药用植物内生真菌的分离及其次生代谢产物的生物活性研究

目的：从4种植物的内生真菌中筛选对单胺氧化酶及乙酰胆碱酯酶具有抑制活性的提取物。方法：用组织块法分离4种植物中的内生真茵;对分离出的纯内生真菌用液体培养基发酵培养,用等体积乙酸乙酯萃取发酵液并用乙醇对茵丝体进行回流提取,得到各组分提取物;用酶标法测定提取物的单胺氧化酶及乙酰胆碱酯酶抑制活性。结果：共分离出36株内生真菌,其中有16种内生真菌提取物有不同程度的抑制单胺氧化酶活性,其中GT-7茵液萃取物抑酶活性最强。2种内生真菌提取物有乙酰胆碱酯酶抑制活性。结论：药用植物中存在丰富的内生真菌,其代谢产物具有一定的单胺氧化酶及乙酰胆碱酯酶抑制活性,可作为筛选单胺氧化酶及乙酰胆碱酯酶抑制剂的新资源。     

麻口皮子药内生真菌及其次生代谢产物的研究

目的研究麻口皮子药内生真菌及其次生代谢产物。方法采用组织切块培养法和划线分离法培养分离麻口皮子药中内生真菌,并通过形态和分子鉴定的方法鉴定菌种。内生真菌的发酵物采用硅胶柱、Sephadex LH-20凝胶柱进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到7个化合物,分别鉴定为3,4-二羟基苯甲酸甲酯(1)、3,4-二甲氧基苯乙醇(2)、(2E)-(2R)-2,3-dihydroxypropyl-3-(4-methoxy-2-oxo-2H-pyran-6-yl)-2-butenoic acid ester(3)、对羟基苯乙醇(4)、(6S)-6-[(1S)-1-羟基戊基]-4-甲氧基-5,6-二氢吡喃-2-酮(5)、β-谷甾醇(6)、豆甾-4-烯-3-酮(7)。结论所有化合物均为首次从该内生真菌中分离得到。     

药用植物内生真菌的分离及其次生代谢产物抗乙酰胆碱酯酶活性研究

目的:从4种植物的内生真菌中筛选对乙酰胆碱酯酶具有抑制活性的提取物。方法:用组织块法分离4种植物中的内生真菌;对分离出的纯内生菌用液体培养基发酵培养,用等体积乙酸乙酯和水饱和正丁醇萃取发酵液并用乙醇对菌丝体进行索氏提取,得到各组分提取物;用改良的Ellman法测定提取物的乙酰胆碱酯酶抑制活性。结果:共分离出53株内生真菌,其中有7种内生真菌萃取物有不同程度的抑制乙酰胆碱酯酶活性,其中以XX-10的正丁醇组份的抑酶活性最强。结论:药用植物中存在丰富的内生真菌,其代谢产物具有一定的抗乙酰胆碱酯酶活性,可作为筛选乙酰胆碱酯酶抑制剂的新资源。     

青钱柳内生真菌次生代谢产物抗氧化活性研究

目的:分析广西产濒危药用植物青钱柳内生真菌次生代谢产物的抗氧化活性,筛选具有抗氧化活性较强的内生真菌菌株。方法:以课题组前期已分离培养的131株青钱柳内生真菌的发酵粗提取物为研究对象,对发酵产物的DPPH·、·OH~-、 O_2~-·、 NO_2~-能力和Fe~(2+)螯合能力进行检测。结果:结果表明,青钱柳内生真菌表现出具有一定清除DPPH·、·OH~-、 O_2~-·、 NO_2~-能力和Fe~(2+)螯合能力,对DPPH·、·OH~-、 O2~-·、 NO_2~-最大清除率和对Fe~(2+)最大螯合率分别为81.32%、 87.83%、 49.7%、 43.5%、 82.24%;菌株824F、 894F、 907F、 885F、 890F、 876F、 912F清除·OH~-自由基能力较强,清除率均大于阳性对照V_C。结论:结果表明青钱柳内生真菌代谢产物具有良好的抗氧化活性,可作为寻找新型天然抗氧化剂的潜在资源。     

