ELISA法检测复方黄芪颗粒体外抗人巨细胞病毒作用

人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染十分普遍。在妇产科,妊娠妇女孕早期原发HCMV感染可造成流产、早产、死胎、畸形、宫内生长迟缓、智力低下及听力损害等。目前。尚无对妊娠期HCMV活动性感染安全有效的治疗方法。本研究采用中药复方黄芪颗粒在细胞培养中干预HCMV感染细胞,观察了其对细胞病变的抑制情况,并探讨了其对HCMV的抑制作用。报告如下。     

抗人巨细胞病毒药物作用机制研究策略

人巨细胞病毒是宫内感染导致胎儿畸形、死胎的病原体，也是免疫缺陷患者感染致死及器官移植术失败的重要原因。目前治疗巨细胞病毒感染仍缺乏有效药物，虽已见从植物或微生物代谢产物中提取抗人巨细胞病毒药物的资料报道，但其抗病毒机制及其研究方法尚待完善。本文就抗人巨细胞病毒药物作用机制的研究策略作简略综述。     

复方黄芪汤干预预防巨细胞病毒感染的实验研究

目的:探讨复方黄芪汤孕前干预预防小鼠的豚鼠巨细胞病毒(GPCMV)感染的效果。方法:随机选择小鼠80只,接种病毒,7d以后检测小鼠血中的GPCMV,选择阳性小鼠60只随机分成两组:黄芪组和空白组,每组30只。黄芪组给予黄芪灌胃,空白组给予等量生理盐水灌胃,14d后比较两组血中GPCMV转阴率。然后将第一阶段实验的两组小鼠血中GPCMV转为阴性小鼠作为观察组,GPCMV仍为阳性的作为对照组进行第二阶段实验,两组小鼠受孕后分别观察孕鼠一般情况及胎仔生长发育情况。结果:黄芪组和空白组血液转阴率分别为80%和46.67%,差异有显著性(P<0.05);观察组和对照组孕鼠的活胎率分别为97%和65.6%(P<0.01)。结论:复方黄芪汤可孕前干预预防豚鼠巨细胞病毒,降低出生缺陷。     

中草药抗巨细胞病毒作用的研究进展

巨细胞病毒是一种可在多种组织潜伏感染的疱疹病毒,常引起宫内和产后感染,导致胎儿先天畸形或死亡。此外,免疫力低下者感染巨细胞病毒会引起多器官损害。目前国内外对中草药抗巨细胞病毒作用的研究主要集中在复方制剂、中草药粗提物以及单体成分的作用和作用机制的研究上,取得了一些研究成果,本文就此综述了近年的相关研究进展。     

四妙解毒汤体外抵制人巨细胞病毒作用研究

人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染播及广泛，它可引起肺炎、肝炎、胃肠炎、新生儿疾病等，近年来对ＨＣＭＶ在动脉硬化性疾病中的发病意义逐渐受到重视。Ｍｅｌｎｉｃｋ等以电镜和免疫荧光技术在冠心病患者动脉粥样硬化斑块中检出了 ＨＣＭＶ ＤＮＡ，阳性率高达９０％以上，另外器官移植患者感染ＨＣＭＶ后可在短期内发生动脉粥样硬化，从而提出动脉粥样硬化的病毒感染学说［１］。目前尚无特效药物能够预防和控制其感染［２］。笔者在临床经验基础上，应用四妙解毒汤治疗动脉硬化性闭塞症取得满意效果，并通过体外实验证实其确有明显抑制ＨＣ…     

金丝桃素体外抗巨细胞病毒效应的实验研究

目的:探讨金丝桃素单体溶液体外抗人巨细胞病毒(HCMV AD169)的效应。方法:采用细胞病变效应(CPE)抑制法观察金丝桃素单体溶液对HCMV AD169毒株的抑制作用,使用MTT比色法检测细胞的损伤程度,并利用吸光度(A)值评价金丝桃素单体溶液的抗HCMV的效应。结果:金丝桃素单体溶液半数中毒浓度(TC50)为195.96 mg/L,半数抑制浓度(IC50)为19.15 mg/L,治疗指数(TI)为10.23。金丝桃素单体溶液具有抗HCMV的作用,且随药物浓度的增高其作用而增强,在6.25-100 mg/L浓度时对巨细胞病毒均有明显抑制作用。结论:体外实验证实,金丝桃素单体是理想的抗HCMV中药。     

