CO2气腹对恶性妇科肿瘤患者腹膜间皮细胞MMP-2和MMP-9表达的影响

目的探讨CO2气腹对妇科恶性肿瘤腹腔镜手术患者腹膜间皮细胞基质金属蛋白酶（MMP）-2和MMP-9表达的影响。方法选择妇科恶性肿瘤腹腔镜手术患者20例及开腹手术10例分别作为腹腔镜组和开腹组。免疫组化（EnVision）法测定患者不同时间（手术开始，手术30min和60min）和不同部位（切口处及远离切口处）腹膜间皮细胞MMP-2和MMP-9的表达。结果腹腔镜组腹膜间皮细胞MMP-2和MMP-9的阳性表达率（分别为41．67％和45．83％）与开腹组（分别为6．67％和13．33％）比较，差异均有统计学意义（P〈0．05）。腹腔镜组不同手术时间及不同取材部位MMP-2和MMP-9的阳性例数比较，差异均无统计学意义（P〉0．05）。开腹组不同手术时间MMP-2和MMP-9的阳性例数比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；切口处腹膜间皮细胞MMP-9阳性例数与远离切口处比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论妇科恶性肿瘤腹腔镜手术中使用CO2气腹可导致腹膜间皮细胞MMP-2和MMP-9的表达上升，CO2气腹可能对肿瘤转移有一定影响。     

妇科腹腔镜手术中CO2气腹对脑摄氧的影响

1 临床资料选择ASA-Ⅱ级妇科患者32例,年龄22～46(平均31.0±8.7)岁,体质量48～76(平均58.7±9.4)kg,其中腹腔镜切除子宫肌瘤4例,卵巢囊肿胀12例,治疗不孕症状16例,术前心肺功能及生化检查无异常.     

妇科电视腹腔镜手术建立CO2气腹时的心血管反应

目的：观察妇科腹腔镜手术CO2充气时的心血管反应及静注芬太尼和利多卡因对减弱应激反应的临床效果。方法：30例全麻下拟行妇科腹腔镜手术患者,随机分为2组,Ⅰ组为对照组,即芬太尼组,Ⅱ组为芬太尼＋利多卡因组。气腹建立前分别静注上述药物。观察充气开始,充气2min、气腹建立时的循环变化。结果：Ⅰ组充气过程、BP、HR、RPP均升高;与充气开始时相比,气腹建立时SPB、DBP有显著性差异（P＜0．05）。Ⅱ组充气过程心血管反应平缓,与充气开始时相比无统计学差异。两组相比,充气时HR、RPP有显著性差异（P＜0．05）。结论：气腹建立前静注芬太尼和利多卡因可明显减弱心血管反应,有利于维持血流动力学的稳定。     

肾上腺皮质肿瘤中E-cadherin、MMP-2及MMP-9的表达及意义

目的 探讨上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9在肾上腺皮质肿瘤中的表达及其临床意义.方法 免疫组织化学技术检测55例肾上腺皮质肿瘤(15例肾上腺皮质癌和40例肾上腺皮质腺瘤)及10例正常肾上腺组织中MMP-2、MMP-9及E-cadherin的表达.结果 MMP-2、MMP-9及E-cadherin在肾上腺皮质癌组织中的阳性表达率分别为80%(12/15)、66.7%(10/15)和20%(3/15),在肾上腺皮质腺瘤中为27.5%(11/40)、25%(10/40)和52.5%(21/40),而在正常肾上腺组织中则为0%(0/10)、10%(1/10)和100%(10/10).MMP-2和MMP-9在肾上腺皮质癌中的表达较腺瘤组织及正常肾上腺组织高,而E-cadherin的表达则相反,差异均有统计学意义(P<0.05).E-cadherin、MMP-2及MMP-9与肾上腺皮质肿瘤患者的年龄、性别、肿瘤大小无关(P>0.05),但与肾上腺皮质癌中TNM分期、是否有淋巴结转移有关(P<0.05).肾上腺皮质肿瘤中E-cadherin与MMP-2、MMP-9的表达呈负相关.结论 E-cadherin、MMP-2及MMP-9在良恶性肾上腺皮质肿瘤中呈差异性表达,E-cadherin表达的减弱与MMP-2及MMP-9表达的增强均与肿瘤的形成和转移有一定的联系.     

