阿司匹林抗高糖诱导的内皮细胞衰老过程中对DDAH-ADMA系统及Caveolin-1蛋白的影响

目的观察阿司匹对高糖诱导的内皮细胞衰老模型二甲基精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)-非对称性二甲基精氨酸(ADMA)系统和Caveolin-1蛋白表达的影响,探讨阿司匹林抗高糖诱导内皮细胞衰老的机制。方法人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分别培养于正常糖浓度培养液(5.5 mmol/L)、高糖培养液(33 mmol/L)、高糖+阿司匹林(0.01~1 mmol/L)培养液以及含L-NAME(300μmol/L)培养液,48 h后采用β-半乳糖苷酶(β-gal)染色鉴定衰老细胞,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western blot分析Caveolin-1蛋白表达,液质联用仪检测细胞上清液中ADMA的含量并计算DDAH的活性。结果高糖作用内皮细胞48 h后,细胞β-gal染色阳性细胞数明显增多,ROS、ADMA水平以及Caveolin-1蛋白表达升高,DDAH活性降低。0.01~1 mmol/L阿司匹林剂量依赖性地降低β-gal染色阳性细胞数、ROS和ADMA水平以及Caveolin-1蛋白表达,同时升高细胞DDAH活性(P均0.05)。L-NAME(NOS的抑制剂)能完全抑制阿司匹林的上述作用(P0.05)。结论高糖环境下阿司匹林(0.01~1mmol/L)能抑制Caveolin-1表达,改善DDAH-ADMA系统的活性而进一步发挥抗氧化损伤、抗细胞衰老的作用。     

低浓度乙醇对血管内皮细胞损伤的保护作用

目的研究乙醇对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人脐带静脉内皮细胞损伤的保护作用与内源性一氧化氮合酶抑制物的关系。方法在培养的人脐带静脉内皮细胞中加入ox-LD(L100μg/ml)诱导内皮细胞损伤。检测细胞培养液中非对称性二甲基精氨酸(ADMA)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子-(αTNF-α)的含量。结果体外给予ox-LD(L100μg/ml)显著诱导内皮细胞损伤,增加培养液中ADMA、MDA、LDH和TNF-α水平,而降低NO水平。两个剂量乙醇(5或15μg/ml)均能显著抑制ox-LDL所致ADMA、MDA、LDH和TNF-α浓度升高和NO的降低。结论低剂量乙醇对ox-LDL诱导的人脐带静脉血管内皮细胞损伤有保护作用,其保护作用与降低ADMA和TNF-α浓度有关。     

川芎嗪对氧化型低密度脂蛋白诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用

目的探讨川芎嗪对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用及其分子机制。方法体外培养人冠状动脉内皮细胞,并随机分为对照组、ox-LDL组、不同浓度川芎嗪为1μmol/L组、10μmol/L组、100μmol/L组。用RT-PCR及Western blot法检测单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)基因和蛋白表达;采用免疫荧光法观察NF-κB p65蛋白的核转位。结果与对照组比较,ox-LDL组MCP-1、ICAM-1基因和蛋白表达明显升高(P<0.01);与ox-LDL组比较,10μmol/L组、100μmol/L组MCP-1、ICAM-1基因表达明显降低(P<0.01),1μmol/L组、10μmol/L组MCP-1、ICAM-1蛋白表达明显降低(P<0.01)。免疫荧光显示,1μmol/L组、10μmol/L组可抑制NF-κB p65亚基的核转位。结论川芎嗪对ox-LDL诱导的血管内皮细胞损伤有保护作用。     

