山莨菪碱对急性肺损伤时肺泡巨噬细胞分泌细胞因子的干预探讨

目的观察山莨菪碱(654-2)对急性肺损伤(ALI)大鼠肺泡巨噬细胞(AM)分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的影响,探讨其对ALI治疗作用的可能机制。方法复制ALI大鼠模型。实验动物随机分为ALI模型组、654-2治疗组、对照组,进行各组大鼠动脉血气、肺湿／干(W／D）值测定及肺组织病理学光镜检查。分离培养各组大鼠肺泡巨噬细胞,采用生物活性法进行AM上清液TNF-α、IL-6测定。结果654-2治疗组大鼠AM分泌TNF-α［（38．98±4.51)KU/L］和IL-6［（20．82±6.3)kU/L］的水平明显低于ALI组［TNF-α为(68.27±9.13)kU/L,P＜0.001;IL-6为(33.84±9.02)kU/L,P＜0.01］,并能使血气改善(P＜0.05)、W／D值下降(P＜0.05),肺组织损伤程度减轻。结论654-2对ALI大鼠肺泡巨噬细胞过度活化、分泌TNF-α、IL-6具有显著抑制作用,在一定程度上防止ALI的发生和发展。     

地塞米松对大鼠创伤失血性休克模型的保护作用

目的探讨早期大剂量地塞米松对大鼠创伤失血性休克的保护作用.方法制作创伤失血性休克大鼠动物模型,随机分为正常对照组(A组)、创伤失血性休克组(B组)、创伤失血性休克地塞米松处理组(C组).分别于模型完成的1、2、3、6、12 h时间点测血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-10水平,取肺、脾做光镜检查.结果大鼠遭受创伤失血性休克打击后,血浆TNF-α水平持续增高,6 h达高峰;IL-1β、IL-10持续增高;光镜下肺损伤,脾小体萎缩、坏死,败血脾.地塞米松能显著降低血浆TNF-α、IL-1β、IL-10的表达水平,减轻脾、肺组织损伤,脾小体持续增生.结论早期大剂量地塞米松抑制过度炎症反应的同时,抑制IL-10的高水平表达,显示了较好的免疫调理作用.     

地塞米松对肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞释放肿瘤坏死因子-α和白细胞介素6的影响

目的：观察博莱霉素（ＢＬＭ）诱发大鼠肺损伤后肺泡巨噬细胞（ＡＭ）释放肿瘤坏死因子 α（ＴＮＦ α）和白细胞介素 ６（ＩＬ ６）的变化及地塞米松（ＤＭ）对ＡＭ 释放ＴＮＦ α和ＩＬ ６的影响。方法：采用生物活性法测定ＴＮＦ α和ＩＬ ６。结果：灌注ＢＬＭ 后ＡＭ 释放ＴＮＦ α〔（５８．９５±１３．２１）ｋＵ／Ｌ〕和ＩＬ ６〔（３５．００±１０．００）ｋＵ／Ｌ〕明显高于对照组〔ＴＮＦ α为（２３．６３±５．５０）ｋＵ／Ｌ,Ｐ＜ ０．００１;ＩＬ ６ 为（２１．１７±６．０４）ｋＵ／Ｌ,Ｐ＜０．０１〕,ＤＭ 能够抑制ＡＭ 释放ＴＮＦ α和ＩＬ ６,并且与其剂量相关（随ＤＭ 浓度的增加,ＡＭ 分泌ＴＮＦ α和ＩＬ ６ 水平逐渐降低）。ＢＬＭ 组支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中细胞总数（４．８８±０．６５）×１０６ 也明显高于对照组〔（１．４７±０．４１）×１０６,Ｐ＜ ０．００１〕。结论：ＤＭ 能以剂量依赖方式抑制ＡＭ 释放ＴＮＦ α和ＩＬ ６     

