脐血清体外对急性白血病病儿化疗后造血细胞增殖的影响

①目的　探讨脐血清体外对急性白血病化疗后骨髓抑制期造血细胞增殖的影响。②方法　采用体外粒单细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）培养法,观察正常成人血清和脐血清,对正常造血细胞和急性白血病化疗后抑制期骨髓造血细胞增殖的影响。③结果　脐血清组的正常骨髓ＣＦＵ－ＧＭ 产率明显高于成人血清组（ｔ＝ ６．９９３,Ｐ＜０．０１）,脐血清组的白血病化疗后骨髓ＣＦＵ－ＧＭ 产率亦高于成人血清组（ｔ＝ ３．０６０,Ｐ＜ ０．０５）。④结论　脐血清体外能促进正常骨髓和白血病化疗后抑制期骨髓造血细胞的增殖。     

脐带血、成人外周血的干祖细胞检测及CFU-GM与CD34~+细胞百分率相关性研究

本文利用桥联酶标ＡＰＡＡＰ技术，用ＣＤ３４＋单抗ＱＢＥＮＤ１０标记脐血和外周血造血干细胞，同时采用体外半固体培养法检测脐血和外周血ＣＦＵ－ＧＭ产率血，并对两者的相关性进行了分析。结果表明：（１）体外培养ＣＦＵ－ＧＭ产率，脐血为９６．０６±６３．３７，外周血为７．２４±６．２０，两者差异显著，Ｐ＜０．０１。（２）ＣＤ３４＋细胞百分率，脐血为１．６９±１．０６％，外周血为０．００６５＋０．００４７％，两者差异显著，Ｐ＜０．０１。（３）脐血ＣＦＵ－ＧＭ产率与ＣＤ３４＋细胞百分率呈正相关，Ｒ＝０．７５９，Ｐ＜０．０１，回归方程Ｙ＝０．０１２７Ｘ＋０．４６４９。外周血不相关Ｒ＝０．０４４７，Ｐ＜０．０５。提示采用桥联酶标法检测ＣＤ３４＋细胞百分率可以代替ＣＦＵ－ＧＭ用于预测脐血造血重建能力，由于该法简便、快速、敏捷，不需昂贵设备，值得推广和应用     

脐血血清对正常及白血病骨髓粒－单祖细胞生长的影响

利用粒－单祖细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）的体外培养，观察脐血血清（ＵＣＳ）对正常及白血病骨髓造血祖细胞生长的影响，结果表明：ＵＣＳ对正常及急性白血病（ＡＬ）患者完全缓解的骨髓ＣＦＵ－ＧＭ形成有一定增殖作用，而对初发／复发未治ＡＬ患者的骨髓ＣＦＵ－ＧＭ形成无类似作用。     

脐血造血干细胞特性研究

应用造血祖细胞体外培养和流式细胞术（ＦＣＭ），观察了脐血中粒一单系祖细胞（ＣＰＵ－ＧＭ）、红系祖细胞（ＢＦＵ－Ｅ）的数量和特性，并对其细胞增殖周期和骨贿及成人外周血做了比较，实验提示脐血中含丰富的ＣＦＵ－ＧＭ和ＢＦＵ－Ｅ，其数量低于成人骨髓而大大超过外周血水平，脐血红系祖细胞对ＥＰＯ、ＢＰＡ表现出更高的敏感性，而粒系祖细胞对ＣＳＦ的敏感性和骨髓比较似无明显差别．脐血Ｓ期、Ｇ２＋Ｍ期，及Ｓ＋Ｇ２Ｍ期细胞数均明显低于骨髓，虽略高于外周血各期细胞数，但差别无显著性意义．     