瑞舒伐他汀联合氨氯地平对ox-LDL诱导的人单核巨噬细胞MMP-9mRNA和蛋白表达的影响

目的瑞舒伐他汀联合氨氯地平降低对氧化修饰的低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的健康人单核巨噬细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA及蛋白的表达进而促进粥样斑块的稳定。方法体外密度梯度离心法分离并培养单核巨噬细胞并传至2代～4代用于实验,根据实验要求分为空白对照组(单核巨噬细胞培养24h)、ox-LDL对照组(ox-LDL 100μg/mL诱导后单独培养24h)、瑞舒伐他汀组(单独加入瑞舒伐他汀0.01μmol/L、0.1μmol/L、1.0μmol/L培养24h)、瑞舒伐他汀联合氨氯地平组(加入不同剂量瑞舒伐他汀联合氨氯地平0.01μmol/L、0.1μmol/L、1.0μmol/L共同作用24h);分别提取各组细胞RNA,用半定量逆转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)测定MMP-9mRNA表达;用ELISA法测定MMP-9的蛋白含量。结果单核巨噬细胞经100μg/mLox-LDL诱导后,与空白对照组比较MMP-9mRNA和蛋白表达显著增加;ox-LDL诱导后不同剂量瑞舒伐他汀联合氨氯地平组,与ox-LDL对照组及瑞舒伐他汀组比较可加强抑制MMP-9mRNA和蛋白表达作用。并呈剂量-效应关系,差异有统计学意义(P<0.05)。结论外周血单核巨噬细胞在ox-LDL诱导后,MMP-9mRNA和蛋白含量明显增加,瑞舒伐他汀与氨氯地平联合后,可以加强抑制单核巨噬细胞MMP-9mRNA和蛋白表达的作用,进而增强急性冠脉综合征(ACS)患者粥样斑块的稳定性。     

尾加压素Ⅱ对ox-LDL诱导的EVC-304细胞凋亡的影响

目的探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)对ox-LDL诱导的EVC-304细胞凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞系ECV304,将不同浓度UⅡ及ox-LDL与内皮细胞共同孵育24 h后,应用倒置显微镜观察细胞形态变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测内皮细胞活性,TUNEL、流式细胞仪检测内皮细胞凋亡,免疫组化法检测内皮细胞凋亡基因bcl-2,bax,caspase-3蛋白表达水平。结果 ox-LDL(20μg/ml)处理24 h后,可诱导内皮细胞凋亡;同时给予不同浓度的UⅡ(20μg/ml ox-LDL+10-10mol/L UⅡ,20μg/ml ox-LDL+10-9mol/L UⅡ,20μg/ml ox-LDL+10-8mol/L UⅡ,20μg/ml ox-LDL+10-7mol/L UⅡ)处理24 h后,可显著增强ox-LDL诱导内皮细胞凋亡作用,并呈浓度依赖性。ox-LDL处理内皮细胞24 h后,bcl-2蛋白阳性表达率降低,而bax、caspase-3阳性表达率升高。同时给予UⅡ可增强促凋亡作用,与ox-LDL组比较,ox-LDL+UⅡ组的bcl-2蛋白阳性表达率显著降低(P0.05),而bax、caspase-3阳性表达率显著升高(P0.05)。结论 UⅡ可增强ox-LDL诱导的内皮细胞凋亡,并呈浓度依赖性,其作用可能与bcl-2、bax、caspase-3调节有关。     

十两茶提取物抗氧化型低密度脂蛋白诱导的内皮细胞衰老机制研究

目的：探讨十两茶提取物对氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导衰老细胞模型的影响及其可能的机制。方法将人脐静脉内皮细胞（HUVECs）株于含有10%牛血清的DMEM培养液中培养,使用ox-LDL孵育建立衰老细胞模型,用β?半乳糖苷酶染色法评价内皮细胞的衰老状态,分别予以不同剂量十两茶提取物及辛伐他汀预处理,检测培养液中活性氧（ROS）、非对称二甲基精氨酸（ADMA）、二甲基精氨酸二甲胺水解酶（DDAH）以及端粒酶活性水平。结果 ox-LDL诱导的内皮细胞衰老模型中β?半乳糖苷酶染色阳性的细胞数量显著增加,细胞内ROS水平、ADMA水平增强,DDAH和端粒酶活性降低,而十两茶提取物预处理可明显抑制这一过程（P＜0.05）。结论十两茶提取物在ox-LDL诱导的内皮细胞衰老进程中起抑制作用,其机制可能与降低细胞内ROS、ADMA水平以及提高DDAH水平和端粒酶活性有关。     

