针刺对ApoE-/-小鼠肝脏病理变化因素的影响

目的 观察针刺干预ApoE-/-小鼠后肝脏细胞的形态和肝脏中低密度脂蛋白受体（LDLR）蛋白的表达变化以及各组小鼠间血浆氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)含量的差异,探讨针刺对ApoE-/-小鼠肝脏病理因素的影响以及对动脉粥样硬化的改善机制。 方法 6周龄ApoE-/-小鼠喂食高脂饲料至20周龄,判断动脉粥样硬化模型造模成功后,将其随机分为药物对照组（F组）、针灸治疗组（A组）、模型对照组（M组）,每组10只,继续给予高脂高胆固醇饮食喂养。同时,将5只喂食普通饲料的同龄C57BL/6J小鼠作为空白对照组（BC组）。F组给予辛伐他汀灌胃治疗,40mg/(kg·d),A组给予针刺内关、后三里（足三里）、三阴交、神门治疗。治疗11周后,采集各组小鼠血浆行ELISA检测各组小鼠血浆Ox-LDL含量;取小鼠肝脏,行HE染色观察各组小鼠肝脏细胞的形态变化,行免疫组化和Western blot法检测各组小鼠肝脏LDLR蛋白表达的差异。 结果 针刺后肝脏内细胞LDLR蛋白表达显著增高(P<0.05),肝脏细胞内脂滴变小,肝脏炎症减轻,血浆Ox-LDL含量显著降低(P<0.05)。 结论 针刺治疗可以调节肝脏内脂质代谢,达到活血化瘀的疗效,从而抑制动脉粥样硬化发展的目的。      

载脂蛋白E基因缺陷(C57BL/6J-ApoE)小鼠血脂及病理组织学观察

目的观察我部饲养的不同年龄、不同性别的载脂蛋白E基因缺陷小鼠的血脂及病理组织学状况。方法选取2月龄和6月龄C57BL／6J-apoE小鼠，以C57BL／6J小鼠为对照组，测定血清中甘油三酯、总胆固醇、高窑度脂蛋白、低密度脂蛋白和载脂蛋白B的含量；小鼠全心脏液氮骤冷，冰冻切片，油红O染色，观察动脉粥样硬化斑块的形成。结果C57BL／6J-apoE小鼠血清中总胆固醇和低密度脂蛋白的含量显著高于同龄同性别C57BL／6J小鼠，高密度脂蛋白的含量显著低于同龄同性别C57BL／6J小鼠；不同性别、年龄的C57BIJ6J-ApoE小鼠血脂变化差异显著；ApoE小鼠血清中载脂蛋白B水平显著高于同龄同性别C57BL／6J小鼠，且随年龄增长显著升高。6月龄却oE小鼠主动脉切面可见脂质斑块。结论该模型小鼠较C57BL／6J小鼠血清中总胆固醇和低密度脂蛋白含量明显升高，高密度脂蛋白含量明显降低；血脂变化与年龄性别有关。6月龄时已形成脂质斑块，是研究动脉粥样硬化等心血管疾病较佳的动物模型。     

高脂饮食对小鼠血脂的影响

目的探讨高脂饮食对C57BL/6J小鼠血脂影响。方法将20只C57BL/₆J小鼠随机分为普食组和高脂饮食组,普食组予100%基础饲料,高脂饮食组予肥甘饲料。各组自由进食,各10只。8周后,眼球取血处死检测指标。结果高脂饮食能够显著提高C57BL/6J小鼠血清中三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、总胆固醇含量。结论高脂饮食对C57BL/6J小鼠血脂有显著影响。     

