人胃癌原代培养体外药敏试验的研究

目的：观察体外原代胃癌细胞对6种化疗药物的敏感性。方法：采用四甲基偶氮唑盐快速比色法测定了84例体外原代胃癌细胞对6种临床常用化疗药物的敏感性。结果：不同病理类型的胃癌对同一种化疗药物的敏感性存在明显的个体差异。其中对阿霉素的共同敏感率为57％，氟脲嘧啶42％，丝裂霉素40％，甲氨喋呤39％，长春新碱35％，顺铂30％。结论：MTT法可作为选择个体化化疗的有效方法，有利于提高对胃癌的综合治疗的疗效。     

人牙髓细胞原代培养方法的研究

目的 确定酶解消化法牙髓细胞原代培养的合适条件与时间。方法 选取年轻患者因正畸拔除的完整和无龋坏牙齿，取出牙髓，分别采用胶原酶一步法消化牙髓组织30分钟及1、2、3小时，胶原酶分步消化法，组织块法和组织块酶解法进行原代培养，倒置显微镜台盼蓝染色观察细胞解离及存活状况，免疫组化法鉴定细胞来源。结果 胰酶消化2小时后，组织块基本未解离，用0.1%胶原酶一步法消化1、2、3小时后组织块均彻底解离为单细胞，基本无残余。0.1%胶原酶消化30分钟后组织块解离不完全，0.1%胶原酶分步法消化1小时后组织解离彻底，台盼蓝染色表明经胶原酶一步法消化获得的牙髓细胞被台盼蓝着色的比例随消化时间减短而下降，分步法消化细胞着色率低于一步法，组织块酶解法的组织块解离，贴附和细胞游出状况均优于组织块法。结论 Ⅰ型胶原酶在37℃，持续振荡条件下消化1小时是彻底酶解消化人牙髓的最短时间，分步酶解法能获得比一步酶解法更高的活细胞数量，而从效果，操作难易和耗时多少等多方面因素综合考虑，组织块酶解法是人牙髓组织原代培养的最佳方法。     

大肠腺瘤细胞原代培养方法的初步研究

近年流行病学、病理形态学和分子遗传学从不同角度揭示了“大肠腺瘤—癌”序列变化过程〔1,2〕,证实腺瘤为癌前病变 〔3〕,对这一癌前病变的研究也越来越受到人们重视。目前关于大肠腺瘤细胞的体外培养 ,国内外报道尚不多 〔4～ 6〕。本研究从人大肠腺瘤组织取材 ,分离培养大肠腺瘤细胞 ,探索其培养方法 ,以期为今后研究大肠腺瘤的体外试验奠定初步的方法学基础。1　材料与方法1.1　试剂与设备 :透明质酸酶、胶原酶 型和 PI染料为 Sigma公司产品 ,DMEM培养液、胎牛血清为 GIB-COL 公司产品 ,角蛋白抗体 (AE1/ AE3)为 DAKO公司产品…     

大肠癌细胞原代培养方法的研究进展

大肠癌细胞原代培养目前尚未建立一种合理、稳定、高效的培养模式,通过查阅国内外关于大肠癌细胞原代培养方法的文献,对常用方法及最新方法进行概括、分析和总结,得出结论:目前常用的组织块法、机械分离法、胰酶消化法和胶原酶消化法培养效果均不理想,而Liberase DH消化法有望成为一种大肠癌细胞原代培养的有效方法,但可行性有待进一步探究.     

人大肠癌细胞原代培养方法的改进

目的:建立一种简单方便但高效的人大肠癌细胞原代培养方法。方法:无菌条件下切取肿瘤组织,比较不同培养基、细胞培养方法和细胞纯化方法对大肠癌细胞原代培养过程的影响,通过免疫细胞化学方法检测表面标记物的表达情况,观察原代的生物学特性。结果:采用改良的DMEM培养基,用组织块培养法和胰酶消化法纯化培养的细胞,大肠癌细胞原代培养的成功率较高。免疫细胞化学检测培养细胞来源于上皮组织。结论:应用改进的人大肠癌细胞原代培养方法,操作简便,重复性好,可满足实验要求。     

