环孢素A对乙型肝炎病毒作用的体外实验

目的探讨环孢素A（CsA）在体外对乙型肝炎病毒（HBV）蛋白合成、DNA复制的影响。方法将不同浓度的CsA（0．6～20．0μg／ml）作用于HepG2．2．15细胞系，通过检测细胞培养上清液中乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和乙型肝炎e抗原（HBeAg）水平；以及细胞内乙型肝炎核心抗原（HBcAg）mRNA水平和HBVDNA水平来评价HBV复制情况；通过检测细胞内PyK2激酶402位点酪氨酸（PyK2Y402）磷酸化水平来探讨CsA对HBV复制的作用机制。结果CsA对HBV复制具有抑制作用，随着CsA浓度的升高，对HBsAg和HBeAg的抑制率逐渐上升，细胞内HBVDNA复制水平下降。10．0μg／ml CsA作用4d时，对HBsAg和HBeAg的抑制率分别为49．7％和34．3％，HBVDNA的表达量仅为对照组的34．9％。在2．0“g／ml CsA作用下PyK2 Y402的磷酸化水平下降。结论CsA对HepG2．2．15细胞HBsAg和HBeAg表达、HBVDNA复制均有抑制作用，并呈剂量依赖性。CsA可能通过降低PyK2 Y402的磷酸化水平抑制HBV的复制。     

愈肝胶囊抗鸭乙型肝炎病毒作用实验研究

观察愈肝胶囊抗鸭乙型肝炎病毒作用。方法选1日龄广州麻鸭50只接种病毒,分ACV200μg/kg,愈肝胶囊6.5g/kg,3.25g/kg及病毒对照组,1/d,口服。分别观察其抗DHBV的作用。试验结束时,取肝组织作病理切片光镜观察。结果 6.5g/kg愈肝胶囊组在给药后第5天,第10天和停药后第3天,鸭血清DHBV DNA水平均明显下降,与给药前自身比及病毒对照组比较,差异均有显著性(P相似文献   

华蟾素抗鸭乙型肝炎病毒实验研究

作者采用鸭乙型肝炎动物模型研究华蟾素抗鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）作用，并观察其毒性作用。结果显示华蟾素注射液１ｍｌ／ｋｇ组１０只麻鸭在用药后第１２周时有９只鸭ＨＢＶ脱氧核糖核酸（ＤＨＢＶＤＮＡ）阴转；３ｍｌ／ｋｇ组１０只中７只阴转。而对照组９只中仅一只阴转。光镜观察华蟾素组鸭肝病理有明显改善。电镜观察两组肝细胞亚微结构改善均不明显。实验表明华蟾素对ＤＨＢＶ有明显抑制作用；且能改善鸭肝病理变化。     

丙型肝炎病毒及乙型肝炎病毒联合基因免疫实验研究

为ＨＣＶ/ＨＢＶ重叠或混合感染的防治寻求新的高效联合基因免疫策略 ,分别将与ＨＣＶ核心区基因互补的ｃＤＮＡ和ＨＢＶ核心区基因克隆于具有两套独立表达单元的真核表达载体 ｐＲＳＣ的巨细胞病毒启动子和ＲＳＶ启动子下游 ,称为ｐＲＳＣ ＨＢＶ/ＨＣＶ ,转染ＳＰ2 / 0细胞 ,通过免疫荧光和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法观测蛋白的表达 ,免疫ＢＡＬＢ/ｃ小鼠 ;用酶联免疫法、ＭＴＴ法及荷瘤试验观察小鼠体液免疫应答及细胞免疫应答。结果表明 ,ｐＲＳＣ ＨＢＶ/ＨＣＶ转染ＳＰ2 / 0细胞可见ＨＢｃＡｇ及ＨＣＶ核蛋白染色阳性荧光细胞 ,相对分子质…     