高脂高胆固醇饮食致C57BL/6J小鼠肺组织脂质蓄积的研究

【摘　要】目的：研究高脂高胆固醇饮食（Paigen饮食）是否可以导致C57BL/6J小鼠肺组织的脂质蓄积。方法：66只C57BL/6J雄性6~8周龄小鼠随机分为２组,分别喂饲普通饮食和Paigen饮食,于喂养12、16、20周３个时间点,取主动脉做冰冻切片,油红O染色观察粥样硬化斑块形成情况;肺组织冰冻切片油红O染色,观察肺组织脂质蓄积情况;体外培养A549细胞观察用不同浓度低密度脂蛋白（Low density lipoprotein,LDL）处理后,A549细胞内脂质蓄积情况。结果：Paigen饮食可导致C57BL/6J小鼠主动脉粥样硬化;同时,不同时间点C57BL/6J小鼠肺组织油红O染色结果提示该饮食还可以导致C57BL/6J小鼠肺组织出现脂质蓄积,并随着时间延长而加剧;不同浓度LDL刺激A549细胞的油红O染色结果提示：A549细胞的脂质蓄积与LDL处理的浓度间存在剂量效应关系。结论：Paigen饮食可以导致C57BL/6J小鼠肺脏出现时间依赖性的脂质蓄积,其机制可能与肺泡Ⅱ型上皮细胞的脂质代谢异常有关。     

葡萄籽提取物抗动脉粥样硬化形成的实验研究

目的：探讨葡萄籽提取物对C57BL／6J小鼠动脉粥样硬化形成的影响。方法：将48只C57BL／6J小鼠，随机分为正常对照组（饲普通饲料）、高胆模型组（饲高脂饲料：含2％胆固醇、0．4％胆酸盐、10％猪油）、葡萄籽提取物低，高剂量组（在饲高脂饲料的同时，分别添加葡萄籽提取物0.2,0.6mg/g体重）。实验至第21周末，眼球放血处死小鼠，检测血清甘油三酯（TG）、胆固醇（Chol)、氧化型低密度脂蛋白（OX－LDL）和红细胞丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）活性，同时取主动脉作病理形态学观察。结果：与高脂模型组比较，葡萄籽提取物组小鼠血清TG、Chol、OX－LDL、MDA含量明显降低，而红细胞SOD活性明显提高（P＜0．01）。同时葡萄籽提取物组小鼠主动脉壁厚度和泡沫细胞数量明显较高脂模型组减轻，小鼠主动脉损伤评分差异显著P＜0．01。结论：葡萄籽提取物具有减缓C57BL／6J小鼠动脉粥样硬化形成的作用，其作用可能与降低TG、Chol、OX－LDL水平，抗脂质过氧化作用有关。     

原花青素对C57BL／6J小鼠动脉舒张功能保护作用的研究

目的探讨原花青素（OPC）对C57BL／6J小鼠血管内皮舒张功能的影响及物质基础。方法①将内皮功能紊乱的C57BL／6J小鼠分为对照组、0．1％w／w原花青素组、抗生素组、抗生素＋0．1％w／w原花青素组,干预4周后观察小鼠胸主动脉舒张功能;②采用高效液相色谱法（HPLC）测定OPC（100mg／kg）灌胃后小鼠60min血浆中OPC以及其代谢物原儿茶酸（PCA）含量;③将内皮功能紊乱的C57BL／6J小鼠分为抗生素组、抗生素＋0．1％w／wOPC、抗生素＋0．1％w／wOPC＋0．003％w／wPCA,干预4周后观察小鼠胸主动脉舒张功能。结果①OPC干预可提高小鼠动脉舒张功能．但该效应被抗生素阻断;②OPC灌胃小鼠60min后,HPLC法测得血浆PCA浓度为（10．6±1．8）μmol／L,但OPC未检出;③抗生素阻断OPC介导的小鼠动脉舒张功能可被其代谢物PCA部分恢复。结论原花青素可以改善血管内皮舒张功能,其物质基础可能与其代谢物PCA有关。     

