大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs株的耐药性与基因检测

目的研究深圳市人民医院2002年1月-2003年12月临床下呼吸道分离的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性、ESBLs基因型以及基因型和耐药表型的相关性。方法共收集临床下呼吸道分离产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌61株，采用酶抑制剂增强法作表型确证试验，琼脂稀释法作药敏试验，应用PCR、序列分析，确定ESBLs基因型。结果61株产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南的敏感率是100％，MIC50 0．5mg／L，两种细菌表现出不尽相同的耐药表型。共检出10种0内酰胺酶基因型，CTX-M型、SHV型和TEM型的检出率依次为83．6％、44．3％和37．7％，其中以CTXM14最多，共38株；SHV型仅见于肺炎克雷伯菌，SHV-12最常见，有20株；TEM型均为TEM-1。结论本院临床下呼吸道产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药情况严重，为多重耐药菌。ESBLs有7种基因型，CTX—M型是主要的基因型，其次是SHV型；两种菌中各基因型的分布不同，其耐药表型也不同。     

全国10所教学医院产ESBLs和质粒AmpC酶大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的研究

目的研究全国10所教学医院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中同时产ESBLs及质粒型AmpC酶菌株的比率及其基因型特点,比较不同地区间的差别。方法收集来自中国不同地区的10所教学医院2003年度产ESBLs的大肠埃希菌90株和肺炎克雷伯菌61株,用等电聚焦电泳测定β内酰胺酶的等电点;接合试验证实酶基因有无可转移性;采用多重聚合酶链反应(MPCR)及序列分析确定质粒AmpC酶的基因型。结果武汉、南京、济南等地产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌所占比率相近,均在50%左右;北京产ESBLs大肠埃希菌所占比率低于肺炎克雷伯菌;其他各城市产ESBLs大肠埃希菌所占比率均略高于肺炎克雷伯菌。在产ESBLs菌株中24.4%大肠埃希菌和19.4%肺炎克雷伯菌对头孢西丁耐药。除沈阳无对头孢西丁耐药菌株外,其他医院均存在对头孢西丁耐药株。产ESBLs菌株基因型主要为CTX—M型,其中以CTX-M-9组最为常见,其次为CTX-M-1组。在同时产ESBLs和AmpC的菌株中,肺炎克雷伯菌多于大肠埃希菌,且均为CTX-M/ DHA-1型(多为CTX-M-9/DHA-1型)。3株同时产ESBLs和AmpC肺炎克雷伯菌的接合子PCR结果与其供体菌完全相同。结论参与本研究的各所教学医院产ESBLs菌株基因型主要为CTX-M-9组,在同时产ESBLs和AmpC酶的菌株中,肺炎克雷伯菌多于大肠埃希菌,多为CTX-M-9/DHA-1型,该酶可通过质粒传播。     

产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌的基因型和耐药性分析

目的研究我院住院患儿分离产ESBLs大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的基因型及其相关耐药性分析。方法收集2004年10月-2005年10月我院住院患儿呼吸道分离产ESBLs大肠埃希菌75株，肺炎克雷伯菌45株，PCR限制性片段长度多态性（RFLP）分析及PCR产物克隆测序等方法明确ESBLs基因型，并结合体外抗生素敏感试验研究基因分型与细菌对不同头孢菌素及氨曲南的敏感性的关系。结果上述120株细菌中112株（93．3％）产CTX—M型p内酰胺酶；未能扩增出SHV型、TEM型ESBL基因。CTX—M型基因亚型主要为CTX—M9簇中的CTX—M-14型（78、6％），其次为CTX—M-1簇中的CTX—M-3型（19．6％），仅有1．8％为CTX—M-8型；携带CTX-M-1簇的菌株对头孢他啶、头孢哌酮-舒巴坦、阿莫西林-克拉维酸、头孢吡肟及氨曲南的耐药率均明显高于CTX—M-9型。结论CTX—M基因型为武汉地区儿童分离大肠埃希菌以及肺炎克雷伯菌中最常见的ESBLs，CTX—M-14为最常见基因型，其次为CTX—M-3型；CTX—M-9簇及CTX-M-1簇对头孢他啶、头孢吡肟、头孢哌酮-舒巴坦和氨曲南的水解能力差异明显。     

