两种人乳头瘤病毒分型检测方法的比较

目的通过比较PCR联合地高辛标记探针杂交法与实时荧光定量PCR法检测宫颈液标本中人乳头瘤病毒(HPV)感染的一致性,评价PCR联合地高辛标记探针杂交法的临床应用价值。方法将4型HPV(16、51、54和56)探针3′端加尾地高辛标记,检测标记探针的灵敏度和特异性。收集63例第二代杂交捕获(HC-Ⅱ)阳性和18例HC-Ⅱ阴性的宫颈液标本,采用HPV通用引物MY11/09对所有标本L1区基因序列进行PCR扩增,利用地高辛标记探针杂交法对PCR产物进行检测分型;同时利用实时荧光定量PCR对这81例标本进行检测,将两者的检测结果进行比较。结果地高辛标记探针杂交法检测出HC-Ⅱ阳性标本中HPV-16型40例,HPV-51型2例,HPV-56型2例,分别占HC-Ⅱ阳性标本的63.5%、3.2%和3.2%,HC-Ⅱ阴性标本中检测出HPV-16型1例;实时荧光定量PCR法检测出HC-Ⅱ阳性标本中HPV-16型39例,HPV-51型2例,HPV-56型2例,占HC-Ⅱ阳性标本的61.9%、3.2%和3.2%,HC-Ⅱ阴性标本中检测出HPV-16型1例;重复性检测显示两种方法检测4型HPV感染的变异系数(CV)为0~1.45%和0~1.50%,检测标本中4型感染的符合率为97.5%~100%。结论PCR联合地高辛标记探针杂交法具有较好的灵敏度和特异性,可能对于临床HPV分型检测有应用价值。     

实时荧光聚合酶链反应技术与第2代杂交捕获法检测高危亚型人乳头瘤病毒的比较

目的 比较实时荧光聚合酶链反应技术(实时PCR)检测人乳头瘤病毒(HPV)16、18型与第二代杂交捕获法(HC-Ⅱ)检测13种HPV高危亚型.方法 采用实时PCR与HC-Ⅱ分别检测宫颈脱落细胞标本中的HPV16、18型和13种HPV高危亚型,并进行测序分析.结果 HPV16、18型实时PCR总的检出率为24%,13种HPV高危亚型HC-Ⅱ总的检出率为46.6%;高度鳞状上皮细胞内病变(HSIL)组实时PCR和HC-Ⅱ的检出率均较低度鳞状上皮细胞内病变(LSIL)组要高,分别为54%与21%、84.3%与65.6%.HPV16、18型在HPV高危亚型中的总检出率为51%.有2例宫颈炎组标本HC-Ⅱ检测阴性而实时PCR检测阳性,测序结果与实时PCR一致.结论 实时PCR法检测HPV16、18较HC-Ⅱ灵敏度高,但检测的HPV亚型少,相比之下HC-Ⅱ更适合于临床上HPV高危亚型的筛查检测.     

实时荧光定量PCR在高危型HPV感染检测中的应用价值

目的分析实时荧光定量PCR检验在高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染检测中的应用价值。方法选取2018年2月至2019年12月新野县人民医院收治的198例高危型HPV感染患者,均行实时荧光定量PCR检验、第二代杂交捕获试验(HC-Ⅱ)检测,比较实时荧光定量PCR检验、HC-Ⅱ检测阳性检出率和符合率,统计不同病变类型检出情况。结果实时荧光定量PCR检验HPV阳性检出率[75.25%(149/198)]较HC-Ⅱ检测[62.63%(124/198)]高,差异有统计学意义(P<0.05);实时荧光定量PCR检验、HC-Ⅱ检测符合率为83.33%(165/198)(Kappa值=0.618,P<0.001);实时荧光定量PCR检验鳞状上皮病变和慢性宫颈炎检出率[62.50%(40/64)]较HC-Ⅱ检测[32.81%(21/64)]高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论实时荧光定量PCR检验、HC-Ⅱ检测应用于高危型HPV感染患者中一致性较好,但实时荧光定量PCR检验HPV阳性、鳞状上皮病变和慢性宫颈炎检出率较高,对促使临床制定针对性的治疗方案,改善患者预后有积极意义。     