芍药苷对ApoE^-/-小鼠血脂及主动脉斑块的影响

[目的]观察芍药苷对ApoE^-/-小鼠血脂及主动脉斑块形成的影响。[方法]6周龄ApoE^-/-雄性小鼠经普通饲料饲养4周,髙脂饲料饲养12周后,随机分为ApoE^-/-模型组及芍药苷60 mg/kg、30 mg/kg剂量组,相同遗传背景的同龄正常C57BL/6J小鼠作为空白对照组。药物干预12周后,检测血脂的变化,并测量主动脉弓部、胸段、腹段斑块面积。[结果]ApoE^-/-模型组甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）显著高于C57BL/6J组（P〈0.01）,芍药苷60 mg/kg、30 mg/kg组的血脂水平显著低于ApoE^-/-模型组（P〈0.05,P〈0.01）,并且不同程度减小主动脉各段斑块的面积。[结论]芍药苷具有降脂和抑制主动脉斑块形成的作用,表明芍药苷具有抗动脉粥样硬化作用。     

载脂蛋白E基因缺陷对小鼠主动脉壁caveolin-1表达的影响

目的探讨高脂喂养的C57BL／6J小鼠和普饲喂养的apoE基因缺陷(apoE-／-)小鼠(品系为C57BL／6J)caveolin-1表达的差异。方法取apoE-／-小鼠作为研究对象，以普饲和高脂喂养的C57BL／6J小鼠为对照组，测定各组小鼠血脂和主动脉壁斑块的变化，Western—blotting检测caveolin-1在主动脉的表达。结果普饲喂养的apoE-／-组和高脂喂养的C57BL／6J组血脂水平较普饲喂养的C57BL／6J组明显升高；普饲喂养的apoE-／-组的主动脉形成明显的斑块，高脂喂养C57BL／6J组没有形成斑块，但血管壁平滑肌细胞出现增殖，普饲喂养的C57BL／6J组未见明显变化。Wester—blotting检测显示普饲喂养的apoE-／-小鼠和高脂喂养的C57BL／6J小鼠caveolin-1的表达与普饲喂养的C57BL／6J小鼠比较明显减弱。结论血管壁caveolin-1的表达下调可能是apoE-／-小鼠动脉粥样硬化形成的重要原因。     

MicroRNA-29b在动脉粥样硬化血管中的表达

目的应用荧光定量PCR技术分析MicroRNA-29b（miR-29b）在Apo-E基因敲除小鼠的动脉粥样硬化（atheroscle—rosis）模型斑块血管中的表达情况,探讨miR-29b在动脉粥样硬化发生、发展过程中的作用。方法8只5周龄、雄性SPF级载脂蛋白E基因敲除小鼠（C57BL／6J—ApoE-／-,apolipoproteinE—deficientmice）为实验组（FS组）。8只雄性、SPF级、相同周龄的C57BL／6J小鼠为对照组（NS组）。高脂（1％胆固醇＋15％猪油）喂食15、20周龄取材检测。结果FS组和NS组体重[（29．10±2．53）g和（33．20±5．18）羽无明显差异（P〉0．05）;FS组较NS组血清总胆固醇（（13．52±1．58）mmol／L和（2．12±0．35）mmol／L]显著增高（P〈0．01）;FS组主动脉出现典型的无动脉粥样硬化斑块;NS组主动脉管壁正常,无动脉粥样硬化斑块;FS组主动脉弓miR-29b的表达较NS组[平均吸光度值：（2．10±0．27）和（17．56±1．07）1明显降低（P〈0．01）。结论在高脂喂食的载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化模型中．miR-29低表达可能与动脉粥样硬化斑块的形成有关。     