兰索拉唑对乙醇所致大鼠急性胃粘膜损伤时炎性介质的影响

探讨Ｐ物质（ＳＰ）与造血的关系。方法：采用甲基纤维素半固体造血祖细胞培养法检测正常血浓度的ＳＰ以及不同浓度的ＳＰ对骨髓ＣＦＵ－ＧＭ和ＣＦＵ－Ｃ_（２１）的作用。 结果：１０－１０　ｍｏｌ·Ｌ~（－１）和１０~（－１１）ｍｏｌ·Ｌ~（－１）ＳＰ组ＣＦＵ－ＧＭ的产率分别为１９３±１９和２０６±４０,与对照（１３６±１７）相比具有显著差异（Ｐ＜０．０５）;１０~（－１０）ｍｏｌ·Ｌ~（－１）和１０~（－１１）ｍｏｌ·Ｌ~（－１）ＳＰ对 ＣＦＵ－Ｃ_（２１）也有明显刺激作用,前者 ＣＦＵ－Ｃ_（２１）为 １４３±１６,后者为 １５３±１５,与对照（８０．３± ３１）相比具有显著性差异（Ｐ＜０．０５）;高于或低于上述浓度时, ＳＰ对 ＣＦＵ－ＧＭ和 ＣＦＵ－Ｃ_（２１）的刺激作用均减弱,与对照相比无显著性差异（ Ｐ＞ ０． ０５）。结论：适当浓度的 ＳＰ对体外 ＣＦＵ－ＧＭ和 ＣＦＵ－Ｃ_（２１）具有明显的刺激效应。ＳＰ对正常骨髓造血具有重要的意义。     

脐血中造血细胞的分离与祖细胞培养

目的 通过脐血粒单系造血祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）培养，探讨其临床应用前景与价值。方法 琼脂半固体培养法，比较脐血、骨髓、外周血ＣＦＵ－ＧＭ，比较脐血４℃保存２，４，６天后，ＣＦＵ－ＧＭ回收率。结果 脐血ＣＦＵ－ＧＭ的平均产率接近骨髓，明显高于成人外周血，脐血４℃保存，ＣＦＵ－ＧＭ回收率２天为８５．５％，４天为３５．１％，６天为１０．１％，结论：脐血中富含造血干／祖细胞，为造血细胞移植提供新的来源。脐     

脐带血,成人外周血的干祖细胞检测及CFU—GM与CD34^＋细胞百分率？…

本文利用桥联酶标ＡＰＡＡＰ技术，用ＣＤ３４＾＋单抗ＱＢＥＮＤ１０标记脐血和外周血造血干细胞，同时采用体外半固体培养法检测脐血和外周血ＣＦＵ－ＧＭ产率血，并对两者的相关性进行了分析。结果表明：（１）体外培养ＣＦＵ－ＧＭ产率，脐血为９６．０６±６３．３７，外周血为７．２４±６．２０，两者差异显著，Ｐ〈０．０１。（２）ＣＤ３４＾＋细胞百分率，脐血为１．６９±１．０６％，外周血为０．００６５＋０．００４７     

人脐血造血祖细胞体外培养的研究

应用体外培养方法对人脐血造血祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｅ、ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－Ｆ）数量及其特征进行观察，并与成人外周血及骨髓相比较。结果显示：①脐血中ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｅ、ＢＦＵ－Ｅ数量约相当于成人外周血的７～１８倍；ＣＦＵ－ＧＭ及ＣＦＵ－Ｅ数量与骨髓相比无统计学差异，但ＢＦＵ－Ｅ低于骨髓；②脐血中ＣＦＵ－ＧＭ的集落大小、细胞构成、集落生长曲线明显不同于成人外周血及骨髓；③脐血红系祖细胞生长模式近似于骨髓；④脐血中可培养出ＣＦＵ－Ｆ，其数量约为骨髓的２／５，而外周血中则无ＣＦＵ－Ｆ形成。提示人脐血中富含造血干／祖细胞，而且在数量和特征上明显不同于外周血和骨髓，在移植中可能更具有重建骨髓造血的能力。     

