肾康注射液对肾小球系膜细胞增殖的影响

为了探讨中药肾康注射液（ＳＫ）对肾小球系膜细胞增殖的影响,笔者采用人的肾小球系膜细胞进行体外培养,用氚标记的胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法观察其增殖情况。结果：不同肾康注射液剂量组＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率无明显低于对照组,提示肾康注射液可明显抑制人肾小球系膜细胞增殖。     

肾康注射液对脂多糖诱导肾小球系膜细胞增殖的影响

目的：探讨中药肾康注射液（SK）对脂多糖（LPS）诱导肾小球系膜细胞增殖的影响。方法：采用人肾小球系膜细胞进行体外培养,用氚标记的胸腺嘧啶核苷（^3H-TdR)掺入法观察其增殖情况。结果：不同肾康注射液剂量组^3H-TdR掺入率均明显低于对照组。结论：肾康注射液可明显抑制脂多糖诱导的人肾小球系膜细胞增殖。     

大黄素对大鼠肾小球系膜细胞增殖及IL-6的影响

目的:观察大黄素对大鼠肾小球系膜细胞增殖及系膜细胞分泌IL-6的影响。方法:应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定系膜细胞的增殖及ELISA法检测系膜细胞中IL-6的含量,观察大黄素对其的影响。结果:大黄素可明显抑制大鼠系膜细胞的增殖及降低系膜细胞对IL-6的分泌,与模型组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:提示大黄素可明显抑制肾小球系膜细胞增生,减少细胞外基质的生成,从而减轻与延缓肾小球硬化,其机制可能与减少肾小球系膜细胞分泌IL-6有关。     

复方中药糖耐康对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

目的 探讨复方中药糖耐康对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞(mesangial cells,MCs)增殖的抑制作用.方法 以30mM葡萄糖刺激体外培养的大鼠MCs增殖,加入不同浓度的中药糖耐康,采用MTT比色法分别观察24 h、48 h、72 h系膜细胞的增殖情况.结果 高浓度葡萄糖(30mM)对系膜细胞的增殖效应最佳时点为24 h前后,在72 h时增殖作用不明显.中药糖耐康有抑制高糖所致的MCs增殖的作用.结论 高糖在一定时段内有刺激大鼠系膜细胞增殖的效应,一定浓度的中药糖耐康对高糖所致MCs增殖具有抑制作用.     

复方中药糖耐康对高糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

目的探讨复方中药糖耐康对高糖环境下大鼠肾小球系膜细胞（mesangial cells，MCs）增殖的抑制作用。方法以30mM葡萄糖刺激体外培养的大鼠MCs增殖，加入不同浓度的中药糖耐康，采用MTT比色法分别观察24h、48h、72h系膜细胞的增殖情况。结果高浓度葡萄糖（30mM）对系膜细胞的增殖效应最佳时点为24h前后，在72h时增殖作用不明显。中药糖耐康有抑制高糖所致的MCs增殖的作用。结论高糖在一定时段内有刺激大鼠系膜细胞增殖的效应，一定浓度的中药糖耐康对高糖所致MCs增殖具有抑制作用。     

肾康注射液对肾小球系膜细胞产生IL-1的影响

目的：探讨中药肾康注射液(SK)对肾小球系膜细胞产生IL-1的影响。方法：以腊多糖(LPS)刺激肾小球系膜细胞产生IL-1，采用胸腺细胞增殖法测定IL-1活性，以。H-TdR掺入法测定胸腺细胞的增殖。结果：不同肾康注射液剂量组的IL-1水平均明显低于LPS对照组。结论：肾康注射液可抑制系膜细胞产生IL-1，该抑制作用具有一定的量效关系，其最佳抑制浓度为25μg/ml。     

