绝经后骨质疏松症合并膝骨关节炎患者的骨代谢特征研究

目的:探讨绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)合并膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者的骨代谢特征。方法:选择2014年11月至2017年3月在浙江省中医院就诊的PMOP合并KOA患者作为研究对象。拍摄患者站立位膝关节X线片,根据Kellgren和Lawrence影像分级标准将纳入研究的患者分为5组。采用双能X线吸收法测定患者L1~L4的骨密度,采用电化学发光免疫分析法测定患者的血清维生素D、甲状旁腺激素(parathyroid hormone,PTH)、Ⅰ型前胶原氨基端前肽(N-terminal propeptide of typeⅠprecollagen,PⅠNP)、N端中段骨钙素(N-terminal in the middle osteocalcin,N-MID-OT)、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(βcross-linked C-telopeptide of typeⅠcollagen,β-CTX)水平。结果:纳入研究的患者共124例,0级组26例、Ⅰ级组15例、Ⅱ级组39例、Ⅲ级组26例、Ⅳ级组18例。5组患者的骨密度比较,差异有统计学意义[(0.800±0.045)g·cm~(-2),(0.788±0.048)g·cm~(-2),(0.813±0.042)g·cm~(-2),(0.827±0.051)g·cm~(-2),(0.849±0.049)g·cm~(-2),F=4.724,P=0.001];0级组的骨密度与Ⅰ级组、Ⅱ级组比较,组间差异均无统计学意义(P=0.436,P=0.291);0级组的骨密度小于Ⅲ级组、Ⅳ级组(P=0.040,P=0.001);Ⅰ级组与Ⅱ级组的骨密度比较,差异无统计学意义(P=0.088);Ⅰ级组的骨密度小于Ⅲ级组、Ⅳ级组(P=0.012,P=0.000);Ⅱ级组与Ⅲ级组的骨密度比较,差异无统计学意义(P=0.228);Ⅱ级组的骨密度小于Ⅳ级组(P=0.007);Ⅲ级组与Ⅳ级组的骨密度比较,差异无统计学意义(P=0.126)。5组患者的血清维生素D、N-MID-OT含量比较,组间差异均无统计学意义[(16.72±9.66)ng·m L~(-1),(17.46±13.18)ng·m L~(-1),(17.92±13.22)ng·m L~(-1),(15.93±6.51)ng·m L~(-1),(16.23±5.54)ng·m L~(-1),F=0.180,P=0.948;(24.39±4.73)ng·m L~(-1),(25.92±5.45)ng·m L~(-1),(23.55±4.35)ng·m L~(-1),(22.44±4.71)ng·m L~(-1),(21.29±5.48)ng·m L~(-1),F=2.424,P=0.052]。5组患者血清PTH含量比较,差异有统计学意义[(40.59±7.74)pg·m L~(-1),(42.37±8.08)pg·m L~(-1),(44.37±9.44)pg·m L~(-1),(45.86±8.88)pg·m L~(-1),(48.18±8.69)pg·m L~(-1),F=2.457,P=0.049];0级组的血清PTH含量与Ⅰ级组、Ⅱ级组比较,组间差异均无统计学意义(P=0.529,P=0.089);0级组的血清PTH含量低于Ⅲ级组、Ⅳ级组(P=0.031,P=0.005);Ⅰ级组的血清PTH含量与Ⅱ级组、Ⅲ级组、Ⅳ级组比较,组间差异均无统计学意义(P=0.452,P=0.220,P=0.059);Ⅱ级组的血清PTH含量与Ⅲ级组、Ⅳ级组比较,组间差异均无统计学意义(P=0.502,P=0.128);Ⅲ级组与Ⅳ级组的血清PTH含量比较,差异无统计学意义(P=0.388)。5组患者血清PINP含量比较,差异有统计学意义[(44.33±7.01)ng·m L~(-1),(45.55±6.55)ng·m L~(-1),(43.60±8.34)ng·m L~(-1),(39.25±6.31)ng·m L~(-1),(36.06±7.19)ng·m L~(-1),F=5.912,P=0.000];0级组的血清PINP含量与Ⅰ级组、Ⅱ级组比较,组间差异均无统计学意义(P=0.606,P=0.695);0级组的血清PINP含量高于Ⅲ级组、Ⅳ级组(P=0.014,P=0.000);Ⅰ级组与Ⅱ级组的血清PINP含量比较,差异无统计学意义(P=0.381);Ⅰ级组的血清PINP含量高于Ⅲ级组、Ⅳ级组(P=0.009,P=0.000);Ⅱ级组的血清PINP含量高于Ⅲ级组和Ⅳ级组(P=0.020,P=0.000);Ⅲ级组与Ⅳ级组的血清PINP含量比较,差异无统计学意义(P=0.157)。5组患者血清β-CTX含量比较,差异有统计学意义[(874.93±189.91)pg·m L~(-1),(1 010.00±241.77)pg·m L~(-1),(810.64±104.43)pg·m L~(-1),(761.18±119.94)pg·m L~(-1),(728.25±193.47)pg·m L~(-1),F=8.178,P=0.000];0级组与Ⅱ级组的血清β-CTX含量比较,差异无统计学意义(P=0.120);0级组的血清β-CTX含量高于Ⅲ级组、Ⅳ级组(P=0.013,P=0.004);Ⅰ级组的血清β-CTX含量高于0级组、Ⅱ级组、Ⅲ级组、Ⅳ级组(P=0.011,P=0.000,P=0.000,P=0.000);Ⅱ级组的血清β-CTX含量与Ⅲ级组、Ⅳ级组比较,组间差异均无统计学意义(P=0.231,P=0.077);Ⅲ级组与Ⅳ级组的血清β-CTX含量比较,差异无统计学意义(P=0.510)。结论:PMOP合并KOA患者,在KOA初期骨代谢呈以骨吸收为主的高转换状态,后期骨转     

蠲痹历节清方对急性痛风性关节炎大鼠的影响及其作用机制

目的:探讨蠲痹历节清方对急性痛风性关节炎大鼠的影响及其作用机制。方法:将96只2月龄雄性清洁级健康SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、蠲痹历节清方组、依托考昔组,每组24只。模型组、蠲痹历节清方组、依托考昔组大鼠以氧嗪酸钾溶液连续腹腔注射后,于大鼠右侧踝关节腔内注射尿酸钠溶液;正常对照组大鼠腹腔及右侧踝关节腔分别注入等剂量生理盐水。关节腔内注射后即刻给予药物干预,正常对照组和模型组以10 m L·kg~(-1)生理盐水灌胃,蠲痹历节清方组以22 g·kg~(-1)剂量的蠲痹历节清方悬混液灌胃,依托考昔组以5.5 mg·kg~(-1)剂量的依托考昔悬混液灌胃;每日2次,连续灌胃2 d。分别于药物干预开始后4 h、12 h、24 h、48 h采用免疫组化法检测各组大鼠踝关节滑膜组织中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6蛋白含量;于药物干预开始后48 h采用全自动生化分析仪检测血尿酸含量,并观察各组大鼠踝关节滑膜组织形态。结果:(1)踝关节滑膜组织中TNF-α蛋白含量。药物干预开始后4 h、12 h、24 h、48 h,4组大鼠踝关节滑膜组织中TNF-α蛋白含量比较,差异均有统计学意义[(14.72±0.98)pg·m L~(-1),(40.05±1.31)pg·m L~(-1),(19.59±2.63)pg·m L~(-1),(19.00±1.32)pg·m L~(-1),F=72.528,P=0.012;(16.14±0.86)pg·m L~(-1),(40.95±2.56)pg·m L~(-1),(24.10±2.50)pg·m L~(-1),(21.02±2.68)pg·m L~(-1),F=59.314,P=0.000;(14.95±0.39)pg·m L~(-1),(38.65±0.75)pg·m L~(-1),(19.49±0.59)pg·m L~(-1),(18.64±0.62)pg·m L~(-1),F=35.681,P=0.001;(14.83±1.26)pg·m L~(-1),(37.91±1.30)pg·m L~(-1),(18.16±0.84)pg·m L~(-1),(17.32±0.83)pg·m L~(-1),F=37.553,P=0.000];正常对照组大鼠踝关节滑膜组织中TNF-α蛋白含量均低于模型组、蠲痹历节清方组和依托考昔组(P=0.000,P=0.000,P=0.003,P=0.001;P=0.000,P=0.000,P=0.001,P=0.008;P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.001);模型组踝关节滑膜组织中TNF-α蛋白含量均高于蠲痹历节清方组和依托考昔组(P=0.000,P=0.001,P=0.000,P=0.000;P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.000);蠲痹历节清方组踝关节滑膜组织中TNF-α蛋白含量与依托考昔组比较,差异均无统计学意义(P=0.212,P=0.079,P=0.091,P=0.088)。(2)踝关节滑膜组织中IL-1β蛋白含量。药物干预开始后4 h、12 h、24 h、48 h,4组大鼠踝关节滑膜组织中IL-1β蛋白含量比较,差异均有统计学意义[(3.43±0.68)pg·m L~(-1),(7.40±0.51)pg·m L~(-1),(4.84±0.21)pg·m L~(-1),(4.67±0.18)pg·m L~(-1),F=64.473,P=0.028;(3.61±0.34)pg·m L~(-1),(7.95±0.63)pg·m L~(-1),(5.28±0.34)pg·m L~(-1),(4.91±0.42)pg·m L~(-1),F=50.119,P=0.006;(3.51±0.50)pg·m L~(-1),(6.98±0.60)pg·m L~(-1),(4.73±0.25)pg·m L~(-1),(4.47±0.23)pg·m L~(-1),F=41.346,P=0.002;(3.47±0.29)pg·m L~(-1),(6.90±0.68)pg·m L~(-1),(4.58±0.27)pg·m L~(-1),(4.12±0.11)pg·m L~(-1),F=68.784,P=0.000];正常对照组大鼠踝关节滑膜组织中IL-1β蛋白含量均低于模型组、蠲痹历节清方组和依托考昔组(P=0.003,P=0.000,P=0.001,P=0.000;P=0.000,P=0.000,P=0.002,P=0.004;P=0.000,P=0.000,P=0.001,P=0.000);模型组踝关节滑膜组织中IL-1β蛋白含量均高于蠲痹历节清方组和依托考昔组(P=0.000,P=0.001,P=0.003,P=0.000;P=0.000,P=0.008,P=0.000,P=0.000);蠲痹历节清方组踝关节滑膜组织中IL-1β蛋白含量与依托考昔组比较,差异均无统计学意义(P=0.198,P=0.081,P=0.101,P=0.097)。(3)踝关节滑膜组织中IL-6蛋白含量。药物干预开始后4 h、12 h、24 h、48 h,4组大鼠踝关节滑膜组织中IL-6蛋白含量比较,差异均有统计学意义[(3.72±0.31)pg·m L~(-1),(7.83±0.33)pg·m L~(-1),(4.87±0.12)pg·m L~(-1),(4.75±0.23)pg·m L~(-1),F=32.582,P=0.018;(4.07±0.38)pg·m L~(-1),(8.04±0.13)pg·m L~(-1),(5.62±0.38)pg·m L~(-1),(5.12±0.20)pg·m L~(-1),F=86.127,P=0.007;(3.77±0.14)pg·m L~(-1),(7.86±0.27)pg·m L~(-1),(4.79±0.53)pg·m L~(-1),(4.68±0.11)pg·m L~(-1),F=49.038,P=0.001;(3.55±0.14)pg·m L~(-1),(7.85±0.24)pg·m L~(-1),(4.67±0.38)pg·m L~(-1),(4.57±0.13)pg·m L~(-1),F=33.115,P=0.000];正常对照组大鼠踝关节滑膜组织中IL-6蛋白含量均低于模型组、蠲痹历节清方组和依托考昔组(P=0.001,P=0.000,P=0.001,P=0.000;P=0.000,P=0.000,P=0.001,P=0.006;P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.003);模型组踝关节滑膜组织中IL-6蛋白含量均高于蠲痹历节清方组和依托考昔组(P=0.000,P=0.000,P=0.002,P=0.000;P=0.000,P=0.001,P=0.000,P=0.000);蠲痹历节清方组踝关节滑膜组织中IL-6蛋白含量与依托考昔组比较,差异均无统计学意义(P=0.256,P=0.075,P=0.933,P=0.108)。(4)血尿酸含量。药物干预开始后48 h,4组大鼠血尿酸含量比较,差异有统计学意义[(132.52±3.32)μmol·L~(-1),(352.30±14.42)μmol·L~(-1),(165.08±3.57)μmol·L~(-1),(321.08±16.44)μmol·L~(-1),F=46.176,P=0.000];正常对照组大鼠血尿酸含量低于模型组、蠲痹历节清方组和依托考昔组(P=0.000,P=0.028,P=0.000),模型组血尿酸含量高于蠲痹历节清方组和依托考昔组(P=0.000,P=0.032),蠲痹历节清方组血尿酸含量低于依托考昔组(P=0.001)。(5)踝关节滑膜组织形态。药物干预开始后48 h,正常对照组踝关节滑膜上皮排列完整,无炎性细胞浸润;模型组踝关节滑膜上皮脱落,大量白细胞浸润;蠲痹历节清方组和依托考昔组踝关节滑膜上皮较完整,炎性细胞浸润较少。结论:蠲痹历节清方能有效降低急性痛风性关节炎大鼠的血尿酸水平,抑制其关节滑膜组织炎症反应,其作用机制可能与其能下调TNF-α、IL-1β、IL-6的蛋白表达有关。     