黄花倒水莲皂苷C抑制单核-内皮细胞黏附作用及其机制研究

目的研究黄花倒水莲皂苷C(RC)对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的单核-内皮细胞黏附的抑制作用及其机制。方法应用HPLC和ELISA法分别测定人单核细胞培养液中的非对称二甲基精氨酸(ADMA)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;检测单核内皮细胞黏附率。结果ox-LDL(100mg/L)孵育24 h能显著增加单核-内皮细胞的黏附率以及细胞上清夜中ADMA [(1．91±0．10)μmol/L]和TNF-α[(130．23±3．55)ng/L]的水平;预处理RC(1、3、10μmol/L)4 h能抑制ox-LDL诱导的单核-内皮细胞黏附率增加[(226±18)、(203±13)、(186±15)个/高倍视野]及ADMA[(0．69±0．06)、(0．65±0．01)、(0．55±0．07)μmol/L]和TNF-α[(150．02±6．06)、(87．08±8．12)、(80．24±3．65)ng/L]释放增加,且呈浓度依赖性。结论RC对ox-LDL诱导的单核-内皮细胞黏附有抑制作用,其作用与降低ADMA和TNF-α水平有关。     

缬沙坦对氧化低密度脂蛋白诱导的人内皮细胞基质金属蛋白酶-1表达的影响

目的观察缬沙坦对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人内皮细胞基质金属蛋白酶-1(MMP-1)表达的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,待细胞生长到融合状态时,将细胞分为4组:对照组;OX-LDL组(加ox-LDL 100 mg/L);低浓度组(先加ox-LDL 100 mg/L,再加缬沙坦10 μmol/L);高浓度组(先加ox-LDL 100mg/L,再加缬沙坦30μmol/L)。RT-PCR测定MMP-1 mRNA的表达。结果与对照组比较,ox-LDL组MMP-1mRNA的表迭明显增多(P<0.05),与ox-LDL组比较,低、高浓度组抑制MMP-1 mRNA的表达(P<0.05),并呈浓度依赖性。结论缬沙坦的抗炎及稳定动脉粥样硬化斑块的作用,可能与抑制内皮细胞MMP-1的表达有关。     

外源性硫化氢对氧化型低密度脂蛋白诱导组织因子和组织因子途径抑制物表达的影响

目的研究外源性硫化氢对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮细胞组织因子(TF)和组织因子途径抑制物(TFPI)表达的影响。方法培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC),分别以不同浓度NaHS(25、50、100及200μmol/L)和50 mg/L ox-LDL共孵育,RT-PCR和ELISA分别检测TF和TFPI mRNA表达和蛋白含量。结果用50mg/L ox-LDL孵育HUVEC 24 h后,TF mRNA表达上调8倍,蛋白含量增加7倍(P<0.01);而TFPI mRNA表达降低73%,蛋白含量减少65%(P<0.01)。用25、50、100及200μmol/L NaHS预孵育HUVEC 1 h,再与ox-LDL共同孵育,与ox-LDL组相比,加入不同浓度NaHS组TF mRNA分别降低12%、31%、63%和80%(P<0.05),蛋白含量分别降低13%、30%、62%和77%;TFPI mRNA表达分别升高0.6、1.2、2.0和2.6倍,蛋白含量分别升高0.3、0.7、1.1和1.6倍。结论 NaHS能抑制ox-LDL对内皮细胞TF表达的诱导作用,减轻ox-LDL对内皮细胞TFPI表达的抑制作用。     