创伤失血性休克大鼠T淋巴细胞功能变化及地塞米松对其影响

目的探讨创伤失血性休克大鼠T淋巴细胞的功能变化及地塞米松对其影响。方法制作创伤失血性休克大鼠动物模型,大鼠随机分为正常对照组、创伤失血性休克组、创伤失血性休克地塞米松处理组。分别于模型完成的1、2、3、6、12h时间点测血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,将各组各时间点大鼠活取肺、脾做病理学检查,取2、6h时间点创伤失血性休克组脾做电镜检查。并取各组各时间点脾做免疫组化白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-4(IL-4)标记。结果大鼠遭受创伤失血性休克打击后,血浆TNF-α水平持续增高,6h达高峰。光镜下肺脏组织损伤,脾小体早期增生,后期出现萎缩。电镜显示脾小体增生期脾淋巴细胞增殖活化,脾小体萎缩期脾淋巴细胞坏死。免疫组化显示脾小体增生期以IL-2表达为主,萎缩期以IL-4表达为主。地塞米松能显著降低血浆TNF-α表达水平,减轻脾、肺组织损伤,脾小体持续增生,免疫组化标记结果变化不大。结论创伤失血性休克大鼠早期T淋巴细胞激活,随后出现了向TH2的漂移,最后淋巴细胞功能衰竭。通过早期应用地塞米松抑制了过度的炎症反应,保存了淋巴细胞的功能。     

大鼠急性胰腺炎肺损伤组织巨噬细胞炎症蛋白-2和TNF-α基因表达

目的 探讨大鼠急性胰腺炎（AP）肺损伤时，肺组织损伤程度与组织巨噬细胞炎症蛋白-2（MIP-2）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）基因表达的关系。方法 胰胆管逆行注射5％脱氧胆酸钠（DCA）复制大鼠AP模型，观察胰腺和肺组织病理学改变，使用RT-PCR法检测肺组织中MIP-2 mRNA、TNF-α mRNA的表达。结果 AP 3h、AP 6h组胰腺和肺组织镜下病理评分明显高于相应对照组。AP 6h组肺组织MIP-2 mRNA表达明显上调。胰腺病理评分与肺组织病理学评分、肺组织MIP-2基因表达呈正相关；肺组织MIP-2与TNF-α的基因表达之间也呈明显正相关。结论 肺组织MIP-2基因表达上调，以及与TNF-α的相互诱生，可能是导致急性胰腺炎中性粒细胞在肺组织浸润和活化，进而导致肺损伤的重要机制之一。     

急性颅脑损伤后血清TNF-α和IL-18的含量变化及临床意义

目的探讨急性颅脑损伤后血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素18（IL-18）的含量变化及临床意义。方法采用酶联免疫吸附（ELISA）法测定60例急性颅脑损伤患者伤后第1、3、7、10天血清TNF-α和IL-18的含量,观察TNF-α和IL-18血清含量的变化规律,分析颅脑损伤程度与TNF-α和IL-18含量之间的关系。结果TNF-α在伤后早期即明显升高,于伤后第3天达到高峰,至第10天下降明显,但仍高于对照组（P〈0．05）;IL-18含量在伤后呈逐渐升高趋势,并在第10天达到高峰。重型颅脑损伤组在伤后各个时间点的血清TNF-α和IL-18含量较轻、中型组明显升高（P〈0．05）。结论急性颅脑损伤后血清TNF-α和IL-18含量明显升高,与颅脑损伤程度呈正相关;TNF-α和IL-18参与了急性颅脑损伤后的炎性反应过程．在继发性脑损害中起重要作用。     

急性颅脑损伤后血清TNF-α和IL-18的含量变化及临床意义

目的探讨急性颅脑损伤后血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素18(IL-18)的含量变化及临床意义。方法采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定60例急性颅脑损伤患者伤后第1、3、7、10天血清TNF-α和IL-18的含量,观察TNF-α和IL-18血清含量的变化规律,分析颅脑损伤程度与TNF-α和IL-18含量之间的关系。结果TNF-α在伤后早期即明显升高,于伤后第3天达到高峰,至第10天下降明显,但仍高于对照组(P<0.05);IL-18含量在伤后呈逐渐升高趋势,并在第10天达到高峰。重型颅脑损伤组在伤后各个时间点的血清TNF-α和IL-18含量较轻、中型组明显升高(P<0.05)。结论急性颅脑损伤后血清TNF-α和IL-18含量明显升高,与颅脑损伤程度呈正相关;TNF-α和IL-18参与了急性颅脑损伤后的炎性反应过程,在继发性脑损害中起重要作用。     