霉酚酸对乙型肝炎病毒复制的体外实验观察

目的探讨霉酚酸的体外抗乙型肝炎病毒作用。方法以HepG2．2．15为细胞模型，加入不同剂量的霉酚酸或拉米夫定，或霉酚酸加拉米夫定共培养，于第3、6、9天收集培养上清液行HBsAg定量检测；收集细胞提取总RNA，行逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）及荧光实时定量PCR测细胞内HBVmRNA水平。结果霉酚酸单独应用时，浓度2～250μg／ml无明显抗乙型肝炎病毒作用，当浓度达1250μg／ml时，可使病毒mRNA水平下降1～2log，上清液中HBsAg滴度也有相应降低；拉米夫定5μ／ml可使病毒mRNA水平下降3～4log，上清液中HBsAg滴度也有相应降低；霉酚酸和拉米夫定合用时，可显著增强后者的抗乙型肝炎病毒作用，其中浓度10μg／ml时效果最明显。结论霉酚酸有体外抗乙型肝炎病毒作用，并可增强拉米夫定的体外抗乙型肝炎病毒作用。     

RNA干扰抑制乙型肝炎病毒复制的实验研究

目的 以乙型肝炎病毒(HBV)核心区为靶位，构建表达小干扰RNA(siRNA)的质粒载体pSilencer3．1-Hlhygro，体外观察siRNA抗HBV的效果。方法 以HepG2 2．2．15细胞为靶细胞，利用脂质体Metafectene与表达siRNA的质粒载体pSilencer3．1-Hlhygro共转染，用定量聚合酶链反应检测细胞上清液中DNA，用逆转录聚合酶链反应检测HBV C-mRNA。结果 成功构建了表达siRNA的转录质粒载体，两条siRNA均可抑制HBV的复制，而且与siRNA浓度成正相关。结论 靶向HBV核心区的siRNA能抑制HBV的复制。     

加强对乙型肝炎病毒基因的研究

加强对乙型肝炎病毒基因的研究张定凤生物的基因变异是生物适应生存和进化的重要手段。病毒基因组的变异对人类防治病毒性传染病的影响极大，如甲型流行性感冒病毒变异可以造成世界性大流行。乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染为我国常见病、多发病，对其基因组变异的规律及临床...     

靶向核糖核酸酶对乙型肝炎病毒复制的作用

通过定量检测上清液中的乙型肝炎e抗原(HBeAg)和乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)，进一步研究靶向核糖核酸酶对HBV复制的影响。     

扇贝多糖抗鸭乙型肝炎病毒作用

摘要： 目的 研究扇贝多糖抗鸭乙型肝炎病毒（DHBV）的作用。方法 选1日龄北京鸭,人工感染鸭乙型肝炎病毒（DHBV）,感染后第7天,阳性鸭随机分为模型组、拉米夫定阳性对照组（50 mg.kg-1）和扇贝多糖（75、150、300 mg.kg-1）3个剂量组,均连续灌胃给药10d,每日2次。分别于给药前、给药5d、10d及停药后3d取血清,应用斑点杂交法检测血清中 DHBV-DNA水平。结果 扇贝多糖150、300mg.kg-1剂量组于用药后5d、10d,与给药前（T0）比较,血清DHBV-DNA水平明显降低（P<0.05、P<0.01）。结论 扇贝多糖体内有抑制DHBV-DNA的作用。     

人乙型肝炎病毒血清实验感染树鼩的研究

本文研究树鼩对人乙型肝炎病毒(HHBV)的易感性。云南树鼩95只,随机分成4组。A组肌注HHBV血清0.1ml,同时使用环磷酰胺抑制其抗病毒免疫。B组于相应时间肌注HHBV血清0.1ml,不用环磷酰胺。C组肌注正常人血清0.1ml,D组作正常对照。A、B两组动物在注射HHBV血清后,血清HBsAg几何平均滴度逐渐增高,在第8周时,部分动物的血清HBsAg     