人脐血粒单系及在纤维系祖细胞的体外培养

采用体外单层半固体琼脂培养法及液体培养法检测了脐知中ＣＦＵ－ＧＭ和ＣＦＵ－Ｆ并与成人骨髓和外周血对照，结果显示，脐血培养７ｄＣＦＵ－ＧＭ产率约相当于成人外周血的５～６倍，但低于骨髓；培养１４ｄ的产率略高于骨髓，与骨髓培养７ｄ结果相比无血中可培养出ＣＦＵ－Ｆ，但产率仅为骨髓的１／５，而外周血中则无ＣＦＵ－Ｆ形成，提示人脐血富含造血祖细胞，且有不同于骨髓及外周血的性质。     

复血康对小鼠骨髓造血祖细胞作用的实验研究

利用扩散盒方法观察了复血康煎剂对正常小鼠及骨髓抑制小鼠ＣＦＵ－Ｄ和ＣＦＵ－Ｅ的影响。结果表明,复血康煎剂不仅可提高正常小鼠ＣＦＵ－Ｄ及ＣＦＵ－Ｅ的产率,与正常对照组比较Ｐ＜０．０１,还可提高环磷酰胺所致骨髓抑制小鼠的ＣＦＵ－Ｄ及ＣＦＵ－Ｅ的产率,与模型对照组比较Ｐ＜０．００１,与正常组比较Ｐ＜０．０１。说明复血康煎剂能促进骨髓造血细胞的增殖、分化,并能促进损伤的骨髓造血祖细胞的增殖、分化,使其受损伤的骨髓恢复造血,推测复血康煎剂用于治疗再生障碍性贫血的临床疗效是可靠的。     

二十碳五烯酸对卵巢切除小鼠骨髓造血干细胞及基质细胞分化增殖功能…

以卵巢切除（ＯＶＸ）小鼠模型，观察二十碳五烯酸（ＥＰＡ）对骨髓造血干细胞和基质细胞分化增殖功能的调节作用，结果ＯＶＸ组骨髓造血干细胞培养（ＣＦＵ－ＧＭ）明显增高（Ｐ〈０．０５）；ＥＰＡ具有降低ＯＶＸ组骨髓ＣＦＵ－ＧＭ和提高骨髓基质细胞培养（ＣＦＵ－Ｆ）的作用，但无促ＯＶＸ小鼠子宫生长发育作用。     

脐血抗—HPCA—2和Tük3标记的CD34阳性细胞的流式细胞仪比较分析

在标记脐血造血祖细胞表面抗原（ＨＰＣＡ），ＣＤ３４中，比较抗－ＨＰＣＡ－２－ＦＩＴＣ和Ｔｋ３（纯抗体）标记的ＣＤ（３４＋）细胞在流式细胞仪分析中的荧光特征及两种单抗标记的ＣＤ（３４＋）细胞与体外培养的粒单细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ），红系爆发形成单位（ＢＦＵ－Ｅ），和混合集落形成单位（ＣＦＵ－Ｍｉｘ）的相关性。结果发现脐血有核细胞中，抗ＨＰＣＡ－２阳性细胞占１．０５±０．７２％（ｎ＝１３），Ｔｋ３阳性细胞占２．０６±１．２５％（ｎ＝８），差别显著（Ｐ＜０．０５）。每毫升脐血两种抗体标记的细胞分别为９６．５６±５６．６４和２３１．４０±１６３．９３（Ｐ＜０．０５）。尽管ＨＰＣＡ－２阳性细胞与Ｔｋ３阳性细胞数量呈显著正相关（ｒ＝０．８７５，Ｐ＜０．０１），前者与ＣＦＵ－ＧＭ，ＢＦＵＥ，ＣＦＵ－Ｍｉｘ及集落总数ＣＦＵｓ均呈正相关，而后者仅与ＣＦＵ－ＧＭ，ＣＦＵｓ相关。研究提示在检测造血祖细胞时，用抗－ＨＰＣＡ－２－ＦＩＴＣ代替Ｔｋ３可降低假阳性，获得较好的ＯＤ（３４＋）细胞与ＣＦＵ间的线性关系。     