宿州市大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs的检测及基因型分布

目的探讨安徽省宿州市临床分离菌中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs的检出率、耐药性及基因型分布。方法采用2005年CLSI推荐方法对收集菌株进行ESBLs确证试验;平皿琼脂对倍稀释法测定产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对13种抗菌药物的耐药性;用PCR法对产ESBLs菌株使用8对引物进行B内酰胺酶基因的扩增,扩增产物回收纯化后测序。结果宿州市临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs株的检出率分别为64．7％和60．5％。ESBLs产生株对三代头孢菌素头孢曲松、头孢塞肟、头孢他啶的耐药率为41．9％～86．3%,对环丙沙星、左氧沙星的耐药率为48．4％～85．5％,对哌拉西林／他唑巴坦、头孢哌酮／舒巴坦的耐药率为4．2％～25．8％,对亚胺培南和美洛培南100．0％敏感。PCR及测序结果显示产ESBLs菌株中,β内酰胺酶基因型以TEM和CTX—M13型为主,分别为61株和55株;亚胺培南和美洛培南是治疗产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌感染的首选药物。结论宿州市临床分离大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs株的检出率和对头孢菌素类及喹诺酮类的耐药率均达到很高水平,应加强对产ESBLs株的临床监测。     

产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌儿童分离株的耐药性和基因型检测

目的 研究我院临床分离的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型与耐药表型的关系.方法 收集我院2007年1-3月临床分离的92株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,用K-B纸片法作药敏试验,酶抑制剂增强法表型确证,应用PCR、产物测序,确定ESBLs基因型.结果 我院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株的检出率分别为50.6%和57.3%;产ESBLs菌株对亚胺培南100%敏感,产ESBLs大肠埃希菌对头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟和环丙沙星的耐药率分别为88.2%、14.7%、5.9%和29.0%,产ESBLs肺炎克雷伯菌则分别为75.6%、35.6%、28.9%和5.2%.92株产ESBLs菌株中,共检出7种β内酰胺酶基因型,TEM型酶的检出率为70.7%,均为TEM-1广谱酶, CTX型、SHV型ESBLs的检出率分别为66.3%和44.6%,其中CTX-M-14阳性率为48.1%;SHV基因型都在肺炎克雷伯菌中检出.结论 我院临床分离产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药情况严重,且其耐药表型也不尽相同.CTX-M型是我院产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中流行的基因型.     

CTX-M型超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学研究

目的了解湖北地区产CTX—M型超广谱β内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的流行基因型，为有效预防和控制该类感染提供理论依据。方法临床分离的无重复产ESBLs的肺炎克雷伯菌70株，采用NCCLS表型筛选和确证试验检测ESBLs，采用聚合酶链反应（PCR）检测CTX—M基因型，并采用PCR—RFLP检测blaCTX—M基因分型，质粒接合试验探讨产CTX—M型ESBLs菌株的传播机制。结果70株产ESBLs的肺炎克雷伯菌中，产CTX—M基N型的肺炎克雷伯菌有26株（37％），PCR-RFLP及DNA测序证实其均为CTX—M-1亚组，其中CTX—M-3型最常见，质粒接合试验证实CTX—M型ESBLs介导的耐药可以水平转移。结论湖北地区存在着CTX—M基因的流行，且产CTX—M型ESBLs菌株的传播机制以质粒介导的为主，可以水平传播，应加强湖北地区产CTX—M型ESBLs菌株的分子流行病学检测。     

