新生隐球菌28S rDNA的基因型特征与序列分析

目的 探讨新生隐球菌各变种、血清型与基因型的关系。方法 新生隐球菌标准株10株、新生隐球菌荚膜缺陷株CAP10以及临床分离株19株,采用变性梯度胶电泳(DGGE)结合DNA序列分析,对以上菌株的28S rDNA片段进行研究。结果 经过DGGE和DNA序列分析,所有新生隐球菌新生变种(A、D型)具有一致的基因带型和序列,格特变种(B、C型)具有不同于新生变种的独特一致的带型和序列;AD型的基因型和序列与格特变种完全相同,新生隐球菌荚膜缺陷株CAP10(D型)的基因型类同于新生变种;19株临床分离菌在DGGE上可分为2型,17株与A、D型完全相同,2株与B、C型相同。结论 DGGE结合DNA序列分析,对于探讨新生隐球菌各变种、血清型的基因型特征、关系具有重要价值;我国非艾滋病隐球菌病感染以新生变种为主,AD型在系统发育上更类同于格特变种,而不是新生变种;本研究不支持A血清型为新生变种以外的新变种即grubii变种的观点。     

新生隐球菌AD血清型是新生变种?

新生隐球菌根据传统的分类方法和以往的观点,血清型AD型新生隐球菌一直被视为新生隐球菌新生变种\,但事实上,AD型新生隐球菌无论在地区分布、致病特征等方面,均与新生隐球菌新生变种中的A型和D型有明显不同^[2,3].本文采用变性梯度胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)技术和核酸序列分析,首次发现新生隐球菌AD型28S rDNA基因型与新生隐球菌新生变种的A、D型不同,而与新生隐球菌格特变种B、C型完全一致,现报道如下.     

腐生性新型隐球菌新型变种的分离

本文报告在扎伊尔的金沙萨市,从室外鸽子与鸡禽的排泄物、室内患有新型隐球菌病合并艾滋病(CN+AIDS)病人与正常人屋子中空气与灰尘中,均分离到了引起隐球菌病的新型隐球菌新型变种。其结果是鸡和鸽子排泄物获得了1.4％和11.3％的阳性率,而5个CN+AIDS患者的屋子和74个其它屋子分别获得了2和3株该菌。虽然新型隐球菌     

发生于艾滋病患者的Kaposl肉瘤样皮肤隐球菌病

kaposi肉瘤及播散性隐球菌病在一般人群中均罕见,但在免疫受损的患者中发病率明显增加.本文报告1例艾滋病(AIDS)患者,患有口腔Kaposi肉瘤及播散性皮肤隐球菌病.患者41岁,     

几种隐球菌酶扩增核糖体DNA图谱及快速基因鉴定

DNA的聚合酶链式反应(PCR)和核糖体DNA(rDNA)位点内限制酶切片段长度的多态性分析(RFLP)是遗传学分析的新方法,作者将这两种方法用于隐球菌rDNA的分析.受试菌种含新生隐球菌(19株)、浅白隐球菌(5株)、指甲隐球菌(2株)、罗伦隐球菌(4株)、黑隐球菌(1株)、白念珠菌(2株).将经土豆浸汁培养基中     

非洲布隆迪地方与艾滋病相关的隐球菌患者室内分离出新型隐球菌

许多报告提及不少非洲国家与艾滋病(AIDS)相关的隐球菌病的发病率很高。因此,中非国家的许多学者将隐球菌感染视为AIDS的一个指征。新型隐球菌及其变种一向只能发现于户外的鸽、鸡等粪中,但室内的灰尘、空气中也可分离到。本文作者对布隆迪城市的20例与AIDS相关的隐球菌病患者室外土壤及尘埃标本作了检查,同时也检查了3例患者室周围的鸽粪;另外,对19例患者     

隐球菌病的研究进展

隐球菌病是条件致病性深部真菌病。易发于细胞免疫功能受损的人群。近年来，发病率有逐渐增高的趋势，已引起临床医生的高度重视。本文就隐球菌病的微生物学、流行病学、发病机制、临床表现、实验室诊断和治疗等方面的研究现状作了综述。     

测定新生隐球菌活力的新方法

目前,对隐球菌性脑膜炎的抗真菌治疗,两性霉素B联合氟胞嘧啶或氟康唑被公认为是急性期最佳治疗方案.临床上经常遇到两性霉素B和氟胞嘧啶或氟康唑治疗一段时间后,不良反应明显,脑脊液隐球菌计数持续2～3个/mm³,这些隐球菌是死细胞还是活细胞?决定两性霉素B是否需要继续用下去.过去人们常通过显微镜脑脊液墨汁染色进行隐球菌计数,通过脑脊液真菌培养检验隐球菌是否存在及其活力,通过乳胶凝集实验观察治疗效果.虽然操作简便,但不能精确判定新生隐球菌的活力.因此,建立方便、有效的检测新生隐球菌活力的方法,便于指导隐球菌性脑膜炎的临床治疗.我们采用一种新型的穿透性核酸染色剂(SYTO9)和常规的核酸染色剂碘化丙啶(PI)进行双重染色后,用共聚焦激光扫描显微镜观察,能准确判定新生隐球菌的活力.同时使用维生素K3增强的四甲基偶氮唑盐(MTT)法进行活力测定比较.     