细胞的原代培养

细胞生物学是生命科学四大前沿学科之一。近年来,随着该学科的迅猛发展,涌现出大量引人注目的新成果。许多新的理论、概念被广泛应用于医学领域,对医学的发展起到巨大的推动作用。动物细胞的原代培养,作为细胞生物学的一项重要实验技术,     

人乳腺癌细胞原代培养体外药敏试验及Her-2、TopoⅡ的表达

目的:研究4种化疗药物对原代培养人乳腺癌细胞的敏感性,结合Her-2、TopoⅡ免疫组化表达结果,分析药敏结果与表达的相关性及临床意义。方法:利用CCK8法检测4种化疗药物对乳腺癌原代细胞生长的影响,免疫组织化学方法检测细胞中Her-2、TopoⅡ的表达情况。结果:⑴4种化疗药物在不同浓度下对乳腺癌细胞的抑制率排序为:紫杉醇>长春瑞滨>阿霉素>卡铂,紫杉醇剂量与疗效之间有量效关系,而阿霉素、长春瑞滨和卡铂则不存在量效关系;⑵Her-2、TopoⅡ阳性表达率分别为25.4%和53.9%;⑶紫杉醇、长春瑞滨、阿霉素对Her-2阳性、TopoⅡ阳性细胞的生长有显著的抑制作用(P<0.05),而卡铂则无显著性抑制作用。结论:原代培养肿瘤细胞的体外药敏试验对临床肿瘤的化疗有很强的指导作用,Her-2、TopoⅡ可作为判断预后很好参考指标。     

大肠腺瘤细胞原代培养方法的改进

目的　对大肠腺瘤细胞原代培养的方法作进一步的改进。方法　在取材、培养条件和细胞纯化等方面对腺瘤细胞原代培养的方法作了进一步的优化和改进。结果　 32枚息肉 ,2 6枚培养成功 ,6枚失败。培养时间为 5～ 2 3天 ,可长满瓶壁的 5 0 %～ 95 %。光镜形态学、免疫组化法和电镜鉴定培养细胞为上皮来源。结论　改进后的大肠腺瘤细胞原代培养法基本克服了细胞培养中的细菌及成纤维细胞的污染问题 ,增加了可获得的细胞数 ,优于改进前的原代培养方法     

MTT法检测乳腺癌细胞对化疗药物敏感性的研究

目的：探讨3-（4,5）-2-噻唑-（2,5）-二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）药敏试验在指导临床乳腺癌化疗中的作用。方法：应用MTT法检测50例乳腺癌新鲜标本肿瘤细胞对10种化疗药物的敏感度。结果：对乳腺癌细胞抑制率强的药物为PTX、NVB、VP-16、5-FU、DDP,对乳腺癌细胞抑制率较弱的化疗药物为VCR、ADM、MTX、MMC、HCPT。结论：MTT体外药敏试验对指导临床乳腺癌个体化治疗具有重要意义。     

大肠腺瘤细胞原代培养方法的改进

目的：对大肠腺瘤细胞原代培养的方法作进一步的改进，方法：在取材，培养条件和细胞纯化等方面对腺瘤细胞原代培养的方法作了进一步的优化和改进。结果：32枚息肉，26枚培养成功，6枚失败，培养时间为5－23天，可长满瓶壁的50％－95％，光镜形态学，免疫组化法和电镜鉴定培养细胞为上皮来源，结论：改进后的大肠腺瘤细胞原代培养法基本克服了细胞培养中的细菌及成纤维细胞的污染问题，增加了可获得的细胞数，优于改进前的原代培养方法。     

人子宫内膜细胞原代培养方法的改良

目的 寻求一种简便高效的人子宫内膜上皮细胞和间质细胞分离、纯化与鉴定方法,建立稳定的子宫内膜细胞体外培养体系.方法 简化Ryan等的子宫内膜细胞原代培养方法的取材,分离和培养条件,分离出高纯度的子宫内膜上皮细胞和间质细胞进行体外培养和传代.结果 培养成功的子宫内膜上皮细胞与间质细胞均可稳定传代,体外生长10～50 d,纯度均达90%以上.结论 该方法简便高效,可建立稳定的人子宫内膜细胞体外培养体系.     

