噬菌体疗法:回顾与展望

目前,细菌感染的治疗主要使用抗生素,但随着抗生素耐药性问题越发严重,迫切需要新的治疗方法.因此,噬菌体疗法将是解决细菌耐药性的一种潜在选择,并可考虑噬菌体与抗生素联合治疗.遗憾的是,目前缺乏设计良好的噬菌体疗法临床对照试验,希望未来有更多的研究着眼于解决噬菌体疗法抗菌谱窄、安全性未知和细菌抵抗等问题.部分难治性疾病如乳...     

吃掉细菌

最新研究表明，噬菌体基因组学研究方法将成为细菌耐药性研究的又一种利器。     

控制细菌耐药性的措施

抗生素耐药性问题已成为全世界研究的热点，我国是世界上滥用抗生素最为严重的国家之一，若不进行有效的遏止，将会回到无抗生素的时代——很小的疾病将会无药可医，危及生命。所以在医院、社区有效控制滥用抗生素，减少细菌耐药性的产生是当前的重要任务。     

细菌耐药机制与控制对策

在抗生素没有发明以前，感染性疾病一直是人类的头号杀手。医院外科手术感染的病死率高达50％，产妇感染的病死率就更高。随着1928年青霉素被发现，1932年合成了磺胺药，先后用于临床，开创了人类战胜细菌的新局面，许多全身感染性疾病得以控制，人类的平均寿命也因此延长。但是，人类与细菌作斗争的半个多世纪里，日益严重的细菌耐药性已成为一个非常棘手的问题。细菌已经存在了几百万年，抗生素是能抑制细菌生长或杀灭细菌的一类化学物质，绝大多数由微生物合成，其中2／3经链霉菌产生。细菌产生的抗生素虽然可以杀死或抑制其它的细菌，但也可能会杀死生产菌自己，     

噬菌体疗法在耐药性细菌感染中应用的研究进展

细菌耐药性已成为全球性的公共卫生问题,特别是“超级细菌”成员的不断增加使针对细菌感染的抗生素疗法面临前所未有的挑战。最近,噬菌体疗法重新受到人们的关注,并取得一些重要研究进展。本文作者就早期噬菌体的研究情况、近年来噬菌体疗法在动物实验中的应用、临床试验的最新实例和噬菌体疗法的优势及局限进行综述。     

噬菌体治疗的研究概况

近几十年来,由于抗生素的滥用导致的致病菌耐药性问题,已经对人类健康造成极大威胁。细菌耐药性加剧使人类面临着严峻的现实——进入"后抗生素时代"。针对耐药菌日益增多的情况,抗生素已无法达到理想的治疗效果,而噬菌体制剂作为一种新的治疗手段也倍受人们关注。研究证明,噬菌体制剂具有许多抗生素无法比拟的优势,而且如对其进行适当的处理,确实可在治疗中发挥其强大的抗菌作用。     

细菌耐药性与新抗菌药物的研究

伴随着抗生素的广泛使用,耐药及多药耐药细菌已经严重威胁了人类的健康.针对细菌产生耐药的各种机制,筛选和研制新型抗耐药细菌药物是战胜细菌耐药性的重要途径.同时,应重视和加强新药研制相关基础研究和微生物药物的筛选,加速开发创新药物,应对不断出现的新病原体和新耐药细菌带来的挑战.     

噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库的构建

目的构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,研究IgA结合分子结构与功能的关系。方法基因合成IgA亲和体ZA1、ZA2片段。片段两端引入Kpn I酶切位点,3′端引入随机连接肽序列,Kpn I酶切,随机连接,克隆于噬菌粒展示载体pCANTAB5S的Kpn I克隆位点上,转化大肠杆菌TGI,辅助噬菌体M13K07拯救,构建噬菌体展示随机组合文库。结果基因合成IgA亲和体;构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,容量为3·4×107,滴度为1·6×1012TU/L;文库中含79%以上的阳性克隆;序列分析显示组合文库由ZA1、ZA2随机组合而成,连接方式符合随机连接的特点,各亲和体之间连接肽序列也呈随机分布。结论合成IgA亲和体,构建噬菌体展示IgA亲和体随机组合文库,该文库库容量、多样性和随机性可满足体外分子进化研究的要求。     