腺苷对人Müller细胞MMP-2和MMP-9mRNA表达的影响

目的 探讨腺苷受体在人Müller细胞中的表达情况以及腺苷(adenosine,ADO)对人Müller细胞中基质金属蛋白酶-2 (matrix metalloproteinases-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶-9 (matrix metalloproteinases-9,MMP-9) mRNA表达的影响.方法 ...     

腹腔镜CO2气腹对妇科恶性肿瘤生长和转移的影响

腹腔镜以其微创、少痛和易恢复等优点使其在近年来的妇科手术中得到越来越广泛地使用。腹腔镜设备和技术也在不断改进与完善，不少学者尝试在腹腔镜下完成妇科恶性肿瘤的手术治疗，并取得了相应的进展。但随着腹腔镜在妇科恶性肿瘤的诊断和治疗中应用的增多，在临床和实验研究中，有关在CO2气腹条件下恶性肿瘤生长加快、易复发以及戳口肿瘤种植转移率升高的报道也越来越来多，其中尤以CO2气腹对恶性肿瘤的影响备受人们的关注，并成为近年来的一个研究热点。现就腹腔镜CO2气腹对妇科恶性肿瘤的影响及预防综述如下。     

穿心莲有效成分对巨噬细胞MMP-2、MMP-9表达和活性的影响

目的 探讨穿心莲有效成分(API0134)是否具有抑制小鼠腹腔巨噬细胞基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9(MMP-2,MMP-9)活性及其mRNA表达的作用.方法 用腹腔冲洗的方法收集小鼠腹腔巨噬细胞,使用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激巨噬细胞,同时分别以不同浓度的API0134对巨噬细胞进行干预.采用免疫荧光方法、明胶酶谱法和RT-PCR的方法检测ox-LDL和API0134对巨噬细胞MMP-2、MMP-9活性和表达的影响.结果 与对照组相比,ox-LDL组MMP-2及MMP-9活性和mRNA表达显著升高(均P＜0.01).与ox-LDL组相比,加入50 μg/mL API0134组MMP-2及MMP-9的活性和mRNA表达变化不明显(均P＞0.05),而加入100、200 μg/mL API0134组的MMP-2及MMP-9的活性和mRNA表达均有不同程度的下降(均P＜0.05).结论 穿心莲有效成分能够抑制ox-LDL对巨噬细胞MMP-2及MMP-9活性和mRNA表达的上调作用,因此可能具有维护粥样斑块稳定,减少斑块破裂危险的作用.     

膀胱癌组织中MMP-2和MMP-9的表达及其意义

目的:探讨膀胱癌中MMP-2和MMP-9表达的临床意义.方法:采用免疫组化方法对72例膀胱移行细胞癌及10例肾囊肿组织和10例正常膀胱粘膜组织中MMP-2和MMP-9进行染色,观察其与肿瘤的发生及分期、分级的关系.结果:MMP-2在膀胱癌组织、肾囊肿组织中阳性表达率分别为83.33%(60/72)和20.00%(2/10);MMP-9在膀胱癌组织、肾囊肿组织中阳性表达率分别为72.22%(52/72)和70.00%(7/10),MMP-2、MMP-9在正常膀胱粘膜组织中无1例阳性表达,三者阳性率比较,差异有统计学意义(P＜0.01);在癌组织Ta～T1、T2～T4、Ⅰ和Ⅱ～Ⅲ中MMP-2阳性率分别为56.67%(17/30)、76.19%(32/42)、72.00%(18/25)和78.72%(37/47),MMP-9阳性率分别为70.00%(21/30)、73.81%(31/42)、73.00%(19/25)和82.98%(39/47),随肿瘤分级的增高,MMP-2和MMP-9的表达显著增强(P＜0.01,P＜0.05).结论:MMP-2和MMP-9在膀胱移行细胞癌的发生和侵袭过程中起到了重要作用.     

