心肌肥大相关蛋白YAP在大鼠糖尿病心肌病中的表达

目的:观察Hippo信号通路效应蛋白YAP在糖尿病大鼠心肌肥大中的改变,分析可能的作用机制。方法:健康雄性SD大鼠随机分为2组,每组6只。正常对照组:大鼠正常饮水饮食喂养12周;糖尿病心肌病组:大鼠腹腔注射STZ（55 mg/kg）复制糖尿病模型,以血糖≥ 16.7 mmo1/L,持续1周确定造模成功,继续饲养12周。测定大鼠空腹血糖水平和体质量;心室内插管检测左心室动力学变化,称量心脏质量计算心体比;荧光定量PCR检测心肌肥大相关基因心房钠尿肽和脑利钠肽mRNA表达,Western blot法检测YAP和p-YAP蛋白表达改变。结果:与正常对照组相比,糖尿病组大鼠心体比增加,左心室舒张末压增高,左心室发展压、左心室内压最大上升和下降速率及左心室做功均降低;心肌肥大相关基因心房钠尿肽和脑利钠肽mRNA表达增加;YAP蛋白表达增加,p-YAP/YAP比值降低（P<0.05~P<0.01）。结论:糖尿病可诱导心肌肥大,其机制可能与增加Hippo信号通路效应蛋白YAP的表达,降低其磷酸化水平有关。     

CDK9及其抑制剂在心肌肥大中的作用机制研究

心肌肥大的特征是分化的心肌细胞体积的增加,在分子水平上,心肌肥大与细胞的转录和翻译密切相关。研究发现细胞周期蛋白依赖性激酶9(CDK9)与心肌肥大相关。CDK9作用于磷酸化RNA聚合酶Ⅱ的C端结构域,从而刺激心肌细胞分化中转录的延长阶段。长期激活的CDK9不仅可引起心肌细胞增大,还可能导致心力衰竭,加重患者病情。针对CDK9的抑制剂如5,6-二氯-1-β-D-呋喃核糖苯并咪唑、Flavopiridol、Roscovitine等可抑制心肌肥大,了解这些化合物的作用机制以及与CDK9的结合方式可为心肌肥大的治疗提供提供帮助。     

细胞周期蛋白D1重组质粒的构建及其在鼻咽癌细胞中的表达

目的克隆人细胞周期蛋白D1基因,构建真核表达载体,诱导并鉴定其表达。方法利用RT-PCR法,以低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞mRNA为模板,扩增周期蛋白D1基因,构建重组表达载体pIRES2-EGFP-D1和pEGFP-C2-D1,用脂质体LipofectamineTM 2000将重组质粒转染到低分化鼻咽癌CNE-2Z细胞,诱导其表达,免疫荧光、Western blotting等鉴定其表达。结果电泳获得918bp预期片段,重组质粒经酶切、PCR和测序分析证实含有周期蛋白D1完整读码框,将重组质粒导入CNE-2Z细胞并成功表达,目的蛋白经免疫荧光和Western blotting鉴定具有生物学活性。结论成功克隆并构建含周期蛋白D1基因的真核表达GFP质粒,为进一步研究周期蛋白D1在鼻咽癌CNE-2Z细胞中的作用奠定基础。     

肺癌组织中细胞周期蛋白D1、E的表达

目的：观察非小细胞肺癌（NSCLC）与小细胞肺癌（SCLC）肿瘤组织中细胞周期蛋白D1,E表达的差异,并分析其与临床参数的关系。方法：应用免疫组化S－P法检测68例NSCLC和21例SCLC肿瘤组织中细胞周期蛋白D1,E的蛋白质表达水平。结果：NSCLC和SCLC肿瘤组织中细胞周期蛋白D1阳性表达率分别为48．5％和4．8％,两有显性差异（P＜0．05）;细胞周期蛋白E阳性表达率分别为41．2％和23．8％,两之间差异无显性。NSCLC细胞周期蛋白D1表达阳性组淋巴结转移率（66．7％）显高于阴性组淋巴结转移率（37．1％）（P＜0．05）。结论：NSCLC中细胞周期蛋白D1表达可能与肺瘤淋巴结转移有关,细胞周期蛋白D1表达在NSCLC与SCLC肿瘤组织中存在差异,提示两发病机制存在着差异。     

