肝细胞癌P16基因的纯合性缺失及其临床意义

①目的　探讨肝细胞癌（ Ｈ Ｃ Ｃ）组织中 Ｐ１６ 基因的缺失及其临床意义。②方法　应用聚合酶链反应和单链构象多态技术银染法,检测２１ 例 Ｈ Ｃ Ｃ的癌组织、癌旁组织和外周血标本 Ｐ１６ 基因的缺失情况。③结果　２１ 例 Ｈ Ｃ Ｃ 中癌组织 Ｐ１６ 基因纯合性缺失 ３ 例,且均为高分化 Ｈ Ｃ Ｃ;癌旁组织和外周血均无 Ｐ１６ 基因的缺失。④结论 Ｈ Ｃ Ｃ组织中存在 Ｐ１６ 基因的纯合性缺失,而且其缺失与高分化有关。     

PCR—RFLP分析人结直肠癌DCC基因杂合性缺失

目的；探讨ＤＣＣ基因在结直肠癌中杂合性缺失情况及其意义。方法；应用ＰＣＲ技术检测了２５例中国人散发型结直肠癌病人正常粘膜及癌组织和３个直肠癌细胞系ＤＣＣ基因Ｍ２位点限制性片断长度多生。结果；１６例（６４％）病人具有杂合生，其中４例（２５％）癌组织表现等位基因杂合性缺失。此４例均有淋巴结或肝转移。细胞系ＨＣＴ，ＨＲ８３４８表现杂合性，ＨＴ２９表现纯合性，结论；ＤＣＣ基因是一个在结直肠肿瘤发生发展中起     

多重PCR法检测喉癌组织中P16基因纯合缺失及异常甲基化

目的：采用多重ＰＣＲ法检测喉癌及癌旁组织中Ｐ１６ 基因纯合缺失和异常甲基化。方法：选用二对引物分别扩增Ｐ１６ 基因外显子１ 和２,分析有无纯合缺失,对未检出缺失的样品用甲基化敏感内切酶Ｓｍ ａＩ消化后,再扩增外显子１,分析有无Ｐ１６ 基因异常甲基化。结果：３９ 例喉癌组织标本中９ 例标本有Ｐ１６ 基因纯合缺失,缺失率为２３．０８％ （９／３９）。３０ 例未检测到Ｐ１６ 基因缺失的喉癌组织标本,有４ 例检出异常甲基化,检出率为１３．３３％ （４／３０）。３９ 例癌旁组织标本均未检测到Ｐ１６基因缺失或异常甲基化。结论：采用多重ＰＣＲ法可检测出Ｐ１６ 基因常见的纯合缺失和异常甲基化失活。研究表明,Ｐ１６ 基因失活可能在喉癌的发生发展中起重要作用     

人肝细胞癌中PTEN基因的DNA杂交及突变分析

目的 研究人肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因缺失及第５、第８外显子突变。方法 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测人肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因限制性片段长度多态性和纯合性缺失、半合性缺失、片段缺失。应用聚合酶链－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）检查ＰＴＥＮ基因的第５、第８外显子的突变。结果Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果显示,所有３４例肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因未一片段长度多态性或纯合性缺失,半合性缺失、片段缺失。ＰＣＲ－ＳＳＣＰ中     

阴茎癌及其癌旁组织中癌基因ras产物P21蛋白的表达

探讨阴茎癌及其癌旁组织中癌基因ｒａｓ产物Ｐ２１蛋白表达的临床意义。方法 用免疫组化ＡＢＣ法检测３２例阴茎癌、３２例癌旁组织和１６例正常阴茎组织的癌基因ｒａｓ产物Ｐ２１蛋白。结果 ２８例癌组织，８例癌旁组织中有Ｐ２１蛋白表达，而１６例正常阴茎组织中２１阴性。Ｐ２１蛋白和病理分级、临床分期呈正相关表达、即随分级和分期的上升阳性增强，并且癌旁组织Ｐ２１蛋白表达阳性者显示早期复发和转移的不良预后。结论 Ｐ     

p16在肝细胞癌组织内变异的研究

应用分子杂交及免疫组化方法检测５６例ＨＣＣ组织内的抑癌基因Ｐ１６。结果显示，ＨＣＣ标本中Ｐ１６蛋白在癌细胞内表达的阳性率为３７．５％，而Ｐ１６ＤＮＡ斑点杂交的阳性率为５５．３６％。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转膜杂交证实，１２．５％ＨＣＣ标本存在Ｐ１６的甲基化变异，４４．６４％Ｐ１６基因缺失。提示ＨＣＣ发生，发展过程中存在Ｐ１６基因的缺失和甲在化变异。     