艾滋病合并隐球菌病患者43例临床特点及影响预后的相关因素分析

目的探讨艾滋病合并隐球菌病的临床特点及影响预后的相关因素。方法采集艾滋病合并隐球菌病住院患者43例的流行病学资料、临床表现、影像学检查、实验室检查、体格检查及疾病转归情况,统计分析影响预后的相关因素。结果 88.37%患者出现中枢神经系统感染,65.12%患者出现中枢神经系统合并肺部感染。经系统抗真菌治疗后总病死率为27.91%。出现昏迷患者病死率为71.43%,死亡病例平均脑脊液压力为297.8mm H2O,中枢神经系统合并肺部感染患者病死率为42.86%。死亡病例CD4+T细胞计数为(37.2±27.1)cells/μL,显著低于存活病例CD4+T细胞计数(74.0±59.4)cells/μL。未接受HAART治疗患者病死率为37.50%,死亡病例平均年龄显著高于存活病例。结论艾滋病合并隐球菌病患者易累及中枢神经系统和肺部,脑脊液压力高、昏迷、多器官受累、低CD4+T细胞计数、未接受HAART治疗、老年患者是艾滋病合并隐球菌病患者死亡的高危因素。     

儿童全身播散性隐球菌病1例

儿童全身播散性隐球菌病１例刘德明，曾庆玉，王华隐球菌病是由新生隐球菌引起，全身播散性损害罕见，最近我们收治１例有皮肤、淋巴结、肺、骨及中枢神经系统损害的隐球菌病患儿，现报告如下。患儿胡×，女，６岁。因发热、咳嗽、胸痛６个月，伴有皮疹３个月入院。起病初...     

新生隐球菌荚膜多糖葡萄糖醛酸木糖甘露聚糖的意义

新生隐球菌是一种机会致病真菌,隐球菌病严重威胁着免疫缺陷人群.葡萄糖醛酸木糖甘露聚糖是新生隐球菌荚膜多糖的主要成分,是一种分子结构多样的线性多糖,与新生隐球菌的免疫原性和毒力密切相关.葡萄糖醛酸木糖甘露聚糖结合FcγRⅡB介导免疫抑制作用,并参与形成生物膜,从而抑制抗隐球菌感染免疫.葡萄糖醛酸木糖甘露聚精单克隆抗体和疫苗疗法等免疫疗法或许可以改善免疫抑制状态,为隐球菌病提供治疗思路,也使艾滋病等高危人群预防隐球菌病成为可能.     

日本的深部真菌病

近十多年来日本的深部真菌病有增加的趋势。佐野等根据调查文献收集的1971～1981年深部真菌病1898例,与1966年以前的918例作比较,其结果是:①深部真菌病增加。从菌种病种例数的比例来看,曲菌病的比例下降,隐球菌病、奴卡氏菌病的比例增加。②曲菌病、隐球菌病男性患者占的比例低。③曲菌病、念珠菌病、隐球菌病、加杂感染真菌病的发病平均年龄提高。④继发性曲菌病的比例降低,继发性念珠茵病上升。⑤曲菌病、念珠菌病、隐球菌病、毛霉菌病、     

皮肤隐球菌病合并隐球菌性脑膜炎一例

人类的隐球菌病.约110%-15%有皮肤损害.我科收治1例以肉芽肿损害为主的皮肤隐球菌病合并隐球菌性脑膜炎的患者.现报告如下.     

原发性皮肤隐球菌病一例

皮肤隐球菌病在临床上是少见的,多发生于糖尿病、结核病、淋巴网状肉瘤、慢性淋巴细胞性白血病、何杰金氏病、肉样瘤病、慢性活动性肝炎、银屑病、类风湿性脊柱关节炎等患者中,亦可能认为是长期使用皮质激素的一种并发症.作者报道了一例极为罕见的原发性皮肤隐球菌病.患者女性、63岁,1976年8月底鼻翼部曾被蚊子叮咬,9月份局部出现一个溃疡结痂性损害,局部使用各种抗菌素与可的松软膏无效.皮损直径约1cm,界限清晰,边缘为红色堤状隆起,黑色焦痂下为溃疡并有少量溢脓.皮肤活检,霉菌学检查包括直接涂片,培养与生化检查支持新型隐球菌病的诊断,小白鼠腹膜内接种获阳性结果.患者一般化验检查无明显异常,血、尿、痰培养(-),胸片(-),血隐球菌培养(-),腰穿惜被拒绝.患者经100mg/kg 5-     

脑脊液对新生隐球菌和念珠菌的抗真菌活性研究

隐球菌性脑膜炎是隐球菌病中最严重的一型 ,尽管从隐球菌性脑膜炎患者脑脊液 (ＣＳＦ)中可分离出新生隐球菌 ,但对ＣＳＦ影响病原真菌生长的因素知之甚少。作者参照血清抑制新生隐球菌生长因素的研究方法 ,探讨了ＣＳＦ对新生隐球菌和念珠菌的体外抗真菌活性。材料与方法 :新生隐球菌 8株、白念珠菌 2株、光滑念珠菌 1株、克柔念珠菌 1株、乳酒念珠菌 1株。ＣＳＦ过滤除菌后用乳酒念珠菌作生物测试以排除其中的抗真菌药物活性。用ＲＰＭＩ-1 64 0培养液将ＣＳＦ倍比稀释后加入微测量平板中 ,同时用ＲＰＭＩ-1 64 0作对照 ,然后在上述培养基…     