黄芩素抗人巨细胞病毒的体外实验研究

目的体外研究黄芩素抗人巨细胞病毒（human cytomegalovirus,HCMV）的效果和安全性。方法细胞病变法和噻唑蓝（MTT）法检测各浓度黄芩素对人胚肺成纤维细胞（HEL）存活率及HCMV抑制率的影响,并与更昔洛韦进行比较。数据输入SigmaPlot软件,经Hill方程曲线拟合计算药物的半数毒性浓度（TC50）和半数有效浓度（EC50）。结果更昔洛韦和黄芩素的TC50分别为353.1＂g/ml和151.4＂g/ml,EC50分别为62.98＂g/ml和14.47＂g/ml,治疗指数分别为6和10。结论黄芩素具有体外抗HCMV作用,值得进一步研究。     

重组人巨细胞病毒pp65蛋白与金叶败毒颗粒联合抗人巨细胞病毒效应

目的 比较重组人巨细胞病毒(HCMV)pp65蛋白与中药金叶败毒颗粒的抗HCMV作用并探讨二者间的关系.方法 用重组HCMV pp65蛋白刺激培养的人外周血单个核细胞,制备HCMV抗原特异性细胞毒T细胞,即pp65-CTL.分别将pp65-CTL、金叶败毒颗粒、pp65-CTL 金叶败毒颗粒、更昔洛韦作用于HCMV感染的人胚肺成纤维细胞(HEL),比较各组对HEL细胞病变的抑制作用,同时用RT-PCR法半定量检测作用前和作用不同时间点HCMV mRNA表达水平的变化.结果 pp65-CTL组在HEL细胞感染后72 h才开始出现少许细胞病变,有显著抗HCMV作用;pp65-CTL 金叶败毒颗粒组作用不同时间点对HCMV mRNA表达及HCMV所致细胞病变的抑制作用明显强于单一用药.结论 重组HCMV pp65蛋白刺激培养的pp65-CTL对HCMV有明显的抑制作用,与中药金叶败毒颗粒有显著的协同作用,可共同应用于HCMV活动性感染的治疗.     

中药金叶败毒制剂抗人巨细胞病毒感染作用机理的实验研究

目的探讨中药金叶败毒制剂拮抗HCMV感染的机理。方法采用体外实验的方法建立HCMV感染细胞膜型,给予金叶败毒制剂干预后,FQ-PCR法检测细胞内、维持液HCMV DNA拷贝数,放射免疫法测定TNF-α、IL-6蛋白含量,同时观察致细胞病变作用(CPE)的产生及传播,设立病毒对照组和更昔洛韦(GCV)药物对照组。结果分别于感染后24h、48h,实验组细胞内及维持液HCMV DNA拷贝数(5.35±0.581gGE/106HEL,2.78±0.32lgGE/106HEL)明显低于病毒组(6.12±0.65lgGE/106HEL,3.31±0.381gGE/106 HEL,P<0.05),持续至感染晚期,与药物对照组比较,感染晚期实验组细胞内病毒负荷量(7.97±0.81lgGE/106HEL)高于药物对照组(7.05±0.71lgGE/106HEL,P<0.05),但两者维持液内病毒量无明显差异(P>0.05)。分别于感染后12h、24h,实验组维持液TNF-α、IL-6蛋白含量(0.63±0.06pg/ml,38.26±4.19pg/ml)明显高于病毒组(0.55±0.04pg/ml,31.12±4.53pg/ml,P<0.05)和药物对照组(0.56±0.05pg/ml,32.40±4.97pg/ml,P<0.05),在感染后24～36h达高峰(P<0.01)。实验组和药物对照组CPE出现(感染后96h)均晚于病毒组(感染后48h),且发展缓慢,感染后168h仅为++,而病毒组则达到++++。结论金叶败毒制剂可有效抑制感染细胞内HCMV DNA复制及病毒自受染细胞内释放,并能促进     

