用过碘酸钠激活人外周单核细胞诱导抑制性细胞

本文报导用NaIO_4处理(2.0mM,0℃30分钟)的健康人单核细胞诱导产生抑制细胞。在有用NaIO_4处理过的细胞存在时,新鲜同种的和自身的细胞对PHA、ConA、PWM、各种抗原和混合淋巴细胞培养等有丝分裂反应都受到抑制。PWM诱导的空斑形成反应也同样被NaIO_4处理的细胞所抑制,即把NaIO_4处理的细胞加到PWM刺激     

抗CD43单克隆抗体对B细胞增殖及抗体分泌的影响

目的：研究抗CD43 mAb（DFT1）对B细胞增殖及其抗体分泌的影响。方法：细胞培养，^3H-TdR掺入法测定不同时间抗CD43 mAb对B细胞增殖的影响，ELISA测定其对PWM诱导系统内抗体分泌的水平。结果：单独加入抗CD43 mAb对B细胞增殖无影响，但在TPA诱导系统内加入抗CD43 mAb，培养72h可见显著增殖反应，为单独加入TPA引起增殖反应的3倍，在培养开始加入抗CD43 mAb可引起显著的增殖反应，而延迟加入抗CD43 mAb对B细胞增殖的影响不显著。抗CD43 mAb对PWM诱导系统内B细胞的抗体分泌不产生影响。结论：抗CD43抗体可引起TPA诱导系统内B细胞的显著增殖。而PWM诱导系统内B细胞抗体的分泌无影响。     

PWM诱导人免疫球蛋白合成中红细胞的作用

在体外用PWM刺激人外周血单个核细胞(PBM),诱导免疫球蛋白(Ig)合成已广泛地用于体液免疫方面的研究,但从贫血和血沉快的患者或淋巴细胞减少症患者血中获得的PWM常常混有红细胞(RBC).RBC对PWM诱导Ig合成是否有影响,对此作者进行了研究.方法如下:从正常人外周血分离PBM,洗涤3次后用1640培养液配制成PBM悬液(2×10~6细胞/ml).分离剩余的自身红细胞,同样洗三次,配制成不同浓度的RBC悬液     

体外诱导和检测人类B细胞产生抗HLA抗体的研究

目的 体外诱导和采用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测人类B细胞产生的抗HLA抗体.方法 对7名健康志愿者采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)并体外培养5 d,以B细胞多克隆刺激原美洲商陆丝裂原(PWM)、葡萄球菌A蛋白菌体(SAC)体外刺激PBMC,采用EHSA和ELISPOT方法分别测定培养上清中Ig浓度和抗体分泌B细胞数,探索体外诱导PBMC产生Ig的适宜方法.采用该刺激方法和HLA特异的ELISPOT法,诱导和检测9例拟行肾移植预致敏对象PBMC产生的抗HLA抗体.结果 与PWM单刺激相比,PBMC在PWM和SAC联合刺激后,有更多细胞存活的趋势(P=0.052),且培养上清中IgM的水平明显增加(P=0.03),而IgG的水平无明显变化(P>0.05).6例预致敏对象诱导和检测到抗HLA抗体.其特异性与各自培养上清中检测到的抗HLA抗体一致.结论 PWM和SAC体外刺激PBMC,结合HLA特异的ELISPOT方法,能诱导和榆测到人类B细胞产生的HLA抗体.     

体外诱导和检测人类B细胞产生抗HLA抗体的研究

目的 体外诱导和采用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测人类B细胞产生的抗HLA抗体.方法 对7名健康志愿者采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)并体外培养5 d,以B细胞多克隆刺激原美洲商陆丝裂原(PWM)、葡萄球菌A蛋白菌体(SAC)体外刺激PBMC,采用EHSA和ELISPOT方法分别测定培养上清中Ig浓度和抗体分泌B细胞数,探索体外诱导PBMC产生Ig的适宜方法.采用该刺激方法和HLA特异的ELISPOT法,诱导和检测9例拟行肾移植预致敏对象PBMC产生的抗HLA抗体.结果 与PWM单刺激相比,PBMC在PWM和SAC联合刺激后,有更多细胞存活的趋势(P=0.052),且培养上清中IgM的水平明显增加(P=0.03),而IgG的水平无明显变化(P>0.05).6例预致敏对象诱导和检测到抗HLA抗体.其特异性与各自培养上清中检测到的抗HLA抗体一致.结论 PWM和SAC体外刺激PBMC,结合HLA特异的ELISPOT方法,能诱导和榆测到人类B细胞产生的HLA抗体.     