细胞周期蛋白在恶性肿瘤中的表达

肿瘤是一类细胞周期性疾病,细胞周期调控异常在肿瘤的发生发展中起关键作用。细胞周期蛋白(Cyclins)作为细胞周期调控的正性调节蛋白,在正常组织中不表达或者低表达,但在很多恶性肿瘤中都存在高表达、异位表达和不定期表达的现象,其异常表达会导致细胞周期的循环加速和细胞过度增殖,进而引起肿瘤的发生     

细胞周期蛋白E1基因在卵巢癌诊治中的作用

肿瘤细胞中基因拷贝数变异可影响细胞稳态,导致细胞恶变.细胞周期蛋白E1基因(CCNE1)编码细胞周期蛋白E1(Cyclin E1),CCNE1扩增或过表达改变Cyclin E1的表达,并影响其他基因的表达,参与多种恶性肿瘤的发生、发展.CCNE1扩增或过表达与卵巢癌的发生、耐药、靶向治疗及预后密切相关.该文综述CCNE...     

Pyk2在Goldblatt鼠左心室肥大心肌中的变化

目的以两肾一夹肾性高血压大鼠为模型,研究肥大心肌中富脯氨酸蛋白酪氨酸激酶（Pyk2）介导的细胞信号转导的变化及其意义。方法制备两肾一夹肾性高血压大鼠模型,分别于术后第1、4、8和12周测定尾动脉血压和心肌肥大指数,免疫组织化学法检测肥大心肌组织中Pyk2及其磷酸化表达。结果大鼠肾动脉狭窄术后4周心肌肥大已发生,8周至12周心肌肥大进一步加重;术后4、8、12周大鼠心肌组织Pyk2活性逐渐增加,心肌Pyk2活性与心肌肥大程度呈显著正相关。结论随肾动脉狭窄时间的延长,Pyk2活性逐渐增加是导致心肌肥大加剧的重要原因;Pyk2非受体酪氨酸激酶介导的信号通路可能是心肌肥大的重要的信号通路。     

肺癌组织中细胞周期蛋白D1的表达

目的　观察细胞周期蛋白Ｄ１（Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１）在肺癌发生中的作用及其与生物学行为的关系。方法　收集肺癌及癌前病变和正常肺组织,采用免疫组化ＳＰ法检测Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１的表达。结果　正常肺组织和鳞状化生的支气管上皮未见Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达;在轻→中→重度不典型增生、原位癌、浸润癌,Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达的阳性率逐渐升高,阳性细胞数也增多,低分化癌的阳性率高于中高分化癌（Ｐ＜ ０．０５）。Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１阳性组的增殖活性高于阴性组（Ｐ＜ ０．０５） ;肺鳞癌有淋巴结转移组Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１的阳性率高于无转移组（Ｐ＜ ０．０５） 。结论　Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达与肺癌的发生和增殖有关,而且Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达是支气管粘膜上皮癌变的早期表现。Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１表达与肺鳞癌分化不良及淋巴结转移有关,可能是预后不良的标志。     

细胞周期素D1在女性非小细胞肺癌中的表达研究

目的：探讨女性非小细胞肺癌（NSCLC）中细胞周期素D1（cyclin D1）的表达情况及其与临床生物学行为的关系。方法：应用Western blot方法检测60例女性NSCLC组织和癌旁正常组织中cyclin D1的阳性表达率。结果：女性NSCLC组织中cyclin D1的阳性表达率显著高于癌旁正常组织（P〈0.05）。T2～T4组、淋巴结转移阳性组cyclin D1表达率高于T1组、淋巴结转移阴性组（P〈0.05）。cyclin D1的阳性表达与肿瘤生长部位未见显著性关联。结论：女性NSCLC组织中存在cyclin D1的过表达，cyclin D1可能是肺癌的潜在预报因子。     