沙格列汀对过氧化氢诱导损伤的血管内皮细胞二甲基精氨酸二甲胺水解酶/非对称性二甲基精氨酸/内源性一氧化氮合酶通路影响的研究

目的观察二肽基肽酶-4(DPP-4)抑制剂沙格列汀对过氧化氢(H2O2)诱导损伤的血管内皮细胞二甲基精氨酸二甲胺水解酶/非对称性二甲基精氨酸/内源性一氧化氮合酶(DDAH/ADMA/eNOS)通路的影响。方法以培养人脐静脉内皮细胞株(HUVEC)作为靶细胞,在内皮细胞培养基中加入100μmol/L的H2O2制备细胞损伤模型,以20μmol/L沙格列汀进行干预,观察24~72h,检测细胞上清一氧化氮(NO)含量、ADMA浓度,检测细胞中NOS活性、DDAH活性及DDAH蛋白表达量。结果H2O2作用HUVEC后,细胞上清中NO含量降低,而ADMA浓度增加(P0.05)。细胞中NOS活性、DDAH活性、DDAH-Ⅱ蛋白表达量降低(P0.05);而加入沙格列汀,细胞上清中NO含量升高,ADMA浓度降低(P0.05)。细胞中NOS活性、DDAH活性、DDAH-Ⅱ蛋白表达量升高(P0.05)。结论沙格列汀通过对DDAH/ADMA/eNOS通路的调节作用改善H2O2诱导的内皮细胞NO生成减少。     

阿托伐他汀对氧化低密度脂蛋白诱导人内皮细胞环氧化酶-2表达的影响

目的探讨阿托伐他汀对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）干预后人内皮细胞环氧化酶-2（COX-2）表达的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,待细胞生长到融合状态时加入ox-LDL,对照组不加任何干预,作用24 h后,分别加入不同浓度的阿托伐他汀（1、10及30μmol/L）继续培养24 h。采用逆转录聚合酶链式反应技术分别测定各组COX-2 mRNA的表达。结果Ox-LDL可诱导COX-2 mRNA的表达;不同浓度的阿托伐他汀可抑制ox-LDL诱导的COX-2 mRNA的表达,并呈浓度依赖性（P〈0.05）。结论内皮细胞源性COX-2在动脉粥样硬化斑块形成中可能起着重要的促炎作用;阿托伐他汀可抑制人脐静脉内皮细胞COX-2 mRNA的表达。     

辛伐他汀对内皮细胞PD-L1表达的影响

目的研究辛伐他汀对受氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）干预的人脐静脉内皮细胞程序性死亡配体1（PD-L1）表达的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,用50 mg/L ox-LDL含或不含5μmol/L辛伐他汀共同孵育温育人脐静脉内皮细胞12 h,RT-PCR及流式细胞术分别检测人脐静脉内皮细胞PD-L1 mRNA及蛋白表达水平。结果与对照组比较,ox-LDL刺激人脐静脉内皮细胞PD-L1表达明显升高（P〈0.01）;预先给予辛伐他汀可明显抑制ox-LDL诱导的PD-L1表达,与单纯ox-LDL组比较具有统计学差异（P〈0.05）。结论PD-L1参与了辛伐他汀的免疫抑制作用。     

不对称二甲基精氨酸对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量的影响

目的 观察不对称二甲基精氨酸（ADMA）对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量的影响.方法 THP-1单核细胞给予160nmol/L佛波酯（PMA）孵育48h,诱导分化成巨噬细胞,与80mg/L氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）孵育24h,使巨噬细胞转化为泡沫细胞,用油红O染色在光镜下鉴定泡沫细胞形态及变化.再以不同浓度ADMA（1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L）作用泡沫细胞24h,以20μmol/L ADMA作用泡沫细胞不同时间（0h,6h,12h,24h,48h）,酶比色法检测泡沫细胞内胆固醇的含量.结果 ①单核细胞加人PMA诱导48h后,分化为巨噬细胞,再经ox-LDL诱导24h后转化为泡沫细胞.②与对照组相比,5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L,30μmol/L的ADMA作用于,THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞24h后,细胞内胆固醇含量均明显增加（P＜0.01）,③与对照组相比,20μmol/L的ADMA作用于THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞12h,24h,48h,细胞内胆固醇含量均明显增加（P＜0.01）.结论 ①单核细胞株THP-1经PMA诱导后,可分化为巨噬细胞,再经ox-LDL诱导后,可转化为泡沫细胞.②ADMA可以增加THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇的含量.     