失血性休克大鼠器官组织中促炎细胞因子表达及释放的时相性研究

目的探讨休克后促炎细胞因子表达释放的时相性变化。方法80只SD大鼠被随机分为失血性休克组（40只）和对照组（40只）。于休克后30、60和90min及复苏后30min和90min各处死8只大鼠，采用逆转录-聚合酶链反应（RT～PCR）检测失血性休克后各时间点肠、肝、肺组织内肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6的mRNA表达，采用酶联免疫吸附试验（ELISA）双抗体夹心法测定血清中TNF—α、IL-6的含量。结果①休克30min时，肠、肝、肺组织中促炎细胞因子的mRNA表达均未见升高；休克60min肠道首先出现TNF—α mRNA表达升高（P〈0．05），而肝脏在休克90min时表达开始升高（P〈0．01），肺脏则在复苏后30min表达开始升高（P〈0．05）。复苏后90min肠、肝、肺组织中TNF—α mRNA表达仍高于对照组（P均〈0．01）。TNF—α mRNA在肠、肝、肺内的表达升高最早，其后才是IL-1β mRNA和IL-6 mRNA。②休克30min门静脉血和下腔静脉血中TNF—α、IL-6的含量与对照组比较差异均无显著性，而休克60min时门静脉血中TNF—α含量显著升高（P〈0．05）；休克90min、复苏后30min和90min门静脉血和下腔静脉血中TNF—α、IL-6含量均较对照组显著升高（P均〈0．01）。结论失血性休克时细胞因子的释放顺序县肠道、肝脏和肺脏。椎测存在“肠→肝→肺”细胞因子释放轴。     

血清IL-6、IL-8和TNF-α在早期诊断重症急性胰腺炎中的价值

目的　研究血清白介素 6 (IL 6 )、白介素 8(IL 8)和肿瘤坏死因子 (TNF α)在早期诊断重症急性胰腺炎中的价值。方法　采用双抗体夹心ELISA法检测 41例重症急性胰腺炎(SAP)患者血清IL 6、IL 8和TNF α的水平 ,并与 6 1例轻型急性胰腺炎 (MAP)和 2 0例正常对照组进行比较。结果　入院 2 4h内SAP患者血清IL 6、IL 8和TNF α水平显著高于MAP和正常对照组 (P <0 0 1) ,入院治疗 7d后则下降接近正常水平 ;MAP患者入院时血清TNF α水平显著高于正常对照组 (P <0 0 1) ,IL 6、IL 8则无差异。结论　检测血清IL 6、IL 8和TNF α水平可作为早期诊断重症急性胰腺炎的有效指标之一 ,TNF α在急性胰腺炎从轻型向重症的发展过程中起核心作用     

大黄对急性肺损伤大鼠血浆和支气管肺泡灌洗液中炎症细胞因子表达的影响

目的:探讨大黄对实验性急性肺损伤(ALI)大鼠炎症细胞因子在血浆和肺泡灌洗液中表达的影响.方法:用舌下静脉注射内毒素(LPS)的方法复制ALI模型,将145只雄性Wistar大鼠随机分成LPS组、对照组、大黄治疗组和地塞米松治疗组;分别测定大鼠血浆和支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-8含量.结果:与对照组相比,LPS组血浆和支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β和IL-8均明显升高(P均<0.05),而地塞米松治疗组和大黄治疗组则均明显下降(P<0.05或P<0.01).结论:LPS诱导的大鼠ALI表现为肺和全身炎症反应;大黄和地塞米松能减轻肺和全身炎症反应,其机制可能是通过抑制TNF-α、IL-1β和IL-8活性来实现的.     