食管癌和癌旁组织P16和P53的变化

采用免疫组织化学方法分析食管癌组织和癌旁组织中肿瘤抑制基因Ｐ１６的变化，并与肿瘤抑制基因Ｐ５３蛋白聚集的变化进行比较研究。结果：２２例食管鳞癌组织中，３例出现Ｐ１６蛋白的免疫阳性反应（１４％），此３例均为高分化鳞癌。在３例Ｐ１６免疫阳性组织中，２例同时出现Ｐ５３蛋白聚集的改变。２２例手术切除癌标本中的各级癌前病变均未出现Ｐ１６阳性反应。癌组织和癌旁上皮各级病变均出现较高的Ｐ５３蛋白改变。提示：肿瘤     

人肝细胞癌中PTEN基因的DNA杂交及突变分析

目的　研究人肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因缺失及第５、第８外显子突变。方法　应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测人肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因限制性片段长度多态性和纯合性缺失、半合性缺失、片段缺失。应用聚合酶链单链构象多态性（ＰＣＲＳＳＣＰ）检查ＰＴＥＮ基因的第５、第８外显子的突变。结果　Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果显示,所有３４例肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因未见限制性片段长度多态性或纯合性缺失、半合性缺失、片段缺失。ＰＣＲＳＳＣＰ检测发现,２例肝细胞癌第５外显子ＰＣＲ产物均显示１条额外电泳迁移带,突变率为５．９％（２／３４）。另２例肝细胞癌第８外显子ＰＣＲ产物呈现额外电泳迁移带,突变率为５．９％（２／３４）,合计突变率为１１．８％（４／３４）。结论　所检３４例人肝细胞癌中ＰＴＥＮ基因未见纯合性缺失、半合性缺失、片段缺失,但存在突变。     

抑癌基因p16在人肝细胞癌中的表达及其与HBxAg表达的关系

目的：探讨抑癌基因ｐ１６在肝细胞癌发生、发展中的作用。方法：采用免疫组化及原位杂交方法在８７例肝细胞癌及其癌旁肝组织内检测Ｐ１６蛋白、ＨＢｘＡｇ及ｐ１６ｍＲＮＡ。结果：在８７例中，１６例Ｐ１６蛋白和１９例ｐ１６ｍＲＮＡ阳性，分别占１８．４％和２１．８％。在５３例癌旁肝组织中，３２例Ｐ１６蛋白和３３例ｐ１６ｍＲＮＡ阳性，分别占６０．４％和６２．８％。在ＨＢｘＡｇ阳性的７０例中，９例Ｐ１６蛋白阳性，ＨＢｘＡｇ阴性的１７例中，７例Ｐ１６蛋白阳性。结论：肝细胞癌的发生可能与ｐ１６表达减少有关，ＨＢＶｘ基因表达产物可能参与ｐ１６基因表达的调控     

P^21和PCNA在肝硬变组织中表达的研究

目的：探讨Ｐ２１、ＰＣＮＡ的相关关系及它们在肝硬变、肝细胞不典型增生（ＬＣＤ）、肝细胞癌（ＨＣＣ）形成中的作用。方法：运用Ｓ－Ｐ法对６０例单纯肝硬变（不伴癌）、３０例癌旁肝硬变及２７便ＨＣＣ的Ｐ２１、ＨＢｓＡｇ及ＰＣＮＡ表达情况进行实验研究。结果：癌旁肝硬变组织、单纯肝硬变组织、癌组织Ｐ２１阳性率分别为９０％、６８．３３％、６２．９６％,癌旁肝硬变与单纯肝硬变,癌旁肝硬变与癌组织之间判别有显著性意     