清热解毒中药外敷治疗外伤感染创面的疗效观察及作用机制研究

目的:观察清热解毒中药外敷治疗外伤感染创面的疗效并探讨其作用机制。方法:将100例外伤感染创面患者随机分为2组,每组50例,分别采用清热解毒中药外敷和呋喃西林外敷治疗,连续治疗至创面愈合。比较治疗前及治疗第7天和第14天2组患者感染创面面积、外周血单个核细胞表面Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)的表达情况及外周血血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin~(-1) beta,IL~(-1)β)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)的表达情况,并于治疗开始后2周比较2组患者的临床疗效。结果:清热解毒中药组的感染创面愈合时间短于呋喃西林组[(16.10±3.15)d,(18.26±3.72)d,t=3.133,P=0.002]。治疗前后不同时间点感染创面面积比较,差异有统计学意义,存在时间效应,治疗后创面面积逐渐缩小(F=13.250,P=0.002);2组患者感染创面面积比较,差异有统计学意义,存在分组效应(t=2.040,P=0.044);治疗前2组患者感染创面面积比较,差异无统计学意义[(12.80±1.61)cm~2,(13.00±2.21)cm~2,t=0.517,P=0.606];治疗第7天和第14天清热解毒中药组的感染创面面积均小于呋喃西林组[(6.50±0.97)cm~2,(8.30±0.94)cm~2,t=9.422,P=0.000;(3.00±0.66)cm~2,(5.70±0.67)cm~2,t=20.300,P=0.000];时间因素与分组因素存在交互效应(F=6.830,P=0.003)。治疗前后不同时间点TLR4表达量比较,差异有统计学意义,存在时间效应,治疗后TLR4表达量逐渐减少(F=6.864,P=0.017);2组患者TLR4表达量比较,差异有统计学意义,存在分组效应(t=2.185,P=0.031);治疗前2组患者TLR4表达量比较,差异无统计学意义[(5.81±0.78)ng·m L~(-1),(5.79±0.73)ng·m L~(-1),t=0.132,P=0.890];治疗第7天和第14天清热解毒中药组的TLR4表达量均低于呋喃西林组[(4.10±0.33)ng·m L~(-1),(4.69±0.27)ng·m L~(-1),t=9.784,P=0.000;(2.82±0.55)ng·m L~(-1),(3.80±0.59)ng·m L~(-1),t=8.591,P=0.000];时间因素与分组因素存在交互效应(F=6.012,P=0.005)。治疗前后不同时间点TNF-α表达量比较,差异有统计学意义,存在时间效应,治疗后TNF-α表达量逐渐减少(F=38.313,P=0.000);2组患者TNF-α表达量比较,差异有统计学意义,存在分组效应(t=2.195,P=0.030);治疗前2组患者TNF-α表达量比较,差异无统计学意义[(97.55±6.27)ng·m L~(-1),(97.66±7.07)ng·m L~(-1),t=0.082,P=0.934];治疗第7天和第14天清热解毒中药组的TNF-α表达量均低于呋喃西林组[(52.46±6.84)ng·m L~(-1),(74.10±4.49)ng·m L~(-1),t=18.701,P=0.000;(25.72±3.95)ng·m L~(-1),(40.43±2.42)ng·m L~(-1),t=22.454,P=0.000];时间因素与分组因素存在交互效应(F=38.812,P=0.000)。治疗前后不同时间点IL~(-1)β表达量比较,差异有统计学意义,存在时间效应,治疗后IL~(-1)β表达量逐渐减少(F=28.000,P=0.000);2组患者IL~(-1)β表达量比较,差异有统计学意义,存在分组效应(t=2.361,P=0.020);治疗前2组患者IL~(-1)β表达量比较,差异无统计学意义[(61.13±5.60)pg·m L~(-1),(61.90±5.35)pg·m L~(-1),t=0.703,P=0.483];治疗第7天和第14天清热解毒中药组的IL~(-1)β表达量均低于呋喃西林组[(31.03±3.06)pg·m L~(-1),(38.69±4.40)pg·m L~(-1),t=10.106,P=0.000;(12.44±1.36)pg·m L~(-1),(21.91±2.05)pg·m L~(-1),t=27.210,P=0.000];时间因素与分组因素存在交互效应(F=7.431,P=0.002)。治疗前后不同时间点IL-6表达量比较,差异有统计学意义,存在时间效应,治疗后IL-6表达量逐渐减少(F=24.492,P=0.001);2组患者IL-6表达量比较,差异有统计学意义,存在分组效应(t=2.078,P=0.040);治疗前2组患者IL-6表达量比较,差异无统计学意义[(127.92±10.51)pg·m L~(-1),(123.56±11.45)pg·m L~(-1),t=1.983,P=0.050];治疗第7天和第14天清热解毒中药组的IL-6表达量均低于呋喃西林组[(52.56±3.59)pg·m L~(-1),(68.93±4.88)pg·m L~(-1),t=19.106,P=0.000;(31.37±2.37)pg·m L~(-1),(42.64±2.89)pg·m L~(-1),t=21.324,P=0.000];时间因素与分组因素存在交互效应(F=10.670,P=0.000)。治疗开始后2周,采用自拟标准评价临床疗效,清热解毒中药组痊愈27例、显效11例、有效12例,呋喃西林组痊愈12例、显效10例、有效23例、无效5例;清热解毒中药组的临床疗效优于呋喃西林组(Z=2 026.000,P=0.000)。结论:清热解毒中药外敷治疗外伤感染创面可以减小创面面积、缩短创面愈合时间,其临床疗效优于呋喃西林外敷;其作用机制可能是通过抑制外周血单个核细胞表面TLR4的表达,使TNF-α、IL~(-1)β及IL-6的表达受到抑制,从而减轻了炎症反应。     