MMP-2与肿瘤的研究进展

目的 探讨MMP-2与多种肿瘤侵袭和转移间的关系.方法 查阅大量国内外文献.结果 MMP-2通过降解细胞外基质、促进新生血管形成、调节细胞间的粘附等机制,促使肿瘤发生侵袭和转移;不同肿瘤中MMP-2有不同程度的增加,且与肿瘤的进展和预后相关.结论 MMP-2可以作为特异性的分子标志物,被用于各种癌前病变和肿瘤的筛查.本文就MMP-2和肿瘤的相关研究进展作一综述.     

妇科恶性肿瘤腹腔镜术建立CO2气腹过程中的腹膜免疫因子变迁机制

目的 探讨妇科恶性肿瘤腹腔镜术建立CO2气腹过程中的腹膜免疫因子变迁机制。方法 选取广州医科大学附属肿瘤医院妇科恶性肿瘤患者64例。根据手术方式将其分为两组,观察组34例,行腹腔镜术;对照组30例,行传统开腹手术。采用流式细胞术测定术前术后外周血CD4＋T淋巴细胞、NK细胞及CD4＋CD25highCD127lowTreg水平;采用ELISA法检测术后腹膜免疫因子IL-6、TNF-β、TNF-α水平。结果 经建立CO2气腹的腹腔镜术后1 d观察组患者外周血CD4＋T淋巴细胞、NK细胞水平显著低于对照组,而CD4＋CD25highCD127lowTreg细胞水平显著高于对照组（P〈0.05）;但术前1 d及术后1周,两组患者的外周血CD4＋T淋巴细胞、NK细胞及CD4＋CD25highCD127lowTreg细胞水平比较差异无统计学意义（P〉0.05）;观察组腹膜免疫因子（IL-6、TNF-α）水平均显著低于对照组,而TNF-β水平显著高于对照组（P〈0.05）;CD4＋CD25highCD127lowTreg水平与恶性肿瘤的临床分期相关,表现为Ⅱ～Ⅲ期患者显著高于Ⅰ期患者（P〈0.05）;经Pearson相关性分析发现：CD4＋CD25highCD127lowTreg与IL-6、TNF-α水平呈负相关（r=-0.741、-0.695,P〈0.05）;CD4＋CD25highCD127lowTreg与TNF-β呈正相关（r=0.694,P〈0.05）。结论 妇科恶性肿瘤腹腔镜术建立CO2气腹过程中可能通过抑制腹膜免疫因子IL-6、TNF-α水平或增加CD4＋CD25highCD127lowTreg细胞水平的方式降低患者的免疫功能,随术后时间的延长患者免疫功能可恢复。     

Effect of human osteopontin on proliferation, transmigration and expression of MMP-2 and MMP-9 in osteosarcoma cells

Background To explore the effect of human osteopontin (hOPN) on the proliferation, transmigration and expression of matrix metallproteinase-2 (MMP-2) and matrix metallproteinase-9 (MMP-9) in osteosarcoma (OS) cells in vitro.Methods The prokaryotic-expression vector of hOPN was produced, hOPN was then subcloned into E. coli BL21 (DE3) cells and purified with ProBond^TM Columns. The proliferation, cell cycle and the expression of cycUn A in OS cells were investigated by using MTT assay, flow cytometry and Western blot respectively. The transmigration of OS cells was checked by using transwell cell culture chamber.The micro-pore-filter-membrane system was used to study the chemiotaxis of hOPN to OS cells. The levels of total protein were examined according to Coomassie Brilliant Blue manuals. The expression of MMP-2 and MMP-9 were evaluated by detecting the volume of degradation of gelatin on SDS-PAGE gel.Results The prokaryotic-expression vector of hOPN and purified hOPN protein were achieved hOPN promoted OS cells proliferation in a dose-dependent manner, and stimulated cyclin A expression in OS cells to accelerate cell division cycle, hOPN facilitated the trans-membrane migration of OS cells.hOPN also enhanced the secretion of MMP-2 and MMP-9 in OS cells.Conclusion hOPN could stimulate cyclin A expression in OS cells, hOPN has chemiotaxis to OS cells and increases their transmigration, hOPN enhances the secretion of MMP-2 and MMP-9 in OS cells.     