维拉帕米对大鼠创伤失血性休克复合内毒素血症模型的保护作用

目的　研究钙通道阻滞剂维拉帕米对创伤失血性休克复合内毒素血症模型大鼠的保护作用。方法　制作大鼠创伤失血性休克复合内毒素血症动物模型 ,腹腔内给予维拉帕米干预治疗 ,检测血清中TNF -α、IL - 1β、IL - 10含量的变化及大鼠肺组织的病理改变。结果　维拉帕米干预治疗组大鼠血清中TNF -α、IL - 1β的水平较致伤组明显降低 (P <0 .0 1) ,血清中IL - 10的含量较致伤组明显升高 (P <0 .0 1) ,大鼠肺组织炎症病理改变较致伤组明显减轻。结论　维拉帕米干预治疗对大鼠创伤失血性休克复合内毒素模型有明显保护作用。     

白介素—10对内毒素诱导肺泡巨噬细胞核因子—kB活化及肿瘤坏死因子释放的调节

目的 探讨白介素－10对内毒素（LPS）诱导肺泡巨噬细胞核因子－kB(NF-kB）活伦及肿瘤坏死因子α（TNF-α)基因表达的调节,为临床运用白介素－10提供理论依据。方法 用支气管肺泡灌洗法收集肺巨噬细胞（PAM）进行培养,分正常对照组、LPS 、IL－10＋LPS组。用凝胶电泳迁移率改变分析（EMSA）法和ELIS法分别检测核提取物中NF－kB活性和细胞培养上清中TNF－α含量。结果 LPS组NF－kB活性和TNF－α含量在刺激后0.5-4h明显高于正常对照组;IL－10＋LPS组NF-kB活性和TNF-α含量均显著低于LPS组。结论 LBS诱导PAM的NF－kB活化,导致TNF－α基因表达增强;白介素－10可抑制NF－kB活化而减少TNF－α的释放。     

过氧化物酶增殖体激活受体αmRNA在急性肺损伤大鼠肺组织表达的变化

目的观察内毒素(LPS)复制的急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织过氧化物酶增值体激活受体α(PPARα)mRNA表达的变化,探讨PPARα在ALI中可能的作用.方法将40只雄性Wistar大鼠随机分为对照组,LPS致伤1、2、4、8 h组.用LPS(5 mg/kg)静脉注射复制大鼠ALI模型,分别在LPS致伤后1、2、4、8 h时处死大鼠,采用RT-PCR与ELISA法检测肺组织中PPARα和肿瘤坏死因子α(TNFα)mRNA的表达及肺组织匀浆中TNFα浓度.结果LPS致伤后2、4、8 h肺组织病理积分较对照组明显升高(P均＜0.01);LPS致伤后2、4 h PPARα mRNA表达(IOD值)较对照组显著降低(P＜0.05);LPS致伤后1、2、4、8 hTNFα mRNA(IOD值)和蛋白水平表达均较对照组显著升高(P均＜O.01).结论PPARα mRNA在ALI大鼠肺组织表达降低;而肺组织TNFα mRNA和蛋白水平均升高.PPARα在ALI的发病机制中具有一定的作用.     

TNF—α、IL—8在机械通气致肺损伤中的作用

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素8(IL-8)在机械通气致肺损伤中的可能作用。方法24只普通健康小猪随机等分为对照组、低潮气量组(A组)、正常潮气量组(B组)、大潮气量组(C组),采用持续给予小猪不同潮气量通气动物模型,利用放射免疫法、酶联免疫法(ELISA)和髓过氧化物酶(MPO)测定法,分别检测不同潮气量组通气1、3、7d后,血清和肺组织匀浆中TNF-α、IL-8及MPO含量的变化。结果A、B、C组血清、肺组织匀浆TNF-α、IL-8及MPO的含量较对照组升高(P＜0.05或P＜0.01),其中3d后,TNF-α达峰值;7d后IL-8及MPO达峰值,以A、C组明显。结论TNF-α、IL-8在机械通气致肺损伤中可能发挥重要作用。     