体外诱导和检测人类B细胞产生抗HLA抗体的研究

目的 体外诱导和采用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测人类B细胞产生的抗HLA抗体.方法 对7名健康志愿者采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)并体外培养5 d,以B细胞多克隆刺激原美洲商陆丝裂原(PWM)、葡萄球菌A蛋白菌体(SAC)体外刺激PBMC,采用EHSA和ELISPOT方法分别测定培养上清中Ig浓度和抗体分泌B细胞数,探索体外诱导PBMC产生Ig的适宜方法.采用该刺激方法和HLA特异的ELISPOT法,诱导和检测9例拟行肾移植预致敏对象PBMC产生的抗HLA抗体.结果 与PWM单刺激相比,PBMC在PWM和SAC联合刺激后,有更多细胞存活的趋势(P=0.052),且培养上清中IgM的水平明显增加(P=0.03),而IgG的水平无明显变化(P>0.05).6例预致敏对象诱导和检测到抗HLA抗体.其特异性与各自培养上清中检测到的抗HLA抗体一致.结论 PWM和SAC体外刺激PBMC,结合HLA特异的ELISPOT方法,能诱导和榆测到人类B细胞产生的HLA抗体.     

体外诱导和检测人类B细胞产生抗HLA抗体的研究

目的 体外诱导和采用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测人类B细胞产生的抗HLA抗体.方法 对7名健康志愿者采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)并体外培养5 d,以B细胞多克隆刺激原美洲商陆丝裂原(PWM)、葡萄球菌A蛋白菌体(SAC)体外刺激PBMC,采用EHSA和ELISPOT方法分别测定培养上清中Ig浓度和抗体分泌B细胞数,探索体外诱导PBMC产生Ig的适宜方法.采用该刺激方法和HLA特异的ELISPOT法,诱导和检测9例拟行肾移植预致敏对象PBMC产生的抗HLA抗体.结果 与PWM单刺激相比,PBMC在PWM和SAC联合刺激后,有更多细胞存活的趋势(P=0.052),且培养上清中IgM的水平明显增加(P=0.03),而IgG的水平无明显变化(P>0.05).6例预致敏对象诱导和检测到抗HLA抗体.其特异性与各自培养上清中检测到的抗HLA抗体一致.结论 PWM和SAC体外刺激PBMC,结合HLA特异的ELISPOT方法,能诱导和榆测到人类B细胞产生的HLA抗体.     

体外诱导和检测人类B细胞产生抗HLA抗体的研究

目的 体外诱导和采用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测人类B细胞产生的抗HLA抗体.方法 对7名健康志愿者采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)并体外培养5 d,以B细胞多克隆刺激原美洲商陆丝裂原(PWM)、葡萄球菌A蛋白菌体(SAC)体外刺激PBMC,采用EHSA和ELISPOT方法分别测定培养上清中Ig浓度和抗体分泌B细胞数,探索体外诱导PBMC产生Ig的适宜方法.采用该刺激方法和HLA特异的ELISPOT法,诱导和检测9例拟行肾移植预致敏对象PBMC产生的抗HLA抗体.结果 与PWM单刺激相比,PBMC在PWM和SAC联合刺激后,有更多细胞存活的趋势(P=0.052),且培养上清中IgM的水平明显增加(P=0.03),而IgG的水平无明显变化(P>0.05).6例预致敏对象诱导和检测到抗HLA抗体.其特异性与各自培养上清中检测到的抗HLA抗体一致.结论 PWM和SAC体外刺激PBMC,结合HLA特异的ELISPOT方法,能诱导和榆测到人类B细胞产生的HLA抗体.     