NF—κB对外周血单核细胞MMP-9 mRNA表达的影响

目的探讨核因子-κB（NF-κB）对外周血单核细胞基质金属蛋白酶9（MMP-9）mRNA表达的影响,以及二者与冠状动脉粥样硬化斑块不稳定性的关系。方法分离收集冠心病患者的外周血单核细胞,分别在不含血清的RPMI-1640中单独（空白对照组）或者加入氧化低密度脂蛋白（Oox-LDL）（ox-LDL组）孵育24h或先加PDTC（NF-κB抑制剂）（PDTC组）（10^-5mol／L）培育1h后加OX—LDL（40μg／ml）继续孵育24h,收集单核细胞提取总RNA,并用BT-PCR方法测定MMP-9、组织金属蛋白酶抑制物1（TIMP-1）mRNA的表达,采用ELISA法测定上清液中MMP-9、TIMP-1浓度。结果细胞上清液中MMP-9蛋白及单核细胞MMP-9mRNA表达增加（P〈0．01）。与空白对照组比较,ox-LDL组PDTC表达减少（P〈0．05）;TIMP-1 mRNA表达及细胞上清液中TIMP-1蛋白含量在各组间无统计学差异。结论OX-LDL可诱导人单核细胞MMP-9表达增加,并且NF-κB也参与了OX—LDL对MMP-9表达的促进作用,但对TIMP-1表达无影响。     

不稳定性心绞痛患者基质金属蛋白酶-1与细胞分化抗原40配体的研究

目的探讨自细胞分化抗原40配体（CD40L）介导基质金属蛋白酶-1（MMP-1）的表达与分泌在不稳定性心绞痛（UA）发病机制中所起的作用，以及MMP-1在UA患者危险度分层及预后价值中的作用。方法选择UA患者组64例，并按Braunwald分级分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级，选择稳定性心绞痛（SA）患者组56例及健康对照组40例，采用酶联免疫吸附法分别测定各组血清可溶性CD40L（sCD40L）、MMP-1的水平，分析UA组MMP-1与sCD40L之间的相关性，同时分析MMP-1水平与心血管事件发生率的相关性。结果（1）UA患者组MMP-1水平（53．53±18．25）μg／L显著高于SA患者组（31．28±13．64）μg／L（P〈0.01）及对照组（11．58±9．83）μg／L（P〈0．05）；sCD40L水平（3．21±2．78）μg／L显著高于sA患者组（1．83±1．37）μg／L（P〈0.01）及对照组（1．19±1．05）μg／L（P〈0．01）。（2）UA患者组MMP-1与sCD40L水平之间呈显著正相关（r=0．642，P〈0．01）。（3）UA患者组MMP-1水平升高组发生心血管事件明显高于MMP-1水平低者组（P〈0．01）。结论（1）UA患者外周血sCD40L、MMP-1水平升高，MMP-1与CD40L之间呈显著正相关，提示冠状动脉粥样硬化斑块的破裂可能与CD40L介导MMP-1的表达与分泌有关。（2）UA患者MMP-1水平与心血管事件发生率之间呈正相关性，提示MMP-1可作为UA患者危险度分层及预后有价值的生化指标。     