上海地区产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的实验和临床研究

目的：了解上海地区临床分离大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌中超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的发生率、流行情况、对抗菌药物的耐药性、产酶基因的转移特征以及感染类型和医院感染的临床特征。方法：用双纸片法和表型确证试验(MIC法)检测ESBLs产生株;Kirby-Bauer(KB)法测定细菌对抗菌药物的敏感性;接合转移试验检测产酶基因的可传播性;对上述细菌感染中部分患进行病史调查与分析。结果：肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中ESBl0产生株的发生率分别为39．4％、21．5％,ES—BLs产生株对于大多数β内酰胺类药物明显耐药,并对氨基糖苷类、氟喹诺酮类多数耐药,对亚胺培南则呈现敏感;ESBLs产生株可以通过接合转移将其产酶基因转移给敏感株,转移频率多在10^-3～10^-7,双纸片法和表型确证试验结果显示转移接合子具有与产ESBLs供体菌相同的耐药表型,质粒提取、聚合酶链反应(PCR)检测结果两亦相同;ESBLs产生株主要引起医院感染且患的转归较差。结论：肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌ESBLs产生株大多为多重耐药菌;ESBLs产生株可通过结合转移将产酶基因转移给敏感菌,导致耐药性传播;ESBLs产生株为引起医院感染的重要病原菌,治疗较困难,需要加强检测。     

武汉市儿童医院临床分离大肠埃希菌与肺炎克雷伯菌中产质粒介导AmpC酶和ESBLs的研究

目的研究武汉市儿童医院临床分离高产质粒AmpC酶和超超广谱β内酰胺酶（SSBL）肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌的分子流行病学特征。方法收集我院2005年8月-2006年8月住院患儿临床分离的头孢西丁中介或耐药的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌161株。采用三维试验检测AmpC酶，表型确认试验检测ESBLs，质粒转化试验定位耐药基因；采用PCR技术扩增质粒AmpC与CTX—M基因；使用限制性片段长度多态性（RFLP）技术确定CTX—M基因簇的特征；利用基因测序确定AmpC酶及CTX—M的基因亚型。结果DHA-1型和ACT-1型为主要的质粒AmpC酶基因型，发现1种新的ACT型质粒AmpC酶，其与ACT-1的同源性仅为84％。CTX—M-14型和CTX-M-3型为主要的ESBLs基因型。最常见的大肠埃希菌SSBL基因组合为CTX-M-14＋DHA-1＋ACT-1型，肺炎克雷伯菌的为CTX—M-3＋DHA-1＋ACT-1。结论我院临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中，产SSBL菌株所占比例显著高于单产质粒AmpC酶菌株；CTXM-14／CTX—M-3＋DHA-1＋ACT-1是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中最常见的SSBL基因型。     

CTX—M型超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌的分子流行病学研究

目的了解湖北地区产CTX—M型超广谱β内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌的流行基因型，为有效预防和控制该类感染提供理论依据。方法临床分离的无重复产ESBLs的肺炎克雷伯菌70株，采用NCCLS表型筛选和确证试验检测ESBLs，采用聚合酶链反应（PCR）检测CTX—M基因型，并采用PCR—RFLP检测blaCTX—M基因分型，质粒接合试验探讨产CTX—M型ESBLs菌株的传播机制。结果70株产ESBLs的肺炎克雷伯菌中，产CTX—M基N型的肺炎克雷伯菌有26株（37％），PCR-RFLP及DNA测序证实其均为CTX—M-1亚组，其中CTX—M-3型最常见，质粒接合试验证实CTX—M型ESBLs介导的耐药可以水平转移。结论湖北地区存在着CTX—M基因的流行，且产CTX—M型ESBLs菌株的传播机制以质粒介导的为主，可以水平传播，应加强湖北地区产CTX—M型ESBLs菌株的分子流行病学检测。     

产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的药敏分析及其CTX-M基因型的研究

[目的]通过对产ESBLs大肠埃希菌和克雷伯菌的表型、基因型检测和耐药性分析，了解产ESBLs的大肠埃希菌和克雷伯菌的基因分布及耐药特性，为临床抗感染治疗提供有力证据。[方法]用NCCLS推荐的纸片确认试验检测产ESBLs大肠埃希菌和克雷伯菌，用PCR方法对ESBLs阳性菌进行CTX-M基因型检测；用K-B法对其进行药物敏感性试验，并进行耐药性分析。[结果]产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌大部分同时以CTX和CAZ为底物，单用CAZ-CAZ／CLA作底物会造成30．3％的漏检。ESBLs阳性菌对头孢菌素及广谱青霉素的耐药率高，对亚胺培南则均为敏感。对其基因型分析显示CTX-M型在肺炎克雷伯菌中占71．4％，而大肠埃希菌仅为15．8％。[结论]ESBLs是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢菌素产生耐药的主要原因，ESBLs菌耐药性强且多重耐药，ESBLs表型检测应同时选择2种以上底物，CTX-M基因型检出率为39．4％。     