共培养体系中卵巢癌细胞对内皮祖细胞成管及MMP-2和MMP-9表达的影响

目的观察血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)对共培养体系中(EPCs+SKOV3)内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的成管能力和MMP-2、MMP-9的表达影响。方法采用密度梯度离心法分离EPCs,先在Matrigel基质胶中测定其成管能力,再与SKOV3共培养后测定成管能力,最后在共培养体系中加入不同浓度的血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)抗体再分别测定不同浓度抗体组的EPCs成管能力。采用RT-qPCR及Western blot测定不同浓度抗体组EPCs中MMP-9、MMP-2的表达量。结果 EPCs单独成管时管腔个数为(18.00±1.00),较共培养组(36.33±1.52)明显降低(P<0.05)。加入25、50、100μg VEGF抗体的共培养组EPCs成管个数分别为32.00±1.00、26.33±0.57、20.33±1.15,均较共培养组降低(P<0.05)。RT-qPCR及Western blot结果显示:共培养组MMP-2和MMP-9 mRNA相对表达倍数较EPCs组分别上调了4.36、3.34倍(P<0.05),蛋白表达量上调了2.99、6.63倍(P<0.05);加入VEGF抗体100、50μg的共培养组的MMP-2 mRNA相对表达倍数较共培养组分别下调了2.08、2.11倍(P<0.05),蛋白表达下调了2.12、1.71倍(P<0.05);加入VEGF抗体100μg的共培养组的MMP-9 mRNA相对表达倍数较共培养组下调2.13倍(P<0.05),蛋白表达下调了2.94倍(P<0.05)。结论 SKOV3可能通过分泌VEGF调节EPCs MMP-2、MMP-9蛋白的表达,从而促进EPCs的成管能力。     

CTGF基因转染对宫颈癌细胞MMP-2、MMP-9表达及细胞增殖的影响

目的:研究结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)基因对人宫颈癌Hela细胞基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达及细胞增殖的影响,探讨CTGF在宫颈癌侵袭和转移中的作用机制。方法:经脂质体介导将含有CTGF重组表达质粒转染人宫颈癌Hela细胞株,用G418筛选阳性细胞克隆及实时荧光定量PCR、蛋白质印迹鉴定;采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测阳性克隆细胞MMP-2及MMP-9的表达;噻唑盐(MTT)比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性。结果:成功建立稳定高表达CTGF的阳性Hela细胞克隆,证实其MMP-2、MMP-9表达及细胞增殖活性均显著增高。结论:CTGF转染可显著增加宫颈癌细胞MMP-2及MMP-9的表达并促进其细胞增殖,CTGF可能是宫颈癌基因治疗的潜在靶点。     

利凡诺对B16黑色素瘤细胞生长及MMP-2、MMP-9表达的影响

目的:观察利凡诺对体外培养的B16黑色素瘤细胞生长状态及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响,研究利凡诺的抗肿瘤转移作用。方法:用噻唑蓝(MTT)法检测利凡诺对B16黑色素瘤细胞的生长抑制率;酶联免疫吸附法检测细胞培养上清的MMP-2蛋白相对含量;免疫细胞化学染色检测MMP-2、MMP-9蛋白表达情况。结果:MTT法检测结果显示,不同浓度的利凡诺对细胞都有明显抑制并伴有时间及浓度依赖性;6.25、12.5μg.ml-1的利凡诺组在72 h与同时段对照组比有显著差异(P<0.05);利凡诺各药物组的MMP-2、MMP-9蛋白阳性表达随药物浓度的增加而减弱。结论:利凡诺可以抑制B16细胞的生长,并且具有潜在的抑制肿瘤侵袭和转移的作用。     

