筑巢式PCR等多项指标对小儿急性白血病微量残留病的监测

①目的　探讨采用筑巢式聚合酶链反应（Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ）等多项指标监测小儿急性白血病（ＡＬ）微量残留病（ＭＲＤ）的临床意义。②方法　对１５２ 例ＡＬ在形态学、免疫学和细胞遗传学（ＭＩＣ）分型诊断的基础上,结合Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ,姐妹染色单体交换（ＳＣＥ）、染色体核型分析方法进行ＭＲＤ监测。③结果　对５８ 例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）进行了Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）Ｖδ２Ｄδ３ 基因重排监测,其中８３％ 的Ｂ－ＡＬＬ和２５％ 的Ｔ－ＡＬＬ具有此基因重排,检测灵敏度为１０－ ５～１０－ ６ ．对４４ 例ＡＬＬ进行了ＭＲＤ动态监测,结果显示化疗期间ＰＣＲ由阴性转为阳性或持续阳性者,易引起骨髓复发、死亡。ＰＣＲ转阴时间有明显个体差异性。持续完全缓解３ 年以上的ＡＬＬ病儿ＰＣＲ持续阴性可作为停药治疗的可靠指标。对７６ 例ＡＬ进行了ＳＣＥ动态监测,结果表明ＳＣＥ频率变化与疾病的严重程度呈平行关系。对６１ 例ＡＬ进行了染色体核型动态监测,结果表明初发ＡＬ染色体核型正常者亦有ＤＮＡ 严重损伤。④结论　在ＭＩＣ分型诊断的基础上,采用Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ,ＳＣＥ,染色体核型分析等多项指标进行ＡＬ的ＭＲＤ动态监测、综合分析评价,对指导治疗、预测复发及判断     

急性淋巴细胞白血病微量残留病的PCR监测

①目的探讨急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）微量残留病（ＭＲＤ）检测的临床意义。②方法应用筑巢式多聚酶链反应（ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）对３２例ＡＬＬ进行Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）Ｖδ２Ｄδ３基因重排检测。③结果１８例Ｂ系ＡＬＬ中有１５例（７２．２％）、４例Ｔ系ＡＬＬ中有１例（２５．０％）存在ＴＣＲＶδ２Ｄδ３基因重排。同时对１６例进行３９例次微量残留病动态监测，其中６例ＭＲＤ－ＰＣＲ阴性病人随访５．１７～１６．１７年，无１例复发；１０例ＭＲＤ－ＰＣＲ阳性者，２例分别于阳性后０．２５，１．００年骨髓复发，１例有复发倾向，余７例随访４．３３～６．２５年无复发。④结论ＭＲＤ－ＰＣＲ阴性者预后良好，可望长期生存，治疗时应以ＭＲＤ－ＰＣＲ转阴为停止化疗的可靠指标，对ＭＲＤ－ＰＣＲ阳性者应定期监测ＭＲＤ变化，结合病人情况进行综合评价。     

白血病患者外周血白细胞介素2膜受体的表达

目的为探讨白血病患者外周血单个核细胞（ＰＭＮＣ）上白细胞介素２膜受体（ｍＩＬ－２Ｒ）的表达及临床价值。方法采用流式细胞仪对１４例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ），２６例急性髓细胞白血病（ＡＭＬ），１９例有骨髓异常增生综合症病史的ＡＭＬ（ＭＤＳ－ＡＭＬ）及２６例慢粒急变（ＣＭＬ·ＢＣ）患者的ＰＭＮＣ上ｍＩＬ－２Ｒ的表达进行了检测。结果ＭＤＳ－ＡＭＬ及慢粒急粒变患者ｍＩＬ－２Ｒ的表达明显高于ＡＭＬ（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０５）。慢粒急淋变患者ｍＩＬ－２Ｒ的表达明显高于ＡＬＬ（Ｐ＜０．０５）。ｍＩＬ－２Ｒ阳性ＡＭＬ及ＡＬＬ患者对化疗反应性较差。结论ｍＩＬ－２Ｒ的表达可能为ＭＤＳ－ＡＭＬ，ＣＭＬ·ＢＣ的一个特征，并可作为估计ＡＭＬ、ＡＬＬ疗效的一项指标     