原发性膀胱移行细胞癌中P16基因缺失与突变及临床意义

目的：为探讨Ｐ１６基因的必变与膀胱移行细胞癌生物学行为的关系。方法：采用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）,对４０例膀胱移行细胞癌组织Ｐ１６基因纯合缺失、突变进行了研究。结果：膀胱移行细胞癌中Ｐ１６纯合缺失与突变率在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级肿瘤中分别为７．１％、１８．８％、６０％。在Ｔｉｓ～Ｔ１期和Ｔ２～Ｔ４期分别为５．６％及４０．９％且与肿瘤细胞的分化程度、临床分期明显相关。结论：Ｐ１６基     

人肝癌中P16蛋白的表达缺失与意义

用免疫组化法对３５例手术切除的原发性肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）标本中Ｐ１６蛋白的表达作了检测,结果发现１５例（４５．７％）Ｐ１６蛋白表达阴性,分化低癌组织Ｐ１６蛋白缺失率显著高于分化高者（Ｐ〈０．０１）,且Ｐ１６表达缺失的患者生存期明显短于有Ｐ１６表达者（Ｐ〈０．０５）,提示Ｐ１６蛋白表达的缺失可能与ＨＣＣ的发生,发展及预后有关。     

p15基因缺失分析在食管癌研究中的意义

目的：探讨p15基因在食管癌中的表达以及与食管癌临床病理及预后的关系。方法：应用酚：氯仿法提取46例食管癌患者的肿瘤及癌旁正常组织中高分子量的基因组DNA，并对p15基因外显子1和2进行PCR扩增，以1．5％琼脂糖凝胶电泳及溴化乙烷染色，分析PCR产物中p15基因的纯合性缺失。结果：正常食管粘膜组织中未见p15基因的纯合性缺失。食管癌肿瘤组织中，p15基因的纯合性缺失率为63．04％(29／46)，且与食管癌的临床病理分级及DNA含量有关。结论：p15基因的纯合性缺失在食管癌发生、发展中起重要作用，可作为肿瘤标志物判断食管癌患者的预后。     

食管鳞癌组织中抑癌基因p16突变的检测

应用ＰＣＲＳＳＣＰ银染技术检测了４０例食管鳞状细胞癌及癌旁组织中ｐ１６基因的突变情况。结果：１１例（２７．５％）癌组织中有ｐ１６基因突变，其中９例发生在第２外显子，突变率随癌分化程度减低及浆膜浸润和淋巴转移有增高趋势。癌旁粘膜中未发现ｐ１６基因突变。提示：食管鳞癌中存在ｐ１６基因突变，是食管癌发生中的晚期事件，并可能与食管癌的进展与转移有关。     

食管鳞癌组织中抑癌基因p16突变的检测

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术检测了４０例食管鳞状细胞癌及癌旁组织中Ｐ１６莽原突变情况。结果：１１例（２７．５％）癌组织中有Ｐ１６基因突变，其中９例发生在第２外显子，突变率随癌分化程度减低及浆膜浸润和淋巴转移有增高趋势。癌旁粘膜中未发现Ｐ１６基因突变。提示：食管鳞癌中存在Ｐ１６基因突变，是食管癌发生中的晚期事件，并可能与食管癌的进展与转移有关。     

乙型肝炎病毒相关性肝癌与p53基因变化的关系

目的：探讨与ＨＢＶ感染相关的肝癌其ｐ５３基因变化及意义，方法：收集１６例西安地区的肝癌及其旁肝组织，应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交检测了组织中ＨＢＶＤＮＡ的状态，免疫组化确定ＨＢＶ的ＨＢｓＡｇ，ＨＢｘＡｇ和肿瘤抑制基因Ｐ５３蛋白的分布，采用ＰＣＲ扩增后直接ＤＮＡ序列分析，检测了ｐ５３基因第５～８外显子的基因序列。结果：１６例中１３例ＨＢＶＤＮＡＳｏｕｔｈｅｒｎ杂交阳性，１０例癌组织和１３例癌旁组织ＨＢｘ     