C57BL/6J-HBV转基因小鼠血清生化指标与性别年龄的关系

目的观察C57BL/6J-HBV乙型肝炎病毒转基因小鼠血清总胆红素（T-BIL）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总蛋白（TP）和白蛋白（ALB）与性别和年龄的关系，以及与遗传背景相同的C57BL／6J小鼠的差异。方法选取8周龄和24周龄的C57BL／6J-HBV转基因小鼠及C57BL／6J小鼠的血清测定T-BIL、ALT、AST、TP和ALB值。结果C57BL／6J-HBV转基因小鼠与同周龄同性别的C57BL／6J小鼠相比，T-BIL、ALT、AST、TP和ALB均存在显著差异（P〈0．05）；24周龄的C57BL／6J-HBV转基因小鼠ALT和AST与其8周龄鼠相比均存在显著差异（P〈0．05）。结论C57BL／6J-HBV转基因小鼠T-BIL、ALT、AST、TP和ALB值显著高于C57BL／6J小鼠；且C57BL／6J-HBV转基因小鼠ALT和AST值与年龄有关，与性别无关。     

克拉霉素对C57BL/6J小鼠动脉粥样硬化及炎症反应的影响

目的观察肺炎衣原体（Chlamydia pneumoniae,Cpn）与动脉粥样硬化的关系以及克拉霉素的抗炎作用。方法 60只健康雄性C57BL/6J小鼠根据喂养的饲料及是否感染Cpn分为4组：对照组（n=6）、高脂组（n=6）、感染组（n=24）和感染＋高脂组（n=24）。Cpn感染组于试验开始每隔2周1次,共6次,分别经鼻内接种0.05ml Cpn（6.6×106IFU/ml）。对照组及高脂组以同样方法接种链球菌蛋白G（SPG）缓冲液。感染Cpn后（感染组、感染＋高脂组）依据有或无克拉霉素的治疗及治疗的时间进一步分为未治疗、早期及延迟治疗亚组。全自动生化分析仪检测小鼠的血脂,免疫荧光法检测Cpn IgG抗体。12周后处死小鼠,放免法测定IL-6、IL-8的水平,并取升主动脉大血管检测主动脉动脉粥样硬化的情况。结果高脂组的总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）明显高于对照组（P均〈0.01）。各组与对照组比较IL-6、IL-8的水平明显升高（P〈0.05或P〈0.01）;未治疗组高于早期及延迟治疗组（P〈0.01）,且延迟治疗组高于早期治疗组（P〈0.01）。与延迟治疗组比较,克拉霉素早期治疗组可以延缓动脉粥样硬化的发生。结论 Cpn协同高脂血症与动脉粥样硬化的形成密切相关。克拉霉素治疗能够减轻Cpn感染所致动脉粥样硬化的炎症反应。     

瑞舒伐他汀对LDL受体基因缺陷小鼠MMP-2表达和粥样斑块形成的抑制作用

目的 观察瑞舒伐他汀对LDL受体基因缺陷（LDLR-/-）小鼠MMP-2的表达及动脉粥样斑块进展的影响及其作用机制.方法 以高脂＋高胆固醇饲料喂养建立高脂血症及动脉粥样硬化模型,16只7周龄小鼠随机分为瑞舒伐他汀组和对照组,每组8只.12周后处死小鼠,观察主动脉大体标本,检测主动脉窦部动脉粥样硬化斑块情况;H＆E染色观察主动脉窦部切片动脉粥样硬化斑块面积;检测血脂、oxLDL、血糖和胰岛素水平;明胶酶谱法检测主动脉弓处基质金属蛋白酶-2、9（MMP-2、9）的活性;免疫组化染色检测主动脉窦部MMP-2的表达情况.结果 除HDL-C外,瑞舒伐他汀组其他各血脂指标与对照组的差异均有统计学意义（P＜0.05或0.01）.大体标本可见,瑞舒伐他汀组的粥样硬化斑块面积较对照组减少了约80%.主动脉窦切片H＆E染色观察可见,瑞舒伐他汀组动脉粥样硬化面积较对照组减少了约74.1%.免疫组化检测结果示,瑞舒伐他汀组MMP-2的表达较对照组减少了45.9%.Zymography法检测结果示,与对照组比较,瑞舒伐他汀组MMP-2表达减少了42.3%,MMP-9表达减少了35.3%.结论 瑞舒伐他汀能够抑制LDLR-/-小鼠MMP-2、9的表达并改善动脉粥样硬化斑块的进展,这可能是瑞舒伐他汀能够干预动脉粥样硬化进展的机制之一.     