氨甲环酸对全膝关节置换术中应用止血带造成的缺血再灌注损伤的影响

目的:探讨氨甲环酸对全膝关节置换(total knee arthroplasty,TKA)术中应用止血带造成的缺血再灌注损伤的影响。方法:膝骨关节炎患者60例,男19例、女41例;年龄61～79岁,中位数68岁;病程3～20年,中位数8年。随机分为氨甲环酸组和生理盐水组,每组30例。均行初次单侧全膝关节置换术,手术全程上充气止血带,放置负压引流管。分别于术中安装假体后和术后3 h,氨甲环酸组给予氨甲环酸1 g加入100 mL生理盐水中静脉滴注,生理盐水组给予生理盐水100 mL静脉滴注。术中缝合关节囊后,氨甲环酸组给予氨甲环酸1 g加入100 mL生理盐水中关节腔局部灌注,生理盐水组给予生理盐水100 mL关节腔局部灌注。术后负压引流管夹闭3 h后间断开放,术后24 h拔除引流管。记录2组患者手术时间、术中出血量及术后24 h负压引流量。分别于术前、术后24 h、术后72 h时肘静脉采血5 mL,术后24 h拔除引流管时取引流液10 mL。采用酶联免疫法检测外周血血清中和关节腔引流液中白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量。结果:①一般结果。2组患者均顺利完成手术,手术时间、术中出血量的组间差异均无统计学意义[(73.4±6.5)min,(70.2±8.2)min,t=1.636,P=0.326;(65±11)mL,(62±15)mL,t=0.824,P=0.428],氨甲环酸组术后24 h引流量少于生理盐水组[(217±35)mL,(467±52)mL,t=21.710,P=0.000]。②2组患者手术前后外周血血清中IL-6含量检测结果。时间因素和分组因素存在交互效应(F=12.312,P=0.000);2组患者外周血血清中IL-6含量的组间总体比较,差异有统计学意义,即存在分组效应(F=3.214,P=0.001);不同时间点间外周血血清中IL-6含量总体比较,差异有统计学意义,即存在时间效应(F=16.531,P=0.000);2组患者手术前后外周血血清中IL-6含量均呈先增高后降低的趋势,但2组的趋势不完全一致[氨甲环酸组:(6.23±1.65)pg·mL~(-1),(28.13±4.21)pg·mL~(-1),(22.09±2.75)pg·mL~(-1);生理盐水组:(6.41±2.02)pg·mL~(-1),(37.54±5.31)pg·mL~(-1),(32.52±3.01)pg·mL~(-1)];术前2组患者外周血血清中IL-6含量的组间差异无统计学意义(t=1.567,P=0.268);术后24 h和术后72 h时,氨甲环酸组患者外周血血清中IL-6含量均低于生理盐水组(t=3.553,P=0.001;t=4.537,P=0.000)。③2组患者手术前后外周血血清中TNF-α含量检测结果。时间因素和分组因素存在交互效应(F=17.312,P=0.000);2组患者外周血血清中TNF-α含量的组间总体比较,差异有统计学意义,即存在分组效应(F=4.318,P=0.000);不同时间点间外周血血清中TNF-α含量总体比较,差异有统计学意义,即存在时间效应(F=15.231,P=0.000);2组患者手术前后外周血血清中TNF-α含量均呈先增高后降低的趋势,但2组的趋势不完全一致[氨甲环酸组:(20.51±3.61)pg·mL~(-1),(35.33±4.35)pg·mL~(-1),(31.32±2.98)pg·mL~(-1);生理盐水组:(19.82±2.96)pg·mL~(-1),(42.85±3.87)pg·mL~(-1),(37.76±3.62)pg·mL~(-1)];术前2组患者外周血血清中TNF-α含量的组间差异无统计学意义(t=1.312,P=0.316);术后24 h和术后72 h时,氨甲环酸组患者外周血血清中TNF-α含量均低于生理盐水组(t=5.124,P=0.000;t=3.317,P=0.001)。④2组患者术后关节腔引流液中IL-6、TNF-α含量检测结果。氨甲环酸组术后关节腔引流液中IL-6、TNF-α含量均低于生理盐水组[(30.23±3.42)pg·mL~(-1),(38.78±4.15)pg·mL~(-1),t=2.637,P=0.018;(31.65±4.27)pg·mL~(-1),(41.24±4.83)pg·mL~(-1),t=3.281,P=0.001]。结论:在TKA术中静脉滴注结合关节腔灌注氨甲环酸,有利于减轻应用止血带造成的缺血再灌注损伤。     

桃红四物汤对兔自体皮片移植模型Delta-like4表达的影响

目的:观察桃红四物汤对兔自体皮片移植模型Delta-like 4表达的影响。方法:将75只新西兰大白兔(10~12月龄)随机分为假手术组、模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组15只。模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组动物进行自体皮片移植手术,假手术组仅在对应区域作切口,不进行皮下组织分离。造模术后假手术组和模型组动物以蒸馏水灌胃,低剂量组、中剂量组和高剂量组均以制备好的桃红四物汤汤剂灌胃(每次给药量分别为2.5 g·kg~(-1)、5 g·kg~(-1)、10 g·kg~(-1)),每天2次。分别在药物干预开始后2、5、8 d从每组随机选取5只动物,心脏采血后处死,切取移植皮片吻合区皮片组织。采用酶联免疫吸附实验测定血清Delta-like 4蛋白含量;所取皮片组织分成2份,一份制成石蜡切片,HE染色后测定血管密度,另一份采用逆转录聚合酶链式反应法测定Delta-like 4 mRNA含量。结果:1血清Delta-like 4蛋白含量。药物干预开始后2 d,5组动物血清Delta-like 4蛋白含量比较,差异无统计学意义[(30.58±3.56)ng·m L~(-1),(32.31±2.66)ng·m L~(-1),(33.53±1.75)ng·m L~(-1),(36.00±1.49)ng·m L~(-1),(35.63±1.87)ng·m L~(-1),F=2.669,P=0.062]。药物干预开始后5、8 d,5组动物血清Delta-like 4蛋白含量比较,组间差异均有统计学意义[(30.56±1.35)ng·m L~(-1),(33.52±2.50)ng·m L~(-1),(37.96±1.83)ng·m L~(-1),(48.74±2.34)ng·m L~(-1),(49.05±2.86)ng·m L~(-1),F=46.239,P=0.000;(29.26±2.20)ng·m L~(-1),(32.98±1.43)ng·m L~(-1),(35.24±1.97)ng·m L~(-1),(38.02±1.72)ng·m L~(-1),(36.06±2.50)ng·m L~(-1),F=8.394,P=0.000];模型组分别与假手术组和低剂量组比较,差异均无统计学意义(5 d:P=0.112,P=0.269;8 d:P=0.340,P=0.182);中、高剂量组血清Delta-like 4蛋白含量均高于模型组(5 d:P=0.000,P=0.000;8 d:P=0.020,P=0.006);中、高剂量组比较,组间差异均无统计学意义(P=0.862,P=0.245)。药物干预后5 d,中、高剂量组血清Delta-like 4蛋白含量均高于低剂量组(P=0.000,P=0.000)。药物干预开始后8 d,中、高剂量组Delta-like4蛋白含量与低剂量组比较,差异均无统计学意义(P=0.105,P=0.623)。2移植皮片组织中Delta-like 4 mRNA含量。药物干预开始后2、5、8 d,5组动物移植皮片中Delta-like 4 mRNA含量比较,组间差异均有统计学意义(0.26±0.03,0.29±0.04,0.34±0.06,0.42±0.03,0.39±0.04,F=7.072,P=0.001;0.25±0.03,0.34±0.04,0.39±0.03,0.48±0.06,0.45±0.06,F=12.028,P=0.001;0.25±0.06,0.30±0.04,0.35±0.03,0.44±0.03,0.43±0.04,F=10.813,P=0.000);模型组分别与假手术组和低剂量组比较,差异均无统计学意义(2 d:P=0.452,P=0.162;5 d:P=0.320,P=0.158;8 d:P=0.171,P=0.219);模型组Delta-like4 mRNA含量低于中、高剂量组(2 d:P=0.000,P=0.001;5 d:P=0.001,P=0.009;8 d:P=0.001,P=0.002);中、高剂量组比较,组间差异均无统计学意义(P=0.426,P=0.330,P=0.725)。药物干预开始后2 d,中、高剂量组与低剂量组比较,差异均无统计学意义(P=0.111,P=0.167);药物干预开始后5、8 d,中、高剂量组Delta-like 4 mRNA含量均高于低剂量组(5 d:P=0.024,P=0.025;8 d:P=0.013,P=0.028)。3移植皮片组织中血管密度。药物干预开始后2、5 d,5组动物移植皮片中每个视野(×400)中血管数量比较,组间差异均有统计学意义[(5.37±0.36)个,(2.55±0.41)个,(2.83±0.24)个,(3.31±0.26)个,(3.53±0.67)个,F=4.084,P=0.014;(5.62±0.56)个,(4.25±0.68)个,(4.80±0.74)个,(5.88±0.42)个,(5.92±0.48)个,F=4.600,P=0.009];模型组均低于假手术组(P=0.001,P=0.011),模型组与低剂量组比较,差异均无统计学意义(P=0.527,P=0.268);中、高剂量组比较,组间差异均无统计学意义(P=0.620,P=0.939)。药物干预开始后2 d,中、高剂量组与模型组比较,差异均无统计学意义(P=0.102,P=0.131);中、高剂量组与低剂量组比较,差异均无统计学意义(P=0.297,P=0.352)。药物干预开始后5 d,中、高剂量组高于模型组(P=0.003,P=0.003);中、高剂量组与低剂量组比较,差异均无统计学意义(P=0.038,P=0.033)。药物干预开始后8 d,5组动物移植皮片中每个视野中血管数量比较,差异无统计学意义[(6.18±0.33)个,(5.86±0.66)个,(6.03±0.40)个,(6.27±0.53)个,(6.27±0.59)个,F=0.334,P=0.852]。结论:桃红四物汤能上调兔自体皮片移植模型Delta-like 4的表达,促进血管新生。但本研究未能明确桃红四物汤的剂量及作用时间与其上调Delta-like 4表达作用的关系,需要在今后的研究中进一步探讨。     

强骨饮对假体周围骨溶解模型大鼠骨密度的影响及其作用机制研究

目的:探讨强骨饮对假体周围骨溶解模型大鼠骨密度的影响及其作用机制。方法:选取30只成年雄性SD大鼠,随机分为空白组、模型组和强骨饮组,每组10只。空白组不进行造模;模型组和强骨饮组大鼠右侧股骨植入高密度聚乙烯颗粒和钛棒,制备聚乙烯颗粒诱导的假体周围骨溶解模型。造模手术3 d后,强骨饮组大鼠以制备好的强骨饮药液灌胃,每周3次,连续给药11周。空白组和模型组均不进行药物干预。造模后12周,取大鼠静脉血用ELISA法测定血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b(tartrate resistant acid phosphatase 5b,TRACP5b)水平,取右侧股骨进行骨密度检测,并以ELISA法测定股骨组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)水平。结果:实验过程中各组大鼠日常行为无差别,精神状况良好,反应灵敏,体质量逐渐增加。模型组和强骨饮组大鼠术后1周切口愈合。实验全过程中各组均无大鼠死亡。3组大鼠血清TRACP5b水平比较,差异有统计学意义[(1.83±0.42)U·L~(-1),(2.40±0.43)U·L~(-1),(1.90±0.28)U·L~(-1),F=9.323,P=0.002]。模型组血清TRACP5b水平高于空白组和强骨饮组(P=0.001;P=0.002)。3组大鼠股骨骨密度比较,差异有统计学意义[(0.162±0.009)g·cm~(-2),(0.119±0.010)g·cm~(-2),(0.140±0.007)g·cm~(-2),F=74.323,P=0.000]。模型组股骨骨密度低于空白组和强骨饮组(P=0.000;P=0.000)。3组大鼠股骨组织中TNF-α水平比较,差异有统计学意义[(70.21±8.83)pg·mL~(-1),(175.32±14.95)pg·mL~(-1),(129.73±12.86)pg·mL~(-1),F=160.242,P=0.000]。模型组股骨组织TNF-α水平高于空白组和强骨饮组(P=0.000;P=0.000)。结论:强骨饮可以增加假体周围骨溶解模型大鼠的骨密度,其机制可能是通过减轻炎症反应,抑制破骨细胞活性,从而减少假体周围骨吸收。     