运用多重PCR技术检测CTX-M型耐药基因的研究

目的了解产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肠杆菌科细菌的阳性率、耐药性以及基因型分布。方法采用K-B琼脂扩散法,检测临床分离的85株大肠埃希菌和41株肺炎克雷伯菌对18种抗生素的耐药性,用双纸片增效试验检测产ES-BLs菌株,用多重PCR技术检测相关耐药基因,用DNA序列分析确认基因亚型。结果检测菌株中,ESBLs阳性56株,阳性率为44.4%。所有检测菌株对亚胺培南敏感。产ESBLs的菌株对头孢唑啉、头孢噻肟、头孢曲松、头孢哌酮、头孢他啶等的耐药率为100.0%;质粒接合试验证实,CTX-M型ESBLs介导的耐药可以水平转移;ESBLs阳性菌株中有48株扩增到CTX M型耐药基因,其中CTX-M-3型11株,CTX-M-9型7株,CTX-M-14型25株。结论产CTX-M型ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率较高,以CTX-M-14型为多。碳青霉烯类抗生素是目前治疗产ESBLs最有效药物。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒AmpC酶基因型及流行病学分析

目的研究大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产质粒型AmpC酶株的比率、酶的基因型及其流行病学状况。方法收集本院、福建省立医院两家医院2004年9月至2005年3月的67株耐头孢西丁不重复大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌，用酶提取物三维试验检测高产AmpC酶；抽提高产AmpC酶株质粒，用PCR及产物序列分析确定质粒AmpC酶和13内酰胺酶的基因型；质粒转化试验定位耐药基因；ERIC-PCR指纹图确定产酶株间的同源关系。结果福州两家医院耐头孢西丁菌中产质粒型AmpC酶的发生率，大肠埃希菌分别为16．7％和10．5％，肺炎克雷伯菌则分别为8．0％和0。2株肺炎克雷伯菌产DHA-1型、4株大肠埃希菌产CMY-2型、1株大肠埃希菌产CMY-22型质粒AmpC酶；5株产CMY型AmpC酶的大肠埃希菌还分别同时产CTX—M-14、CTX—M-27、TEM-144和TEM-1型13内酰胺酶。7株菌中，1株肺炎克雷伯菌和3株大肠埃希菌可将头孢西丁耐药性转移给受体菌。7株产酶菌ERIC—PCR指纹图显示，2株肺炎克雷伯菌来自相同克隆，其余菌株来自不同克隆。结论福州地区发现产DHA-1型AmpC酶肺炎克雷伯菌和产CMY-2型及CMY-22型AmpC酶大肠埃希菌。CMY-22型AmpC酶和TEM-144型13内酰胺酶是国内外首次报道，GenBank登录号为DQ256079和DQ2560S0。     

大肠埃希菌和克雷伯菌临床分离株中整合子介导的多重耐药性的相关性分析Ⅰ

目的研究整合子介导的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的多重耐药性。方法采用聚合酶链反应（PCR）对临床分离的135株大肠埃希菌和59株克雷伯菌进行Ⅰ型和Ⅱ型整合酶基因的检测。结果在135株大肠埃希菌和59株克雷伯菌中，大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）率为50．4％，克雷伯菌产ESBLs率为37.3％，共检出105株细菌携带Ⅰ类整合酶基因，72株为大肠埃希菌，占53.33％（72／135），33株肺炎克雷伯菌，占55.93％（33／59）；其中携带Ⅱ类整合酶基因3株，全部为大肠埃希菌，此3株同时携带Ⅰ类整合酶基因并产ESBLs。结论Ⅰ类整合子在大肠埃希菌和克雷伯菌中分布广泛。整合子与大肠埃希菌和克雷伯菌的耐药有关，即整合子阳性菌比整合子阴性菌更容易产生耐药。     

