Ryanodine受体Ser2815位点磷酸化状态的改变在心肌肥厚兔触发性室性心律失常中的作用

目的 研究Ryanodine受体Ser2815位点磷酸化状态的改变在心肌肥厚兔触发性室性心律失常中的作用.方法 将30只日本长耳兔随机分为3组:假手术组(Sham组)、心肌肥厚组(LVH组)、心肌肥厚+KN-93组(KN-93组),LVH组和KN-93组均通过缩窄腹主动脉建立兔心肌肥厚模型,Sham组仅游离腹主动脉不进行缩窄.8周后行超声心动图证实心肌肥厚形成,制备兔左室楔形心肌块的灌流模型,同步记录心内、外膜动作电位及跨壁心电图.KN-93组预先给予KN-93预灌,然后观察各组在异丙肾上腺素(1 μmol/L)灌流和快频率程序刺激下触发活动和室性心动过速的发生率.灌流完毕后取左室心肌组织,应用Western blot检测各组心肌Ryanodine受体总量及其Ser2815位点磷酸化蛋白水平.结果 Sham组、LVH组和KN-93组触发活动的发生率分别为0/10、10/10、4/10,室性心动过速或室颤的发生率分别为0/10、9/10、3/10,KN-93组均较LVH组明显降低(均P＜0.05);LVH组Ryanodine受体总量及Ser2815位点磷酸化蛋白水平较Sham组增加(均P＜0.05),KN-93组Ser2815位点磷酸化蛋白水平较LVH组减少(P＜0.05).结论 KN-93可通过降低Ryanodine受体Ser2815位点的磷酸化水平抑制肥厚心肌的室性心律失常,Ryanodine受体的过度磷酸化是触发性心律失常发生的重要机制之一.     

门冬氨酸钾镁对家兔肥厚性心肌细胞内钙含量的影响

目的观察口服门冬氨酸钾镁片对家兔肥厚性心肌细胞内钙含量的影响。方法将家兔随机分为假手术组、心肌肥厚组和门冬氨酸钾镁组。假手术组开腹但不行腹主动脉缩窄术，心肌肥厚组和门冬氨酸钾镁组采用腹主动脉缩窄术制备家兔心肌肥厚模型，喂养8周，制备兔左心室楔形心肌块，利用浮置玻璃微电极法同步记录楔形心肌块跨壁心电图和内、外膜心肌细胞跨膜动作电位，程序电刺激诱发室性心律失常，记录早期后除极（EAD）和尖端扭转型室速（TdP）的发生率，采用Langendorff灌流装置分离心肌细胞，应用荧光指示剂Fura-2／AM标记，SIMPLE-PCI荧光图像成像系统测量3组心肌细胞在激发波长为340am和380am时的荧光比值，并以此比值来间接反映细胞内钙含量的变化。结果①假手术组、心肌肥厚组和门冬氨酸钾镁组EAD的发生率分别为0／10、10／10和5／10，TdP的发生率分别为0／10、6／10和1／10。心肌肥厚组与假手术组相比差异有显著性意义（P〈0．05），门冬氨酸钾镁组与心肌肥厚组相比EAD和TdP的发生率明显降低，二者差异有显著性意义（均P〈0．05）。②心肌肥厚组和门冬氨酸钾镁组较假手术组荧光比值明显增大，差异有显著性意义（P〈0．05），而门冬氨酸钾镁组较心肌肥厚组的荧光比值明显减小，差异具有显著性意义（均P〈0．05）。结论肥厚心肌钙离子内流增加，形成钙超载，心律失常的发生率显著升高。门冬氨酸钾镁可以阻断慢钙通道，从而减轻钙超载，可明显降低EAD和TdP的发生率。     