补肾活血方对去卵巢大鼠骨代谢及骨密度的影响

目的:观察补肾活血方对去卵巢大鼠骨代谢和骨密度的影响。方法:将40只SD雌性大鼠随机分成假手术组、模型组、补肾活血方组和尼尔雌醇组,每组10只。假手术组行开腹术但不摘除卵巢,其他3组行双侧卵巢切除术。术后假手术组和模型组大鼠以蒸馏水灌胃(每次3 m L,每天1次),补肾活血方组大鼠以补肾活血方汤剂灌胃(每次15 g·kg~(-1),每天1次),尼尔雌醇组大鼠以研细的尼尔雌醇片和生理盐水配制成的混悬液灌胃(每次0.6 g·kg~(-1),每周1次)。灌胃12周后从大鼠心脏取血,离心后吸取上层血清,置入冰箱保存待检。处死大鼠后,切取右侧股骨中段做标本,同时取大鼠腰椎,置入冰箱保存待检。采用ELISA法测定血清Ⅰ型前胶原氨基端原肽(procollagen typeⅠN-terminal propeptide,PINP)、β-胶原降解产物(βisomer of C-terminal telopeptide of typeⅠcollagen,β-CTX)含量,并用双能X线骨密度测量仪检测腰椎骨密度。将冰冻切片做HE染色后,在显微镜下观察骨组织病理学改变。结果:1血清PINP、β-CTX含量。药物干预后各组大鼠血清PINP含量比较,差异有统计学意义(F=914.448,P=0.000)。组间两两比较,假手术组血清PINP含量低于模型组[(0.109±0.008)μg·m L~(-1),(0.252±0.006)μg·m L~(-1),q=-51.807,P=0.000];假手术组血清PINP含量与补肾活血方组[(0.163±0.006)μg·m L~(-1)]、尼尔雌醇组[(0.169±0.005)μg·m L~(-1)]比较,差异均无统计学意义[q=0.559,P=0.208;q=0.850,P=0.253];模型组血清PINP含量高于补肾活血方组和尼尔雌醇组(q=32.248,P=0.000;q=29.957,P=0.000);补肾活血方组与尼尔雌醇组比较,差异无统计学意义(q=-0.290,P=0.317)。药物干预后各组大鼠血清β-CTX含量比较,差异有统计学意义(F=963.955,P=0.000)。组间两两比较,假手术组血清β-CTX含量低于模型组[(0.432±0.007)ng·m L~(-1),(0.766±0.005)ng·m L~(-1),q=-48.601,P=0.000];假手术组血清β-CTX含量与补肾活血方组[(0.482±0.006)ng·m L~(-1)]、尼尔雌醇组[(0.494±0.008)ng·m L~(-1)]比较,差异均无统计学意义(q=-0.172,P=0.215;q=0.980,P=0.322);模型组血清β-CTX含量高于补肾活血方组和尼尔雌醇组(q=41.429,P=0.000;q=39.622,P=0.000);补肾活血方组血清β-CTX含量与尼尔雌醇组比较,差异无统计学意义(q=-0.808,P=0.790)。2腰椎骨密度。药物干预后各组大鼠腰椎骨密度比较,差异有统计学意义(F=419.969,P=0.000)。组间两两比较,假手术组腰椎骨密度高于模型组[(0.170±0.004)g·cm-2,(0.097±0.005)g·cm-2,q=35.198,P=0.000];假手术组腰椎骨密度与补肾活血方组[(0.127±0.005)g·cm-2]、尼尔雌醇组[(0.126±0.004)g·cm-2]比较,差异均无统计学意义(q=2.444,P=0.157;q=1.167,P=0.230);模型组腰椎骨密度低于补肾活血方组和尼尔雌醇组(q=~(-1)4.754,P=0.000;q=~(-1)4.031,P=0.000);补肾活血方组腰椎骨密度与尼尔雌醇组比较,差异无统计学意义(q=0.723,P=0.474)。3骨组织形态。假手术组股骨骨小梁粗壮、饱满,壁厚,形态结构完整,排列紧密有序,呈网状,密度、面积正常,骨小梁间隙较小。模型组股骨骨小梁变细、变薄,有扭曲或断裂,骨小梁间隙增大。补肾活血方组和尼尔雌醇组股骨骨小梁较模型组明显增粗,排列尚整齐并连接成网,部分区域骨小梁间隙略增大。结论:补肾活血方能降低去卵巢大鼠血清PINP、β-CTX含量,提高骨密度,改善骨组织状况,但其具体作用机制尚不明确,有待进一步研究。     

骨髓间充质干细胞移植对胶原诱导性关节炎大鼠血清细胞因子的影响

目的:观察骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植对胶原诱导性关节炎(collagen induced arthritis,CIA)大鼠血清细胞因子的影响。方法:选取清洁级雌性Wistar大鼠60只。用颈椎脱臼断颈法处死1只大鼠,取股骨和胫骨骨髓,分离、培养BMSCs。其余59只大鼠采用随机数字表分为正常对照组(20只)、模型组(20只)、细胞移植组(19只)。模型组和细胞移植组每只大鼠在尾根部、背部及左后足跖部皮下注射含牛Ⅱ型胶原的乳化液共0.5 mL,正常对照组注射等量生理盐水。于第1次注射后第14天再注射1次。于第2次注射后的第15天,各组分别随机处死2只大鼠,观察左侧踝关节组织形态,判断造模是否成功。于第2次注射的当天,细胞移植组大鼠通过尾静脉注射BMSCs悬液,正常对照组和模型组注射等量生理盐水。干预30 d后,采用关节炎指数(arthritis index,AI)评价各组大鼠关节炎严重程度;采用ELISA法检测大鼠血清中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase 3,MMP-3)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor,TNF-α)、白细胞介素17(interleukin-17,IL-17)水平。结果:①模型鉴定结果。造模完成后的第15天,正常对照组大鼠踝关节结构完整,组织切片未见明显炎性细胞增殖;模型组和细胞移植组大鼠踝关节滑膜增生,组织切片可见大量增殖的炎性细胞,提示造模成功。②关节炎严重程度评价结果。干预30 d后,正常对照组、模型组和细胞移植组AI值分别为(1.15±0.32)分、(8.25±3.18)分和(5.07±1.29)分,3组间的总体差异有统计学意义(F=2.823,P=0.005)。模型组和细胞移植组AI值均高于正常对照组(P=0.017,P=0.023),细胞移植组AI值低于模型组(P=0.042)。③血清细胞因子水平检测结果。干预30 d后,3组间血清VEGF、MMP-3、TNF-α和IL-17水平总体比较,差异均有统计学意义[(10.45±3.44)pg·mL~(-1),(22.43±6.49)pg·mL~(-1),(17.22±5.20)pg·mL~(-1),F=2.059,P=0.043;(5.39±1.27)pg·mL~(-1),(12.49±3.22)pg·mL~(-1),(7.30±2.11)pg·mL~(-1),F=2.823,P=0.005;(22.34±8.50)pg·mL~(-1),(44.39±12.29)pg·mL~(-1),(35.55±9.40)pg·mL~(-1),F=1.983,P=0.048;(5.23±1.28)pg·mL~(-1),(11.26±3.07)pg·mL~(-1),(8.34±4.30)pg·mL~(-1),F=2.557,P=0.015]。模型组和细胞移植组血清VEGF、MMP-3、TNF-α和IL-17水平均高于正常对照组(模型组和正常对照组比较:P=0.022,P=0.040,P=0.033,P=0.016;细胞移植组和正常对照组比较:P=0.019,P=0.031,P=0.022,P=0.047);细胞移植组血清VEGF、MMP-3、TNF-α和IL-17水平低于模型组(P=0.044,P=0.012,P=0.033,P=0.048)。结论:BMSCs移植可减轻CIA大鼠关节炎严重程度,降低CIA大鼠血清中VEGF、MMP-3、TNF-α和IL-17水平。     