HO-1在AMPK抑制心肌肥大中的作用

目的】 研究AMP激活的蛋白激酶 (AMPK)及血红素氧合酶HO-1激活对心肌肥大的影响,以及HO-1在AMPK抑制心肌肥大中的作用?【方法】 以培养的新生大鼠心肌细胞为研究对象,采用蛋白免疫印迹杂交方法检测5-氨基-4甲酰胺咪唑核糖核苷酸(AICAR)对AMPK的磷酸化程度及对HO-1的影响,并测定心肌细胞 [3H]-亮氨酸掺入率及心肌细胞表面积,观察AMPK及HO-1心肌细胞肥大的影响?【结果】 AICAR对AMPK及HO-1均有激活作用,AICAR能阻断AngⅡ引起的心肌肥大效应;阻断HO-1的激活则能减弱AICAR的抑制作用?【结论】 AMPK具有抑制心肌肥大的作用,AMPK能激活HO-1,HO-1在AMPK抗心肌肥大的机制中起重要作用     

β-肌球蛋白重链基因与心肌肥厚

心肌肥厚是多种心血管病的一种病理改变。近年研究表明心肌肥厚是一种复杂的多种因素参与调节的动态过程。笔者就β-肌球蛋白重链基因与心肌肥厚的关系在分子遗传学水平做一综述。     

异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚及对相关因子的影响

目的 探讨异丙肾上腺素(isoproterenol,Iso) 致大鼠心肌肥厚及对相关因子的影响.方法 Wistar大鼠30只,随机分成对照组和Iso组.Iso组背部皮下注射5 mg/(kg·d),连续7 d后,测量大鼠心脏重量指数(HW/BW)、左心室重量指数(LVW/ BW)及左心室游离壁厚度;分光光度法检测左心室心肌组织及血清羟脯氨酸含量并计算胶原含量;分光光度法检测左心室心肌组织中丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性.结果 与对照组比较,Iso组大鼠心重指数和左心室重量指数明显增大,左心室游离壁厚明显增厚,左心室心肌组织及血清中胶原含量增高,心肌组织中MDA含量增高、SOD活性下降.结论 Iso能促进大鼠心肌肥厚和相关因子的变化.     

苯那普利与普萘洛尔对高血压大鼠心肌肥厚的影响

目的:探讨苯那普利与普萘洛尔对心肌肥厚的干预作用.方法:将Wistar雄性大鼠60只随机分为假手术对照组,模型对照组,苯那普利组,普萘洛尔组,联合用药组,后4组均行腹动脉部分结扎术.术后4周测定血流动力学,心室重量指数,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ).结果:苯那普利、普萘洛尔均可不同程度地降低心室重量指数,降低AngⅡ含量,改善血流动力学.结论:苯那普利与普萘洛尔能干预心肌肥厚,改善血流动力学,两者合用具有协同作用.     

替米沙坦对大鼠心肌肥厚组织中RASSF1A表达的影响

目的:观察替米沙坦对心肌肥厚大鼠左室心肌组织中RASSF1A表达的影响。方法:SD大鼠30只,随机分为对照组、模型组和干预组。模型组和干预组给予异丙肾上腺素3mg/(kg·d)皮下注射,干预组在建模同时灌胃替米沙坦8.33mg/(kg·d)。10d后,进行血流动力学和心肌肥厚指数测定;取大鼠左心室心肌组织,分别采用RT-PCR和免疫组化法检测RASSF1AmRNA和蛋白的表达,同时观察病理学变化。结果:血流动力学、心室肥厚指数及病理观察结果提示,模型组大鼠发生心肌肥厚,干预组上述变化较模型组减轻。3组大鼠心肌组织中RASSF1AmRNA和蛋白的表达差异均有统计学意义(F=38.968,284.445,P<0.001)。与对照组相比,模型组、干预组RASSF1AmRNA和蛋白的表达降低(P<0.05);与模型组相比,干预组RASSF1AmRNA和蛋白的表达升高(P<0.05)。结论:替米沙坦可通过调节RASSF1A的表达抑制心肌肥厚的发生。     

丝裂素活化蛋白激酶在心肌细胞肥大中的作用

目的：研究神经肽Ｙ（ＮＰＹ）在高血压心肌细胞肥大中的作用。方法：复制腹主动脉狭窄和高盐摄入性高血压大鼠模型。测定对照组和高血压血浆、心肌ＮＰＹ水平和心肌丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）活性。结果：高血压大鼠心重、ＮＰＹ水平和心肌ＭＡＰＫ活性均较显著高于对照组（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）。心肌ＭＡＰＫ活性与左心室肥大程度呈正相关（ｒ＝０．８０９，Ｐ〈０．０１）。结论：ＭＡＰＫ系统可能在ＮＰＹ致心肌细     