枸杞籽油对2型糖尿病C57BL/6J小鼠血清SOD、MDA及GSH的影响

目的研究枸杞籽油对2型糖尿病C57BL/6小鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）及还原型谷胱甘肽（GSH）的影响。方法将实验动物随机分为正常对照组、糖尿病模型组、枸杞籽油0.025、0.05、0.1 mL/10g剂量干预组5组,除正常对照组外,其余以高脂饲料饲喂4周后的雌雄各半C57BL/6小鼠腹腔注射链尿左菌素（STZ,125mg.kg-1）,诱导2型糖尿病模型。检测各组血糖水平及血清SOD、MDA及GSH的变化。结果枸杞籽油各组与糖尿病模型组相比较,SOD都有所升高（P〈0.05）;枸杞籽油中剂量干预组GSH明显升高（P〈0.05）;MDA明显下降（P〈0.05）。结论枸杞籽油能改善2型糖尿病C57BL/6小鼠的抗氧化能力并有助于降低其血糖水平。     

冠心康对ApoE^（-/-）动脉粥样硬化小鼠PPARγ-LXRα-ABCA1信号通路的影响

目的：观察中药复方冠心康对载脂蛋白E（apolipoprotein E,ApoE）基因敲除（ApoE-/-）动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）小鼠三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ATP-binding cassette transporterA1,ABCA1）通路的影响。方法：70只ApoE-/-小鼠用高脂饲料喂养建立小鼠AS模型。14只C57BL/6J小鼠为正常对照组,给予普通饲料。70只ApoE-/-小鼠造模成功后随机分为5组,即模型组、高剂量冠心康组（生药浓度为3.456g/mL）、中剂量冠心康组（1.728g/mL）、低剂量冠心康组（0.864g/mL）和西药辛伐他汀组[3mg/（kg·d）]。每只小鼠灌胃0.5mL,每天1次。连续灌胃8周后取材,分离肝脏及主动脉。运用蛋白质印迹法检测各组小鼠过氧化物酶体增殖物激活型受体γ（peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ）、肝X受体α（liver X receptor α,LXRα）和ABCA1蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链反应法检测各组小鼠主动脉、肝脏PPARγ、LXRα和ABCA1mRNA的表达。结果：与C57BL/6J小鼠比较,ApoE-/-小鼠的主动脉、肝脏的PPARγ、LXRα、ABCA1mRNA的表达明显增高;与模型组小鼠比较,高、中剂量冠心康与辛伐他汀在不同程度上下调了主动脉、肝脏的PPARγ、LXRα、ABCA1mRNA的表达（P〈0.05）,而以高剂量冠心康的作用最为突出。低剂量组无明显改变（P〉0.05）。与C57BL/6J小鼠比较,ApoE-/-小鼠的主动脉、肝脏的PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白的表达明显增高;与模型组小鼠比较,各用药组主动脉、肝脏的PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白的表达量下降（P〈0.05）,而以冠心康高剂量组作用最为突出。结论：PPARγ-LXRα-ABCA1通路在ApoE-/-小鼠脂质代谢紊乱、炎症反应方面扮演重要角色。复方冠心康能改善ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化过程中的脂质代谢紊乱,抑制炎症反应的进展,可能与调控ApoE-/-小鼠的主动脉、肝脏PPARγ、LXRα、ABCA1 mRNA及蛋白的表达有关。     