小儿急性白血病MTS1基因缺乏及点突变的研究

为探讨ＭＴＳ１基因突变与恶性血液病的关系，应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和ＤＮＡ印迹方法检测３５例急性白血病（ＡＬ）患儿ＭＴＳ１基因改变。结果显示：急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）缺乏（包括点突变）为２５．８％（８／１３）。Ｂ－ＡＬＬ纯合缺失为１６％（４／２５），Ｔ－ＡＬ为３３％（２／６）。点突变则两型各１例。结果证明：我国儿童ＡＬＬ ＭＴＳ１基因失活的存在，Ｔ－ＡＬ高于Ｂ－ＡＬＬ，点突变仅见于少数病例。该基     

急性淋巴细胞白血病细胞分化与花生凝集素受体表达

用系列单抗与标记的花生凝集素（ＰＮＡ）对３８例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）细胞行免疫分型与确定分化阶段，检测ＡＬＬ细胞ＰＮＡ受体表达情况，与正常成熟淋巴细胞（ＮＭＬ）对照。发现Ｔ－ＡＬＬ，Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ细胞大多表达ＰＮＡ受体，而ＮＭＬ细胞极少表达ＰＮＡ受体，两者有显著差别（Ｐ＜０．０１）。经神经氨酸酶（ＮＡ）预处理后，Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ与ＮＭＬ细胞ＰＮＡ受体表达明显增加（Ｐ＜０．０５），以ＮＭＬ为甚，而Ｔ－ＡＬＬ细胞ＮＡ处理前后ＰＮＡ受体表达未见明显区别；ＡＬＬ细胞ＰＮＡ受体表达与细胞分化程度存在显著的等级相关（ｒ８＝－０．３５７，Ｐ＜０．０５）。结果表明ＡＬＬ细胞上大多存在Ｄ－半乳糖－β（１－３）－Ｎ－乙酰氨基半乳糖基（Ｄ－Ｇａｌ－β（１－３）－Ｎ－ＧａｌＮＡＣ）；ＡＬＬ细胞分化程度越高。细胞上Ｄ－Ｇａｌ－β（１－３）－Ｎ－ＧａｌＮＡＣ连接唾液酸末端越多。     

急性淋巴细胞白血病免疫分型研究

使用一组单克隆抗体及抗ＩｇＭ多抗对２４例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）细胞表面抗原标志进行分析。结果表明：急性非Ｔ细胞白血病（Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ）为６２．５０％，急性Ｔ细胞白血病（Ｔ－ＡＬＬ）为２９．１７％，急性未分化型白血病（ＡＵＬ）为４．１７％，急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ－Ⅱ）为４．１７％。Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ－Ⅰ型以ＨＬＡ－ＤＰ＋，Ⅱ型以ＣＤ１９＋，Ⅲ型以ＣＤ１０＋，Ⅳ型以ＣＤ２０＋，Ⅵ型以ＳＩｇＭ＋为诊断条件。Ｔ－ＡＬＬ－Ⅰ期以ＣＤ７＋、Ⅲ期以ＣＤ３＋、ＣＤ４＋或ＣＤ８＋为诊断条件，其它表面抗原变化不定。Ｔ－ＡＬＬ中ＨＬＡ－ＤＰ表达率达４２．８６％。２４例ＡＬＬ中３例为Ｂ－Ｔ杂合型白血病，占１２．５０％，均分布在Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ之中。ＦＡＢ形态学分型符合率为９５．６５％。非诊断性表面抗原标志的变化是进一步分亚型的依据，也可能与药物敏感性等治疗和预后相关，值得进一步探讨     

急性淋巴细胞白血病免疫表型的分析

采用改良的ＡＢＣ－ＡＰ法对１２０例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）患者的骨髓涂片作免疫学检查，研究ＡＬＬ的免疫表型，结果表明，成人以Ｌ２型／Ｂ－ＡＬＬ为主（６６％），儿童以Ｌ１型／Ｂ－ＡＬＬ为主（５８％），Ｌ３型ＡＬＬ均为Ｂ－ＡＬＬ。Ｔ－ＡＬＬ经较低成人和儿童Ｔ－ＡＬＬ患者均以男性居多，研究显示，Ｂ－ＡＬＬ以ＣＤ１０、ＣＤ１９、ＣＤ２２和ＨＬＡ－ＤＲ高频率表达为主；Ｔ－ＡＬＬ以ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ５高     

