC等(P＜0.05);Pearson相关系数分析显示乏脂肪型肾错构瘤患者的BV、BF、PS与BUN、TC存在明显的负相关性(P＜0.05),而MTT与BUN、TC存在明显的正相关性(P＜0.05)。结论:乏脂肪型肾错构瘤患者存在明显的肾功能与血脂等生化指标异常,同时CT灌注参数也处于异常情况,可参与到乏脂肪型肾错构瘤的形成,存在一定的相关性,在临床上有很好的应用价值。     

超氧化物歧化酶,维生素A对顺铂所致的肾及骨髓损伤的保护作用

一次极量注射顺铂后，检测超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、维生素Ａ（ＶＡ）保护兔及对照兔血尿素氮（ＢＵＮ）、肌酐（Ｃｒ）、２４小时尿蛋白（ＵＰ）、耳血粒细胞计数。结果发现ＳＯＤ保护组及ＶＡ保护组兔ＢＵＮ、Ｃｒ、ＵＰ检测值明显低于对照组（Ｐ＜０．０１）．而粒细胞计数高于对照组（Ｐ＜０．０５）．说明ＳＯＤ及ＶＡ能保护肾及骨髓，免受顺铂所致的损伤。实验结果为临床大剂量应用氧自由基抗癌药，减少毒性，提高疗效，提供了新的方法。     

Amelioration of cisplatin induced nephrotoxicity in mice by ethyl acetate extract of a polypore fungus,Phellinus rimosus

Pretreatment of ethyl acetate extract of Phellinus rimosus (Berk) Pilat protected cisplatin induced nephrotoxicity in mice. Single dose of the extract (25 and 50 mg/kg body weight) decreased cisplatin induced serum creatinine and urea levels. The cisplatin depleted renal antioxidant defence system, such as activity of superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPX) and concentration of reduced glutathione (GSH), were restored by the treatment of the extract. The enhanced renal antioxidant defence system prevented cisplatin induced tissue lipid peroxidation. The experimental results suggest that ethyl acetate extract of P. rimosus protected cisplatin induced nephrotoxicity, possibly by enhancing renal antioxidant status. The extract did not interfere with the antitumor efficacy of cisplatin.     

枸杞多糖对酒精性肝损伤小鼠肾脏的保护作用

目的:研究枸杞多糖对酒精性肝损伤小鼠肾脏的保护作用。方法:将60只小鼠随机分为正常对照组,模型组和枸杞多糖低、中、高剂量组(分别为75、150、300 mg/kg)。枸杞多糖组动物连续灌胃受试物16 d,第10天开始,给予枸杞多糖组和模型组50%酒精连续灌胃7 d,建立酒精性肝损伤模型。最后一次灌胃16 h后处死小鼠,取血清和肾脏。用自动生化分析仪检测血清中葡萄糖(GLU)、尿素氮(BUN)和肌酐(CREA)浓度,用生化试剂盒测定肾脏中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)浓度,用ELISA方法测定肾脏中肿瘤杀伤因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)浓度。结果:与对照组相比,模型组小鼠体质量下降,肾脏指数均升高,血清GLU、BUN、CREA浓度升高,肾脏SOD活性、GSH浓度下降,而MDA上升,肾脏炎性因子TNF-α和IL-1β升高(P均<0.01),表明模型组小鼠在大量酒精刺激后,机体健康受到影响,肾脏受到损伤。与模型组相比,枸杞多糖中剂量组小鼠体质量增加,各剂量组肾脏指数均降低,中、高剂量组小鼠血清GLU浓度(7.63、7.82 mmol/L)降低,高剂量组BUN浓度和CREA浓度降低,而SOD活力升高,各剂量组GSH浓度升高,MDA浓度下降,各剂量组TNF-α浓度降低(P<0.05),高剂量组IL-β浓度与模型组相比降低(P均<0.05)。结论:枸杞多糖对于乙醇诱导的小鼠酒精性肾脏损伤具有一定的保护作用。