CaMKⅡ信号通路在神经肽Y诱导心肌细胞肥大中的作用

目的：探讨钙离子／钙调蛋白（Ca^2＋／CaM）依赖的蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）信号通路在神经肽Y（NPY）诱导下心肌细胞肥大的作用。方法：原代培养SD乳鼠心肌细胞，将细胞分为5组，NPY组：培养液中加入终浓度为100nmol／L的NPY：KN-931组、KN-935组和KN-9310组除加入100nmol／L的NPY外，分别加入CaMKⅡ特异性抑制剂KN-93，终浓度为1μmol／L、5μmol／L和10μmol／L；对照组：培养液中不加任何刺激药品。加药24h后采用 ^3H-亮氨酸（Leu）掺入法测定各组心肌细胞蛋白质合成速率，Western blotting测定对照组与NPY组心肌细胞的CaMKⅡδ蛋白表达。结果：经100nmol／L NPY刺激24h后，可明显增加心肌细胞^3H-Leu掺入量（p〈0．05），KN-93（1-10μmol／L）可以抑制NPY刺激的心肌细胞^3H-Leu掺入量的增加，并呈剂量依赖性（P均〈0．05）；100nmol／L NPY明显增加心肌细胞内CaMKⅡδ蛋白的表达（P〈（0．05）。结论：Ca^2＋／CaM依赖的蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）信号途径参与NPY诱导的大鼠心肌细胞肥大反应。     

复极时程和跨室壁复极离散在尖端扭转型室性心动过速中的作用

目的:探讨复极时程和跨室壁复极离散(TDR)在尖端扭转型室性心动过速(TdP)发生的作用. 方法:32只兔随机等分为4组,低浓度索他洛尔组(10 μmol/L),高浓度索他洛尔组(100 μmol/L),低浓度奎尼丁组(1 μmol/L),高浓度奎尼丁组(10 μmol/L). 采用Langendorff技术离体兔心脏灌流,同步记录用药后三层心肌的单相动作电位(MAP)和TDR,观察早期后除极(EAD)、TdP的发生情况. 结果:索他洛尔浓度依赖性地延长三层心肌MAP时程(MAPD)和TDR,高浓度索他洛尔组诱发EAD,TdP分别为8只和6只,而低浓度组诱发EAD,TdP分别为4只和0只. 奎尼丁浓度依赖性地延长三层心肌MAPD,但逆浓度依赖性地延长TDR,高浓度奎尼丁组诱发EAD,TdP分别为7只和1只,而低浓度组诱发EAD,TdP分别为6只和4只. 结论:与TdP的发生密切相关的主要是TDR,而不是复极时程.     

灯盏花素对家兔肥厚心肌室性心律失常的影响

目的观察口服灯盏花素对家兔肥厚心肌室性心律失常的影响,探讨灯盏花素抗心律失常的作用机制。方法 30只家兔随机分为假手术组、心肌肥厚组和灯盏花素组,每组10只。假手术组开腹但不行腹主动脉缩窄术;心肌肥厚组和灯盏花素组采用腹主动脉缩窄术制备家兔心肌肥厚模型;灯盏花素组自手术后第2天开始喂服灯盏花素,每只每日1片,喂养8周。制备兔左心室楔形心肌块,利用浮置玻璃微电极法同步记录楔形心肌块内、外膜心肌细胞跨膜动作电位和跨壁心电图;测心脏质量(HW)、体质量(BW)和左心室游离壁厚度(LVT)。观察各组QT间期和内、外膜心肌细胞跨膜动作电位以及跨室壁复极离散度(TDR),程序电刺激诱发室性心律失常,记录跨膜动作电位复极90%的时程(APD90),早期后除极(EAD)和尖端扭转性室性心动过速(Tdp)的发生率。结果心肌肥厚组与灯盏花素组HW、HW/BW及LVT值与假手术组相比均明显升高(P<0.05);灯盏花素组HW、HW/BW及LVT值与心肌肥厚组相比均明显减小(P<0.05)。心肌肥厚组与灯盏花素组QT间期及内、外膜心肌APD90较假手术组明显延长(P<0.05);灯盏花素组QT间期及内、外膜心肌APD90与心肌肥厚组相比明显缩短(P<0.05)。假手术组、心肌肥厚组和灯盏花素组TDR分别为(55±17)、(99±12)和(68±11)ms,3组间比较差别有统计学意义(P<0.05)。灯盏花素组EAD和Tdp的发生率明显低于心肌肥厚组(P<0.05)。结论肥厚心肌TDR增大,心律失常的发生率显著升高。灯盏花素可减少TDR,明显降低EAD和Tdp的发生率。     

