HPLC测定地奥心血康胶囊中薯蓣皂苷元的含量

地奥心血康胶囊为《中国药典》一部2005年版收载品种,由薯蓣科植物黄山药、穿龙薯蓣的根茎提取物经加工而成的胶囊剂,其主要成分为薯蓣皂苷,占药物成分量的30%左右,临床上主要用于治疗心绞痛、冠心病等心肌缺血疾病[1]。薯蓣皂苷可经酸水解成薯蓣皂苷元(diosgenin)和葡萄糖、鼠李糖等糖类,薯蓣皂苷元的含量测定方法主要为HPLC法[2-4]。地奥心血康胶囊中薯蓣皂苷元测定方法尚未见报道,本研究建立了一种高效液相色谱法测定地奥心     

穿龙薯蓣的研究进展

 目的综述了穿龙薯蓣的研究进展，为深入系统研究穿龙薯蓣提供一定依据。方法根据国内外有关文献，从穿龙薯蓣的化学成分、药理活性、薯蓣皂苷元的提取、分离及测定等方面进行了介绍、结果穿龙薯蓣皂苷是重要的合成药物原料，临床应用广泛，用超临界C01萃取薯蓣皂苷元提取率高，无溶剂残留，高效液相色谱法测定，分析快速、准确。结论 穿龙薯蓣是一种重要的药用植物资源，有广阔的开发前景。     

不同产地和生态环境穿龙薯蓣两种活性成分的含量测定

目的:建立HPLC同时测定穿龙薯蓣中原薯蓣皂苷和薯蓣皂苷的含量测定方法,并建立药材质量评价的综合指标。方法:采用RP-HPLC,Agilent TC-C18(5μm,4.6mm×250mm);乙腈(A)-水(B)为流动相梯度洗脱;流速1.0mL.min-1,柱温:35℃,检测波长:203nm,记录35个穿龙薯蓣药材的HPLC图,依据线性关系计算原薯蓣皂苷、薯蓣皂苷的含量;同时进行了成分之间的相关分析和主成分分析,并计算了主成分的得分分值。结果:建立的色谱条件能使2种皂苷类成分达到基线分离,各成分都有较宽的线性范围和良好的线性关系(r=0.9998),加样回收率符合标准;原薯蓣皂苷和薯蓣皂苷的相关系数为-0.615,呈中度负相关;主成分分析提取一个主成分,可以代表80%以上两指标的信息,得分分值计算快捷。结论:含量测定的方法简单、准确、重复性好;主成分得分分值可为药材的质量评价提供参考依据。     

穿龙薯蓣根茎中薯蓣皂苷元的制备

目的制备穿龙薯蓣根茎中薯蓣皂苷元。方法水分离法分离根茎中的纤维和淀粉,富集浓缩皂苷浆料,再进行高温高压水解。分光光度法测定薯蓣皂苷元含有量,HPLC法测定其纯度。结果最优分离工艺为破壁时间40 s,筛网目数200目,纤维洗涤次数3次,淀粉洗涤次数3次;最优水解工艺为保温时间60 min,硫酸浓度1 mol/L,保温温度130℃,薯蓣皂苷元收率为3.07%,纯度为96.25%。结论该方法在分离阶段实现无溶剂提取,附属资源得以回收;水解阶段减少酸用量,缩短酸解时间,最终降低了薯蓣皂苷元的制备成本。     

不同性别及去花对穿龙薯蓣中薯蓣皂苷元含量的影响

目的 探讨不同性别及去花对薯蓣皂苷元含量的影响.方法 采用高效液相色谱法测定不同时期穿龙薯蓣根茎中薯蓣皂苷元的含量.结果 与结论 雌性植株薯蓣皂苷元的含量显著高于雄性,雌性去花后含量明显降低,与雄性植株接近.雌性、雌性去花和雄性三者具有相似的季节积累规律.     