急性淋巴细胞性白血病完全缓解期免疫功能,微小残留病及预…

目的 观察急性淋巴细胞性白血病（ＡＬＬ）完全缓解期免疫功能对微小残留病（ＭＲＤ）及预后的影响，。方法 检测ＩｇＨ和ＴＣＲｓ基因重排以反映ＭＲＤ，以外周血Ｔ细胞亚群、ＮＫ细胞、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ｓＩＬ－２Ｒ、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－α等指标反映免疫功能，系统观察２５例ＡＬＬ患者完全缓解免疫功能与ＭＲＤ的变化。结果 刚获完全缓解时，ＣＤ４细胞、ＮＫ细胞、ＩＬ－２减少，ＴＮＦ－α，ｓＩＬ－２Ｒ、ＣＤｓ细胞     

急性白血病患者免疫学表型分析

采用间接免疫荧光技术对４９例急性白血病患者进行免疫学表型分析，结果为２４例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）中，共发现Ｔ－ＡＬＬ和Ｃ－ＡＬＬ各８例，Ｎ－ＡＬＬ６例，前Ｂ－ＡＬＬ和Ｂ－ＡＬＬ各１例；２５例急性非淋巴细胞白血病中，有２例Ｍ-４和３例Ｍ-５表达ＣＤ-（１４）。２４例ＡＬＬ均不表达ＣＤ-（１３）或ＣＤ-（３３）。     

急性淋巴细胞白血病中T细胞受体δ基因Vδ2－Dδ3及Dδ2－Dδ3重排结合部顺序的研究

为了探讨中国人Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）δ基因的Ｖ－Ｄ－Ｊ结合部顺序（Ｎ顺序）的组成，及其在急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）患者中的重组规律，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对４６例ＡＬＬ标本进行了ＴＣＲδ基因重排的研究，发现１６例患者出现Ｔ细胞受体δ基因不完全重排，其中１３例为Ｖδ２－（Ｄ）－Ｄδ３重排，３例为Ｖδ２－（Ｄ）－Ｄδ３合并Ｄδ２－Ｄδ３重排。进而应用ＤＮＡ直接测序技术，对这１６例ＡＬＬ标本ＴＣＲδ基因重排结合部进行了分析，证实由于Ｖδ２或Ｄδ２的３＇端和Ｄδ３的５＇端碱基缺失、部分Ｄδ１或Ｄδ２顺序存在、Ｎ顺序的插入以及未发生缺失的Ｖδ２，Ｄδ２或Ｄδ３编码顺序端Ｐ核昔酸的非随机插入，使得每例患者的结合部顺序均存在高度个体特异性。此外，对Ｎ顺序碱基成份的分析表明，其脱氧鸟嘌呤和脱氧胞嘧啶含量大于７０％，而脱氧腺嘌呤和脱氧胸腺嘧啶小于３０％，说明碱基插入并非完全随机。本文结果提示ＴＣＲδ基因重排是淋巴细胞发育中的一个早期事件，其结合部顺序的测定，可作为检测ＡＬＬ患者微小残留病变的特异性克隆标志。     

T大颗粒淋巴细胞白血病

目的：为了进一步认识Ｔ大颗淋巴细胞白血病（Ｔ－ＬＧＬＬ）的临床及生物学特性,提高诊断水平。方法：利用细胞形态学、细胞化学及免疫发型检查分析３例Ｔ－ＬＧＬＬ。结果：３例有朋颗粒淋巴细胞（ＬＧＬ）明显升高。细胞化学染色：ＰＯＸ（－）,ＰＡＳ阳性率１００％,ＡＮＡＥ：Ｔ样酶型（＋）,ＡＣＰ（＋）,ＴＲＡＰ（－）,免疫表型ＣＤ２（＋）,ＣＤ３（＋）,ＣＤ４（－）,ＣＤ８（＋）,ＣＤ５７（＋）,ＴＣＲαβ（     