人参总皂甙对人血细胞生成的研究

从人参中提取有效成份人参总皂甙（ＴＳＰＧ），测定它对人骨髓粒单系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ），红系祖细胞（ＣＦＵ－Ｅ，ＢＦＵ－Ｅ）和多向祖细胞（ＣＦＵ－ＧＥＭＭ）的刺激增殖作用。结果显示：在培养中加入不同浓度的ＴＳＰＧ５．２５，５０，７５，１００ｍｇ／Ｌ，可促进造血细胞增殖，在体外形成集落。在ＴＳＰＧ５－７５ｍｇ／Ｌ时，ＣＦＵ－ＧＭ集落产率均明显高于不加ＴＳＰＧ的对照组浓度的ＴＳＰＧ使集落产率明显高于对     

维拉帕米联用阿霉素、长春新碱、足叶己甙体外净化白血病细胞

采用体外克隆形成培养技术研究维拉帕米（ＶＰＬ）联用阿霉素（ＡＤＭ）、长春新碱（ＶＣＲ）和足叶己甙（ＶＰ－１６）体外净化白血病细胞，结果显示：ＶＰＬ２．２μｍｏｌ／Ｌ能明显增加单一应用的不同浓度ＡＤＭ、ＶＣＲ或ＶＰ－１６对白血病细胞克隆形成单位（Ｌ－ＣＦＵ）的抑制作用，而不增加其对正常粒巨系克隆形成单位（ＧＭ－ＣＦＵ）的毒性。０．９２μｍｏｌ／ＬＡＤＭ、０．０２５０μｍｏｌ／ＬＶＣＲ及１．７０μｍｏｌ／ＬＶＰ－１６联合应用下，Ｌ－ＣＦＵ集落存活率为１１．６１％％，再联用２．２０μｍｏｌ／ＬＶＰＬ则为３．５２％；而相同条件下ＧＭ－ＣＦＵ集落存活率分别为３５．８１％及２６．０５％（与相应Ｌ－ＣＦＵ组相比，Ｐ＜０．０１），提示ＶＰＬ能明显增加上述化疗药物联合应用下的选择性体外净化白血病细胞作用。     

姬松茸对马利兰诱导致骨髓衰竭小鼠的治疗作用

目的：观察姬松茸多糖对马利兰诱导致骨髓衰竭的治疗作用。方法：采用体外骨髓造血祖细胞ＧＭ—ＣＦＵ、ＣＦＵ—Ｅ、ＣＦＵ—Ｆ培养技术。结果：马利兰损伤后骨髓ＧＭ—ＣＦＵ、ＣＦＵ—Ｅ、ＣＦＵ—Ｆ分别减少至正常的３９８０％、４５００％和４７３０％，经姬松茸多糖（ＡＢＰＳ）０４ｇ／ｋｇ／ｄ×５ｄ，ｉｐ治疗后，骨髓造血分别恢复到马利兰对照组的２１５、１７６和１４９倍（Ｐ＜００１或００５）。表明ＡＢＰＳ可明显促进骨髓造血功能损伤的恢复。同时观察到，ＡＢＰＳ促进ＧＭ—ＣＦＵ、ＣＦＵ—Ｅ的增殖作用强于康力龙，促进ＣＦＵ—Ｆ的增殖作用次于硝酸一叶秋碱。且ＡＢＰＳ与康力龙，硝酸一叶秋碱之间均无协同效应。结论：姬松茸治疗马利兰诱导致骨髓衰竭是通过促进造血细胞增殖和改善造血微环境来恢复骨髓造血。     