细菌生物膜的相关性研究

随着感染性疾病的不断增多和反复发作,关于细菌耐药性的研究已经成为人类关注和研究的重点。细菌生物膜在细菌耐药过程中发挥了重要的作用,且生物膜的耐药现象呈不断增高趋势,使得我们不断地研究生物膜的耐药机制及其防治措施,改进与生物膜相关疾病的治疗方法。本文将对细菌生物膜的形成、耐药机制及生物膜相关疾病的治疗现状做一综述。     

噬菌体疗法的研究现状

抗生素耐药问题不断加重使得感染性疾病的临床治疗面临严峻挑战,特别是多重耐药菌感染时可能会出现无药可用的状况。噬菌体作为微生物病毒,能够特异性裂解宿主菌,且具有与抗生素完全不同的作用机制,使其在应对抗生素耐药问题中表现出独特的优势。本文通过查阅国内外文献,对噬菌体疗法的研究状况进行综述,通过一些研究案例介绍了常规方法以及新颖的策略,包括使用鸡尾酒疗法、噬菌体-抗生素联合使用、噬菌体相关的酶以及工程噬菌体和重组裂解酶等生物技术,目前已有许多成功治疗的案例并开发了多款噬菌体产品。文中也探讨了噬菌体疗法面临的问题,尽管在治疗的安全性、规范性以及制剂的生产、监管方面还需要进一步研究,但噬菌体在耐药菌感染的治疗和防控方面仍具有巨大的潜力。     

南宁市生活污水中大肠菌群对抗生素的耐药性评价

目的检测生活污水中大肠菌群对当前常用抗生素是否有耐药性。方法采集南宁市琅东污水处理厂初沉池中的水样．用多管发酵法分离其中大肠菌群，采用药敏试纸扩散法，检测了分离出来的大肠菌群对七种常用的抗生素包括青霉素、红霉素、庆大霉素、阿米卡星、先锋霉素V、先锋噻肟和氨苄西林的耐药性。结果大肠菌群对青霉素和红霉素表现出耐药性（S），对氨苄西林的耐药性处于中介（I），而对阿米卡星、庆大霉素、先锋霉素V、先锋噻肟四种抗生素的耐药性为敏感（R）。耐药性大小顺序依次为：青霉素〉红霉素〉氨苄西林〉阿米卡星〉庆大霉素〉先锋霉素V〉先锋噻肟。结论在现有的停留时间内，生活污水中大肠菌群对革兰阴性菌的抗生素都没有产生耐药性。     

1998～2000年954株烧伤感染菌耐药性调查分析

目的 调查烧伤创面分离菌对抗菌药物的耐药状况。方法 收集临床分离的致病菌，采用纸片扩散法进行药敏试验。结果 在检出的954株细菌中，金黄色葡萄球菌居首位，检出率为27．5％；其次为铜绿假单胞菌，检出率为19．5％；以后依次为表皮葡萄球菌、粪肠球菌、肺炎克雷白杆菌和阴沟肠杆菌，检出率分别为10．4％、6．8％、4．1％和2．6％：万古霉素对金黄色葡萄球菌100％敏感；铜绿假单胞菌对第三代头脑菌素和亚胺培南耐药性显著增加；除铜绿假单胞菌外，其它细菌对阿米卡星的耐药率都有不同程度的降低。结论 细菌耐药性日益严重，随时进行细菌耐药性监测、合理应用抗生素是控制和延缓细菌耐药性的关键。     

241株非发酵菌的临床分析

目的 了解我院非发酵菌感染的菌群分布及药敏情况,为临床提供诊断和治疗的依据.方法 对本院2004年7月～2005年7月送检的241株非发酵菌,采用VITEK-Ⅱ全自动细菌鉴定仪进行细菌鉴定及药敏分析.结果 脑外科、呼吸科、骨科分离率最高,为24.9%、23.2%及10.8%.标本检出率较高的为痰液、分泌物、尿液.药敏结果显示:241株非发酵菌对13种抗生素耐药率较低的为泰能(17.8%)、阿米卡星(27.0%)、哌拉西林(33.2%)、头孢吡肟(30.7%)、头孢他定(37.6%)等.结论 院内非发酵菌感染日趋严重,且呈现多剂耐药.临床应依据药敏结果优化选择抗生素,提高感染治愈率.     