HDV核酶对乙型肝炎病毒抑制作用的研究

目的研究HDV核酶在细胞内对乙型肝炎病毒(HBV)复制及其抗原表达的抑制作用。方法1)以HBV前基因组mRNA为靶基因,体外筛选出HDV核酶有效作用位点,构建HDV核酶并进行体外测活;2)分别选用tRNA-Val、U6和hCMV 3种真核启动子,重组构建HDV核酶真核表达载体ptVHRz、pSURz和pcDHRz,分别用3种载体转染HepG2.2.15细胞;3)用点杂交、ELISA和实时荧光定量PCR方法分别检测核酶在细胞内的表达及对HBV的抑制作用。结果在HBV C基因区筛选到一位点,所构建的HDV核酶在体外条件下对该位点能产生有效切割。3种核酶表达载体在细胞内均能高效表达,在转染48 h后,ptVHRz和pcDHRz对HBeAg的表达产生了明显的抑制作用,而对HBsAg没有抑制作用。三者对HBV的复制均未产生明显影响。结论HDV核酶在细胞内对HBV抗原的表达能产生特异性抑制作用,但未能有效抑制HBV的复制,对其原因需进一步深入研究。     

替比夫定对乙型肝炎病毒转基因鼠孕期安全性的实验研究

目的 探讨HBV转基因鼠孕期应用抗病毒药替比夫定对降低HBV载量、HBsAg水平的有效性以及对母、胎鼠的安全性.方法 33只HBV转基因雌鼠均分为3组.交配当天至分娩当天,HBV Tg对照组每天喂0.9%氯化钠溶液,HBV Tg-L与HBV Tg-H实验组分别予替比夫定600和1200 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃.普通雌鼠11只为健康对照组,予替比夫定600 mg·kg~(-1)·d~(-1)灌胃.交配当天、分娩当天采血.ELISA法测HBsAg,荧光定量PCR法测HBV DNA.观察4组雌鼠的妊娠生育状况及子鼠的生长发育情况,子鼠28 d时检测HBsAg、HBV DNA.数据行方差分析、t检验和χ~2检验.结果 HBV Tg对照组雌鼠用药前后血清HBsAg水平差异无统计学意义(t=0.34,P>0.05),HBV Tg-L和HBV Tg-H实验组雌鼠血清HBsAg分别为(187.39±23.18)μg/L比(160.50±27.69)μg/L,(190.48±22.43)μg/L比(161.89±21.23)μg/L(t=2.91,t=3.16;均P<0.05),用药前后血清HBV DNA水平差异无统计意义(P>0.05).HBV Tg对照组、HBV Tg-L与HBV Tg-H实验组子鼠血清HBV DNA水平分别为(11.22±1.08)、(8.38±1.80)和(8.97±1.86)lg拷贝/mL(F=4.34,P<0.05),HBsAg分别为(93.03±18.37)、(9.56±4.39)和(9.27±2.69)μg/L(F=18.11,P<0.05).各组子鼠的生长发育指标差异均无统计学意义(P>0.05).结论 孕期应用替比夫定对母鼠子鼠的安全性无影响,由于HBV转基因鼠的种类、孕期短等原因,雌鼠血清HBsAg下降明显,对HBV DNA水平影响较小.     

肝康栓的体外抗乙型肝炎病毒作用的研究

观察肝康栓对抗乙型肝炎病毒(HBV)体外药效评价,进一步探讨其抗病毒机制.方法:利用乙型肝炎病毒基因转染的2.2.15细胞系,用不同浓度的肝康栓作用于此细胞系,留取培养上清液.用ELISA、PCR技术检测上清液中的乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、乙肝病毒e抗原(HBeAg)及乙肝病毒DNA(HBV DNA)的含量作为药物抗HBV效果的观察指标.结果:肝康栓能有效抑制上清液中的HBeAg和DNA浓度,但对HBsAg作用不明显.结论:肝康栓是一种有效的抗乙肝病毒的药物.     