肾康注射液对常规培养体系中肾小球系膜细胞增殖的影响

目的：探讨中药肾康注射液(SK)对肾小球系膜细胞增殖的影响。方法：采用人的肾小球系膜细胞进行体外培养,用氚标记的胸腺嘧啶核苷(^3H-TdR)掺入法观察其增殖情况。结果：不同肾康注射液剂量组H-TdR掺入率均明显低于对照组。结论：肾康注射液可明显抑制人肾小球系膜细胞增殖。肾康注射液业师叶传惠教授依据中医理论．结合现代中药药理研究成果而研制的中药复方静脉制剂,具有益气活血、降逆泻浊的功效。我们以往的临床与实验研究表明,该药治疗慢性肾功能衰竭的总有效率达81．7％。本研究采用体外培养的huMC进行研究,观察其对常规培养体系中huMC增殖的影响。     

糖肾汤对大鼠肾小球系膜细胞表达基质金属蛋白酶的影响

目的：观察糖肾汤对高糖培养下肾小球系膜细胞表达基质金属蛋白酶(MMP2)、3mRNA的作用。方法：用糖肾汤含药血清作用于体外高糖培养的肾小球系膜细胞体系，采用逆转录-多聚合酶链反应(RT-PCR)法测定MMP2、MMP3mRNA表达。结果：高糖刺激后MMP2mRNA表达明显下降，经糖肾汤干预后有不同程度的上升，而高糖和糖肾汤均对MMP3mRNA无影响。     

虫草肾茶胶囊对肾小球系膜细胞增殖的影响

目的：研究虫草肾茶胶囊对体外高糖环境下系膜细胞（HMC）增殖的影响,探讨其在糖尿病肾病（DN）防治中的意义。方法：将常规培养的人肾小球系膜细胞分为正常对照组、高糖组、虫草肾茶胶囊高、中、低剂量组及福辛普利组,分别于相应处理后24h,48h和72h收集细胞,用4-甲偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖。结果：高糖有刺激HMC增殖的效应,48h上增殖最明显,而在72h时呈下降趋势。虫草肾茶胶囊及福辛普利两种药物血清对高糖刺激下的系膜细胞增殖有明显的抑制作用,其中虫草肾茶胶囊血清对HMC的抑制作用优于福辛普利血清。且随着虫草肾茶胶囊浓度、作用时间的增加作用更明显,呈一定的时间、剂量依赖性关系。结论：高糖可促进HMC增殖,虫草肾茶胶囊能明显抑制高糖条件下HMC增殖,从而发挥预防肾小球纤维化及硬化的发生、发展,进而延缓DN的进展。     

芪药消渴胶囊对高糖诱导肾小球系膜细胞增殖的抑制作用

目的观察芪药消渴胶囊对高糖诱导肾小球系膜细胞(GMCs)增殖的抑制作用。方法通过GMCs体外培养技术,采用含药血清药理学的方法,制备不同浓度芪药消渴胶囊的含药血清,筛选最佳葡萄糖浓度,在葡萄糖的诱导下,通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测并观察不同时间、不同浓度下GMCs增殖情况。结果在不同时间点,空白组细胞生长最为缓慢。与空白组比较,在相同培养条件下,0.4 g/L葡萄糖组及0.5 g/L葡萄糖组在48 h、72 h对GMCs增殖有刺激作用(P<0.05,P<0.01),0.6 g/L葡萄糖组0.7 g/L葡萄糖组、0.8 g/L葡萄糖组在24 h、48 h、72 h对GMCs增殖有明显刺激作用(P<0.05,P<0.01),其中0.6 g/L葡萄糖组在48 h、72 h对GMCs增殖刺激作用较强(P<0.01)。提示0.6 g/L葡萄糖为GMCs增殖的最佳刺激浓度。与空白对照组比较,高糖组细胞生长迅速(P<0.05,P<0.01);与高糖组比较,芪药消渴胶囊含药血清各组细胞在48 h、72 h生长缓慢(P<0.05),提示芪药消渴胶囊对高糖诱导的GMCs增殖的抑制作用。结论芪药消渴胶囊具有抑制GMCs增殖作用。     