人巨细胞病毒蚀斑实验条件的优化及在抗病毒物质活性测定中的应用

目的探讨人巨细胞病毒（HCMV）的蚀斑形成实验最适工作条件,建立稳定易行的HCMV蚀斑技术,用于HC-MV的定量测定及体外抗病毒物质活性测定的研究。方法HCMV病毒悬液接种至人胚成纤维细胞（HF）单层,37℃吸附1h,分别用含0.463‰、0.925‰NaHCO3及0.5%、1%DMSO琼脂糖覆盖,1周后加盖第2层;2周后用0.5%结晶紫染色5min,计数、计算pfu/ml,采用PCR法对蚀斑培养物进行鉴定;分别用患者血清及HCMVAD169株兔免疫血清进行蚀斑抑制实验,计算中和抗体滴度;蚀斑减少实验测定不同浓度更昔洛韦（GCV）的抗HCMV活性。结果HCMV对照孔在5d出斑,蚀斑为圆形、实心、不透明状;两种浓度NaHCO3对蚀斑形成数量、大小有明显影响且病毒滴度差异有显著性（P〈0.05）。在含0.463‰NaHCO3培养孔内,出斑时间提前至3d;但不同浓度的DMSO对蚀斑数量、大小以及病毒滴度的影响差异无显著性（P〉0.05）。HCMV患者血清及HCMVAD169株兔免疫血清均可以抑制蚀斑形成。利用蚀斑减少实验测定GCV抗HCMV活性,可在7d内获得结果。结论HCMV蚀斑形成实验条件经优化后,可以方便稳定地对HCMV进行定量测定以及抗病毒活性物质的筛选和评价。     

双扑伪麻泡腾颗粒剂的药效学实验研究

目的：对双扑伪麻泡腾颗粒剂的药效学进行研究。方法：通过家兔致热试验、小白鼠醋酸扭体法、小白鼠热板法、小鼠耳壳二甲苯致肿试验、毛细血管通透性试验及豚鼠鼻粘膜致敏试验等方法对双扑伪麻泡腾颗粒剂的药效学进行评价。结论：双扑伪麻泡腾颗粒剂是一抗感冒疗效高、副作用小的新剂型。     

人巨细胞病毒致造血系统获得性染色体改变的临床研究

目的 通过应用染色体显带技术观察人巨细胞病毒(HCMV)感染致造血系统获得性染色体改变,为HCMV感染导致患儿造血功能紊乱的发病机制提供可能的遗传学基础,并进一步为抗HCMV感染的治疗和疗效判断提供遗传学依据.方法 临床筛选造血系统2系或3系减少患儿52例,ELISA检测患儿血HCMV-IgG,HCMV-IgM;尿短时培养快速法检测HCMV即刻早期抗原(IEA);以及染色体G显带技术检测骨髓染色体畸变.结果 ①血清HCMV-IgM阳性52例,21例同时检出抗HCMV-IgG阳性.其中的38例患儿同期进行了尿HCMV快速培养检测HCMV IEA,37例尿HCMV快速培养为阳性,尿HCMV快速培养阳性率为97.4%,37例尿HCMV快速培养阳性患儿其IgM检测均为阳性.②37例活动性HCMV感染患儿中,外周血细胞形态学未见病态造血现象.骨髓细胞学检查中,红细胞系:37例存在红系造血增生,30例有较典型红系病态造血的特征性改变;粒系细胞有18例检出异常;巨核细胞系仅4例发现较典型改变.③骨髓培养及染色体检查,结果 11例染色体核型异常,占29.7%,染色体核型异常呈非随机性改变.2例患儿经治疗后分别于3个月和6个月后复查骨髓染色体核型转为正常.结论 HCMV感染可造成症状性造血功能紊乱并可能引起骨髓染色体畸变,是导致患儿造血功能紊乱可能的遗传学基础.     

肝素点眼预防后囊混浊的实验与临床研究

目的 :探讨肝素点眼对白内障囊外摘除术后后囊混浊的作用。方法 :在 2 4只兔建立白内障动物模型 ,随机分为肝素点眼组和对照组 ,行双眼白内障囊外摘除术。 10 0例 ( 10 0眼 )老年性白内障 ,随机分为肝素点眼组和对照组 ,行超声乳化摘除联合人工晶体植入 ,术后应用裂隙灯显微镜及检眼镜观察角膜、前房及后囊混浊情况 ,并对兔后囊膜行组织学检查。结果 :肝素点眼组与对照组前房反应及后囊混浊眼数有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 :肝素可减少早期前房反应 ,抑制后囊混浊的形成 ,为一种简便、安全而有效的预防后囊混浊的方法     