六味地黄丸对兔椎间盘退变模型椎间盘组织中Ⅰ、Ⅱ型胶原表达的影响

目的:观察六味地黄丸对兔椎间盘退变模型椎间盘组织中Ⅰ、Ⅱ型胶原表达的影响。方法:将80只新西兰兔随机分为空白组、假手术组、模型组和六味地黄组,每组20只。模型组、六味地黄组手术暴露L4~5和L5~6椎间隙,随机选择1个椎间盘注射肿瘤坏死因子α进行椎间盘退变造模,并以咬骨钳咬除该椎间盘上位椎体横突进行标记;假手术组经相同手术入路暴露L4~5和L5~6椎间隙,不做任何处理后缝合;空白组不进行任何手术干预。造模术后3 d开始,六味地黄组按26 mg·kg-1以六味地黄胶囊混悬液灌胃,其余3组以等量生理盐水灌胃,每天1次,共8周。分别于药物干预开始后2、4、6、8周,从各组随机选取5只兔子处死,模型组和六味地黄组手术取出造模椎间盘,空白组和假手术组随机选择L4~5或L5~6椎间盘取出。分别采用聚合酶链式反应法和Western Blot法测定椎间盘组织中Ⅰ、Ⅱ型胶原的mRNA和蛋白表达水平。结果:药物干预2、4、6、8周后,4组兔子椎间盘组织Ⅰ型胶原mRNA表达水平比较,组间差异均有统计学意义[(0.064 8±0.009 8),(0.068 6±0.012 7),(0.192 0±0.040 6),(0.124 6±0.012 0),F=49.752,P=0.000;(0.066 0±0.010 0),(0.077 1±0.011 8),(0.252 4±0.039 9),(0.164 1±0.018 1),F=79.537,P=0.000;(0.071 2±0.011 2),(0.089 1±0.008 1),(0.326 3±0.028 5),(0.176 3±0.015 0),F=236.726,P=0.000;(0.094 1±0.012 0),(0.155 0±0.003 8),(0.451 4±0.039 6),(0.205 8±0.018 1),F=201.055,P=0.000];模型组Ⅰ型胶原mRNA表达水平高于空白组、假手术组和六味地黄组(P=0.000,P=0.015,P=0.002,P=0.000;P=0.013,P=0.002,P=0.000,P=0.015;P=0.002,P=0.012,P=0.000,P=0.000)。空白组和假手术组的Ⅰ型胶原mRNA表达水平各时间点间比较,差异均无统计学意义(F=50.563,P=0.132;F=80.352,P=0.634);模型组和六味地黄组的Ⅰ型胶原mRNA表达水平各时间点间比较,差异均有统计学意义(F=193.635,P=0.000;F=284.736,P=0.000),Ⅰ型胶原mRNA表达水平均逐渐增高(P=0.004,P=0.002,P=0.000;P=0.000,P=0.003,P=0.001)。药物干预2、4、6、8周后,4组兔子椎间盘组织Ⅱ型胶原mRNA表达水平比较,组间差异均有统计学意义[(0.042 7±0.008 0),(0.041 2±0.005 8),(0.011 6±0.002 1),(0.031 7±0.005 6),F=42.696,P=0.000;(0.038 8±0.004 3),(0.037 3±0.004 3),(0.011 5±0.001 8),(0.031 1±0.003 5),F=108.110,P=0.000;(0.030 3±0.005 7),(0.025 9±0.008 3),(0.007 9±0.002 7),(0.017 2±0.002 1),F=52.436,P=0.000;(0.029 3±0.006 9),(0.023 7±0.004 6),(0.005 3±0.001 0),(0.014 8±0.001 8),F=51.375,P=0.000];模型组Ⅱ型胶原mRNA表达水平低于空白组、假手术组和六味地黄组(P=0.002,P=0.001,P=0.000,P=0.001;P=0.001,P=0.000,P=0.000,P=0.001;P=0.001,P=0.002,P=0.013,P=0.000)。空白组和假手术组的Ⅱ型胶原mRNA表达水平各时间点间比较,差异均无统计学意义(F=70.463,P=0.122;F=90.362,P=0.089);模型组和六味地黄组的Ⅱ型胶原mRNA表达水平各时间点间比较,差异均有统计学意义(F=110.364,P=0.001;F=86.362,P=0.004),模型组和六味地黄组的Ⅱ型胶原mRNA表达水平均逐渐降低(P=0.002,P=0.005,P=0.003;P=0.000,P=0.001,P=0.000)。药物干预2、4、6、8周后,4组兔子椎间盘组织Ⅰ型胶原蛋白表达水平比较,组间差异均有统计学意义[(0.575 9±0.135 6),(0.599 5±0.037 4),(0.620 0±0.072 0),(0.609 6±0.032 1),F=9.288,P=0.001;(0.593 9±0.108 0),(0.647 1±0.044 8),(0.807 0±0.061 6),(0.659 9±0.105 5),F=28.883,P=0.000;(0.614 0±0.224 6),(0.685 6±0.066 5),(1.129 1±0.097 4),(0.700 1±0.086 5),F=34.957,P=0.000;(0.614 8±0.139 3),(0.742 3±0.165 3),(1.322 4±0.351 7),(0.806 0±0.094 3),F=3.296,P=0.048];模型组Ⅰ型胶原蛋白表达水平高于空白组、假手术组和六味地黄组(P=0.000,P=0.015,P=0.002,P=0.000;P=0.013,P=0.002,P=0.000,P=0.015;P=0.002,P=0.012,P=0.000,P=0.000)。空白组和假手术组的Ⅰ型胶原蛋白表达水平各时间点间比较,差异均无统计学意义(F=37.485,P=0.365;F=10.376,P=0.583);模型组和六味地黄组的Ⅰ型胶原蛋白表达水平各时间点间比较,差异均有统计学意义(F=70.362,P=0.000;F=6.375,P=0.001),模型组和六味地黄组的Ⅰ型胶原蛋白表达水平均逐渐增高(P=0.005,P=0.002,P=0.000;P=0.004,P=0.001,P=0.000)。药物干预2、4、6、8周后,4组兔子椎间盘组织Ⅱ型胶原蛋白表达水平比较,组间差异均有统计学意义[(0.605 8±0.066 5),(0.550 0±0.117 9),(0.278 0±0.053 2),(0.498 6±0.149 1),F=10.224,P=0.001;(0.553 7±0.126 5),(0.523 4±0.078 4),(0.258 2±0.037 8),(0.479 7±0.090 8),F=11.627,P=0.000;(0.546 8±0.120 8),(0.494 8±0.139 8),(0.219 0±0.099 2),(0.440 5±0.052 7),F=13.543,P=0.003;(0.494 8±0.042 5),(0.433 7±0.061 9),(0.131 9±0.012 8),(0.392 9±0.107 0),F=13.979,P=0.000];模型组Ⅱ型胶原蛋白表达水平低于空白组、假手术组和六味地黄组(P=0.002,P=0.001,P=0.000,P=0.001;P=0.001,P=0.000,P=0.000,P=0.001;P=0.001,P=0.002,P=0.013,P=0.000)。空白组和假手术组的Ⅱ型胶原蛋白表达水平各时间点间比较,差异均无统计学意义(F=17.364,P=0.092;F=15.573,P=0.175);模型组和六味地黄组的Ⅱ型胶原蛋白表达水平各时间点间比较,差异均有统计学意义(F=17.753,P=0.001;F=13.674,P=0.000),模型组和六味地黄组的Ⅱ型胶原蛋白表达水平均逐渐降低(P=0.002,P=0.004,P=0.001;P=0.000,P=0.001,P=0.000)。结论:六味地黄丸能适度下调兔椎间盘退变模型椎间盘组织中Ⅰ型胶原的表达、上调Ⅱ型胶原的表达,可在一定程度上延缓椎间盘退变进程。     

口服蠲痹汤和盐酸氨基葡萄糖胶囊治疗膝骨关节炎的疗效观察及作用机制研究

目的:观察口服蠲痹汤和盐酸氨基葡萄糖胶囊治疗膝骨关节炎的临床疗效并探讨其作用机制。方法:将80例膝骨关节炎患者随机分为2组,每组40例,分别采用口服蠲痹汤和盐酸氨基葡萄糖胶囊、单纯口服盐酸氨基葡萄糖胶囊治疗。蠲痹汤口服每日1剂,水煎400 m L,早晚各200 m L,连续服用8周;盐酸氨基葡萄糖胶囊口服每次2粒,每日3次,连续服用8周。分别于治疗前、治疗开始后8周测量并比较2组患者膝关节疼痛视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)评分、日本骨科协会(Japanese orthopaedic association,JOA)膝关节功能评分以及Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的血清含量。结果:1膝关节疼痛VAS评分和JOA膝关节功能评分。治疗前2组患者膝关节疼痛VAS评分及JOA膝关节功能评分比较,组间差异均无统计学意义[(8.01±1.16)分,(8.05±1.12)分,t=0.157,P=0.876;(70.02±9.86)分,(68.32±10.28)分,t=0.755,P=0.453]。治疗开始后8周,口服蠲痹汤和盐酸氨基葡萄糖胶囊组膝关节疼痛VAS评分低于单纯口服盐酸氨基葡萄糖胶囊组[(2.33±0.68)分,(5.86±0.97)分,t=18.850,P=0.000],JOA膝关节功能评分高于单纯口服盐酸氨基葡萄糖胶囊组[(86.24±5.32)分,(79.46±7.54)分,t=4.647,P=0.000];2组患者膝关节疼痛VAS评分均低于治疗前(t=26.720,P=0.000;t=9.348,P=0.000),JOA膝关节功能评分均高于治疗前(t=9.156,P=0.000;t=5.526,P=0.000)。2TLR4、TNF-α血清含量。治疗前2组患者TLR4、TNF-α血清含量比较,组间差异均无统计学意义[(17.90±6.80)ng·mL~(-1),(18.40±6.50)ng·mL~(-1),t=0.336,P=0.738;(188.70±38.90)pg·mL~(-1),(192.40±46.50)pg·mL~(-1),t=0.386,P=0.701]。治疗开始后8周,口服蠲痹汤和盐酸氨基葡萄糖胶囊组TLR4、TNF-α血清含量均低于单纯口服盐酸氨基葡萄糖胶囊组[(11.40±3.60)ng·mL~(-1),(15.10±4.30)ng·mL~(-1),t=4.173,P=0.000;(122.40±39.20)pg·mL~(-1),(158.20±37.37)pg·mL~(-1),t=4.181,P=0.000],2组患者TLR4、TNF-α血清含量均低于治疗前(t=5.343,P=0.000;t=2.678,P=0.000;t=7.593,P=0.000;t=3.636,P=0.000)。结论:口服蠲痹汤和盐酸氨基葡萄糖胶囊治疗膝骨关节炎,能够缓解或消除膝关节疼痛,改善膝关节功能,其疗效优于单纯口服盐酸氨基葡萄糖胶囊;其作用机制可能是通过抑制TLR4的表达,使TNF-α的表达受到抑制,从而减轻了炎症反应。     