急性白血病患者免疫学表型分析

采用间接免疫荧光技术对４９例急性白血病患者进行免疫学表型分析，结果为２４例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）中，共发现Ｔ－ＡＬＬ和Ｃ－ＡＬＬ各８例，Ｎ－ＡＬＬ６例，前Ｂ－ＡＬＬ和Ｂ－ＡＬＬ各１例，２５例急性非淋巴细胞白血病中，有２例Ｍ４和３例Ｍ５表达ＣＤ１４。２４例ＡＬＬ均不表达ＣＤ１３或ＣＤ３３。     

急性淋巴细胞性白血病完全缓解期免疫功能、微小残留病及预后关系的研究

目的观察急性淋巴细胞性白血病（ＡＬＬ）完全缓解期免疫功能对微小残留病（ＭＲＤ）及预后的影响。方法检测ＩｇＨ和ＴＣＲｓ基因重排以反映ＭＲＤ，以外周血Ｔ细胞亚群、ＮＫ细胞、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ｓＩＬ－２Ｒ、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－α等指标反映免疫功能，系统观察２５例ＡＬＬ患者完全缓解期免疫功能与ＭＲＤ的变化。结果刚获完全缓解时，ＣＤ＋４细胞、ＮＫ细胞、ＩＬ－２减少，ＴＮＦ－α，ｓＩＬ－２Ｒ、ＣＤ＋８细胞增多，其后，上述异常有所恢复，ＭＲＤ转阴者的恢复程度优于ＭＲＤ未转阴者，ＭＲＤ快速转阴者的恢复程度又优于缓慢转阴者。结论患者免疫功能、ＭＲＤ转归及预后之间密切相关。     

急性淋巴细胞白血病微量残留病的PCR监测

探讨急性淋巴细胞白血病微量残留病检测的临床意义。方法：应用筑巢式多聚酶链反应对３２例ＡＬＬ进行了Ｔ细胞受体Ｖδ２Ｄδ３基因重排检测。结果 １８例Ｂ系ＡＬＬ中有１５例，４例Ｔ系ＡＬＬ中有１例，存在ＴＣＲＶδ２δ３基因重排。同时对１６例进行３９例次微量残留病动态监测，其中６例ＭＲＤ－ＰＣＲ阴性病人随访５．１７－１６．１７年，无１例复发，１０例ＭＲＤ－ＰＣＲ阳性者，２例分别于阳性后０．２５，１．００年骨     

儿童急性淋巴细胞性白血病102例疗效分析

目的 探讨早期强烈连续化疗治疗儿童急性淋巴细胞白血病的长期无病生存率（ＤＦＳ）。方法 对１０２例儿童急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）,依次进行①ＶＤＬＰ诱导治疗,②ＣＡＴ巩固治疗,③ＨＤＭＴＸ髓外白血病防治,④ＶＤＬＰ＋ＥＡ早期强化,⑤维持与定期强化治疗５ａ。结果 初治诱导治疗的完全缓解（ＣＲ）率９６％,ＨＲ－ＡＬＬ和ＳＲ－ＡＬＬ的５ａ持续缓解率（ＣＣＲ）或ＤＦＳ分别为６２．１％和６５．３％。结论 在     