2005年中国CHINET大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的了解我国主要地区医院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对抗菌药物的耐药性,指导临床合理使用抗菌药物。方法国内8所较有代表性的综合性医院按统一方案、统一方法(Kirby-Bauer法)和判断标准(CLSI2005版)进行细菌耐药性监测。结果临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检出率分别为38.9%(20%～57%)、40.5%(13%～70%),各所医院检出率有较大差异。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对亚胺培南、美罗培南等碳青霉烯类抗生素仍高度敏感,耐药率为0～3%,有4所医院出现了对碳青霉烯类抗生素耐药株。大肠埃希菌产ESBLs株对头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-三唑巴坦、头孢他啶、阿米卡星耐药率<20%,而肺炎克雷伯菌产ESBLs株对其耐药率>50%。大肠埃希菌ESBLs阴性株对氨苄西林、哌拉西林、环丙沙星、庆大霉素和复方磺胺甲噁唑耐药率>50%,肺炎克雷伯菌非产ESBLs株对氨苄西林高度耐药。不同医院产ESBLs细菌对同一药物的耐药率有较大差异。结论不同医院耐药性各具特点。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素仍最敏感,但已出现少数耐药株,应重视对其耐药机制的研究。     

对头孢吡肟敏感的疑似产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌和克雷伯菌属的分子生物学特征

目的 了解初筛试验疑似产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)但确证试验未能确认,而对头孢吡肟敏感的大肠埃希菌和克雷伯菌属中的ESBLs和质粒介导的AmpC酶.方法 纸片扩散法检测18株细菌对常用抗菌药物的敏感性;PCR及多重PCR法检测细菌中的ESBLs和质粒AmpC酶基因;质粒转移接合试验检测耐药质粒的可传递性;细菌基因间重复一致序列(ERIC)-PCR法检测供体大肠埃希菌和受体E.coli J53及其接合子的同源性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)对11株大肠埃希菌和6株肺炎克雷伯菌进行同源性分析.结果 18株细菌均为2005年1月至12月期间上海华山医院临床分离的菌株,其中大肠埃希菌11株,肺炎克雷伯菌6株,产酸克雷伯菌1株,按常规方法对细菌进行重新鉴定和药敏试验.18株细菌经美国临床和实验室标准协会(CLSI)推荐的ESBLs初筛试验结果均为ESBLs产生可疑菌株,但确证试验未能确认;所有菌株的头孢吡肟抑菌圈直径均在18 mm以上,显示敏感.PCR检测结果显示,11株大肠埃希菌中有9株产CIT型质粒AmpC酶,DNA测序及序列比对结果证实为CMY-2型AmpC酶,未发现TEM、SHV、CTX-M、PER、VEB、SFO等广谱或ESBLs;6株肺炎克雷伯菌中有5株产DHA型质粒AmpC酶,DNA测序及序列比对结果证实为DHA-1型AmpC酶;5株产DHA-1型AmpC酶的肺炎克雷伯菌株中,4株同时伴有广谱或ESBLs:其中2株产SHV-11型广谱酶,另2株分别产CTX-M-14型ESBLs和SHV-62型ESBLs;1株产酸克雷伯菌亦单产DHA-1型AmpC酶;质粒转移接合试验结果表明,携带耐药基因的质粒可从供体菌转移至敏感细胞中;PFGE结果显示,6株肺炎克雷伯菌的谱型各不相同,而11株大肠埃希菌可分为5种谱型,其中B型包含7株细菌,这7株细菌均产生质粒介导的CMY-2型AmpC酶,并分离自外科病房,提示可能存在克隆菌株的流行传播.结论在确证试验未能确认的疑似产ESBLs中,对头孢吡肟敏感的大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌主要产生质粒介导的AmpC酶,但尚有少数菌株同时伴有产ESBLs.对同时产生ESBLs和AmpC酶的菌株,临床微生物实验室必须报告这些菌株对头孢吡肟耐药.     