骨碎补总黄酮对纳米羟基磷灰石-胶原复合材料与成骨细胞-血管内皮细胞共培养体系中血管内皮细胞增殖的影响

目的:探讨骨碎补总黄酮(osteopractic total flavone,OTF)对纳米羟基磷灰石-胶原(nano-hydroxyapatite collagen,nHAC)复合材料与成骨细胞-血管内皮细胞共培养体系中血管内皮细胞增殖的影响。方法:分别以浓度为500μg·mL~(-1)、250μg·mL~(-1)、100μg·mL~(-1)、50μg·mL~(-1)及0μg·mL~(-1)的OTF溶液干预生长在nHAC复合材料上的hFOB1.19人成骨细胞,干预24 h后收集5种上清液。再分别以5种上清液和人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)培养基混合培养HUVEC,培养24 h和48 h后进行划痕实验,计算细胞迁移率,确定OTF溶液最佳干预浓度和时间。在4个培养皿中铺满nHAC复合材料,加入DMEM/F12。A培养皿中不添加其他材料;B、D培养皿中接种hFOB1.19人成骨细胞,预培养24 h使细胞贴壁;C、D培养皿中加入OTF溶液,根据上一步划痕实验确定的最佳干预浓度和时间进行干预。干预结束后收集各培养皿中的上清液进行后续实验。接种HUVEC于HUVEC培养基上,分为空白组和A、B、C、D共5组;空白组不添加其他材料,A、B、C、D组分别加入A、B、C、D培养皿上清液;以CCK-8法测定细胞增殖率,HE染色后观察HUVEC形态,以ELISA法检测血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和成纤维细胞生长因子-2(fibroblast growth factor-2,FGF-2)含量。结果:①OTF溶液最佳干预浓度与时间检测结果。5种浓度OTF溶液干预后,0～24 h细胞迁移率的差异有统计学意义[(16.46±4.01)%,(21.71±1.30)%,(24.94±3.47)%,(22.08±2.46)%,(21.34±2.28)%,F=4.564,P=0.013],其中100μg·mL~(-1)OTF溶液干预后的细胞迁移率高于其余4组(P=0.001,P=0.020,P=0.014,P=0.029);24～48 h细胞迁移率的差异无统计学意义[(6.06±1.22)%,(5.37±1.85)%,(5.58±1.88)%,(6.14±1.52)%,(4.99±1.25)%,F=0.374,P=0.823]。提示OTF溶液最佳干预浓度为100μg·mL~(-1),最佳干预时间为24 h。②HUVEC细胞活性检测结果。时间因素与分组因素存在交互效应(F=14.039,P=0.000);5组HUVEC细胞增殖率总体比较,差异有统计学意义,即存在分组效应(F=83.285,P=0.000);干预开始后不同时点之间HUVEC细胞增殖率的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=1 968.467,P=0.000);5组HUVEC细胞增殖率随时间变化均呈升高趋势,各组的变化趋势不完全相同(1.05±0.06,1.81±0.09,2.53±0.05,6.10±0.17,11.29±1.21,F=527.347,P=0.000;0.99±0.11,2.37±0.40,2.92±0.19,7.35±0.19,14.41±1.35,F=913.030,P=0.000;0.98±0.20,3.50±0.18,4.35±0.16,8.53±0.99,15.42±0.73,F=1 637.304,P=0.000;1.02±0.10,2.10±0.13,2.59±0.15,4.70±0.25,11.41±1.21,F=494.876,P=0.000;1.01±0.06,2.81±0.37,3.31±0.08,5.95±0.24,12.74±2.03,F=878.982,P=0.000);干预开始后0 d时,各组细胞增殖率比较,差异无统计学意义;干预开始后1 d、2 d时,B组HUVEC细胞增殖率最高、D组次之,其余3组增殖率较为接近;干预开始后3 d、4 d时,B组HUVEC细胞增殖率最高、A组次之,其余3组增殖率较为接近。③HUVEC形态观察结果。细胞形态观察结果显示,干预开始后0 d、1 d、2 d、3 d、4 d时各组HUVEC的形态均无明显差异。④VEGF和FGF-2含量检测。A、B、C、D 4组VEGF含量比较,差异无统计学意义(0.059±0.012,0.057±0.016,0.059±0.018,0.057±0.014,F=0.060,P=0.980)。4组FGF-2含量比较,差异有统计学意义[(215.83±19.56)pg·mL~(-1),(565.83±47.14)pg·mL~(-1),(228.33±17.67)pg·mL~(-1),(445.00±17.69)pg·mL~(-1),F=317.377,P=0.000];B组的FGF-2含量高于其余3组(P=0.009,P=0.010,P=0.025),D组的FGF-2含量高于A组和C组(P=0.013,P=0.017),A组和C组FGF-2含量的差异无统计学意义(P=0.050)。结论:人成骨细胞和HUVEC在nHAC复合材料上共培养,均可以良好贴附、生长和增殖;OTF不能促进nHAC复合材料与人成骨细胞-HUVEC共培养体系中HUVEC增殖;HUVEC的增殖可能与成骨细胞分泌FGF-2有关。     

健肾方联合碳酸钙D3咀嚼片(Ⅱ)治疗绝经后骨质疏松症肾阳虚证

目的:观察健肾方联合碳酸钙D3咀嚼片(Ⅱ)治疗绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)肾阳虚证的临床疗效和安全性。方法:选取80例符合要求的PMOP肾阳虚证患者,随机分为2组,每组40例。健肾方组采用口服健肾方联合碳酸钙D3咀嚼片(Ⅱ)治疗,阿仑膦酸钠组采用口服阿仑膦酸钠片联合碳酸钙D3咀嚼片(Ⅱ)治疗,共治疗6个月。分别于治疗前和治疗结束后测定患者的骨密度、疼痛程度、血清雌二醇(Estradiol,E2)、骨保护素和胰岛素样生长因子Ⅰ(insulin-like growth factorⅠ,IGF-Ⅰ)含量,观察不良反应的发生情况。结果:健肾方组2例出现肝功能指标异常,2例出现肾功能指标异常;阿仑膦酸钠组1例出现肝功能指标异常,1例出现肾功能指标异常。对于出现不良反应的患者均立即停止使用当前药物,给予护肝及保护肾功能等对症处理后,患者的肝肾功能指标均在2周内恢复至正常范围。2组患者的不良反应发生率比较,差异无统计学意义(χ2=0.180,P=0.671)。治疗前2组患者的骨密度比较,差异无统计学意义(t=1.014,P=0.314);治疗结束后2组患者的骨密度均较治疗前增加(-2.69±0.12,-2.09±0.22,t=14.343,P=0.000;-2.72±0.13,-2.37±0.09,t=14.038,P=0.000),健肾方组的骨密度高于阿仑膦酸钠组(t=6.931,P=0.000)。治疗前2组患者的疼痛视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)评分比较,差异无统计学意义(t=0.465,P=0.644);治疗结束后2组患者的疼痛VAS评分均较治疗前降低[(4.53±0.94)分,(2.33±0.68)分,t=11.366,P=0.000;(4.42±1.03)分,(3.21±0.87)分,t=5.522,P=0.000],健肾方组的VAS评分低于阿仑膦酸钠组(t=4.841,P=0.000)。治疗前2组患者的血清E2含量比较,差异无统计学意义(t=0.511,P=0.611);治疗结束后健肾方组的血清E2含量较治疗前升高[(50.91±6.24)pmol·L~(-1),(62.88±9.02)pmol·L~(-1),t=6.546,P=0.000];阿仑膦酸钠组血清E2含量与治疗前相比,差异无统计学意义[(50.17±6.31)pmol·L~(-1),(50.88±8.16)pmol·L~(-1),t=0.425,P=0.672];治疗结束后,健肾方组的血清E2含量高于阿仑膦酸钠组(t=6.006,P=0.000)。治疗前2组患者的血清骨保护素含量比较,差异无统计学意义(t=0.348,P=0.729);治疗结束后2组患者的血清骨保护素含量均较治疗前升高[(140.76±14.97)pg·m L~(-1),(160.18±15.70)pg·m L~(-1),t=5.371,P=0.000;(139.55±14.99)pg·m L~(-1),(146.68±15.68)pg·m L~(-1),t=2.027,P=0.046],健肾方组的血清骨保护素含量高于阿仑膦酸钠组(t=3.701,P=0.000)。治疗前2组患者的血清IGF-Ⅰ含量比较,差异无统计学意义(t=0.839,P=0.404);治疗结束后2组患者的血清IGF-Ⅰ含量均较治疗前升高[(25.19±8.34)μg·L~(-1),(35.81±9.48)μg·L~(-1),t=5.042,P=0.000;(23.53±8.74)μg·L~(-1),(28.87±10.29)μg·L~(-1),t=2.440,P=0.017],健肾方组的血清IGF-Ⅰ含量高于阿仑膦酸钠组(t=3.012,P=0.004)。结论:健肾方联合碳酸钙D3咀嚼片(Ⅱ)能提高PMOP肾阳虚证患者血清E2、骨保护素及IGF-Ⅰ含量,增加患者的骨密度、减轻疼痛程度,其效果优于阿仑膦酸钠片联合碳酸钙D3咀嚼片(Ⅱ)治疗,而且具有较高的安全性。     

虎潜丸对去卵巢大鼠骨质疏松模型骨密度及转化生长因子β1表达的影响

目的：探讨虎潜丸治疗骨质疏松症的作用机制.方法：雌性SD大鼠40只,体质量180～220 g,中位数200 g,随机分为虎潜丸组、雌激素组、模型组、假手术组,每组10只.虎潜丸组、雌激素组、模型组切除双侧卵巢造模.7 d后,虎潜丸组予以虎潜丸水煎液灌胃,雌激素组予以尼尔雌醇混悬液灌胃,模型组、假手术组予以蒸馏水灌胃;每100 g体质量0.875 mL,每日灌胃1次,连续干预12周.比较各组大鼠椎骨骨密度及椎骨、肾组织中转化生长因子β1的表达.结果：虎潜丸组和雌激素组各有1只大鼠死亡,共纳入研究38只.干预12周后,各组大鼠椎骨骨密度值比较,差异有统计学意义[（0.210±0.028）g·cm-2,（0.205±0.030）g·cm-2,（0.171±0.036）g·cm-2,（0.205±0.034）g·cm-2;F=7.561,P=0.001];虎潜丸组、雌激素组、假手术组均高于模型组（P=0.002,P=0.002,P=0.013）;虎潜丸组与雌激素组、假手术组相比,差异均无统计学意义（P=0.459,P=0.224）;雌激素组与假手术组相比,差异无统计学意义（P=0.231）.各组大鼠椎骨转化生长因子β1灰度值比较,差异无统计学意义（169.060±5.545,167.420±6.238,162.400±3.882,168.130±7.899;F=2.176,P=0.109）.各组大鼠肾组织转化生长因子β1光密度值比较,差异有统计学意义（172.600±5.019,158.200±8.038,155.130±4.542,157.570±5.524;F=15.568,P=0.000）;虎潜丸组高于雌激素组、模型组和假手术组（P=0.000;P=0.000;P=0.000）;雌激素组与模型组、假手术组比较,差异均无统计学意义（P=0.478,P=0.490）;假手术组高于模型组（P=0.038）.结论：虎潜丸可增加大鼠腰椎椎骨骨密度,上调肾组织中转化生长因子β1的表达,可能是其治疗骨质疏松症的机制之一.     