高山红景天内生真菌的分离及产红景天苷菌株的筛选

目的分离和鉴定珍贵药用植物高山红景天根及根茎中的内生真菌,并从中筛选出可产红景天苷的菌株。方法用PDA培养基,通过组织分离法从高山红景天根及根茎中分离内生真菌,并采用传统的鉴定方法对纯化后的菌株进行分类鉴定。通过薄层层析(TLC)和高效液相色谱(HPLC)对分离得到的内生真菌发酵产物进行检测来获得产红景天苷的菌株。结果分离获得内生真菌20株,初步鉴定为3目、5科、9属。其中镰孢霉属(Fusarium)、青霉属(Penicillium)和曲霉属(Aspergillus)为优势种群。经TLC和HPLC法筛选得到一株可代谢产生活性物质红景天苷的内生真菌G5。结论高山红景天内生真菌在数量和种类上存在极其丰富的多样性;而且其内生真菌具有产生与其宿主相同或相似生理活性成分的能力。     

HPLC法比较组培与野生穿龙薯蓣中薯蓣皂苷元的含量

目的:建立用高效液相色谱法测定薯蓣皂苷元含量的方法,比较两种穿龙薯蓣中薯蓣皂苷元含量。方法:采用Agilent ZORBAX Extend-C-18反相色谱柱,流动相为乙腈-水(90:10),检测波长为206nm,流速为1ml/min。结果:薯蓣皂苷元在0~6μg范围内,其峰面积与浓度呈良好的线形关系(r=0.9999),平均回收率为101.00%,RSD为2.08%(n=5)。结论:两种穿龙薯蓣中薯蓣皂苷元的含量无显著差异(P>0.05)。     

不同性别及去花对穿龙薯蓣中薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷和总皂苷含量的影响

目的:探讨不同性别及去花对薯蓣皂苷和原薯蓣皂苷含量的影响.方法:采用高效液相色谱法和比色法,测定不同时期穿龙薯蓣根茎中薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷和总皂苷的含量.结果:雌性植株薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷和总皂苷的含量显著高于雄性,雌性去花后含量明显降低,与雄性植株接近.结论:三者具有相似的季节积累规律,各发育时期含量变化不大.     

穿龙薯蓣最佳采收期的研究

穿龙薯蓣Dioscorea nipponica Makino别名穿地龙、穿龙骨、穿山龙,为薯蓣科薯蓣属多年生缠绕性草本植物,属道地北药,以根茎入药,主要药用成分为薯蓣皂苷(dioscin)及水解后产生的薯蓣皂苷元(diosgenin)[1],后者是合成各种避孕药和甾体激素类药物的重要原料,其本身有肝脏保护[2]、抑制癌细胞增殖[3]、治疗骨质疏松[4]、抗糖尿病和消炎等功能[5,6]。近年来,由于国内外合成甾体激素类药物的迅速发展,对穿龙薯蓣的需求量日益增加,野生资源已不能满足生产需求,人工驯化与栽培正在广泛兴起。笔者已对穿龙薯蓣氮、磷、钾养分量变化规律进行了研究[7…     

RP-HPLC法测定穿山龙中薯蓣皂苷元的含量

穿山龙为薯蓣科植物穿龙薯蓣Dioscoreanip ponicaMakino的干燥根茎,收载于《中国药典》,含有多种水溶性和水不溶性皂苷,其中水不溶性皂苷主要为薯蓣皂苷元(diosgenin,C2 7H42 O3 )与不同糖类结合而成的薯蓣总皂苷[1 ] 。薯蓣皂苷元可选择先提取后水解法,或先水解再提取法、两相溶剂的直接水解提取法、生物降解法等进行测定[2 ] 。薯蓣皂苷元的测定方法有分光光度法[3 ] 、薄层扫描法[4] 、气相色谱法[5] 以及高效液相色谱法[6] ....     

黄芪内生真菌发酵液中有效成分的初步研究

目的:对黄芪内生真菌发酵液进行成分研究。方法:将分离得到的黄芪内生真菌28株,按优化的发酵条件发酵培养8天,滤除菌体,得发酵液。对发酵液不同方法分别处理后,进行黄芪皂苷类、黄芪多糖类和黄芪黄酮类成分检测研究。结果:黄芪皂苷类成分检测中Salkowski反应、TLC检测、HPLC检测都没有阳性结果;黄芪黄酮类成分检测,颜色反应也不明显;黄芪多糖类检测为阴性结果。结论:单一黄芪内生真菌发菌液中没有检测到黄芪有效成分。     

不同性别及去花对穿龙薯蓣中薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷和总皂苷含量的影响

目的：探讨不同性别及去花对薯蓣皂苷和原薯蓣皂苷含量的影响。方法：采用高效液相色谱法和比色法,测定不同时期穿龙薯蓣根茎中薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷和总皂苷的含量。结果：雌性植株薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷和总皂苷的含量显著高于雄性,雌性去花后含量明显降低,与雄性植株接近。结论：三者具有相似的季节积累规律,各发育时期含量变化不大。     