临床可疑产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析

目的了解可疑产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的构成比和耐药情况,指导临床合理用药。方法对2008年7～12月住院患者各种临床标本,采用美国临床实验室标准化委员会推荐的表型筛选法分离到可疑产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,再经确认试验检测产ESBLs菌株,统计耐药分布情况。结果从248株阳性标本中共检出可疑产ESBLs菌株117株,其中大肠埃希菌38株,肺炎克雷伯菌79株;确证试验检测出产ESBLs菌82株,总检出率为33．1％,其中大肠埃希菌27株,肺炎克雷伯菌55株。确定为产ESBLs的菌株对氨苄西林、部分第3代头孢菌素的耐药率为100．0％,对磺胺类、喹诺酮类耐药率为60．0％～90．0％,对亚胺培南的耐药率为0．0％。结论产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对多种抗菌药物的耐药率明显高于非产ESBLs菌株,具有多重耐药性;而碳青霉烯类亚胺培南仍然是对产ESBLs细菌最有效的药物。     

产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性分析

为了研究我院产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性情况,更好的指导临床用药,我们对56株产ESBLs的大肠埃希菌(24株)和肺炎克雷伯菌(32株)的耐药率进行了分析.,现报告如下.     

产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的检测

目的研究大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药谱。方法收集2002年8月至2003年6月间从嘉善县第一人民医院分离的167株大肠埃希菌、154株肺炎克雷伯菌和67株阴沟肠杆菌，用头孢噻肟或头孢他啶药敏纸片筛选产ESBLs可疑株；用头孢噻肟和头孢噻肟加克拉维酸或头孢他啶和头孢他啶加克拉维酸双纸片扩散法检测ESBLs；采用K-B法进行药敏试验。结果符合CTX筛选标准的有158株，符合CAZ筛选标准的有94株，两者都符合的有76株，共176株产ESBLs可疑株。CTX和CTV／CA双纸片检出115株阳性，CAZ和CAZ／CA双纸片检出62株阳性，两种双纸片法都为阳性的有51株，共检出126株产ESBLs菌株。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的ESBLs检出率分别为30%（50／167）、34％（52／156）和36％（24／67）。产ESBLs株对氨苄西林、阿齐霉素和克林霉素的耐药率近乎100％，对阿米卡星、环丙沙星和呋喃妥因的耐药相对较低，除2株产ESBLs肺炎克雷伯菌耐亚胺培南外，其余均为敏感。结论大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的产ESBLs率较高，耐药性严重。筛选产ESBLs可疑株的最佳纸片为CTX，表型确证产ESBLs菌株的最佳双纸片为CTX和CTX／CA，阴沟肠杆菌的产ESBLs率超过肺炎克伯菌成为主要产ESBLs菌。     

产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌耐药性检测

【目的】了解临床分离肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌超广谱β内酰胺酶（ESBLs）产生情况及耐药性。【方法】用VITEK32型全自动细菌鉴定分析系统对临床标本中分离的123株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌进行鉴定，ESBLs采用双纸片扩散法检测，采用KB纸片法选用13种抗菌药物进行药敏分析。【结果】产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌检出率分别为46．2％和40．5％，以呼吸道感染为主占50％。产ESBLs菌对多种抗生素的耐药性较非产酶株显著升高，对β一内酰胺类喹诺酮类和青霉素类抗生素几乎全部耐药，但对亚胺培南的敏感性为100％，对头孢西丁的敏感率〉60％。【结论】治疗产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌首选是碳青霉烯类和头霉素类；应重视ESBLs的检测，合理使用抗生素。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β内酰胺酶的基因分型

目的 :分析我院大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌临床分离株中超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs)的主要基因型。 方法 :用表型确证试验确定临床标本中产ESBLs的大肠埃希菌和克雷伯菌 ,用Etest检测其最低抑菌浓度 (MIC) ,分别用TEM、SHV和CTX M通用引物进行聚合酶链反应 (PCR)扩增并对PCR产物进行序列分析。结果 :大部分产ESBLs菌株体外对头孢噻肟耐药而对头孢他啶敏感 ,PCR扩增结果显示TEM、SHV和CTX M的阳性率分别为 6 8%、39%和 83% ,序列分析证实TEM扩增产物均属于TEM 1基因 ,CTX M扩增产物均属于CTX M 3基因 ,而SHV扩增产物则分别属于SHV 12、SHV 11或SHV 1基因。结论 :CTX M 3和SHV 12是我院产ESBLs菌株的主要基因型 ;尚未发现TEM起源ESBLs。