甲型肝炎病毒消毒研究

本成果通过建立甲型肝炎病毒(HAV)消毒实验细胞感染模型,将HAV细胞培养法引入消毒学研究领域,在大量的实验和自然水体HAV消毒试验中首次系统地获得了常用的理化消毒因子对HAV的消毒作用基础数据,修正或进一步证实了以往人们对HAV对理化因子抵抗力的基本认识。为医     

树Qu对人乙型肝炎病毒实验感染的量反应

50只树Qu分成5组。将HBV含量为10^8CID/ml的美国NIH提供的标准血清稀释成10^-6--10^-10等5个浓度，先经股静脉分别给各组每只动物接种0.5ml，3天后，经腹腔再注射等量同样稀释血清一次。实验观察16周，经血清学及免疫组织化学检测，5个稀释度的血清引起树Qu实验感染率依次为80．1％，88．8％，66．67％，55．56％及42．8％。表明，树Qu对人HBV的易感性与黑猩猩近似。由于其体形小，易于饲养管理，是研究与HBV感染有关的疾病，治疗药物及疫苗质量检测的较好的实验动物。     

树鼩对人乙型肝炎病毒实验感染的量反应

５０只树分成５组。将ＨＢＶ含量为１０~８ＣＩＤ／ｍｌ的美国ＮＩＨ提供的标准血清稀释成１０~（－６）～１０~（－１０）等５个浓度，先经股静脉分别给各组每只动物接种０．５ｍｌ。３天后，经腹腔再注射等量同样稀释血清一次。实验观察１６周。经血清学及免疫组织化学检测，５个稀释度的血清引起树实验感染率依次为８０．１％、８８．８％、６６．６７％、５５．５６％及４２．８％。表明：树对人ＨＢＶ的易感性与黑猩猩近似。由于其体形小，易于饲养管理，是研究与ＨＢＶ感染有关的疾病、治疗药物及疫苗质量检测的较好的实验动物。     

乙型肝炎病毒基因型研究现状

目前 ,已发现乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)变异对乙型肝炎的发病、血清学诊断和抗病毒治疗均有一定影响。ＨＢＶ的基因变异主要体现在两方面 :一是病毒基因型的演变 ,即ＨＢＶ基因组在不同携带者之间的差异性 ;二是感染个体出现的ＨＢＶ突变。因此 ,基因型的研究对于进一步明确乙型肝炎发病机制、寻找治疗对策是有其重要意义的。一、基因型的发现和发展1 988年Ｏｋａｍｏｔｏ等通过对 1 8株不同亚型的ＨＢＶＤＮＡ全序列比较后发现 ,亚型的区分并不能真正反映ＨＢＶ基因组的差异。从基因型角度看 ,不同血清型间仅是Ｓ基因区 2个位点上的差异。他们…     

乙型肝炎病毒基因型研究新进展

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)属于嗜肝DNA病毒科,由于HBV复制过程中HBV DNA聚合酶缺乏校正功能,导致HBV容易发生突变．根据基因序列差异的多少,可将HBV划分为A-H 8种基因型,其中A,B,C,F 4介基因型还可以划分为不同的亚型．HBV基因型呈一定的地理区域性分布．并且HBV基因型对于探讨HBV的传播途径,HBV携带者的流动形式以及变异株在不同人群中的流行情况都有很重要的意义．HBV基因型之间结构和功能的差异均可影响慢性HBV感染者在临床诊治过程中出现的基因变异、病情预后以及对抗病毒治疗的反应性．虽然近几年对HBV基因型的研究迅速增多,但尚处于探索阶段对其研究仍任重而道远．     

X蛋白在乙型肝炎病毒生命周期中作用的研究

X基因是一种仅存在于嗜肝乙型肝炎病毒(hepatitis Bvirus,HBV)的基因,至今未在其它逆转录病毒和生物细胞中发现它。由于它的基因结构的特殊性及高度的保守性,提示其在HBV的生物学上具有重要的生物学意义,越来越多的证据表明,它是引起肝癌的直接病因,还广泛参与宿主细胞的基因表达、反式激活和细胞信号转导过程。 一、基因在HBV感染宿主细胞过程中具有不可或缺的作用 Chen等以土拨鼠HBV(WHV)质粒感染上拨鼠为模型,将质粒的X基因起始密码子ATG突变为TTG,去除X基蛋白表达,即对X基因表达的C末端突变,形成终止密码,使X蛋白C末端分别截除52、31、16或3个氨基酸,与野生型感染质粒进行对照,结果发现,除在C末端截除3个氨基酸的突变质粒外,其它各种突变均不能有效感染土拨鼠。Zoulim等应用不同的感染性质粒,独立进行了相似的实验,他们将WHV的