IgH超基因家族及其相关基因在急性淋巴细胞白血病微小残留病检测中的应用

探讨免疫球蛋白超基因家族及其相关基因在急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）微小残留病（ＭＲＤ）检测中的应用。方法应用免疫学和聚合酶链反应技术。对１５例ＡＬＬ进行免疫表型测定。结果发现其中１１例为Ｂ－ＡＬＬ，３例为Ｔ－ＡＬＬ。ＤＮＡＳｏｕｔｈｅｒｎ分析发现，１１例Ｂ－ＡＬＬ均有ＩｇＨ基因的重排，且有ＩｇＨ基因重排的病例均能用ＩｇＨ基因ＣＤＲ３区及Ｊ区引物得到聚合酶链反应扩增条带。对其中３例Ｂ－ＡＬＬ的ＩｇＨ基因Ｖ－Ｄ－Ｊ结合部区域进行了顺序分析，并合成了２个针对ＩｇＨＶ－Ｄ－Ｊ结合部的寡核苷酸作为探针用来检测ＭＲＤ，显示其灵敏度为１０－４。另外还对１例Ｔ－ＡＬＬ病例同时进行了ＴＣＲγ基因和ＳＩＬ－ＴＡＬ－１融合基因在ＭＲＤ检测中的比较研究，显示二者具有相同的ＭＲＤ阳性检出率，但后者的敏感度更高。结论ＩｇＨ基因重排及其ＴＣＲ基因重排、肿瘤融合基因等均可作为ＡＬＬ患者ＭＲＤ检测的特异性标记     

ONCOGENIC TRANSFORMATION OF SYRIAN HAMSTER EMBRYO CELLS BY 5．3－MeV α PARTICLES AND A TUMOR PROMOTER PHORBOL ESTER

ＯＮＣＯＧＥＮＩＣＴＲＡＮＳＦＯＲＭＡＴＩＯＮＯＦＳＹＲＩＡＮＨＡＭＳＴＥＲＥＭＢＲＹＯＣＥＬＬＳＢＹ５．３－ＭｅＶαＰＡＲＴＩＣＬＥＳＡＮＤＡＴＵＭＯＲＰＲＯＭＯＴＥＲＰＨＯＲＢＯＬＥＳＴＥＲＳｈｏｕＪｉａｎｇ（寿江）；ＧｏｎｇＹｉｆｅｎ（龚诒芬）...     

急性白血病复发时克隆演化的研究

为研究克隆演化在急性白血病复发发病机制中作用，应用聚合酶锭反应（ＰＣＲ）联合Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测７５例及其中３６例复发急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）ＩｇＨ重排基因，ＰＣＲ检测８１便及其中３５例复发急性淋巴细胞病（ＡＬＬ）ＩｇＨ、ＴＣＲＶｘ２－Ｊｘ、ＴＣＲＶδ－Ｄδ３重排基因及ｂｃｒ／ａｂｌｍＲＮＡ，配合形态学和免疫学检查发现８例ＡＬＬ（２２．９％）和４例（１１．１％）ＡＮＬＬ复发时形态学，免     

急性淋巴细胞白血病细胞分化与花生凝集素受体表达

用系列单抗与标记的花生凝集素（ＰＮＡ）对３８例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）细胞行免疫分型与确定分化阶段，检测ＡＬＬ细胞ＰＮＡ受体表达情况，与正常成熟淋巴细胞（ＮＭＬ）对照。发现Ｔ－ＡＬＬ，Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ细胞大多表达ＰＮＡ受体，而ＮＭＬ细胞极少表达ＰＮＡ受体，两者有显著差异（Ｐ〈０．０１）。经神经氨酸酶（ＮＡ）预处理后，Ｎｏｎ－Ｔ－ＡＬＬ与ＮＭＬ细胞ＰＮＡ受体表达明显增加（Ｐ〈０．０５），以ＮＭ     

PCR扩增IgH和TCR_β基因重排在检测淋巴细胞白血病微小残留病中的应用

利用ＩｇＨ和ＴＣＲ＿β克隆性基因重排原理，用多聚酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ．ＰＣＲ）技术检测小儿急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）骨髓和外周血共１３例。结果：ＡＬＬ初治的２例患儿ＰＣＲ检测全部呈现阳性特异性单带。ＡＬＬ完全缓解（ＣＲ）的１１例患儿中阳性７例，阴性４例，其中２例骨髓移植（ＢＭＴ）患儿移植前ＰＣＲ阳性，移植后转为阴性。１例自体骨髓移植（ａｕｔｏ－ＢＭＴ）患儿于移植后２个月时ＰＣＲ检测又重新出现阳性，但临床无复发现象。４例对照者ＰＣＲ均为阴性。结果表明ＰＣＲ技术具有简便、快速、敏感、特异性强等优点，在检测微小残留（ＭＲＤ）中具有广阔前景。