槲皮素对去卵巢大鼠血清骨钙素和股骨Ⅰ型胶原蛋白水平的影响

目的:观察槲皮素对去卵巢大鼠血清骨钙素和股骨Ⅰ型胶原蛋白水平的影响。方法:将50只6月龄清洁级健康雌性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、尼尔雌醇组、槲皮素高剂量组和槲皮素低剂量组,每组10只。假手术组大鼠开腹找到卵巢后即关闭腹腔,其余4组切除双侧卵巢。造模手术1周后,假手术组和模型组以生理盐水灌胃,每天1次,每次4 m L;尼尔雌醇组按1.5 mg·kg-1以尼尔雌醇灌胃,每周1次;槲皮素高剂量组和槲皮素低剂量组分别按200 mg·kg-1和100 mg·kg-1以槲皮素灌胃,每天1次。3个月后以酶联免疫吸附测定法测定各组大鼠血清骨钙素水平,以Western Blot法测定股骨干骺端Ⅰ型胶原蛋白水平。结果:至药物干预结束时,模型组、尼尔雌醇组及槲皮素高剂量组各有1只大鼠死亡,槲皮素低剂量组2只大鼠死亡,死亡原因均为肺部感染。5组大鼠血清骨钙素水平比较,差异有统计学意义[(2.562±0.671)ng·m L-1,(5.763±0.612)ng·m L-1,(2.674±1.170)ng·m L-1,(2.722±1.063)ng·m L-1,(3.574±1.914)ng·m L-1,F=98.527,P=0.000]。假手术组、尼尔雌醇组、槲皮素高剂量组、槲皮素低剂量组血清骨钙素水平均低于模型组(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P=0.005);槲皮素高剂量组与尼尔雌醇组比较,差异无统计学意义(P=0.361);槲皮素低剂量组高于尼尔雌醇组(P=0.047);槲皮素低剂量组与槲皮素高剂组比较,差异无统计学意义(P=0.106)。5组大鼠股骨干骺端Ⅰ型胶原蛋白表达水平比较,差异有统计学意义(2.718±0.362,1.492±0.228,2.624±0.296,2.497±0.274,1.713±0.327,F=10.726,P=0.000)。假手术组、尼尔雌醇组、槲皮素高剂量组股骨Ⅰ型胶原蛋白表达水平均高于模型组(P=0.000,P=0.000,P=0.000);槲皮素低剂量组与模型组比较,差异无统计学意义(P=0.056);槲皮素高剂量组与尼尔雌醇组比较,差异无统计学意义(P=0.217);槲皮素低剂量组低于槲皮素高剂量组和尼尔雌醇组(P=0.000,P=0.000)。结论:槲皮素具有类雌激素样作用,可有效降低去卵巢大鼠的血清骨钙素水平、提高股骨Ⅰ型胶原蛋白水平,其作用效果与剂量有关。     

氨甲环酸关节腔注射联合三七散口服对初次全膝关节置换术围手术期失血量的影响

目的:观察氨甲环酸关节腔注射联合三七散口服对初次全膝关节置换术(total knee arthroplasty,TKA)围手术期失血量的影响。方法:将302例初次接受TKA的患者随机分为2组,151例采用氨甲环酸关节腔注射联合三七散口服治疗(联合治疗组),151例采用氨甲环酸关节腔注射联合安慰剂口服治疗(关节腔注射组)。TKA手术结束关闭关节腔后,向膝关节腔内注射氨甲环酸注射液50 m L。术前3 d至术后14 d连续口服中药配方颗粒三七散,每次4.5 g,每日2次。安慰剂应用方法与三七散相同。术后14 d采用Gross方程计算患者的围手术期失血量,测量患侧与健侧下肢周径差值;分别于术前3 d及术后1 d、7 d、14 d测量血浆D-二聚体含量。结果:术后14 d,联合治疗组的围手术期失血量低于关节腔注射组[(453.41±61.31)m L,(502.92±46.91)m L,t=7.881,P=0.000];联合治疗组的患侧与健侧下肢周径差值低于关节腔注射组[(0.62±0.12)cm,(0.75±0.22)cm,t=6.277,P=0.000]。手术前后不同时间点血浆D-二聚体含量比较,差异有统计学意义,存在时间效应(F=238.157,P=0.000);2组患者血浆D-二聚体含量总体比较,差异有统计学意义,即存在分组效应(t=3.185,P=0.002);术前3 d,2组患者血浆D-二聚体含量比较,差异无统计学意义[(0.35±0.15)ng·m L~(-1),(0.36±0.14)ng·m L~(-1),t=0.318,P=0.751];术后1 d、7 d、14d时,联合治疗组的血浆D-二聚体含量均低于关节腔注射组[(0.98±0.52)ng·m L~(-1),(1.15±0.87)ng·m L~(-1),t=2.048,P=0.041;(0.91±0.42)ng·m L~(-1),(1.34±0.56)ng·m L~(-1),t=7.601,P=0.000;(0.73±0.26)ng·m L~(-1),(0.95±0.47)ng·m L~(-1),t=5.289,P=0.000];时间因素和分组因素存在交互效应(F=403.727,P=0.000)。结论:氨甲环酸关节腔注射联合三七散口服可以减少初次TKA患者围手术期失血量、减轻患肢肿胀程度、降低血浆D-二聚体含量,效果优于单纯氨甲环酸关节腔注射。     

强骨膏方对绝经后骨质疏松性椎体骨折患者经皮椎体后凸成形术后骨代谢及生活质量的影响

目的:观察强骨膏方对绝经后骨质疏松性椎体骨折患者经皮椎体后凸成形术(percutaneous kyphoplasty,PKP)后骨代谢及生活质量的影响。方法:选择2018年9—12月因骨质疏松性椎体骨折接受了PKP治疗的患者为研究对象。采用随机数字表将符合要求的患者随机分为2组。常规治疗组自术后第2天开始口服碳酸钙D3片(每天1次,每次600 mg)和阿法骨化醇软胶囊(每天1次,每次1μg),强骨膏方组在常规治疗组治疗方案的基础上自术后第2天开始口服强骨膏方(每次15 mL,每天早晚各1次)。所有药物每服用3个月,停药1个月,共治疗1年。分别于入组时和治疗结束时,测定患者的血清总Ⅰ型原胶原氨基端前肽(total procollagen typeⅠN-terminal propeptide,T-PⅠNP)含量、Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(β-C-terminal telopeptide of typeⅠcollagen,β-CTX)含量、腰椎和髋部骨密度及简明健康状况调查表(short form 36 health survey questionnaire,SF-36)评分。结果:①分组结果。共纳入109例患者,强骨膏方组57例、常规治疗组52例。至试验结束时,强骨膏方组3例因出现药物性胃肠道不良反应退出、2例主动要求退出、1例因再次发生骨折退出;常规治疗组2例因出现药物性胃肠道不良反应退出、1例主动要求退出、2例因再次发生骨折退出。出现药物性胃肠道不良反应患者改用抗骨质疏松针剂治疗,再次出现骨折患者均再次行PKP和抗骨质疏松治疗,预后良好。②骨转换标志物及骨密度测定结果。入组时2组患者的血清T-PⅠNP含量、血清β-CTX含量、腰椎骨密度及髋部骨密度比较,组间差异均无统计学意义(t=-1.335,P=0.185;t=0.471,P=0.693;t=-1.734,P=0.086;t=-1.190,P=0.237)。治疗结束时2组患者的血清T-PⅠNP和β-CTX含量均较入组时降低[T-PⅠNP:(60.83±4.57)ng·mL~(-1),(39.26±4.06)ng·mL~(-1),t=26.460,P=0.000;(62.14±5.11)ng·mL~(-1),(31.32±2.49)ng·mL~(-1),t=38.692,P=0.000;β-CTX:(0.77±0.08)ng·mL~(-1),(0.44±0.05)ng·mL~(-1),t=25.880,P=0.000;(0.76±0.10)ng·mL~(-1),(0.52±0.06)ng·mL~(-1),t=14.961,P=0.000],腰椎和髋部骨密度均较入组时升高[腰椎骨密度:(0.758±0.011)g·cm~(-2),(0.786±0.024)g·cm~(-2),t=-10.238,P=0.000;(0.761±0.006)g·cm~(-2),(0.779±0.028)g·cm~(-2),t=-4.239,P=0.000;髋部骨密度:(0.528±0.008)g·cm~(-2),(0.567±0.036)g·cm~(-2),t=-7.550,P=0.000;(0.530±0.010)g·cm~(-2),(0.556±0.024)g·cm~(-2),t=-8.039,P=0.000];治疗结束时强骨膏方组的血清T-PⅠNP含量高于常规治疗组(t=11.754,P=0.000),血清β-CTX含量低于常规治疗组(t=-6.901,P=0.000),腰椎和髋部骨密度的组间差异均无统计学意义(t=1.355,P=0.179;t=1.770,P=0.080)。③SF-36评分。入组时2组患者的SF-36评分比较,差异无统计学意义(t=-1.212,P=0.229)。治疗结束时,2组患者的SF-36评分均较入组时升高[(102.22 1.69)分,(124.55±2.56)分,t=-98.085,P=0.000;(102.68±2.03)分,(115.34±2.29)分,t=-80.066,P=0.000],强骨膏方组的SF-36评分高于常规治疗组(t=18.702,P=0.000)。结论:绝经后骨质疏松性椎体骨折患者PKP术后应用强骨膏方,可以改善骨代谢、改善生活质量。     