黄山药化学成分的研究

黄山药 Dioscorea panthaica Prain et Burkill为我国特有的薯蓣科薯蓣属植物 ,主要分布于云南、贵州、四川、湖南等地区 ,根茎含薯蓣皂苷元 1 .7%～2 .3% ,生药能祛风除湿 ,清热解毒 ,可治胃病、风湿性心脏病、风湿性关节炎、跌打损伤、牛马炭疽病[1] 。我们对其甾体皂苷类成分进行分离 ,通过硅胶柱色谱及 HPLC分离鉴定了 5个化合物 :progenin( ) ,progenin( ) ,薯蓣皂苷 (dioscin, ) ,纤细皂苷(gracillin, ) ,pseudoproto- dioscin( )。其中 ～ 为已知化合物 , 系首次从该植物中分得。1　仪器和材料熔点仪用 Yanoco MP- 53显微熔点测…     

盾叶薯蓣转录组分析及其皂苷元生物合成关键酶基因的挖掘

目的分析比较盾叶薯蓣根茎与叶片的转录组,挖掘与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径相关的关键酶基因。方法利用Illumina Hi Seq2000高通量测序技术对盾叶薯蓣根茎与叶片进行转录组测序,对测序结果进行注释分析;并结合根茎与叶片中皂苷元的含量测定结果,挖掘与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径相关的关键酶基因;最后利用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术对部分候选基因的表达模式进行分析。结果共获得了81 660个Unigene,有64.33%在NT、NR、Swiss-Prot、KOG、GO、KEGG数据库中得到注释;根据其表达量与代谢通路分析筛选出29种共227个可能参与盾叶薯蓣中皂苷元生物合成途径的催化酶基因,部分催化酶基因的表达模式与皂苷元含量具有一定相关性;并发现5个盾叶薯蓣内生菌基因。结论研究初步获得了盾叶薯蓣中参与皂苷元生物合成的候选关键酶基因,部分候选酶基因可能参与盾叶薯蓣中皂苷类成分的后修饰过程,并发现盾叶薯蓣根茎中内生菌可能参与其皂苷元的生物合成,为进一步阐明盾叶薯蓣中皂苷元生物合成的分子机制奠定基础。     

穿龙薯蓣中抗血栓活性成分研究

目的为进一步寻找穿龙薯蓣Dioseorea nipponica抗血栓活性成分,对其甾体皂苷类化学成分进行了系统的分离。方法采用正相、反相等色谱分离手段进行分离纯化,通过物理化学方法,根据MS、NMR谱数据,对得到的化合物进行结构鉴定。结果共分离得到9个化合物,分别鉴定为薯蓣皂苷元(1)、薯蓣皂苷元-3-O-β-D-葡萄糖苷(2)、薯蓣皂苷元-3-O-[α-L-鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(3)、薯蓣皂苷元-3-O-[α-L-鼠李糖基(1→4)]-β-D-葡萄糖苷(4)、薯蓣皂苷(5)、纤细皂苷(6)、伪原薯蓣皂苷(7)、26-O-β-D-葡萄糖基-3β,26-二醇-25(R)-Δ5,20(22)-二烯-呋甾-3-O-[α-L-鼠李糖基(1→2)]-O-β-D-葡萄糖苷(8)、26-O-β-D-葡萄糖基-3β,26-二醇-25(R)-Δ5,20(22)-二烯-呋甾-3-O-[α-L-鼠李糖基(1→4)]-O-β-D-葡萄糖苷(9)。结论化合物3、4及7～9为首次从该植物中分离得到。大鼠静脉旁路血栓形成试验表明,化合物2和5显示出一定的抗血栓活性。     

桃儿七茎部产鬼臼毒素类成分的内生真菌筛选及鉴定

目的:筛选和鉴定濒危藏族药桃儿七茎部产鬼臼毒素类成分的内生真菌,为保护桃儿七植物资源和发现新的天然活性菌株提供参考。方法:采用组织块法对桃儿七茎部的内生真菌进行分离,利用TLC和HPLC检测其代谢产物中的鬼臼毒素类成分,检测波长254 nm,流动相乙腈-水(40∶60)。采用形态学和分子生物学相结合的方法对产鬼臼毒素类成分的内生真菌进行鉴定。结果:共分离得到9株内生真菌,其中菌株J-1,J-2,J-3的发酵液中含有鬼臼毒素类成分,分别鉴定为Chaetomium globosum strain MF564,C.sp.4RF3和Pseudallescheria sp.T55。结论:从桃儿七茎中分离到3株产鬼臼毒素类成分的内生真菌,分别来源于2个新属的不同种菌株,为开发新绿色生物能源和实现内生真菌工业发酵生产鬼臼毒素类成分奠定了理论基础。     