黄连内生真菌炭角菌次生代谢产物研究

针对重庆道地药材黄连,进行内生真菌分离,获得一株炭角菌属真菌。通过大米固体发酵,利用硅胶、MCI、HPLC半制备等色谱分离方法进行分离纯化,运用MS、NMR、IR、UV、ECD等方法进行结构确证。共分离鉴定了5个化合物,分别为lasobutone A(1)、lasobutone B(2)、guignardianone C(3)、guignardic acid(4)和4-hydroxy-17R-methylincisterol(5)。其中,化合物1和2为新化合物。活性测试表明,化合物2和4对脂多糖诱导的小鼠单核巨噬细胞释放一氧化氮具有一定抑制活性,其IC;分别为58.7、42.5μmol·L^-1;化合物5对结肠癌细胞HT-29具出显著的抑制活性,IC;为14.3μmol·L^-1。     

三尖杉内生真菌次生代谢产物的活性成分分析

目的:研究三尖杉内生真菌次生代谢产物的活性成分。方法:采用滤纸片扩散法和噻唑蓝比色法对三尖杉内生真菌CEP18发酵液的乙酸乙酯提取物进行抑菌和细胞毒活性测试,利用GC-MS分析活性成分。结果:三尖杉内生真菌次生代谢产物对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌及人早幼粒急性白血病细胞HL-60的生长抑制作用明显。乙酸乙酯提取物中组分Fr2活性最强,主要成分为乳酸丁酯(2.96%),2-氯杀鼠灵酮(8.65%),(Z)-11-二十烯酰胺(13.90%),1-甲基芘(3.51%)及丁二酸二甲酯(6.34%)、对羟基苯乙酸(8.27%)、反油酸甲酯(10.07%)、亚油酸(5.60%)、棕榈酸(7.54%)。结论:对羟基苯乙酸在三尖杉属植物的相关研究中属首次报道,为微生物药物的研发和三尖杉的资源利用提供参考。     

高等真菌次生代谢产物及其生物活性

对本研究组近年来进行的高等真菌化学成分及生物活性研究情况进行了综述，从地花菌Albatrellus con-fluens中分离鉴定出一个具有VR1受体拮抗作用（IC505μmol/L）结构新颖的化合物（1）；从大红菇Russula lepida中分离鉴定出新的抗真菌，farnesy1转移酶抑制活性的萜类化合物（2-8）；从干巴菌中鉴定出不寻常的多苯乙酰化联三苯类化合物（9-15）。从块菌Tuber indicum和Russula cyanoxantha,Polyporus ellisii中发现系列活性鞘脂（16-21），同时在肉球菌Engleromyces gotzii和金耳Tremella aurantilba中发现结构奇特的化合物（22，25），从硫磺菌Laetiporus sulphureus中鉴定出引起视幻觉活性化合物（26，27）。     

一株毛壳属内生真菌次生代谢产物研究

目的研究一株毛壳属内生真菌Chaetomium sp.的次生代谢产物。方法采用硅胶、凝胶和半制备等多种色谱方法进行分离纯化,根据波谱学数据鉴定化合物结构。结果从发酵提取物中共分离得到10个化合物,分别鉴定为chetoseminudin B(1)、gonytolide C(2)、chaetone D(3)、1H-indole-3-carbaldehyde(4)、1H-吲哚-3-羧酸(5)、indole-3-methylethanoate(6)、3R*,4R*-二羟基-3-甲基戊烷-2-酮(7)、大黄素(8)、3β,5α,9α-trihydroxy-(22E,24R)-ergosta-7,22-dien-6-one(9)、(3β,5α,6β,22E)-6-methoxyergosta-7,22-diene-3,5-diol(10)。结论化合物1~10均为首次从该菌种中分离得到。     

娃儿藤内生真菌Diaporthe sp.次生代谢产物研究

通过硅胶柱色谱、中压ODS柱色谱和反相HPLC等多种色谱分离方法,从娃儿藤内生真菌Diaporthe sp.乙酸乙酯提取物中分离得到7个化合物,分别鉴定为(2S,3S)-2,3-dihydroxybutyl 2-hydroxy-3,5,6-trimethylbenzoate(1),xylariphthalide A(2),convolvulol(3),cis-4-hydroxy-6-deoxytalone(4),phomoxydienes B(5),5,6-dihydroxy-2,3,6-trimethylcyclohex-2-enone(6),trans-cyclo-(D-tryptophanyl-L-tyrosyl)(7)。其中化合物1为新化合物,其结构由NMR、质谱、ECD数据确定。化合物1具有抑制人肺成纤维细胞MRC-5活化的药理作用,抑制率为64.0%(10μmol·L-1)。MTT实验结果表明化合物2和4对人胃癌细胞BGC-823具有选择性抑制作用,IC50分别为1.5,8.6μmol·L-1。     