Inhibition of Qiyaoxiaoke capsule on the glomerular mesangial cell proliferation induced by high glucose

目的 观察芪药消渴胶囊对高糖诱导肾小球系膜细胞(GMCs)增殖的抑制作用.方法 通过GMCs体外培养技术,采用含药血清药理学的方法,制备不同浓度芪药消渴胶囊的含药血清,筛选最佳葡萄糖浓度,在葡萄糖的诱导下,通过四甲基偶氮唑蓝(M TT)比色法检测并观察不同时间、不同浓度下GMCs增殖情况.结果 在不同时间点,空白组细胞生长最为缓慢.与空白组比较,在相同培养条件下,0.4 g/L葡萄糖组及0.5 g/L葡萄糖组在48h、72h对GMCs增殖有刺激作用(P＜0.05,P＜0.01),0.6 g/L葡萄糖组0.7 g/L葡萄糖组、0.8 g/L葡萄糖组在24h、48h、72h对GMCs增殖有明显刺激作用(P＜0.05,P＜0.01),其中0.6 g/L萄萄糖组在48 h、72h对GMCs增殖刺激作用较强(P＜0.01).提示0.6 g/L葡萄糖为GMCs增殖的最佳刺激浓度.与空白对照组比较,高糖组细胞生长迅速(P＜0.05,P＜0.01);与高糖组比较,芪药消渴胶囊含药血清各组细胞在48 h、72 h生长缓慢(P＜0.05),提示芪药消渴胶囊对高糖诱导的GMC8增殖的抑制作用.结论 芪药消渴胶囊具有抑制GMCs增殖作用.     

藻黄合剂含药血清对高糖环境下人肾小球系膜细胞MCP-1表达的影响

目的:观察藻黄合剂(ZHM)对高糖环境下人肾小球系膜细胞(HMC)单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达的影响,探讨其在糖尿病肾脏疾病(DKD)防治中的意义。方法:体外培养HMC并鉴定,血清药理学方法制备ZHM低、中、高剂量组,空白对照组及海昆肾喜阳性对照组大鼠含药血清,10%各组含药血清培养基分别孵育高糖作用下HMC 48h,另设低糖组作为空白对照。ELISA法和RT-PCR技术分别检测各组系膜细胞MCP-1蛋白及mRNA表达情况。结果:MCP-1蛋白及mRNA表达量在高糖组较低糖组明显升高(P<0.01);ZHM中、高剂量组MCP-1蛋白及mRNA表达量均低于高糖组,且具有剂量依赖性;ZHM中、高剂量组与海昆肾喜组比MCP-1蛋白及mRNA表达差异无统计学意义。结论:高糖可诱导HMC中MCP-1表达,而ZHM可通过抑制高糖条件下HMC中MCP-1蛋白及mRNA表达,发挥对DKD的防治作用。     