药物致尖端扭转型室性心动过速的发生机制

目的探讨药物致尖端扭转型室性心动过速（Tdp）的发生机制。方法建立冠状动脉灌注的犬左室心肌楔形组织块模型,
同步记录左心室内膜、中层、外膜心肌细胞的动作电位及跨壁心电图,观察不同浓度D-Sotalol对动作电位时间（APD）、QT间期、
跨壁复极离散度（TDR）、早期后除极（EAD）及Tdp发生的影响。结果浓度为0~100 μmol/L的D-Sotalol呈剂量依赖性地延长
各层细胞APD,尤以中层细胞最为显著（P<0.05）,因而增加TDR;D-Sotalol在中层细胞可诱发EAD,触发室性早博并形成跨壁
折返导致Tdp。结论D-Sotalol在中层细胞诱发EAD、R on T室性早博是其致Tdp的始动因子,在TDR增加的基础上形成跨室
壁折返是Tdp得以维持的关键。
     

抗心律失常肽对陈旧性心肌梗死兔室性心律失常的影响

为观察缝隙连接激动剂抗心律失常肽（AAP10）对陈旧性心肌梗死（OMI）兔室性心律失常的影响，并探讨其作用机制。将30只雄性日本大耳白兔随机分为假手术组（Sham）、OMI组和AAP10组，每组各10只。Sham组开胸但不结扎冠状动脉，OMI组和AAP10组开胸并结扎冠状动脉左室支制备心肌梗死模型，普通饲料喂养3个月后制备兔左心室楔形心肌块的灌注模型。Sham组和OMI组灌流正常台氏液，AAP10组灌流正常台氏液＋AAP10（80nmol／L）。灌流全程同时采用浮置玻璃微电极法同步记录内膜下心肌、外膜下心肌跨膜动作电位和跨壁心电图，并观察心外膜下心肌的刺激反应间期（stmulus-response-interval，SRI）和室性心动过速（室速）的诱发率。     

声学定量技术评价原发性高血压病患者的左室功能

目的评价原发性高血压病患者的左室功能变化。方法正常对照组包括38例正常人，67例原发性高血压（EH）患者分为高血压无左室肥厚组（NLVH）和高血压伴左室肥厚组（LVH），应用声学定量技术观测左室的功能变化。结果与对照组相比，高血压组AF、PAFR、PER均显著增大（P〈0．05～0．01），RF／AF减小（P〈0．05）；与高血压病NLVH组相比，高血压LVH组RF、TF、PRFR均减低且差异有统计学意义（P〈0．05）；与对照组相比，LVH组PRFR／PAFR降低且差异有统计学意义（P〈0．05）。结论高血压病患者左室充盈异常，舒张早期充盈减低，舒张晚期充盈增强；高血压LVH组左室舒张早期充盈受损重于高血压NLVH组；高血压病的舒张功能障碍在心肌肥厚前已经发生，心肌肥厚发生后，舒张功能障碍加重。     

药物致尖端扭转型室性心动过速的发生机制

目的探讨药物致尖端扭转型室性心动过速(Tdp)的发生机制。方法建立冠状动脉灌注的犬左室心肌楔形组织块模型,同步记录左心室内膜、中层、外膜心肌细胞的动作电位及跨壁心电图,观察不同浓度D-Sotalol对动作电位时间(APD)、QT间期、跨壁复极离散度(TDR)、早期后除极(EAD)及Tdp发生的影响。结果浓度为0～100μmol/L的D-Sotalol呈剂量依赖性地延长各层细胞APD,尤以中层细胞最为显著(P<0.05),因而增加TDR;D-Sotalol在中层细胞可诱发EAD,触发室性早博并形成跨壁折返导致Tdp。结论 D-Sotalol在中层细胞诱发EAD、R on T室性早博是其致Tdp的始动因子,在TDR增加的基础上形成跨室壁折返是Tdp得以维持的关键。     

Effects of calmodulin-dependent protein kinase II inhibitor, KN-93, on electrophysiological features of rabbit hypertrophic cardiac myocytes