体外诱导和检测人类B细胞产生抗HLA抗体的研究

目的 体外诱导和采用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测人类B细胞产生的抗HLA抗体.方法 对7名健康志愿者采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)并体外培养5 d,以B细胞多克隆刺激原美洲商陆丝裂原(PWM)、葡萄球菌A蛋白菌体(SAC)体外刺激PBMC,采用EHSA和ELISPOT方法分别测定培养上清中Ig浓度和抗体分泌B细胞数,探索体外诱导PBMC产生Ig的适宜方法.采用该刺激方法和HLA特异的ELISPOT法,诱导和检测9例拟行肾移植预致敏对象PBMC产生的抗HLA抗体.结果 与PWM单刺激相比,PBMC在PWM和SAC联合刺激后,有更多细胞存活的趋势(P=0.052),且培养上清中IgM的水平明显增加(P=0.03),而IgG的水平无明显变化(P>0.05).6例预致敏对象诱导和检测到抗HLA抗体.其特异性与各自培养上清中检测到的抗HLA抗体一致.结论 PWM和SAC体外刺激PBMC,结合HLA特异的ELISPOT方法,能诱导和榆测到人类B细胞产生的HLA抗体.     

体外诱导和检测人类B细胞产生抗HLA抗体的研究

目的 体外诱导和采用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测人类B细胞产生的抗HLA抗体.方法 对7名健康志愿者采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)并体外培养5 d,以B细胞多克隆刺激原美洲商陆丝裂原(PWM)、葡萄球菌A蛋白菌体(SAC)体外刺激PBMC,采用EHSA和ELISPOT方法分别测定培养上清中Ig浓度和抗体分泌B细胞数,探索体外诱导PBMC产生Ig的适宜方法.采用该刺激方法和HLA特异的ELISPOT法,诱导和检测9例拟行肾移植预致敏对象PBMC产生的抗HLA抗体.结果 与PWM单刺激相比,PBMC在PWM和SAC联合刺激后,有更多细胞存活的趋势(P=0.052),且培养上清中IgM的水平明显增加(P=0.03),而IgG的水平无明显变化(P>0.05).6例预致敏对象诱导和检测到抗HLA抗体.其特异性与各自培养上清中检测到的抗HLA抗体一致.结论 PWM和SAC体外刺激PBMC,结合HLA特异的ELISPOT方法,能诱导和榆测到人类B细胞产生的HLA抗体.     

体外诱导和检测人类B细胞产生抗HLA抗体的研究

目的 体外诱导和采用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测人类B细胞产生的抗HLA抗体.方法 对7名健康志愿者采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)并体外培养5 d,以B细胞多克隆刺激原美洲商陆丝裂原(PWM)、葡萄球菌A蛋白菌体(SAC)体外刺激PBMC,采用EHSA和ELISPOT方法分别测定培养上清中Ig浓度和抗体分泌B细胞数,探索体外诱导PBMC产生Ig的适宜方法.采用该刺激方法和HLA特异的ELISPOT法,诱导和检测9例拟行肾移植预致敏对象PBMC产生的抗HLA抗体.结果 与PWM单刺激相比,PBMC在PWM和SAC联合刺激后,有更多细胞存活的趋势(P=0.052),且培养上清中IgM的水平明显增加(P=0.03),而IgG的水平无明显变化(P>0.05).6例预致敏对象诱导和检测到抗HLA抗体.其特异性与各自培养上清中检测到的抗HLA抗体一致.结论 PWM和SAC体外刺激PBMC,结合HLA特异的ELISPOT方法,能诱导和榆测到人类B细胞产生的HLA抗体.     