二甲双胍抑制高糖状态下大鼠肾小球系膜细胞增殖作用机制的进一步研究

目的探讨二甲双胍抑制高糖状态下大鼠肾小球系膜细胞增殖的作用机制。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞(HBZY-1)分为2组,AICAR组分为正常对照(NC)组(葡萄糖浓度5.6 mmol/L)、高糖(HG)组(葡萄糖浓度30 mmol/L)、HG+AICAR组(葡萄糖浓度30 mmol/L+AICAR浓度2.0 mmol/L)、HG+AICAR+二甲双胍组(葡萄糖浓度30 mmol/L+AICAR浓度2.0 mmol/L+二甲双胍浓度200 mmol/L)4个亚组,Compound C组分为NC组、HG组、HG+Compound C组(葡萄糖浓度30 mmol/L+Compound C浓度0.5 mmol/L)、HG+Compound C+二甲双胍组(葡萄糖浓度30 mmol/L+Compound C浓度0.5 mmol/L+二甲双胍浓度200 mmol/L)4个亚组,作用时间均为24 h,MTT法检测各组HBZY-1细胞增殖的情况;如上分组,作用12 h,用Western blot法检测各组细胞内p-单磷酸腺苷激活的蛋白激酶(p-AMPK)和AMPK蛋白表达的变化。结果①与NC组相比,高糖刺激24 h后HBZY-1增殖明显(P均0.01);与HG组相比,加AICAR干预后HBZY-1增殖明显抑制,加Compound C干预后系膜细胞进一步增殖,均有显著性差异(P均0.01);与HG+AICAR组相比,加二甲双胍干预后HBZY-1增殖进一步抑制,有显著性差异(P0.01);与HG+Compound C组相比,加二甲双胍干预后HBZY-1增殖明显抑制,有显著性差异(P0.01);②与NC组相比,高糖刺激24 h后HBZY-1细胞内p-AMPK表达水平明显下降(P均0.01);与HG组相比,加AICAR干预后p-AMPK表达水平明显升高,加Compound C干预后p-AMPK表达水平进一步下降,均有显著性差异(P均0.01);与HG+AICAR组相比,加二甲双胍干预后HBZY-1细胞内p-AMPK表达水平进一步升高,有显著性差异(P0.01);与HG+Compound C组相比,加二甲双胍干预后p-AMPK表达水平明显升高,有显著性差异(P0.01)。结论二甲双胍可能通过增加肾小球系膜细胞内p-AMPK的表达水平来抑制HBZY-1的增殖。     

密蒙花方对高糖状态下视网膜Mtiller细胞增殖的影响

目的从离体细胞研究层面,研究中药密蒙花方对高糖状态下视网膜Mfiller细胞损伤的保护作用。方法（1）采用大鼠视网膜Mfiller细胞在30mmol／L高糖下进行体外培养,模拟高糖环境,再分别给予20％含密蒙花方血清（以下均称合药血清）干预12h,24h、36h,观察密蒙花方含药血清对大鼠视网膜Mtiller细胞增殖的影响。（2）采用流式细胞仪AnnexinV—FITC／PI双色染色法观察密蒙花方对高糖状态下视网膜Mtiller细胞凋亡的影响。结果（1）高糖组较正常组吸光度（OD）值增高;含药血清组与高糖组相比,0D值明显降低,各合药血清组间比较,随着时间的延长,OD值逐渐降低,差异具有统计学意义（P〈0．05）。（2）高糖组较正常组细胞早期凋亡比例减少,活细胞比例增高,各含药血清组与高糖组相比,细胞早期凋亡比例增高,活细胞比例减少（P〈0．05）。密蒙花方通过诱导早期高糖状态下视网膜Mtiller细胞的早期凋亡,抑制细胞反应性增生,从而起到防护高糖状态下视网膜神经细胞损伤的作用。结论密蒙花方可以抑制早期高糖状态下视网膜Mfiller细胞的增殖。     

Xiaokeping-containing serum suppresses high-glucose-induced proliferation of mesangial cells involved in the regulation of cell cycle progression and the p38 mitogen-activated protein kinase pathway

OBJECTIVE:To investigate the efficacy of Xia-okeping(XKP)-containing serum on the prolifera-tion of high-glucose-induced mesangial cells(MCs)and the potential u...     

Effects of Wen-Pi-Tang and its crude drug extracts on proliferation of cultured mouse mesangial cells

The efficacy of Wen-Pi-Tang and each of its crude drug extracts on the proliferation of mouse mesangial cells was determined in terms of [³H]thymidine uptake. When Wen-Pi-Tang was added to the medium of mesangial cell cultures, it suppressed the proliferation of mesangial cells markedly. Similar to the effects of Wen-Pi-Tang, Rhei Rhizoma, its main ingredient, exerted an inhibitory effect on mesangial cell proliferation at a relatively low concentration. Ginseng Radix and Aconiti Tuber were also an effective crude drug. As for Zingiberis Rhizoma, an inhibitory activity at relatively high concentration was noted. However, the proliferation of mesangial cells in the presence of Glycyrrhizae Radix showed no particular alteration. As is clear from the results of the present study, Rhei Rhizoma, Ginseng Radix, Aconiti Tuber and Zingiberis Rhizoma alone each exert an inhibitory effect. The inhibition of mesangial cell proliferation by Wen-Pi-Tang can thus be explained by the action of these crude drugs.     