急性肺损伤环氧合酶同工酶mRNA表达的变化及地塞米松的影响

目的 探讨急性肺损伤（ＡＬＩ）环氧合酶（ＣＯＸ）同工酶的变化及地塞米松（ＤＥＸ）的影响。方法 用内毒素（ＬＰＳ）复制ＡＬＩ模型,用逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）测定ＣＯＸ－１和ＣＯＸ－２的ｍＲＮＡ表达。结果 ＣＯＸ－１ｍＲＮＡ表达在对照组、ＬＰＳ组、ＤＥＸ组之间无显著差别（Ｐ〉０．０５）,而ＣＯＸ－２ｍＲＮＡ表达ＬＰＳ组显著高于对照组（３倍）（Ｐ〈０．０１）,ＤＥＸ干预组显著低ＬＰＳ组（Ｐ〈０     

一氧化氮对内毒素刺激肺泡巨噬细胞核因子-κB的影响

目的：探讨一氧化氮（NO）在内毒素刺激肺泡巨噬细胞（PAM）对核因子－kB(NF-kB)活性的影响。方法：用支气管肺泡灌洗法收集PAM进行培养，分正常对照组、脂多糖（LPS）组和NO＋LPS组。用凝胶电泳迁移率改变分析（EMSA）法和酶联免疫吸附（ELISA）法分别检测核提取物中NF－kB活性和细胞培养上清中肿瘤坏死因子－α（TNF-α）含量。结果：LPS组NF－kB活性和TNF－α含量在刺激后1小时明显高于正常对照组；NO＋LPS组NF－kB活性和TNF－α含量在刺激后1小时均显著低于LPS组。结论：LPS诱导PAM的NF－kB活化，导致TNF－α大量释放；NO可抑制NF－kB活化而减少TNF－α的基因表达。     

急性肺损伤核因子-κB的活性变化及糖皮质激素的干预研究

目的：观察急性肺损伤（ALI）肺组织核因子（NF）-kB、肿瘤坏死因子（TNF）-α的活性变化及地塞米松（Dex）的干预作用。方法：采用ALI大鼠模型，实验动物随机分为ALI模型组（8只）、Dex治疗组（8只）、正常对照组（8只），用免疫组织化学法结合原位定量分析检测肺组织NF-kB、IkB-a、TNF-α蛋白表达及相对含量，并进行肺组织的病理学光镜检查。结果：ALI大鼠肺组织NF-kB、TNF-α的蛋白明显升高，I-kB表达显著降低。Dex能明显下调NF-kB、TNF-α的蛋白表达，上调I-kB表达，并能减轻肺组织的损伤程度。结论：NF-kB活化在ALI的发生、发展过程中起着重要作用。Dex发挥抗炎作用，减少肺组织损害，与其对NF-kB的活性和细胞因子的调节作用密切相关。     

创伤感染大鼠巨噬细胞分泌功能的研究

本研究观察大鼠创伤和创感染早期腹腔巨噬细胞全外分泌ＴＮＦ和ＩＬ－１能力的变化及血浆ＴＮＦ活性的变化。研究发现：双肌骨骨折所致创伤未引起巨噬细胞ＴＮＦ和ＩＬ－１分泌的明显变化，而合并减速 后巨噬细胞释放大量的ＴＮＦ和ＩＬ－１，ＴＮ地在伤后６ｈ形成高峰，ＩＬ－１未见明确高峰。研究表明巨噬细胞分泌功能紊乱在创伤感染的发生发展过程中，特别是在病程早期，起重要作用。     

髓系细胞触发受体2在急性肺损伤小鼠肺泡巨噬细胞上的表达

目的：研究髓细胞触发受体2（TREM2）在脂多糖（LPS）致急性肺损伤（ALI）小鼠肺泡巨噬细胞（AM）上的表达,并探讨其作用机制及意义。方法：采用动物实验,以腹腔注射大剂量LPS诱导ALI模型;以腹腔注射生理盐水作为对照。用荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）对AM表达的TREM2mRNA做定量分析。用ELISA对支气管肺泡灌洗液中的肺肿瘤坏死因子（TNF—α）定量检测。结果：AM在正常情况下表达大量的TREM2,在LPS造成急性损伤后表达大幅度下降。TREM2与TNF—α的表达呈负相关（P〈0．001）。结论：TREM2可能在LPS致ALI中起重要的抗炎作用。