体外诱导和检测人类B细胞产生抗HLA抗体的研究

目的 体外诱导和采用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测人类B细胞产生的抗HLA抗体.方法 对7名健康志愿者采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)并体外培养5 d,以B细胞多克隆刺激原美洲商陆丝裂原(PWM)、葡萄球菌A蛋白菌体(SAC)体外刺激PBMC,采用EHSA和ELISPOT方法分别测定培养上清中Ig浓度和抗体分泌B细胞数,探索体外诱导PBMC产生Ig的适宜方法.采用该刺激方法和HLA特异的ELISPOT法,诱导和检测9例拟行肾移植预致敏对象PBMC产生的抗HLA抗体.结果 与PWM单刺激相比,PBMC在PWM和SAC联合刺激后,有更多细胞存活的趋势(P=0.052),且培养上清中IgM的水平明显增加(P=0.03),而IgG的水平无明显变化(P>0.05).6例预致敏对象诱导和检测到抗HLA抗体.其特异性与各自培养上清中检测到的抗HLA抗体一致.结论 PWM和SAC体外刺激PBMC,结合HLA特异的ELISPOT方法,能诱导和榆测到人类B细胞产生的HLA抗体.     

体外诱导和检测人类B细胞产生抗HLA抗体的研究

目的 体外诱导和采用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测人类B细胞产生的抗HLA抗体.方法 对7名健康志愿者采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)并体外培养5 d,以B细胞多克隆刺激原美洲商陆丝裂原(PWM)、葡萄球菌A蛋白菌体(SAC)体外刺激PBMC,采用EHSA和ELISPOT方法分别测定培养上清中Ig浓度和抗体分泌B细胞数,探索体外诱导PBMC产生Ig的适宜方法.采用该刺激方法和HLA特异的ELISPOT法,诱导和检测9例拟行肾移植预致敏对象PBMC产生的抗HLA抗体.结果 与PWM单刺激相比,PBMC在PWM和SAC联合刺激后,有更多细胞存活的趋势(P=0.052),且培养上清中IgM的水平明显增加(P=0.03),而IgG的水平无明显变化(P>0.05).6例预致敏对象诱导和检测到抗HLA抗体.其特异性与各自培养上清中检测到的抗HLA抗体一致.结论 PWM和SAC体外刺激PBMC,结合HLA特异的ELISPOT方法,能诱导和榆测到人类B细胞产生的HLA抗体.     

体外诱导和检测人类B细胞产生抗HLA抗体的研究

目的 体外诱导和采用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测人类B细胞产生的抗HLA抗体.方法 对7名健康志愿者采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)并体外培养5 d,以B细胞多克隆刺激原美洲商陆丝裂原(PWM)、葡萄球菌A蛋白菌体(SAC)体外刺激PBMC,采用EHSA和ELISPOT方法分别测定培养上清中Ig浓度和抗体分泌B细胞数,探索体外诱导PBMC产生Ig的适宜方法.采用该刺激方法和HLA特异的ELISPOT法,诱导和检测9例拟行肾移植预致敏对象PBMC产生的抗HLA抗体.结果 与PWM单刺激相比,PBMC在PWM和SAC联合刺激后,有更多细胞存活的趋势(P=0.052),且培养上清中IgM的水平明显增加(P=0.03),而IgG的水平无明显变化(P>0.05).6例预致敏对象诱导和检测到抗HLA抗体.其特异性与各自培养上清中检测到的抗HLA抗体一致.结论 PWM和SAC体外刺激PBMC,结合HLA特异的ELISPOT方法,能诱导和榆测到人类B细胞产生的HLA抗体.     

儿童单纯性肾病综合征血浆对B细胞功能的影响

本文观察37例小儿单纯性肾病(INS)、6例急性链球菌感染后肾炎(APSGN)血浆及6例INS外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液对SAC诱导的正常人B细胞增殖的影响,8例INS血浆对PWM诱导B细胞产生IgG及其亚类的影响。结果发现INS发作期血浆抑制B细胞增殖及PWM诱导的B细胞分化,对B细胞增殖的抑制效应不能被正常人混合血浆及小牛血清纠正,表明INS血浆抑制作用是由于确有抑制因子存在,而非缺乏某种物质。血浆抑制作用在INS缓解期消失,正常儿童及APSGN儿童血浆无此抑制作用。INS发作期血浆与其PBMC上清液对B细胞增殖的抑制作用呈直线正相关,提示其血浆抑制因子可能为INS患儿PBMC的产物。     