重组人酸性成纤维细胞生长因子复方喷剂治疗宫颈糜烂临床研究

目的观察重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)-蛇床子复方喷剂对宫颈糜烂的治疗效果。方法将复方喷剂每日早晚各1次,喷于阴道深部,连用10d。计算治愈率、显效率、有效率及创面痊愈时间。比较单用复方喷剂与复方喷剂宫颈波姆光照射联用的疗效和创面痊愈时间。结果单用复方喷剂治疗宫颈糜烂的总有效率为94.5%,其中治愈率38.2%,显效率40.0%,有效率16.4%,同对照药治糜灵栓的疗效相似(P>0.05),但痊愈时间缩短(P<0.05)。复方喷剂与宫颈波姆光照射联用,可使后者的疗效提高,痊愈时间缩短(P<0.05)。结论复方喷剂可促进宫颈糜烂的愈合。     

神安冲剂治疗神经症的临床研究

研究神安冲剂对神经症的临床疗效，方法将３００例患者随机分成组；治疗组用神安冲剂，对照组用刺五加片，结果治疗组总有效率、治愈率分别为９４％、６８．６７％，均高于对照组８０％、３３．３３％有明显差异。结论神安冲剂是治疗神经症的安全，有效的药物。     

人巨细胞病毒被膜磷蛋白pp65的检测及其在肾移植受者CMV病诊断中的临床应用

目的 建立一种简便诊断肾移植受者人巨细胞病毒(HCMV)活动性感染的方法.方法 运用催化信号扩增法检测外周血白细胞中的人巨细胞病毒被膜磷蛋白pp65,并与抗HCMV-IgM检测法作比较.结果 检测100例肾移植受者中,HCMVpp65抗原阳性47例,IgM抗体检测阳性41例,pp65抗原阳性细胞数为(71±45)个,2×105个WBC,而有症状的CMV病29例,抗原阳性细胞指数为(83±46)个,2×105个WBC.对照组50名健康人,pp65抗原检测全为阴性.pp65的敏感性、特异性、阳性预测值与阴性预测值分别是100%、74.6%、61.7%和100%.结论 该法敏感、简便,可作为肾移植术后HCMV病的早期诊断并可指导抗病毒治疗.     

Clinical and experimental study on separately decocted and mingly decocted jianweishu granule

Objective

To observe the difference in therapeutic effect of Chinese herbal granule decocted separately and mingly.

Methods

One hundred patients of functional dyspepsia of Spleen deficiency and Liver stagnancy type were treated with Jianweishu Granule (JWSG, ,a self-formulated recipe by the authors). Half of the patients received JWSG decocted separately, half of them received that decocted mingly. The therapeutic effects between the two groups were compared. Experimental observation on the effects of differently decocted remedies in rats was also conducted.

Results

The therapeutic effects obtained in the two groups were similar, with respective cure rate of 72 % and 70 % and the total effective rate 96 % in both group. There was insig1nificant difference between the two groups (P <0.05). Experimental study all showed no difference between the differently decocted remedies in inhibiting gastric acid, pepsin activity, gastric function regulation, small intestine movement improvement and pain alleviation in rats.

Conclusion

The therapeutic effects of JWSG decocted separately or mingly are the same. This fact provides a scientific basis for clinical use of granule form of single Chinese herbs.     

复方唇香草颗粒干预As斑块炎症反应信号通路的实验研究

目的：探讨以维吾尔药为主的复方唇香草颗粒对 Apo-E基因敲除小鼠动脉粥样硬化（As）斑块 IκK-β/IκB-α/NF-κB 信号通路的影响及其稳定 As斑块作用的可能机制。方法选择70只6～8周龄 Apo-E基因敲除小鼠,予高脂饮食喂养12 w后,随机处死10只,取主动脉根部,HE染色普通光镜下观察并确定As形成,其余小鼠随机分为模型组（生理盐水）、中药对照组（血脂康）、西药对照组（辛伐他汀）及复方唇香草颗粒高、中、低剂量组,每组10只,给药12 w后处死,采用原位杂交法检测小鼠斑块内 IκK-β、IκB-α和 NF-κB mRNA表达。结果与模型组比较,中药对照组、西药对照组及复方唇香草颗粒高、中、低剂量组 IκK-β和 NF-κB mRNA的表达降低（P ＜0．01）,IκB-αmRNA的表达增高（P ＜0．05）;而西药对照组与复方唇香草颗粒高、中剂量组比较,差异均无统计学意义（P ＞0．05）。结论复方唇香草颗粒具有抗 As的作用,其机制可能与调控 IκK-β/IκB-α/NF-κB 信号通路的活动而抑制炎症反应有关。