姜黄素调控炎症对内皮细胞增殖凋亡的影响

目的明确姜黄素对炎症诱导的血管内皮细胞损伤的保护机制。方法将人单核／巨噬细胞系（THP-1）分为空白对照组、高脂高糖组、高脂高糖＋姜黄素预处理组（高脂高糖浓度为25mmol／L葡萄糖＋500μmol／L棕榈酸）,分别给予相应处理24h,更换培养基继续培养24h,利用酶联免疫吸附法（ELISA）检测上清及实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）分析THP-1细胞内肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-6（IL-6）的表达,同时将上清作用脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）,HUVECs分为空白对照组、空对照条件培养基组、高脂高糖条件培养基组、姜黄素处理条件培养基组,并行噻唑蓝法（MTT）检测HUVECs增殖、流式细胞仪检测凋亡,Westernblotting分析磷酸化细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）及B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）蛋白表达。组间比较采用独立样本t检验,多组间比较采用单因素方差分析。结果高脂高糖组THP-1细胞内受体相互作用蛋白140（RIPl40）、TNF-α和IL-6mRNA表达及上清中炎症因子TNF-α和IL-6浓度明显高于空白对照组（t=8．55、9．44、9．73、16．01、19．22,均P〈0．05）。相对于高脂高糖组,姜黄素预处理组THP-1细胞内RIPl40、TNF-α和IL-6mRNA表达及上清中TNF-α和IL-6浓度明显下降（t=3．59、5．96、5．59、6．95、23．91,均P〈0．05）;高脂高糖条件培养基组HUVECs细胞活力明显低于空对照条件培养基组（24h,1．22±0．07比1．85±0．14,t=6．58,P〈0．05;48h,1．72±0．02比2．49±0．09,t=10．08,P〈0．05）,而姜黄素处理条件培养基组能够改善高脂高糖条件培养基对HUVECs增殖的抑制作用（24h,1．22±0．07比1．72±0．11,t=2．13,P〈0．05;48h,1．72±0．02比2．33±0．11,t=6．92,P〈0．05）;与空对照条件培养基组比较,高脂高糖条件培养基组能够明显增加HUVECs凋亡率、p-ERK表达及降低Bcl-2表达（t=9．82、9．69、4．61,均P〈0．05）,姜黄素处理条件培养基组与高脂高糖条件培养基组比较,下调RIPl40表达后能明显降低HUVECs凋亡率、p-ERK表达及增加Bcl-2表达（t=6．35、7．17、3．26,均P〈0．05）。结论姜黄素能够通过抑制高脂高糖诱导的炎症来调控HUVECs的增殖凋亡。     

白果内酯在鱼藤酮处理的PC12细胞中抑制α-共核蛋白蛋白寡聚体形成的实验研究

目的研究白果内酯对鱼藤酮诱导的帕金森病细胞模型是否具有保护作用,对α-共核蛋白（α-synuclein）的表达及聚集是否有影响。方法使用鱼藤酮对嗜铬细胞瘤株PCl2细胞进行处理,建立叶synuclein蛋白高表达的帕金森病细胞模型,白果内酯进行干预,采用四甲基偶氮唑盐法（MTT法）检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting法检测α-synuclein蛋白的表达。数据以均数±标准差（面±5）表示,应用SPSS16．0统计软件,多组间比较采用单因素方差分析,两组间独立样本的比较采用LSD—t检验,P〈0．05认为差异有统计学意义。结果1．6μmoL／L鱼藤酮组细胞活性显著低于对照组（t=17．422,P〈0．01）,细胞凋亡率和α--synuclein蛋白量高于对照组（t=9．141,t=8．392;P均〈0．01）;10μmol／L及50／μmol／L白果内酯组细胞活性均高于鱼藤酮组（t=4．257,t=6．501;P均〈0．01）,且高剂量者细胞活性更优（t=2．933,P=0．043）;10μmol／L及50μmoL／L白果内酯组细胞凋亡率较鱼藤酮组低（t=4．482,t=4．488,P均〈0．01）,α-synuclein蛋白的表达量低于鱼藤酮组（t=8．349,t：9．028,P均〈0．01）,但两剂量间二者均无统计学差异（￡=0．831,P=0．45;t=2．178,P=0．095）;实验中所显影的α-synuclein蛋白分子量在57kD左右。结论白果内酯对鱼藤酮诱导的PCI2细胞损伤有保护作用,该保护作用可能通过抑制仅,synuclein蛋白寡聚物的形成来实现。     