Cardiac hypertrophy is an independent risk factor for sudden cardiac death in clinical settings and the incidence of sudden cardiac death and ventricular arrhythmias are closely related.The aim of this study was to determine the effects of the calmodulin-dependent protein kinase(CaMK) Ⅱ inhibitor,KN-93,on L-type calcium current(I Ca,L) and early after-depolarizations(EADs) in hypertrophic cardiomyocytes.A rabbit model of myocardial hypertrophy was constructed through abdominal aortic coarctation(LVH group).The control group(sham group) received a sham operation,in which the abdominal aortic was dissected but not coarcted.Eight weeks later,the degree of left ventricular hypertrophy(LVH) was evaluated using echocardiography.Individual cardiomyocyte was isolated through collagenase digestion.Action potentials(APs) and I Ca,L were recorded using the perforated patch clamp technique.APs were recorded under current clamp conditions and I Ca,L was recorded under voltage clamp conditions.The incidence of EADs and I ca,L in the hypertrophic cardiomyocytes were observed under the conditions of low potassium(2 mmol/L),low magnesium(0.25 mmol/L) Tyrode’s solution perfusion,and slow frequency(0.25-0.5 Hz) electrical stimulation.The incidence of EADs and I ca,L in the hypertrophic cardiomyocytes were also evaluated after treatment with different concentrations of KN-92(KN-92 group) and KN-93(KN-93 group).Eight weeks later,the model was successfully established.Under the conditions of low potassium,low magnesium Tyrode’s solution perfusion,and slow frequency electrical stimulation,the incidence of EADs was 0/12,11/12,10/12,and 5/12 in sham group,LVH group,KN-92 group(0.5 μmol/L),and KN-93 group(0.5 μmol/L),respectively.When the drug concentration was increased to 1 μmol/L in KN-92 group and KN-93 group,the incidence of EADs was 10/12 and 2/12,respectively.At 0 mV,the current density was 6.7±1.0 and 6.3±0.7 PA·PF-1 in LVH group and sham group,respectively(P>0.05,n=12).When the drug concentration was 0.5 μmol/L i     

钙调蛋白激酶Ⅱ和蛋白激酶A信号转导通路在儿茶酚胺敏感性室性心动过速中的作用

目的研究钙调蛋白激酶Ⅱ和蛋白激酶A信号转导通路在儿茶酚胺敏感性室性心动过速中的作用。方法日本长耳白兔随机分成正常对照组、模型组、KN93组以及H89组。制备兔左室楔形心肌块灌流模型,正常组灌流蒂罗德液,模型组灌流咖啡因和异丙肾上腺素,KN93组在灌流咖啡因与异丙肾上腺素的基础上加灌KN93,H89组同样在灌流咖啡因与异丙肾上腺素的基础上加灌H89。观察通过程序性刺激后触发活动和室性心律失常的诱发情况。结果对照组触发活动和室性心律失常的诱发率为0。通过灌流咖啡因与异丙肾上腺素以后,QT间期明显缩短,模型组触发活动的诱发率为12/13,室性心律失常的发生率为8/13;而灌流KN93和H89后触发活动分别减少至4/9和6/11,室性心律失常减少到1/9和2/11。钙调蛋白激酶Ⅱ抑制剂和蛋白激酶A抑制剂可以减少药物灌流儿茶酚胺敏感性室速模型的触发活动和室性心律失常的发生。结论儿茶酚胺敏感性室性心动过速的发生跟钙调蛋白激酶Ⅱ和蛋白激酶A信号转导通路密切相关。该信号通路有望成为儿茶酚胺敏感性室性心动过速的治疗靶点。     

白花前胡浸膏对肾型高血压大鼠左室肥厚的预防作用

用肾型高血压左室肥厚（LVH）大鼠模型，观察了白花前胡浸膏长期给药（ig0．2ml／100g体重·d，相当于0．6g生药／100g体重·d）对左室舒张功能，左室心肌线粒体和血管钙含量的影响，与假手术组相比，LVH组左室顺应性明显下降，左室心肌线粒体和尾动脉钙含量增加，与LVH组相比，白花前胡浸膏组的左室顺应性得到改善（P＜0．01），左心室肌线粒体及尾动脉钙含量较LVH组显著降低（P＜0．01），提示白花前胡浸膏具有钙桔抗作用。     

慢性肾脏病非透析患者血游离三碘甲腺原氨酸对左心室肥厚的影响

目的：探讨慢性肾脏病非透析患者血游离三碘甲腺原氨酸（FT,）对左心室肥厚（LVH）的影响。方法：回顾性地分析2006年11月至2009年3月在本院肾内科住院治疗的43例慢性肾脏病非透析患者的临床资料、根据左心室质量指数（LVMI）将患者分为两组,即LVH组（24例）和非LVH组（19例）．比较两组血甲状腺激素谱及其他指标的不同,并采用多元线性回归模型探讨血FT,对LVMI的独立影响作用。结果：与非LVH组相比,LVH组患者估计肾小球滤过率[eGFR,（10．2±10．0）mE／（min·1．73m。）W20．8±14．5mL／（min·1．73m^3）,P〈0．05]、血红蛋白lHGB,（71．8±17．6）g／LUS102±25．3g／L,P〈0．0011和血白蛋白[ALB,（32．8±4．9）g／LUS（37．1±5．8）g／L,P〈0．05]更低,而血磷水平[（1．98±0．62）mmol／L郴（1．28±0．3J）mmol／L,P〈0．001]则更高。同时LVH患者还呈现更低的血FT水平[（2．34±O．83）pmo／／L郴（3．17±0．68）pmol／L,P〈0．05]和更高的低T3综合征发生率（50％US14．3％,P〈0．05）。多因素分析显示血FT,和血磷能独立地影响LVMI的水平（R^2=0．650,P〈0．001）。结论：慢性肾脏病非透析患者存在较高的低T3综合征和LVH发生率,并且低的血FT3对于LVH具有独立的影响作用。     