人脑星形细胞瘤细胞原代培养方法的改良

目的：探讨更为简单,廉价的人星形细胞瘤细胞原代培养方法。方法：应用机械分散法,对不同级别的新鲜星形细胞瘤手术标本进行肿瘤细胞原代培养及传代培养,通过调整培养参数,观察肿瘤细胞的生长情况,并从形态学及细胞免疫组化染色等方法进行研究。结果：Ⅱ级及以上的星形细胞瘤均成功进行原代细胞培养,Ⅲ及Ⅳ级星形细胞瘤还成功获得传代培养,并表达免疫组化GFAP,不表达Ⅳ胶原。结论：星形细胞瘤细胞的原代培养可以用机械分散法成功培养,该方法简单易操作,重复性好且价格低廉,可以较好的满足实验要求。     

小鼠血管平滑肌细胞原代培养方法的改良

目的建立一种简单方便但高效的血管平滑肌细胞原代培养方法。方法改良酶消化法。结果用该法培养细胞传代生长快,细胞纯度达98%以上,足以满足各种细胞试验需求。结论与传统方法相比该法简单经济,试验成功率高,节省材料和时间,而且可获得更多纯度较高的细胞。     

新生大鼠大脑皮层神经元原代培养方法

目的：介绍一种简单、生长良好的大脑皮层神经元的培养方法。方法：急性分离新生鼠大脑皮层制作单细胞悬液进行原代培养,观察培养神经元的生长形态,并用免疫荧光化学法对其进行鉴定。结果：培养的神经元细胞清晰,光晕明显,生长良好,免疫荧光鉴定结果表明该方法培养的细胞纯度较高,能够达到实验研究的要求。结论：该培养方法简单、可靠,是神经元培养的良好方法。     

原代培养乳鼠窦房结细胞的形态学研究

目的 通过对原代培养乳鼠窦房结细胞进行光、电镜观察，了解培养窦房结细胞的形态结构特征。方法 取新生24h Wistar乳鼠的窦房结组织，用差速贴壁结合BrdU处理进行原代细胞纯化培养。结果 在培养的窦房结细胞中观察到有3种不同形态的细胞，即梭形细胞、三角形细胞与不规则形细胞，其中梭形细胞最多，博动频率最快，肌原纤维稀疏排列紊乱，细胞器不发达；三角形细胞与心房肌三角形细胞特征相似。结论 在培养的乳鼠窦房结细胞中，细胞体积小搏动频率快的细胞即是窦房结的起搏细胞。     

原代肾细胞体外培养及其在药物毒理学中的应用

近年来,肾细胞体外模型的使用非常广泛,从外源性化合物的毒性筛选、危险性评价到肾损伤机制的研究都广泛地应用到离体肾细胞模型.原代肾细胞的体外培养是研究肾脏疾病及药物对肾毒性的一项重要技术,目前该细胞分离方法 有酶分离法、化学分离法、筛网分离法、显微解剖分离法、流式细胞仪分离法、免疫分离法等.本文就原代肾细胞体外培养及其在药物毒理学中的应用综述如下.     

原代喉癌细胞药敏实验研究

目的：化疗前进行肿瘤细胞药敏试验，以提高疗效。方法：应用MTT比色法和流式细胞术对手术切除的喉癌组织制备单细胞悬液，体外培养，进行4种抗癌药物敏感性试验和细胞周期检测。结果：5－FU、MTX对喉癌细胞敏感性强，流式细胞仪检测，喉癌细胞G1期细胞增多，S期细胞 减少。结论：在化疗前进行肿瘤细胞药敏试验，选择高效药物用于同一患者，对于提高喉癌的疗效，减少毒副作用的产生具有重要意义和实际应用价值。     

皮肤细胞原代培养技术用于实验教学初探

本探讨了皮肤细胞原代培养技术应用于细胞培养实验课教学，具有较好的教学效果，既可以使学生观察到上皮型和成纤维型两种形态的细胞，更有助于提高学员的实验技能。