口服自拟补肾活血汤治疗早期膝骨关节炎的临床研究

目的:观察口服自拟补肾活血汤治疗早期膝骨关节炎的临床疗效。方法:将70例早期膝骨关节炎患者随机分为2组,每组35例,分别采用口服自拟补肾活血汤和塞来昔布胶囊治疗。自拟补肾活血汤口服每日1剂,早晚服用;塞来昔布胶囊口服每日1次,每次200 mg,餐后服用;15 d为1个疗程,共6个疗程。分别于治疗前、治疗1个月后及治疗3个月后,记录并比较2组患者膝关节疼痛视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)评分、美国膝关节协会评分(American knee society score,KSS)、膝关节软骨T2值以及血清蛋白聚糖和血清Ⅱ型胶原的表达量。结果:(1)膝关节疼痛VAS评分。时间因素和分组因素存在交互效应(F=14.564,P=0.001);2组患者膝关节疼痛VAS评分总体比较,组间差异有统计学意义,即存在分组效应(F=17.326,P=0.000);治疗前后不同时间点间膝关节疼痛VAS评分的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=89.267,P=0.000);2组患者膝关节疼痛VAS评分随时间均呈降低趋势(F=80.933,P=0.000;F=25.824,P=0.000),但2组的降低趋势不完全一致;治疗前2组患者膝关节疼痛VAS评分的组间差异无统计学意义[(5.46±0.82)分,(5.57±0.95)分,t=-0.836,P=0.859];治疗1个月后、治疗3个月后补肾活血汤组膝关节疼痛VAS评分均低于塞来昔布胶囊组[(3.74±0.95)分,(4.34±0.94)分,t=-2.149,P=0.019;(1.94±0.97)分,(3.11±1.16)分,t=-4.385,P=0.000]。(2)KSS评分。时间因素和分组因素存在交互效应(F=13.453,P=0.006);2组患者KSS评分总体比较,组间差异有统计学意义,即存在分组效应(F=18.536,P=0.000);治疗前后不同时间点间KSS评分的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=64.329,P=0.000);2组患者KSS评分随时间均呈增高趋势(F=75.632,P=0.000;F=16.738,P=0.000),但2组的增高趋势不完全一致;治疗前2组患者KSS评分的组间差异无统计学意义[(55.91±5.68)分,(53.29±7.12)分,t=1.152,P=0.653)];治疗1个月后、治疗3个月后补肾活血汤组KSS评分均高于塞来昔布胶囊组[(66.92±5.82)分,(61.11±7.01)分,t=2.258,P=0.013;(82.20±5.01)分,(72.97±13.37)分,t=4.681,P=0.000]。(3)血清蛋白聚糖表达量。时间因素和分组因素存在交互效应(F=15.379,P=0.000);2组患者血清蛋白聚糖表达量总体比较,组间差异有统计学意义,即存在分组效应(F=19.524,P=0.000);治疗前后不同时间点间血清蛋白聚糖表达量的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=112.358,P=0.000);2组患者血清蛋白聚糖表达量随时间均呈降低趋势(F=102.497,P=0.000;F=16.738,P=0.001),但2组的降低趋势不完全一致;治疗前、治疗1个月后,2组患者血清蛋白聚糖表达量的组间差异均无统计学意义[(227.98±10.71)mmol·L~(-1),(231.11±12.18)mmol·L~(-1),t=-0.942,P=0.528;(220.60±13.76)mmol·L~(-1),(226.16±11.45)mmol·L~(-1),t=-1.171,P=0.061];治疗3个月后补肾活血汤组血清蛋白聚糖表达量低于塞来昔布胶囊组[(209.56±12.35)mmol·L~(-1),(220.12±17.23)mmol·L~(-1),t=-3.385,P=0.000]。(4)血清Ⅱ型胶原表达量。时间因素和分组因素存在交互效应(F=17.785,P=0.000);2组患者血清Ⅱ型胶原表达量总体比较,组间差异有统计学意义,即存在分组效应(F=12.586,P=0.000);治疗前后不同时间点间血清Ⅱ型胶原表达量的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=39.267,P=0.000);2组患者血清Ⅱ型胶原表达量随时间均呈降低趋势(F=45.598,P=0.000;F=12.136,P=0.004),但2组的降低趋势不完全一致;治疗前、治疗1个月后,2组患者血清Ⅱ型胶原表达量的组间差异均无统计学意义[(2.58±0.22)mmol·L~(-1),(2.60±0.24)mmol·L~(-1),t=-0.636,P=0.923;(2.45±0.32)mmol·L~(-1),(2.52±0.35)mmol·L~(-1),t=-1.125,P=0.065];治疗3个月后补肾活血汤组血清Ⅱ型胶原表达量低于塞来昔布胶囊组[(2.28±0.49)mmol·L~(-1),(2.41±0.52)mmol·L~(-1),t=-2.275,P=0.001]。(5)膝关节软骨T2值。时间因素和分组因素存在交互效应(F=15.337,P=0.002);2组患者膝关节软骨T2值总体比较,组间差异有统计学意义,即存在分组效应(F=20.586,P=0.000);治疗前后不同时间点间膝关节软骨T2值的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=63.481,P=0.000),但2组的变化趋势不完全一致;补肾活血汤组膝关节软骨T2值随时间呈降低趋势(F=75.438,P=0.000),塞来昔布胶囊组膝关节软骨T2值随时间无明显变化(F=4.527,P=0.277);治疗前2组患者膝关节软骨T2值的组间差异无统计学意义[(45.48±3.13)ms,(45.68±3.18)ms,t=-0.542,P=0.938];治疗1个月后、治疗3个月后补肾活血汤组膝关节软骨T2值均低于塞来昔布胶囊组[(42.55±3.06)ms,(45.60±3.39)ms,t=-2.746,P=0.009;(38.75±3.24)ms,(45.50±3.62)ms,t=-4.635,P=0.000]。结论:口服自拟补肾活血汤治疗早期膝骨关节炎可以缓解膝关节疼痛,改善膝关节功能,延缓软骨退变,其疗效优于口服塞来昔布胶囊,值得临床推广应用。     

中医综合疗法防治绝经后骨量减少的多中心临床研究

目的:观察口服强骨饮颗粒联合新编五禽戏锻炼及佩戴药穴腰带的中医综合疗法防治绝经后骨量减少的临床疗效及安全性。方法:从6家医院共纳入800例绝经后骨量减少患者,其中400例患者进行日光浴和饮食干预(常规治疗组),其余400例患者在此基础上采用口服强骨饮颗粒联合新编五禽戏锻炼及佩戴药穴腰带的中医综合治疗(中医综合治疗组),共治疗12个月。观察骨密度(bone mineral density,BMD)、血清Ⅰ型前胶原氨基端前肽(N~(-1)terminal propeptide of typeⅠprecollagen,PⅠNP)和Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(βcross~(-1)linked C~(-1)telopeptides of typeⅠcollagen,β~(-1)CTX)含量、疼痛视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)评分及不良事件发生率。结果:(1)BMD测定结果。治疗前后不同时间点腰椎BMD的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=1 974.342,P=0.000);治疗后中医综合治疗组腰椎BMD逐渐升高(F=1 482.684,P=0.000),常规治疗组腰椎BMD先升高然后降低(F=1 161.076,P=0.000)。2组患者腰椎BMD总体比较,组间差异无统计学意义,即不存在分组效应(F=2.939,P=0.087)。治疗前,2组患者腰椎BMD的差异无统计学意义[(0.775±0.046)g·cm~(~(-1)2),(0.777±0.049)g·cm~(~(-1)2),t=0.416,P=0.677];治疗6个月后和12个月后,中医综合治疗组的腰椎BMD均大于常规治疗组[(0.788±0.047)g·cm~(~(-1)2),(0.780±0.049)g·cm~(~(-1)2),t=~(~(-1)2).487,P=0.013;(0.789±0.048)g·cm~(~(-1)2),(0.778±0.049)g·cm~(~(-1)2),t=~(-1)3.039,P=0.002]。时间因素和分组因素存在交互效应(F=958.556,P=0.000)。治疗前后不同时间点股骨近端BMD的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=2 639.694,P=0.000);治疗后中医综合治疗组股骨近端BMD逐渐升高[(0.704±0.056)g·cm~(~(-1)2),(0.709±0.057)g·cm~(~(-1)2),(0.713±0.057)g·cm~(~(-1)2),F=5 515.964,P=0.000],常规治疗组股骨近端BMD逐渐降低[(0.707±0.054)g·cm~(~(-1)2),(0.706±0.054)g·cm~(~(-1)2),(0.706±0.054)g·cm~(~(-1)2),F=470.256,P=0.000]。2组患者股骨近端BMD总体比较,组间差异无统计学意义,即不存在分组效应(F=0.301,P=0.583)。时间因素和分组因素存在交互效应(F=5 456.814,P=0.000)。(2)血清PⅠNP和β~(-1)CTX含量测定结果。治疗前后不同时间点血清PⅠNP含量的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=276.541,P=0.000);治疗后中医综合治疗组血清PⅠNP含量先降低后升高,常规治疗组血清PⅠNP含量逐渐降低。2组患者血清PⅠNP含量总体比较,组间差异有统计学意义,即存在分组效应(F=11.094,P=0.001);治疗前,2组患者血清PⅠNP含量的差异无统计学意义[(45.76±21.66)ng·m L~(-1)1,(45.34±19.95)ng·m L~(-1)1,t=~(-1)0.284,P=0.777];治疗6个月后和12个月后,中医综合治疗组的血清PⅠNP含量均高于常规治疗组[(43.58±20.67)ng·m L~(-1)1,(40.58±17.81)ng·m L~(-1)1,t=~(~(-1)2).052,P=0.040;(49.89±24.16)ng·m L~(-1)1,(38.83±17.09)ng·m L~(-1)1,t=~(-1)7.472,P=0.000)]。时间因素和分组因素存在交互效应(F=651.242,P=0.000)。治疗前后不同时间点血清β~(-1)CTX含量的差异有统计学意义,即存在时间效应(F=316.946,P=0.000);治疗后中医综合治疗组血清β~(-1)CTX含量先降低后升高[(0.296±0.173)ng·m L~(-1)1,(0.227±0.137)ng·m L~(-1)1,(0.259±0.155)ng·m L~(-1)1,F=275.302,P=0.000],常规治疗组血清β~(-1)CTX含量逐渐降低[(0.287±0.158)ng·m L~(-1)1,(0.281±0.156)ng·m L~(-1)1,(0.273±0.151)ng·m L~(-1)1,F=992.78,P=0.000]。2组患者血清β~(-1)CTX含量总体比较,组间差异无统计学意义,即不存在分组效应(F=3.124,P=0.078)。治疗前和治疗12个月后,2组患者血清β~(-1)CTX含量的差异均无统计学意义(t=~(-1)0.880,P=0.379;t=1.257,P=0.209);治疗6个月后,中医综合治疗组血清β~(-1)CTX含量低于常规治疗组(t=5.233,P=0.000)。时间因素和分组因素存在交互效应(F=247.222,P=0.000)。(3)疼痛VAS评分测定结果。治疗前和治疗12个月后,2组患者疼痛VAS评分比较,差异均无统计学意义[(2.40±0.69)分,(2.39±0.70)分,t=0.335,P=0.723;(2.38±0.68)分,(2.46±0.67)分,t=~(-1)1.696,P=0.090];2组患者治疗前的疼痛VAS评分与治疗12个月后相比,差异均无统计学意义(t=0.508,P=0.612;t=~(-1)1.540,P=0.124)。(4)不良事件观察结果。至试验结束时中医综合治疗组失访19例、未按照试验方案治疗28例,常规治疗组失访13例、未按照试验方案治疗9例,脱落和剔除均发生在治疗6个月后数据采集完成之后。2组均无患者死亡、发生严重疾病等严重不良事件。结论:口服强骨饮颗粒联合新编五禽戏锻炼及佩戴药穴腰带的中医综合疗法,能提高绝经后骨量减少患者血清中PⅠNP含量、降低β~(-1)CTX含量,从而增加患者的骨密度,而且安全性较高。