子宫内膜组织MTS1／P16蛋白表达的研究

采用免疫组化ＳＰ法对３０例子宫内膜癌组织中的Ｐ１６蛋白进行检测，探讨Ｐ１６蛋白在子宫内膜癌组织及癌旁正常组织中表达的意义。结果显示：３０例宫内膜癌组织中Ｐ１６蛋白表达率为５０．００％，低于癌旁正常宫内膜组织的１００．００％（Ｐ〈０．０１）。高分化癌Ｐ１６蛋白表达高于中，低分化癌（Ｐ〈０．０１）。结果表明：Ｐ１６蛋白表达与宫内膜癌发生及分化有关。     

食管癌和癌旁组织 P16 和 P53 的变化

采用免疫组织化学方法分析食管癌组织和癌旁组织中肿瘤抑制基因Ｐ１６的变化，并与肿瘤抑制基因Ｐ５３蛋白聚集的变化进行比较研究。结果：２２例食管鳞癌组织中，３例出现Ｐ１６蛋白的免疫阳性反应（１４％），此３例均为高分化鳞癌。在３例Ｐ１６免疫阳性组织中，２例同时出现Ｐ５３蛋白聚集的改变。２２例手术切除癌标本中的各级癌前病变均未出现Ｐ１６阳性反应。癌组织和癌旁上皮各级病变均出现较高的Ｐ５３蛋白改变。提示：肿瘤抑制基因Ｐ１６的变化可能主要发生在食管癌变的终末阶段，Ｐ１６与Ｐ５３有较高的一致性改变。     

p16基因产物在肺癌中的表达研究

目的 探讨Ｐ１６基因产物在肺癌中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组化ＳＰ法检测８２例肺癌组织中Ｐ１６基因表达并结合肺癌的临床病理学特征及预后情况进行分析,４０例癌变的临床病理学特征及预后情况进行分析,４０例癌旁正常肺组织作对照。结果 肺癌组织中Ｐ１６基因产物阳性表达率为５７．３％,癌旁正常肺组织学９２．５％。肺癌组织中存在明显的Ｐ１６基因表达缺失。肺癌组织中Ｐ１６基因表达水平与肺癌的细胞分化程度     

胃癌组织中p16基因mRNA和蛋白的表达及其与p53、Cyclin D1蛋白表达的相关性和临床意义

目的排除正常组织细胞的影响，探讨ｐ１６基因在胃癌发生发展及预后判断上的作用和可能的基因调节机制。方法采用ＣＤＮＡ－ｍＲＮＡ原位核酸杂交和免疫组化技术观察６１例胃癌组织和４９例癌旁非癌组织中ｐ１６基因ｍＲＮＡ和蛋白的表达，并与ｐ５３、ＣｙｃｌｉｎＤ１蛋白表达情况及肿瘤的生物学行为进行相关性分析（Ｘ２检验，Ｗｉｌｃｏｘｏｎ等级秩和检验，配对资料Ｙａｔｅｓ校正Ｘ２检验）。以ＰＣＲ随机引物法制备生物素标记的ｐ１６ＣＤＮＡ探针。结果（１）胃癌组织ｐ１６ｍＲＮＡ的阳性率为５０．８％，ｐ１６蛋白的阳性率为７０．５％，与癌旁正常胃粘膜１００％的阳性率相比，差异具有显著性意义（Ｐ＜０．００１）。１０例早期胃癌ｐ１６ｍＲＮＡ和蛋白均阳性，而５１例进展期胃癌的阳性率分别为４１．２％（２１／５１），６４．７％（３３／５１）。早期与进展期胃癌相比，ｐ１６ｍＲＮＡ和ｐ１６蛋白的阳性率均有显著性差异（Ｐ＜０．００１，Ｐ＜０．０１）。而且在同一切片中也可以观察到分化较好或浸润浅层的癌细胞表达ｐ１６ｍＲＮＡ和蛋白，而分化较差、浸润深层的癌细胞则没有表达。（２）ｐ１６ｍＲＮＡ和ｐ１６蛋白的表达强度与胃癌的分化程度、浸润深度，有无淋巴结转移及病