长期骨髓培养、白细胞介素2、干扰素α2a体外净化慢性粒细胞白血病骨髓的研究

用长期骨髓培养（ＬＴＢＭＣ）和白细胞介素２（ＩＬ－２,１０００Ｕ／ｍｌ）,干扰素α２ａ（ＩＦＮ－α２ａ,１０００Ｕ／ｍｌ）不同的组合方案,对１０例慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）骨髓进行体外净化培养２周。结果发现：①单用ＬＴＢＭＣ体系其净化效果差;②加入ＩＬ－２后,对ＣＭＬ的ＣＦＵ－ＧＭ以及ｐｈ＇（＋）细胞有明显的杀伤作用（Ｐ＜０．０１,Ｐ＜０．０５）对正常的ＣＦＵ－ＧＭ则无影响;③ＩＦＮ－α２ａ在ＬＴＢＭＣ体系中抑制ｐｈ＇（＋）细胞生长而不影响ＣＭＬ和正常的ＣＦＵ－ＧＭ;④ＬＴＢＭＣ、ＩＬ－２、ＩＦＮ－α２ａ三者净化ＣＭＬ骨髓具有协同作用。结果提示：ＬＴＢＭＣ、ＩＬ－２、ＩＦＮ－α２ａ联合净化效果好,可用于临床净化ＣＭＬ骨髓     

当归注射液对正常人和再生障碍性贫血患者造血祖细胞的 …

本文采用体外造血祖细胞集落形成技术，观察了当归注射液对正常人和再生障碍性贫血（再障）患者骨髓红系（ＣＦＵ－Ｅ，ＢＦＵ－Ｅ）、粒系（ＣＦＵ－ＧＭ）的刺激增殖作用。实验结果表明：在正常骨髓培养体系中加入当归注射液后ＣＦＵ－Ｅ、ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＧＭ产率均明显提高，以终浓度为５０μｇ／ｍｌ时最佳，以此浓度加入再障患者骨髓常规培养体系中，后者的ＣＦＵ－Ｅ、ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－ＧＭ产率分别提高３６．２％、     

WEHI－3细胞的自我刺激作用

采用体外液体培养和琼脂半固体培养方法，观察ＷＥＨＬ－３细胞的生长特点。结果表明，种入的细胞浓度越高，细胞增殖越快；ＷＥＨＩ－３细胞条件培养液对ＷＥＨＩ－３细胞的生长、集落形成及小鼠粒－单系造血祖细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）产率均有明显的刺激作用（Ｐ＜０．０１）。提示ＷＥＨＩ－３条件培养液具有ＧＭ－ＣＳＦ活性。     

外周血干细胞的变化与化疗因素的影响

为探讨外周血干细胞移植（ＰＢＳＣＴ）时采取干细胞的最适条件，以粒一巨噬细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）为指标，对１２例造血系恶性肿瘤化疗后ＰＢＳＣ的变化进行了观察。结果表明：化疗结束约２周后，白细胞数２×１０￣９／Ｌ、中性粒细胞数０．８×１０￣９／Ｌ、血小板数１１０×１０￣９／Ｌ左右时采取于细胞是最适宜的；化疗强度使外周血白细胞数抑制得越低，血象恢复期出现的ＣＦＵ－ＧＭ就越多，外周血象最低时的白细胞数与ＣＦＵ－ＧＭ数之间呈负相关（Ｐ＜０．０５）；随化疗次数的增多，ＣＦＵ－ＧＭ数逐渐减少；两者之间呈负相关（Ｐ＜０．０５）；粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）可增加ＣＦＵ－ＧＭ数量；化疗后血象恢复期出现的ＣＤ３４阳性细胞与ＤＦＵ－ＧＭ之间呈大致相同的变化趋势。ＣＤ３４阳性细胞与ＣＦＵ－ＧＭ之间的确切关系有待于进一步探讨。     

细胞因子及4℃保存对脐血造血干／祖细胞的影响

应用体外半固体培养方法,研究了粒巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）、白细胞介素３（ＩＬ－３）、白细胞介素６（ＩＬ－６）和促红细胞生成素（Ｅｐｏ）的不同组合及４℃保存对脐血造血干／祖细胞ＣＦＵ－ＧＭ和ＨＰＰ－ＣＦＣ产率的影响。结果表明：在琼脂半固体培养体系中,在不同组合的细胞因子作用下,脐血ＣＦＵ－ＧＭ产率有是明显差异;以ＧＭ－ＣＳＦ组最低、ＧＭ－ＣＳＦ＋ＩＬ－３＋ＩＬ－６＋Ｅｐｏ组最高。脐血置４