薯蓣皂苷水解微生物的筛选

目的:筛选可水解薯蓣皂苷的微生物。方法:从盾叶薯蓣根茎表面、根际土壤、叶片及根茎内筛选可降解薯蓣皂苷得皂苷元的菌株,薯蓣皂苷元采用薄层层析和高效液相色谱法鉴定。结果:筛选得到水解薯蓣皂苷的微生物,经鉴定分别属于曲霉属和交链孢属,并对其中一株菌的产酶特性和发酵工艺进行了初步研究。结论:筛选菌株分泌的薯蓣皂苷水解酶,可水解薯蓣皂苷得到皂苷元。     

4种重楼不同部位薯蓣皂苷及皂苷元含量的分析

目的评价不同种重楼不同组织部位的药用价值。方法分别提取七叶一枝花、球药隔重楼、狭叶重楼和华重楼的地下根茎、地上茎、叶、种子、果皮和外种皮的薯蓣皂苷及皂苷元,采用HPLC法检测其含量。结果七叶一枝花地下根茎的薯蓣皂苷及皂苷元含量均高于其他组织部位,分别为12.42 mg/g、13.78mg/g;华重楼的地下根茎含有较高的薯蓣皂苷元,为8.91mg/g;七叶一枝花的外种皮和华重楼的叶片中薯蓣皂苷含量较高,分别为:5.24mg/g、7.11mg/g;七叶一枝花果皮与华重楼叶片中薯蓣皂苷元含量较高,分别为11.35mg/g、10.35mg/g;七叶一枝花整个植株的薯蓣皂苷及皂苷元总含量最高,为50.79mg/g。结论不同种重楼不同组织部位的药用成分含量相差较大,其中七叶一枝花地下根茎薯蓣皂苷及皂苷元总含量高于其它组织部位,具有最高的药用价值;七叶一枝花整株薯蓣皂苷及皂苷元总含量高于其他品种,为较好的重楼种植品种。     

RP-HPLC法测定黄山药和穿龙薯蓣中薯蓣皂苷的含量

采用RP-HPLC法测定薯蓣属植物黄山药、穿龙薯蓣中薯蓣皂苷的含量.色谱柱为XterraTMODS(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-水(55: 45,v/v)为流动相,流速1.0 ml/min,柱温为35℃,检测波长为203 nm.结果表明,薯蓣皂苷可与其他主要成分分离,线性范围为2.0～16.0 μg(r=0.9999);样品平均回收率为100.4%,RSD=1.7%(n=9).并应用本方法测定了全国10个地区22个批次的黄山药、穿龙薯蓣中薯蓣皂苷的含量.     

基于指纹图谱和多成分含量测定的穿山龙药材质量评价研究

穿山龙为薯蓣科植物穿龙薯蓣Dioscorea nipponica的干燥根茎。根据生长栽培方式的不同,穿山龙药材可分为野生品和栽培品2种。该文采用高效液相色谱串联蒸发光散射检测器法对12批穿山龙野生品和10批穿山龙栽培品中甾体皂苷类成分进行了分析,建立了穿山龙药材的化学指纹图谱,共标定6个共有峰,穿山龙样品相似度均在0.950以上,所建立的穿山龙化学指纹图谱专属性良好,可用于穿山龙药材的质量评价。在此基础上,对穿山龙野生品和栽培品中的原薯蓣皂苷、原纤细薯蓣皂苷、甲基薯蓣皂苷、伪原薯蓣皂苷、薯蓣皂苷、纤细薯蓣皂苷6种甾体皂苷类成分进行了含量测定,进一步结合主成分分析和偏最小二乘法判别分析等化学计量学方法对穿山龙野生品和栽培品进行区分与比较。结果表明穿山龙野生品和栽培品所含甾体皂苷类成分种类无差异,而各甾体皂苷成分含量有明显差异,其中原薯蓣皂苷和原纤细薯蓣皂苷是二者的差异化合物,可作为鉴别和区分穿山龙野生品和栽培品的指标。通过以上研究,为穿山龙药材的质量控制、野生品和栽培品的鉴别与区分提供了分析方法和数据支撑。