慢性心理应激apoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型的建立与评价

目的探索建立慢性心理应激动脉粥样硬化动物模型。方法 4周龄80只apoE-/-小鼠随机均分为对照组与应激组,实验动物都以高脂、高胆固醇饲料（5%猪油,1%的胆固醇）喂养。应激组小鼠按顺序接受昼夜颠倒7或17 h（每周2次）、鼠笼倾斜成45度角7或17 h（每周2次）、噪声刺激9或15 h（每周2次,70 dB）与恐惧刺激1 h（放入大鼠刚住过鼠笼、每周2次）应激原的刺激;对照组的小鼠关在单独的实验动物房,除了不给予应激刺激外,其它的实验条件与应激组相同。分别在0、4、8与12周后4个时间点处死动物,检测血浆中总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白与低密度脂蛋白水平;采用放射免疫测定方法测定血浆中皮质酮激素水平;油红O染色法观察主动脉窦动脉粥样硬化病变。结果应激组的总胆固醇、三酰甘油与低密度脂蛋白明显高于对照组（均P〈0.05）;与相应对照组相比较,应激组小鼠血浆中的皮质酮激素的水平显著升高（P〈0.05,P〈0.01,P〈0.001）;主动脉窦动脉粥样硬化病变显著加重（均P〈0.01）。结论成功建立慢性心理应激动脉粥样硬化动物模型。     

择时电针干预荷乳腺癌C57BL／6J近交系小鼠对SCN钟基因正反馈环路表达的影响

目的：观察荷乳腺癌小鼠电针后其视交叉上核（SuprachiasmaticNucleus,SCN）中Bmall和ClockmRNA水平的变化,探讨电针对荷瘤动物自发性活动节律影响的正反馈环路的调控机制。方法：将C57BL／6J雄性小鼠随机分为空白组、模型组、模型加电针、空白加电针4组（每组6只）。针灸加模型组在造模成功后的第8-10d,于CT16相位（即：动物起始活动点后4h）进行电针治疗。所有的小鼠将在最后一次治疗后2h立即断颈处死,在相应部位取材后RT-PCR对指标进行检测。结果：检测结果显示,空白组的BmallmRNA,ClockmRNA表达要高于模型组,且模型加电针组的BmallmRNA,ClockmRNA表达要高于模型组。虽然上述结果无显著的统计学意义（P〉0．05）,仍表现出一个改善的趋势。结论：本研究表明电针对荷乳腺癌小鼠在CTl6时相的治疗可升高SCNBmall以及ClockmRNA的表达使之趋于空白小鼠的表达,表明,电针干预可通过直接调控中枢Bmall以及Clock的表达,从而调节正反馈环路进而影响荷乳腺癌小鼠的自发性节律活动,对肿瘤的增殖有一定的抑制作用。     

半枝莲总黄酮对ApoE基因敲除小鼠血脂及抗氧化功能的影响

目的探讨半枝莲总黄酮对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化病变形成早期血清脂质水平、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）表达的影响。方法载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为模型组、辛伐他汀组、银杏叶胶囊组和半枝莲总黄酮高、中、低剂量组,取正常C57BL/6小鼠为对照组,每组6只。除模型组、对照组给予等容量羧甲基纤维素钠外,其他各组分别给予阳性对照药与受试药8周。处死小鼠,ELISA法检测血脂水平,黄嘌呤氧化酶法检测SOD活力,硫代巴比妥酸法测定MDA含量,HE染色观察主动脉形态学变化。结果半枝莲总黄酮中、高剂量组血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）水平明显低于模型组,高剂量组高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平明显高于模型组（P〈0.05或0.01）。半枝莲总黄酮3个剂量组的MDA含量较模型组显著减少,SOD活性表达水平较模型组显著升高（均P〈0.01）。结论半枝莲总黄酮可通过降低载脂蛋白E基因敲除小鼠TG、TC、LDL-C水平,升高HDL-C水平,升高SOD活性,降低MDA含量,从而发挥抗动脉粥样硬化的作用。