姜黄素抑制棕榈酸诱导的巨噬细胞炎症反应的机制研究

目的探讨姜黄素抑制棕榈酸诱导的巨噬细胞炎症反应的作用机制。方法以0、250、500μmol／L棕榈酸干预小鼠巨噬细胞RAW264．724h,观察细胞形态,逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）检测细胞中受体相互作用蛋白140（RIPl40）、肿瘤坏死因子a（TNF-a）、白细胞介素-6（IL-6）mRNA水平,酶联免疫吸附实验（ELISA）检测上清中TNF-a、IL-6水平;噻唑蓝法（MTr）确定姜黄素作用RAW264．7细胞的最佳时间和浓度;细胞分为姜黄素组和对照组,分别给予20μmol／L姜黄素和二甲基亚砜（DMSO）预处理1h后,均给予500μmol／L棕榈酸作用24h,观察细胞形态并检测细胞中RIPl40、TNF-a、IL-6mRNA水平和上清中TNF-a、IL-6浓度。采用单因素方差分析和t检验对研究数据进行统计检验。结果500μmol／L棕榈酸组RIPl40mRNA表达较0μmol／L组显著升高（3．40±0．51比1．01±0．21,t=7．436,P〈0．01）;0、250、500μmol／L棕榈酸组TNF-amRNA（1．00±0．03、1．79±0．12、2．16±0．13）和蛋白[（197±25）、（371±10）、（485±17）ng／L]、IL-6mRNA（1．00±0．51、2．55±0．15、2．59±0．17）和蛋白[（953±66）、（1081±36）、（1182±18）ng／L]与棕榈酸剂量明显相关（F=99．308、187．049、152．958、26．594,均P〈0．01）;棕榈酸处理后,细胞变圆、皱缩甚至崩解;姜黄素作用RAW264．7细胞的最佳时间为1h,最佳浓度为20ixmol／L;姜黄素组与对照组相比,RIPl40mRNA（1．00±0．05比0．63±0．01,t=一13．79,P〈0．01）、TNF-amRNA（0．64±0．11比1．00±0．07,t=一4．532,P〈0．05）和蛋白[（322±12）比（485±17）ng／L,t=一13．577,P〈0．01]、IL-6mRNA（0．57±0．05比1．00±0．02,t=一14．167,P〈0．01）和蛋白[（241±47）比（1182±18）ng／L,t=一44．810,P〈0．01]均显著降低,而细胞形态正常,细胞问仍有连接融合。结论RIPl40可能参与姜黄素抑制棕榈酸诱导的炎症反应过程。     

血清同型半胱氨酸水平异常与脑小血管病的相关性研究

目的探讨血清同型半胱氨酸（Hcy）水平异常与脑小血管病（CSVD）的相关性。方法连续收集204例脑小血管病患者血清同型半胱氨酸及临床资料,其中腔隙性梗死（LI）103例,脑白质病变（WML）101例,以同期健康体检者56例为对照,研究血清同型半胱氨酸水平异常与脑小血管病的相关性。结果 CSVD患者血清Hcy水平[（17.24±7.37）μmol/L]显著高于对照组[（13.70±7.08）μmol/L],差异有统计学意义（P〈0.01）。WML组Hcy水平[（18.66±7.06）μmol/L]显著高于LI组[（16.14±7.24）μmol/L],差异有统计学意义（P〈0.01）。Logistic回归分析显示Hcy水平与CSVD发病密切相关（OR=1.11,P〈0.01）,Hcy水平与WML及LI发病密切相关（OR=1.10、1.07,P〈0.05）。结论血清同型半胱氨酸水平异常与脑小血管病具有显著相关性,且在脑白质病变组更显著。     

姜黄素对人肝星状细胞中神经生长因子及其低亲和力受体表达的影响

目的观察姜黄素对人肝星状细胞(HSC)中神经生长因子(NGF)及其低亲和力受体P75NTR表达的影响,探讨姜黄素逆转肝纤维化的可能机制。方法体外培养人HSC株LX-2,分别给予0~80μmol/L不同浓度的姜黄素作用于LX-2,MTT法检测细胞增殖;选取30~50μmol/L姜黄素分别作用于LX-2,细胞免疫化学染色检测NGF和P75NTR表达,计算阳性细胞率。结果 10~20μmol/L姜黄素作用下LX-2增殖与对照组相比,差异无统计学意义(P0.05);在30~80μmol/L浓度范围内,LX-2增殖显著降低(P0.05);在30~50μmol/L浓度范围内,NGF蛋白表达率分别为(46.59±8.15)%、(90.75±4.72)%、(83.32±4.78)%,对照组为(27.11±5.50)%;P75NTR为(37.17±4.71)%、(88.74±6.27)%、(83.79±4.70)%,对照组为(24.33±5.17)%,差异均有统计学意义(P0.01)。结论姜黄素可诱导人HSC中NGF和P75NTR的蛋白表达,这可能是姜黄素逆转肝纤维化的机制之一。