新生隐球菌对立福康唑和氟康唑的体外敏感性实验

目的 了解临床和环境中分离所得的新生隐球菌对立福康唑和氟康唑的体外敏感性。方法 采用美国国家实验室标准委员会(NCCLS)M27-A方案推荐的酵母菌微量稀释法,检测77株来自临床和环境中分离所得新生隐球菌对立福康唑和氟康唑的MIC值。结果 氟康唑、立福康唑的MIC范围分别为2.0～128μg/mL、0.008～0.5μg/mL,前者MIC₅₀、MIC₉₀几何均数值分别为4μg/mL、8μg/mL,后者几何均数值分别为0.125μg/mL、0.25μg/mL。其中,对氟康唑敏感菌株占81.8%(63/77),中度敏感或剂量依赖性敏感菌株占16.9%(13/77),耐药菌株占1.3%(1/77)。中度敏感和耐药的14株菌中,临床分离株占85.7%,尽管在临床菌株与环境分离株间差异无显著性(P>0.05),但仍应引起临床医师重视。结论 虽然部分新生隐球菌对氟康唑出现中度敏感或耐药,但立福康唑对其均具有较好的体外抗菌活性,有望成为治疗隐球菌病药物的又一选择。     

颅内接种热灭活隐球菌对小鼠隐球菌脑膜脑炎作用的研究

目的 研究脑内接种热灭活的隐球菌(H-CN)在中枢神经系统隐球菌感染中的作用及对小鼠脑和脾白介素-1β(IL-1β)、干扰素γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因表达的影响。方法 建立脑内接种隐球菌造成中枢神经系统感染的小鼠模型,分实验组(给予2次脑内接种H-CN)、对照组(给予2次脑内接种生理盐水),分别取2组小鼠的脑和脾用RT-PCR方法检测IL-1β、IFN-γ及TNF-α的mRNA表达,然后给予2组小鼠脑内接种致死量的隐球菌,观察2组小鼠的生存时间及脑组织中菌落形成单位的变化。结果 实验组与对照组相比小鼠生存时间显著延长,小鼠脑组织中隐球菌菌落形成单位明显减少。小鼠脑组织总RNA以IL-1β、IFN-γ、TNF-α引物进行的RT-PCR产物,实验组IL-1β表达阳性,IFN-γ、TNF-α均表达阴性;对照组IL-1β、IFN-γ、TNF-α均表达阴性。小鼠脾组织总RNA以IL-1β、IFN-γ、TNF-α引物进行的RT-PCR产物2组均表达阳性,差异无显著性。结论 给予小鼠脑内接种H-CN可提高中枢神经系统对隐球菌感染的抵抗力,中枢神经系统抗隐球菌机制很可能与H-CN引起局部细胞因子IL-1β的分泌有关。     

墨西哥隐球菌脑膜炎患者中新生隐球菌格特变种的首次报导

近来据文献报导新生隐球菌格特变种(Cryptococcus neoformans var.gattii)可发生在艾滋病患者及非流行区,且与新生隐球菌新型变种(Cryptococcus neoformans var.neoformans)所致隐球菌脑膜炎的临床经过有所不同,因此有必要对隐球菌脑膜炎的病原体的鉴定、分布和临床特点进行研究。作者对此作了研究。 患者来源于墨西哥国立神经病学、神经外科学研究所。1989～1994年共有20例隐球菌脑膜炎患者,隐球菌从患者脑脊液中分离。用二     

真菌病

20 0 2 2 190　 PCR对新生隐球菌的基因分型研究 /温海(二军大长征医院皮肤科 )…∥第二军医大学学报 .-2 0 0 1,2 2 (11) .- 10 0 5～ 10 0 8用 AP- PCR方法检测新生隐球菌的临床和环境分离株 ,观察 PCR指纹与血清型的关系 ,探索 PCR指纹对于新生隐球菌的分型标准。采用 3种寡     

223 一例隐球菌脑膜炎患者脑脊液中新型隐球菌超微结构观察

新型隐球菌仅有培养基上菌株超微结构的检查,而直接电镜检查脑背液(CSF)中的新型隐球菌尚未见有报告。本文报告一例SLE患者因每日服80mg强的松龙4个月,结果并发了新型隐球菌脑膜炎,乃对其(CSF)中的隐球菌作了透射电镜检查,并与直接涂片及培养的菌相比较。取患者治疗(以两性霉素B20mg/d及5-氟胞嘧啶800mg/d)前及治疗后的10及20天CSF沉淀物分别作镜检、培养及电镜观察。并以培养基上生长的菌作电镜观察对照。结果:直接镜检:治疗前可见到大量菌,呈球形,外围以