用PCR和地高辛标记的核酸杂交技术检测女性下生殖道人乳头瘤病毒感染

<正> 应用多聚酶链反应(PCR)和地高辛标记的HPV11、18型DNA探针的斑点及Southern Blot杂交3种方法,同时检测了17例外阴和宫颈湿疣的标本。结果:①PCR检测结果:17例标本中HPV阳性14例,占82.4％。HPV11型阳性13例,占阳性病例的92.9％;HPV18型阳性6例,占42.9％;HPV11、18型同时阳性5例,占35.7％。②地高辛标记的斑点杂交结果:17例标本中HPV阳性9例,占52.9％。其中HPV11型感染8例,占阳性例数的     

环介导等温扩增法检测人乳头瘤病毒16、18的应用研究

目的:环介导等温扩增技术检测人乳头瘤病毒HPV16、18的应用研究。方法:收集宫颈癌行HC-Ⅱ-HPV检测标本高危型的47例,低危型34例。阴性对照20例,分别利用环介导等温扩增(LAMP)方法和PCR方法进行检测,并对检测结果进行比对分析。结果:HC-Ⅱ-HPV筛查的高危组标本中,LAMP检出HPV16和HPV18的阳性率分别是37%和6%,均高于PCR的31%和4%,在HC-Ⅱ-HPV筛查的低危组标本中,LAMP法和PCR法均有高危型别的检出。LAMP法略优于PCR法,二者比较无统计学差异(P>0.05)。结论:LAMP法在HPV高危型16、18的筛查中与PCR法无差异,然而LAMP法是更经济、便捷的HPV16、18亚型筛查方法。     

高危型人乳头瘤病毒阴性宫颈癌患者临床病理特征分析

背景　宫颈癌是女性常见的生殖道恶性肿瘤。高危型人乳头瘤病毒（HPV）的持续感染是其主要病因。然而临床研究发现,有相当一部分宫颈癌患者高危型HPV检测结果为阴性,且这类患者术后复发风险、肿瘤细胞侵袭以及转移风险均增加。目的　分析高危型HPV阴性宫颈癌患者的临床病理特征。方法　2003-2016年浙江大学医学院附属妇产科医院住院治疗、临床病理资料完整且术前有HPV-HC2检测结果的宫颈癌患者共1 416例,经第2代杂交捕获技术（HC-Ⅱ）检测高危型HPV阳性宫颈癌患者1 296例,高危型HPV阴性宫颈癌患者120例。调取120例高危型HPV阴性宫颈癌组织石蜡标本,采用实时荧光聚合酶链式反应（PCR）法对高危型HPV进行再检测,获取高危型HPV真阴性患者为高危型HPV阴性组。从1 296例高危型HPV阳性宫颈癌患者中以随机数字表法选取与高危型HPV真阴性组等量的患者为高危型HPV阳性组。收集两组患者的发病年龄、初次生育年龄、分娩次数、临床分期及病理类型等。结果　1 416例宫颈癌患者中,HC-Ⅱ法检测高危型HPV阴性120例,阴性率为8.5%。实时荧光PCR法显示,高危型HPV仍为阴性89例,阴性率为6.3%,两次检测符合率为74.2%（89/120）。高危型HPV阴性组患者发病年龄28~75岁,平均发病年龄（45.2±4.2）岁;高危型HPV阳性组患者发病年龄21~78岁,平均发病年龄（46.3±5.1）岁。两组患者平均发病年龄、各发病年龄构成、初次生育年龄、分娩次数、临床分期比较,差异均无统计学意义（P>0.05）。两组患者病理类型比较,差异有统计学意义（χ2=22.062,P=0.001）。结论　采用实时荧光PCR法检测宫颈癌组织石蜡样本中的高危型HPV是一种高敏感度的检测方法。与高危型HPV阳性宫颈癌相比,高危型HPV阴性宫颈癌发病率不高,但其腺癌、腺鳞癌及其他少见类型癌的比例高于高危型HPV阳性的宫颈癌患者。     