脉搏波传导速度与左室肥厚的相关性分析

目的：观察高血压病患者左室肥厚与脉搏波传导速度（pulse wave velocityPWv）的相关性;方法：入选70例高血压病左室肥厚的患者测定其室间隔厚度（ivs）,按其水平分为ivs〉1．1cm组和ivs〈1．1cm组,并测定两组PWV。结果：ivs〉1．1cm组和ivs〈1．1cm组比较,前者PWV明显比后者升高,两者达到统计学差异,P〈0．05。结论：高血压左室肥厚与PWV存在相关性。     

压力过负荷大鼠心肌肥厚组织中PTEN/FAK的表达

目的 观察磷酸酶-张力蛋白同源物(phosphase and tension homology deleted on chromosome 10, PTEN)及黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK) 在腹主动脉缩窄大鼠左心室肌中的表达,以探讨PTEN及FAK在压力过负荷性心肌肥厚发生发展过程中的作用。方法 采用腹主动脉缩窄术制备压力过负荷心肌肥厚动物模型,于术后4周测量左心室质量指数（LVMI）, 并用逆转录聚合酶链反应法（RT-PCR）检测心肌肥厚相关基因心房钠尿因子（ANF）的mRNA 含量,应用免疫组化方法,观察和检测大鼠PTEN蛋白及FAK蛋白表达在左心室心肌细胞中的变化。结果 模型组和假手术的LVMI、ANF mRNA 相对含量和FAK蛋白表达分别为3.46±0.20 和 2.73±0.15、0.93±0.16 和 0.63±0.12、126.45±2.78和77.64±5.74,模型组均明显增高,差异有统计学意义（P<0.05）;模型组和假手术的PTEN蛋白表达分别为87.14±6.11和 120.60±4.22,模型组低于假手术组,差异有统计学意义（P<0.05）;FAK蛋白的表达与LVMI呈正相关（r=0.877, P<0.01）,与PTEN蛋白的表达呈负相关（r=-0.952, P<0.01）;PTEN蛋白的表达与LVMI呈负相关（r=-0.825, P<0.01）。结论 PTEN/FAK通路在压力过负荷性心肌肥厚发生发展过程中发挥了重要调控作用。     

西红花酸对压力超负荷致心肌肥厚大鼠的ATPase及胶原的影响

目的 研究西红花酸对压力超负荷所致心肌肥厚大鼠的ATPase及胶原含量的影响。方法 采用腹主动脉部分狭窄术致大鼠心肌肥厚模型，大鼠分为早期组和晚期组，又各自分为假手术对照组、模型组、卡托普利组、西红花酸100，50mg/kg组。测定心脏重量参数，采用试剂盒测定Na^ ，K^ —ATPase;Ca^2 ，Mg^2 —ATPase的活力及羟脯氨酸的含量。结果 模型早期组(术后24h)ATPase活性明显降低，模型晚期组(术后1个月)ATPase活性降低更加明显，羟脯氨酸的含量明显增加。西红花酸晚期组(给药1个月)能显著提高心肌组织的ATPase活力，降低胶原的含量。结论 西红花酸对压力超负荷所致大鼠心肌肥厚具有一定的改善作用。     

Cyclin D1在大鼠肝细胞癌变过程中的异常表达及意义

目的　探讨肝细胞癌变过程中cyclinD1 的异常表达及其意义。方法　用 0 .0 5 %的 2 AAF诱导Wistar大鼠建立肝癌动物模型 ,应用免疫组化和原位杂交法检测大鼠肝脏在癌变过程中cyclinD1 的蛋白和mRNA表达。结果　正常组 8只中cyclinD1 蛋白和mRNA表达均正常 ,肝硬化组 16只中有 12只cyclinD1 蛋白和mRNA过表达 ,肝癌组 11例中有 4只cyclinD1 蛋白和mRNA过表达。结论　在 3组中cyclinD1 蛋白和mRNA表达一致 ,无显著差异。肝硬化组和肝癌组的cyclinD1 异常表达均高于正常组 ,而且肝硬化组的cyclinD1 异常表达高于肝癌组。