当归内生真菌分离及其次级代谢产物活性评价

目的 分离当归内生真菌并对其次级代谢产物进行生物活性评价。方法 以当归及其根际土壤为材料,选用6种培养基采用组织匀浆法分离内生菌,采用96孔板法测定次级代谢物的抑菌活性,紫外分光光度法评价4种酶抑制活性。结果 从当归的根、茎、叶及土壤中共分离纯化得到153株真菌,对腺苷脱氨酶、β-内酰胺酶、黄嘌呤氧化酶和酪氨酸酶有一定抑制活性样品分别为45.83%、52.78%、51.39%、55.56%;对4种指示菌有广谱抑制作用样品为1.39%,菌株6B对大肠埃希菌ATCC25922、ATCC35218的最低抑菌浓度为62.5、7.81μg/mL。结论 当归内生真菌资源丰富,是活性化合物发现的良好来源,具有一定研究价值。     

植物一内生真菌次生代谢产物的研究(Ⅱ)

目的 :对一种对植物生长有明显促进作用的头孢霉属真菌的发酵菌丝体化学成分进行研究。方法 :柱色谱分离 ,现代物理和光谱分析鉴定结构。结果 :分离鉴定了 3-异丙基-6-异丁基-2 ,5-哌嗪二酮 (Ⅰ) ,硫酸胆碱(Ⅱ) ,鞘安醇 (Ⅲ)等 11个化合物。结论 :Ⅰ ,Ⅱ为首次从头孢霉属真菌中分离得到。     

植物一内生真菌次生代谢产物的研究(Ⅰ)

我们从野生兰科植物金钗石斛Dendrobium nobile Lindl. 的根中分得数 百种植物内生真菌,其中一种经培养鉴定为头孢霉属Cephalosporium Cos t. 真菌,发现它对植物有促生作用,进一步的药理初筛还显示具有心血管方面的活性。为 了阐明其生物及生理活性的物质基础,我们对其次生代谢产物进行了较系统的研究。该内生真菌经液体摇瓶发酵后,经过滤分成发酵液和菌丝体两部分。发酵液丁醇萃取部分经 柱层析分得5 个单体化合物,经光谱(EIMS,1H、13CNMR,IR)分析 和 物理方法鉴定为正丁基βD吡喃果糖苷(nbutyl βDfructopyranoside, Ⅰ),…     

怀山药内生真菌厚孢镰刀菌的次生代谢产物研究

目的研究怀山药内生真菌厚孢镰刀菌Fusarium chlamydosporum的次生代谢产物。方法利用硅胶、凝胶等色谱技术进行分离纯化,通过波谱技术分析鉴定化合物结构。结果从厚孢镰刀菌的甲醇提取物中分离得到8个化合物,分别鉴定为过氧麦角甾醇(1)、麦角甾-4,22-二烯-3-酮(2)、邻苯二甲酸二丁酯(3)、邻苯二甲酸二异丁酯(4)、烟酸(5)、琥珀酸(6)、戊二酸(7)和Nb-乙酰基色胺(8)。结论所有化合物均为厚孢镰刀菌中首次分离得到。     

植物—内生真菌次生代谢产物的研究（Ⅰ）

我们从野生兰科植物金钗石斛Dendrobium nobile Lindl．的根中分得数百种植物内生真菌,其中一种经培养鉴定为头孢霉属Cephalosporium Cost.真菌,发现它对植物有促生作用,进一步的药理初筛还显示具有心血管方面的活性。为了阐明其生物及生理活性的物质基础,我们对其次生代谢产物进行了较系统的研究。     

裙带菜内生真菌Guignardia sp．的活性次生代谢产物

目的：对裙带菜内生真菌Guignardia sp．发酵液的乙酸乙酯萃取物进行分离纯化,寻找具有新和,或强生物活性的化合物。方法：采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析和ODS反相柱层析等色谱方法进行成份的分离纯化,并利用波谱学技术对化合物进行结构鉴定。采用纸片法和MTT法分别评价化合物的抑菌活性和细胞毒活性。结果：从发酵液中分离获得7个化合物,分别鉴定为过氧麦角甾醇（1）、麦角甾醇（2）、环-（酪氨酸-亮氨酸）（3）、环-（苯丙氨酸一苯丙氨酸）（4）、环-（缬氨酸-亮氨酸）（5）、环-（苯丙氨酸-脯氨酸）（6）、环-（亮氨酸-异亮氨酸）（7）。其中化合物1,2,3和6能抑制犬小孢子生长,其MIC分别为10．0,20．0,50．0和5．0μg·mL-1;化合物1,2和6对红发毛癣菌有抑制活性,其MIC分别为15．0,20．0和10．0μg·mL-1并且1和6有抑制絮状表皮癣菌的活性,其MIC分别为20．0和50．0μg·mL-1。另外,化合物1,3和6对人鼻咽癌KB细胞有抑制活性,其Ic50分别为20．0,10．0和10．0μg·mL-1。结论：化合物1—7均首次从裙带内生菌Guignardia sp．中分离得到,并且化合物1和6显示出较好的细胞毒和抗菌活性。     

