用条件培养液代替重组因子培养小鼠高增殖潜能集落形成细胞

利用富含ＩＬ－３的ＷＥＨＩ－３细胞条件培养液（ＷＥＨＩ３－ＣＭ）和富含Ｍ－ＣＳＦ的Ｌ９２９细胞条件培养液（Ｌ９２９－ＣＭ）代替重组因子在体外用单层琼脂法培养小鼠ＨＰＰ－ＣＦＣ获得成功。在合用ＷＥＨＩ３－ＣＭ和Ｌ９２９－ＣＭ的基础上，联合ｒｈＩＬ－１，ｒｈＩＬ－６和ｒｍＧＭ－ＣＳＦ，ＨＰＰ－ＣＦＣ的产率有所提高。用５－ＦＵ处理小鼠２天后，骨髓细胞中ＨＰＰ－ＣＦＣ得以浓集。产生的ＨＰＰ－ＣＦＣ集落直径     

用小鼠骨髓内皮细胞条件培养液代替造血刺激因子培养CFU-GM和HPP-CFC

利用大于 10kD组分的小鼠骨髓内皮细胞条件培养液 (mBMEC CM)作刺激物体外琼脂培养CFU GM ,与rmGM CSF合用培养HPP CFC获得成功。就培养CFU GM和HPP CFC而言 ,用细胞因子作刺激物与并用大于 10kD组分的mBMEC CM作刺激物相比较 ,以后者的CFU GM及HPP CFC产率最高     

bFGF对造血基质细胞造血调节作用的影响

造血基质细胞包括内皮细胞、成纤维细胞和巨噬细胞 ,它们分泌正性和负性造血调控因子调节造血[1] 。本室前期研究显示 ,内皮细胞条件培养液 (ＥＣＭ)对造血集落的生长无明显影响 ,但ＥＣＭ的分子量 >10ｋＤ组分 (>10ｋＤ ＥＣＭ)对造血有刺激作用 ,ＥＣＭ的分子量 <10ｋＤ组分 (<10ｋＤ ＥＣＭ)对造血有抑制作用。成纤维细胞条件培养液 (ＦＣＭ)对造血有刺激作用[2 ,3 ] 。本实验的目的是观察加入硷性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)培养的内皮细胞、成纤维细胞及巨噬细胞的无血清条件培养液及其组分对粒 巨噬系造血集落形成的影响是否更强。收集加或不加ｂＦＧＦ培养的三种基质细胞的无血清     

用WEHI_3－条件培养液代替肺－条件培养液培养CFU－GM

用ＷＥＨＩ＿３－条件培养液（ＷＥＨＩ＿３－ＣＭ）代替个条件培养液（Ｌ－ＣＭ）对小鼠粒单系集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）生长的影响进行研究。结果表明，ＷＥＨＩ＿３－ＣＭ对体外小鼠ＣＦＵ－ＧＭ的形成具有明显的刺激作用；ＷＥＨＩ＿３－ＣＭ与Ｌ－ＣＭ均主要刺激混合型集落生长。提示ＷＥＨＩ＿３－ＣＭ内可能含粒单集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）活性。     

培养条件对小鼠骨髓基质集落形成细胞在体外生长的影响

对一些可能影响小鼠CFU—f集落形成率的因素进行了研究。这些因素包括培养基、血清、培养皿、小鼠品系以及培养容器中的氧浓度。研究发现,在诸因素中以氧浓度最为关键。用含5％O_2、5％CO_2及90％N_2的混合气体代替含5％CO_2空气不仅使CFU—f的集落形成率明显提高,而且可减轻其它因素对细胞生长的影响。用燃烛法消耗空气中的氧虽可使某些肿瘤细胞系在软琼脂中形成集落,但不利于CFU—f生长。     

人胎盘CD133^＋、CD133^-细胞组份中高增殖潜能集落形成细胞及其表型特征的初步探讨

目的研究人胎盘CD133^＋、CD133^-细胞亚群中高增殖潜能集落形成细胞（HPP—CFC）频率及表型特征。方法采用机械法制备人胎盘组织（PT）游离细胞悬液,用Histopaque-1077分离出单个核细胞（MNCs）,经磁式分选（MACS）分离纯化CD133^＋和CD133^-细胞。将分选的CD133^＋和CD133^-细胞分别使用H4435培养基培养4wk后观察HPP—CFC集落形成能力,用流式细胞仪（FCM）对分选的细胞组份和HPP—CFC进行表型分析。结果培养4wk后,PT—CD133^＋、CD133^-细胞生成的HPP—CFC集落分别为32．4±11．2／5×10^3,2．0±2．3／5×10^3,前者细胞中HPP—CFC数量明显高于后者（P〈0．01）;PT—CD133^＋、CD133^-细胞培养至28d时CD133^＋CD34^＋,CD133^＋CD34^-和CD133^-CD34^＋亚型均比培养前减少。结论人胎盘组织CD133^＋与CD133^-细胞群中均存在HPP—CFC,但CD133^＋细胞群中的HPP—CFC明显多于CD133^-细胞群,说明胎盘CD133^＋细胞群中存在更多的早期HSPC。     

粒系集落刺激因子与供体外周血移植物中Ⅱ型树突状细胞的相关性研究

目的：测定粒系集落刺激因子（G—CSF）动员前、后正常异基因供者外周血（PB）移植物中Ⅰ型树突状细胞（DC1）、Ⅱ型树突状细胞（DC2）的数量及DC2／DC1比例;探讨G—CSF对于PB中DC1、DC2数量及DC2／DC1比例的影响。方法：以流式细胞术（FCM）检测11例G—CSF动员的异基因PB造血干细胞移植物（G—PBSC）中的DC1、DC2数量与DC2／DC1比例;并与8例正常供者动员前PB进行比较。结果：正常异基因PB造血干细胞（PBSC）供者以G—CSF动员后,能选择性增加移植物中DC2数量（26．76&#215;10^6／Lvs14．92&#215;10^6／L;P=0．029）和DC2／DC1比例（2．02&#177;1．43VS1．00&#177;0．37;P=0．044）,但DC1无显著变化。结论：移植前以G—CSF动员正常异基因PBSC供者,可选择性提高DC2的数量,而DC1数量无明显增加。