用正常人T细胞诱导B淋巴母细胞系产生IgG抗体

淋巴细胞诱导 B 淋巴细胞产生抗体的过程中,特别是在 IgM 转变成 IgG 反应中起着重要作用。在人用 PWM 刺激 B 淋巴细胞诱导IgM 或 IgG 的产生必须有 T 淋巴细胞参与。很多实验都已经证明,T 细胞的抗原特异性或非恃异性可溶性因子,和抗原或其它诱导物(如抗免疫球蛋白抗体)一起作用于 B 淋     

人类B细胞转化为抗体分泌浆细胞的体外研究

目的体外示踪不同刺激条件下人类B细胞转化为抗体分泌浆细胞的能力。方法对5名健康自愿者采用B细胞阴性选择磁珠分离法分离和体外培养B细胞，观察4种培养条件下（培养液对照组、PWM组、细胞因子组及PWM＋细胞因子组）、不同时间点B细胞转化为抗体分泌浆细胞的能力。采用双荧光标记（FITC—CD27、PE—CD38）流式细胞技术监测B细胞4种表面标志物的动态变化；采用酶联免疫法（ELISA）测定不同时间点培养上清液中1只浓度；采用酶联免疫斑点法（ELISPOT）测定不同时间点抗体分泌B细胞数。结果B细胞产生抗体浓度明显与培养条件有关。PWM刺激的B细胞培养上清液中Ig浓度最高（P=0．003）；PWM＋细胞因子组次之；细胞因子组与对照组差异无统计学意义。流式细胞分析结果显示，培养第7天浆细胞前体达峰，第10天浆细胞百分率达峰。活细胞数以细胞因子组最多，培养10d后仍呈增殖状态；而PWM组很快下降。ELISPOT法测定的Ig分泌B细胞数也以PWM组最佳，PWM＋细胞因子组次之。结论从Ig产生能力看，以PWM组最佳；从细胞增殖和浆细胞的存活来看，以细胞因子组最佳。表明体外诱导B细胞产生抗体不仅需要有效的刺激原，同时还需要必需的细胞因子信号促使细胞增殖和维持细胞的存活。     

PWM诱导sIg-B淋巴细胞分化

在T淋巴细胞参与下,商陆促有丝分裂素(PWM)能诱导人周围血B淋巴细胞分化至免疫球且白分泌细胞(ISC)。研究表明,PWM阳性反应细胞表面IgM阳性,有时IgG和IgA亦阳性。细胞的密度小,密度梯度离心中集聚于上层。细胞表面缺乏小鼠红细胞受体。用阴性选择法把sIgD~+细胞从周围血单个核细胞中去掉,并不影响     

乳糜尿的细胞免疫

有丝分裂素和抗原诱导的体外淋巴细胞转化,常用于评价免疫缺陷、自身免疫及感染性疾病病人的细胞免疫功能。近年来对丝虫感染的宿主免疫反应也作了进一步研究。作者观察了13例乳糜尿病人及32例健康对照者外周血淋巴细胞对PHA和PWM的反应。用     

PWM依赖的小鼠腹腔巨噬细胞介导的细胞毒作用的研究

本文采用间接MTT法,对凝集素美洲商陆(PWM)依赖的小鼠腹腔巨噬细胞(PEMφ)介导的细胞毒作用(PDMC)进行检测分析,发现凝集素(PWM、ConA)预处理靶细胞(Raji、U_(14)),对细胞毒作用的影响视凝集素、靶细胞的不同而异;在PWM分别预处理效、靶细胞的实验中,PWM对Raji靶细胞的作用显更重要;在PWM直接作用下,其PDMC活性可进一步提高,后者可为GlcNAc有效地抑制.观察PDMC中Raji靶细胞的形态学变化,发现坏死与凋亡现象并存.