2008年山东大学附属省立医院细菌耐药性监测

目的监测山东大学附属省立医院2008年临床分离株的耐药谱。方法收集患者首次非重复分离株1994株,其中革兰阴性菌1372株（68．8％）,革兰阳性菌622（31．2％）。以CLSI推荐的纸片扩散法测定其抗菌药物敏感性,用WHO—NET5．3软件分析结果。结果除绿脓杆菌外,所有革兰阴性杆菌对碳青霉烯类药物敏感率均在87％以上,其次为舒普深（头孢哌酮／舒巴坦;68％以上）;所有葡萄球菌对万古霉素100％敏感,MRSA和MRCNS的检出率分别为48．9％和81．8％,MRSA对氯霉素和MRCNS对利福平的敏感率为84．6％、90．1％,对其他药物均较耐药;屎肠球菌和粪肠球菌对万古霉素和利奈唑胺最敏感（100％,100％;98．3％,100％）。结论肠杆菌科细菌对碳青霉烯类仍最为敏感,但不发酵糖菌对其耐药率升高。葡萄球菌属中均未发现耐万古霉素菌株。     

医院内污水中噬菌体的分离及其生物学特性观察

目的：通过噬菌体特性观察，为了解噬菌体吸附特异性及溶苗机理的分子生物学机制奠定物质基础．方法：利用标准苗株从污水中分离特异性噬菌斑，纯化增殖后得到其相应噬苗体．经过高滴度噬菌体与其非特异性宿主菌的混合培养，筛选出宿主谱特异性发生突变的具有宽噬性的噬菌体．结果：从污水中分离出12种特异性噬菌体，发现了可裂解同一菌属的不同菌种的宽噬噬菌体，改变了噬菌体专-宿主谱这一特性．结论：针对同一菌属中不同菌种的宽噬噬菌体具有较高的稳定性及裂菌滴度，为探索噬菌体寄生的基因控制及特异吸附的分子生物学机制奠定了基础，将人工改造噬菌体，使之成为新型的杀菌生物制剂成为可能。     

常见病原菌对环丙沙星的耐药现状

目的调查医院常见病原菌对环丙沙星(ciprofloxacin, CIP)的耐药现状,为遏制细菌对其耐药性提供帮助。方法分析1997~2000年住院患者标本中分离出的3 800株病原菌对CIP药敏试验结果。结果4年间金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和肠球菌属几种主要革兰阳性球菌,对环丙沙星的耐药率较高,且有逐渐上升的趋势,耐药率分别由1997年的50%、25.6%和40.3%上升到2000年的62.2%、53.4%和63.6%。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌肠杆菌属对CIP的耐药率均在40%以上,铜绿假单胞菌和不动杆菌对其耐药率2000年分别达到31.1%和34.0%。2000年分离到的189株致医院感染菌中金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、肠球菌对CIP的耐药率均高达70%以上。结论常见病原菌对CIP的耐药率较高,且4年间有逐渐上升之势,要严格限制此药的不合理应用。     

烧伤病房12年细菌生态学调查及耐药性分析

目的：调查笔者单位烧伤病房12年来细菌生态学变化及耐药性的变迁。方法：从369例患者的血培养及创面培养中分离到细菌427株,用纸片琼脂扩散法及稀释法进行药敏试验。结果：①在广泛应用三代头孢菌素后,金黄色葡萄球菌及肠杆菌检出率明显下降而铜绿色假单胞菌略有上升（后者无统计学意义）,细菌菌种也更趋多样化;②金黄色葡萄球菌、铜绿色假单胞菌对头孢他啶的耐药率明显升高而对临床使用较少的亚胺培南耐药率则很低,目前尚未检出对万古霉素耐药金黄色葡萄球菌菌株。结论：抗生素对临床细菌生态学变化有直接影响,随着高效广谱抗生素的应用,一方面是常见致病菌的耐药率增加,另一方面是一以往较少见的条件致病菌感染率的增加。因此应避免滥用抗生素,调整用药方式,对亚胺培南应尽量减少非必须的使用,以保持较高敏感率并作为抵御严重感染的最后防线。