妇科腹腔镜手术头低脚高位和CO2气腹对循环的影响简

目的探讨妇科腹腔镜手术头低脚高位和CO2气腹对循环的影响。方法选择于北京妇产医院行妇科腹腔镜手术的10例ASAI级的健康女性为研究对象,以瑞芬太尼和依托咪酯静脉诱导气管插管和维持。监测创建气腹前平躺时（T1）、头低10°时（T2）、头低20°时（T3）、手术开始时、创建气腹后气腹压10mmHg及15mmHg平躺时、头低10°时及头低20°时（T4-1、T4-2、T4-3和T5-1、T5-2、T5-3）的心率、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、平均动脉压、心排量、心指数、每搏量、每搏指数、每搏量变异和脑电双频指数（BIS）。结果腹腔充气前,仰卧位、头低脚10°和200三个时点,各项血流动力学参数无明显变化;充气前SBP为（105．8±4．0）mmHg、DBP为（64．1±2．2）mmHg,充气后SBP为（121．4±4．1）mmHg、DBP为（81．3±3．6）mmHg,充气后血压明显高于充气前,差异有高度统计学意义（P〈0．01）,但是充气后体位对各项血流动力学参数并无明显影响。气腹压12mmHg和15mmHg相比,血流动力学无明显改变。结论无合并症的患者可以较好地耐受常规的头低脚高位对机体的影响,腹腔镜下CO2气腹对患者的循环影响较大,如果高气腹压持续时间较长,会对患者造成不良影响,特别是老年人、高血压及心脏病患者。     

清肺化痰通络方对肺纤维化大鼠基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的探讨清肺化痰通络方对博莱霉素A5（BLMA5）所致肺纤维化大鼠的干预作用及可能机制。方法将Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、干预组。模型组和干预组通过气管插管灌注BLMA5复制大鼠肺纤维化模型,对照组给予等量生理盐水气管灌注;对照组和模型组给予生理盐水灌胃,干预组给予清肺化痰通络方药物灌胃。灌胃后3、7、14、28d分别处死大鼠,采用HE和Masson染色观察肺组织病理变化,免疫组化染色检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、MMP-9在肺组织的表达水平。结果清肺化痰通络方能显著改善大鼠的一般身体状况．减轻肺泡炎及肺纤维化的程度。干预组和模型组肺内MMP-2表达在第14天达到高峰,MMP-9的表达在第7天达到高峰,且两组同时期MMP-2、MMP-9的表达均高于对照组（P〈0．05）;干预组MMP-2、MMP-9表达低于同时期模型组（P〈0．01）。结论清肺化痰通络方可能通过抑制MMP-2、MMP-9在肺内的表达,对BLMA5致肺组织纤维化起到一定的防治作用。     

A771726对经PMA活化的THP-1细胞MMP-2及MMP-9表达的影响

目的 观察来氟米特活性代谢产物A771726对经PMA活化的THP-1细胞MMP-2及MMP-9表达的影响。方法 THP-1细胞悬浮生长于含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液中。细胞密度达5×105·ml-1时用于实验。THP-1细胞经PMA刺激24h（诱导THP-1细胞分化成巨噬细胞）后,细胞进行无血清化处理12h,继而加入不同剂量的A771726（5ug/mL、15 ug/mL 、45ug/mL）,干预24h。实时荧光定量PCR检测细胞MMP-2、MMP-9 mRNA的表达,明胶酶谱法检测细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9的活性。结果 细胞经不同浓度的A771726（5ug/mL、15 ug/mL 、45ug/mL）处理后,MMP-2、MMP-9 mRNA表达量均有下降(P＜0.01) 。中、高剂量的A771726（15 ug/mL 、45ug/mL）可降低PMA活化的THP-1细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9活性(P＜0.01)。结论 来氟米特活性代谢产物A771726可以降低经PMA活化的THP-1细胞MMP-2及MMP-9的表达。