Protective effects of rutin on rat glomerular mesangial cells cultured in high glucose conditions

The protective effect of rutin on the glomerulosclerosis of diabetic nephropathy (DN) in rat mesangial cells was investigated. The cultured mesangial cells were divided into eight groups: normal, solvent control, high glucose, low dose of rutin, moderate dose of rutin, high dose of rutin, captopril and Ginkgo biloba extract. The cell cycles, type IV collagen and laminin in cytoplasm, TGF‐β₁ mRNA of mesangial cells, Smad 2/3 and Smad 7, and the activities of four antioxidant indexes including T‐SOD, MDA, CAT and GSH‐Px were measured by flow cytometry, radioimmunoassay, RT‐PCR, western blotting and visible spectrophotometry, respectively. Compared with the high glucose group, rutin decreased the cell percentages of the G₀/G₁ phase and inhibited the expression of Smad 2/3, laminin and type IV collagen, and TGF‐β₁ mRNA level, significantly. The antioxidant capacity, the cell percentages of S phase and Smad 7 expression were significantly increased by rutin. These results suggest that rutin is a potent protective agent against glomerulosclerosis in DN. Copyright © 2011 John Wiley & Sons, Ltd.     

血竭素高氯酸盐抑制高糖诱导的人肾小球系膜细胞中SGK1和FN的表达

目的:观察血竭素高氯酸盐(dracorhodin perchlorate,DP)对高糖环境下培养的人肾小球系膜细胞(human me-sangial cells,HMC)中血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(serum and glucocorticoid induced protein kinase1,SGK1)和纤连蛋白(fibronectin,FN)的抑制作用,探讨其防治糖尿病肾病肾脏纤维化的作用与机制。方法:将体外培养的HMC分为正常糖组(NG,5.5mmol.L-1D-葡萄糖)、正常糖+DP低剂量组(NG+LDP,5.5mmol.L-1D-葡萄糖+7.5μmol.L-1DP)、正常糖+DP高剂量组(NG+HDP,5.5mmol.L-1D-葡萄糖+15μmol.L-1DP)、高糖组(HG,25mmol.L-1D-葡萄糖)、高糖+DP低剂量组(HG+LDP,25mmol.L-1D-葡萄糖+7.5μmol.L-1DP)、高糖+DP高剂量组(HG+HDP,25mmol.L-1D-葡萄糖+15μmol.L-1DP),作用24h后,采用real-time PCR法检测各组细胞中SGK1,FN mRNA的水平,并采用间接免疫荧光和Westernblot方法检测细胞中SGK1和FN蛋白的表达。结果:在正常糖组HMC中有基础量的SGK1,FN mRNA及蛋白的表达,经7.5μmol.L-1的DP作用24h后,SGK1和FN mRNA水平及蛋白与NG组相比无明显差异,但经15μmol.L-1的DP作用24h后,SGK1和FN mRNA水平及蛋白较NG组明显下降;与NG组相比较,HG组中HMC中的SGK1,FN mRNA及蛋白水平显著性增加(P0.01);与HG组相比较,HG+LDP组和HG+HDP组中,HMC的SGK1,FN的mRNA及蛋白水平显著性下降(P0.01)。结论:血竭素高氯酸盐抑制高糖诱导的人肾小球系膜细胞中SGK1和FN的表达,这可能是其防治DN肾纤维化作用的部分机制。