白屈菜内生真菌的分离鉴定及其代谢产物的抗真菌活性研究

为寻找新型抗真菌活性物质的来源,该研究采用常规真菌分离方法,从药用植物白屈菜的根、茎及叶中共分离得到11株可培养的内生真菌,结合分子生物学与形态学鉴定了其中10株,其中刺盘孢属Colletotrichum 7株(L1,L2,L3,S1,S3,S4,S5),镰刀菌属Fusarium 3株(R1,R2,R3)。抗真菌活性测试结果表明,所有菌株代谢产物对5种常见植物病原菌(苹果炭疽菌、玉米弯孢菌、水稻稻瘟菌、烟草赤星菌和白菜黑斑菌)均表现出一定程度的抗菌活性,部分测试项目抑制率超过60%,其中菌株R1,S2,S3,S4的活性相对较高。该研究丰富了对白屈菜内生菌的认识,同时为新型微生物源抗菌物质的深入研究奠定了基础。     

海南粗榧内生真菌S26中次生代谢产物的研究

 目的对海南粗榧内生真菌S26发酵液的化学成分进行研究。方法用多种柱色谱技术对化合物进行分离纯化,用波谱技术和理化性质鉴定化合物的结构,采用MTT法测定化合物的抗肿瘤活性。结果从海南粗榧内生真菌S26的发酵液中分离得到1个环二肽和1个脂肪酸,分别鉴定为(3R,12aS)-3-methyl-2,3,6,7,12,12a-hexahydro-pyrazino[1,2-b]β-carboline-1,4-dione(1)和棕榈酸(2)。结论化合物1是首次分到的天然产物,化合物2在体外对胃癌细胞SGC-7901具有一定的抑制活性。     

头孢霉属真菌次生代谢产物研究进展

头孢霉(Cephalosporium Corda)系半知菌类(Fungi Imperfecti)，丛梗孢目(Moniliales)，丛梗孢科(Moniliaceae)中的一属真菌。头孢霉属真菌中的某些种，可产生具有抗革兰阳性和阴性细菌及抗癌活性的次生代谢产物，如产黄头孢霉、顶头孢霉等真菌可产生头孢菌素C。因此，对该属真菌次生代谢产物的研究，是国内外学者们的重要研究课题。     

药用植物内生真菌及其代谢产物活性的研究概况

近年来,药用植物内生真菌及其次生代谢产物活性成分在多个领域的研究应用已经成为热点,尤其在医药行业显示出独特优势。药用植物内生真菌分布广泛,普遍存在于自然界各生物类群中,就药用植物内生真菌及其次生代谢产物的活性研究做一系统阐述。     

恒山黄芪内生真菌Rhizopus sp.次生代谢产物的分离和鉴定

目的:研究恒山黄芪内生真菌Rhizopus sp.的次生代谢产物的类别。方法:通过组织学的方法从恒山黄芪中分离到AR02,真菌的鉴定采用形态学法结合分子生物学法,内生真菌大量发酵采用固体培养的方法,次生代谢产物的分离采用硅胶柱色谱法,Sephadex LH-20凝胶色谱法结合HPLC进行分离纯化,分离到的代谢产物的化学结构通过理化分析测定结合光谱分析进行鉴定。结果:从黄芪根部分离到的内生真菌AR02被鉴定为根霉属Rhizopus sp.,从该菌株的固体发酵产物中分离得到7个化合物,经结构鉴定,分别为色胺酮(1),lawsaritol A(2),曲菌酸(3),trypacidin(4),monomethylsulochrin(5),emodin 8-Omethylether(6)和cannabifolactone A(7)。结论:化合物1~3,6和7均为首次从恒山黄芪内生真菌中分离得到,且黄芪内生真菌Rhizopus sp.的次生代谢产物呈现出多个类别,可以作为活性物质的新来源。