多通道实时荧光定量PCR检测HPVDNA结果分析

目的探讨多通道实时荧光定量PCR检测HPVDNA的效果,并应用于日常检测工作。方法对临床1100例宫颈分泌物标本采用多通道实时荧光定量PCR仪进行8种高危HPVDNA分型及定量检测。8种高危HPV型别为主要高危型HPV16、18、45、31和次要高危型HPV33、52、58、67。结果在1100例标本中排除了14例B球蛋白为阴性的标本,剩余1086例标本总体的内标平均值为3．71×10^6IU／ml。随机重复性试验和对每个型别的各浓度标本进行的重复性试验每次扩增均为阳性,型别符合率为100％。共检测出阳性标本287例,HPV16、HPV18／45、HPV31、次要高危型和合并感染各有46、17、14、146和64例,分别占总阳性标本的16％、6％、5％、51％和22％。所有标本绝对定量值的分布近似于正态分布。结论多通道荧光定量PCR检测HPVDNA灵敏度高、复性好,可用于临床HPV感染的筛查与宫颈病变程度预测以及患者术后疗效观察。     

上海地区女性生殖道人乳头瘤病毒感染的检测

应用地高辛甙元标记人乳头瘤病毒(HPV)-6,11,16和18探针,通过核酸杂交法检测上海地区女性患者HPV的感染。计活检组织标本128例,阴道脱落细胞130例,同时取样34例。斑点杂交结果表明活检组织中四种类型HPV的总阳性率:宫颈癌44％,宫颈间变66.7％,有间变史28.6％,外阴尖锐湿疣63％和慢性宫颈炎5.6％。阴道脱落细胞的各阳性率与之相近,同时取样的检测符合率为91.2％。Southern转移杂交结果提示:宫颈癌以HPV-16型为主,尖锐湿疣中的HPV为6和11型     

妊娠女性荧光定量检测高危HPV感染情况及基因型分析

目的:应用荧光定量PCR反应(FQ-PCR)技术检测北京地区妊娠中期不同年龄女性高危人乳头瘤病毒(HPV)感染情况,了解基因型别分布情况。方法:采用FQ-PCR方法对2030例妊娠中期女性进行15种高危型HPV型别分析。结果:北京地区妊娠中期女性HPV感染率为10.79%,其中高危型HPV-52、HPV-58、HPV-51、HPV-16感染率最高,占15种HPV型别检出型别的百分率依次为23.29%、15.53%、14.16%、13.70%。6个年龄组感染率最高依次为小于20岁、20~24岁、40岁以上,分别为20.00%、15.85%、13.63%。结论:北京地区妊娠中期女性高危型HPV感染较为普遍,HPV-52、HPV-58、HPV-51、HPV-16型别感染最为多见。低龄段妊娠期女性感染率最高,应加强随访。     

129例生殖道人乳头瘤病毒感染的分型

目的 了解女性生殖道人乳头瘤病毒（HPV）感染的型别组成。方法 用荧光定量聚合酶链反应（PCR）对129例已确诊为HPV感染的门诊标本进行HPV6、11型和HPV16、18型的分型检测。结果 在129例标本中检出阳性126例,阳性检出率为97.7%。其中单独HPV6、11型阳性69例,占53.5%;单独HPV16、18型阳性14例,占10.9%;HPV6、11和HPV16、18型同时阳性43例,占33.3%;HPV6、11和HPV16、18型同时阴性3例。结论 在女性生殖道HPV感染中HPV6、11、16、18占绝对优势。