青年人高血压左心室肥厚与心律失常关系的临床研究

目的探讨青年人高血压左心室肥厚与心律失常关系的临床研究。方法对198例青年高血压患者进行超声心动图及Holter检查，比较有LVH及无LVH两组各类心律失常的发生情况。结果198例青年高血压患者并发LVH86例（占43．43％），LVH组各种心律失常的发生率与非LVH组比较，差别均有显著性意义（P〈0．01），LVH组复杂性室性心律失常为45例（占52．33％），显著高于无LVH组的12例（占10．71％，P〈0．01）。结论青年人高血压LVH与心律失常的发生有密切关系。应加强对青年高血压病的重视，积极逆转左室肥厚，改善患者预后。     

离体LQT2兔心脏模型的研制

目的 室性心律失常是临床常见急诊,长QT综合征(LQTS)所致的尖端扭转型室性心动过速(TdP)是室性心律失常的一种类型.为进一步研究长QT综合征,特制作离体LQT2兔心脏模型.方法 新西兰兔共12只,取出心脏,立即行逆行主动脉灌注,然后用有齿镊钳夹房室结造成Ⅲ度房室传导阻滞,分别用1000ms刺激周长(CLs)起搏至少100个心动周期,体表心电图提示无ST-T明显压低或抬高,给予低钾低镁台氏液灌流5min,观察EAD及心律失常情况.然后用加有右旋索他洛尔(dSotalol)100μmol/L浓度的台氏液逆行Langendorff灌流30min后再分别用上述刺激周期进行刺激,观察:①90%动作电位时程(APD90);②90%复极时间(RT90);③跨室壁复极离散度(TDR);④早期后去极化(EAD)及尖端扭转型室性心动过速的发生率;⑤平均QT间期等的变化.结果 12只新西兰离体Langendorff灌流兔心脏,在心动过缓及高浓度d-Sotalol(100μmol/L)存在时,动作电位时程明显延长,TDR明显增加(P＜0.001),并诱发出EAD(11/12,91.67%),但TdP发生率低(3/12,25%),在附加的低钾低镁台氏液灌流时,TdP发生率高(10/12,83.33%).结论 d-sotalol可在Langendroff灌流离体新西兰兔心脏上成功制备LOT2模型.     

心肌速度梯度评价不同构型高血压患者左室舒张功能

目的 探讨心脏左室长轴及短轴方向舒张早期心肌速度梯度（MVGe）评价不同构型高血压患者左室舒张功能的价值。方法 原发性高血压非左室心肌肥厚（NLVH）组30例，左室心肌肥厚（LVH）组30例，正常对照组30例，分别获得左室后壁长轴方向上的MVGell、MVGel2及短轴方向上的MVGer。结果 与对照组相比，NLVH组和LVH组MVGer、MVGell及MVGel2均显著降低（P〈0．001）。LVH组的MVGer、MVGell及MVGel2均显著低于NLVH组（P〈0．01）。结论 心脏左室长轴及短轴方向MVGe可以准确评价不同构型高血压左室舒张功能，为心肌舒张功能评价提供了一个新的量化指标。     

不同血钾水平时索他洛尔对在体跨室壁心肌复极不均一性的影响

为了观察正常血钾和低血钾时索他洛尔对在体跨室壁心肌复极不均一性的影响,探讨索他洛尔致室性心律失常的机制。24只兔随机分为两组,正常血钾组（12只）和低血钾组（12只）,分别静注索他洛尔1.0mg/kg,3.0mg/kg;同步记录兔左室心外膜心肌(Epi)、中层心肌(Mid)和心内膜心肌(Endo)的单相动作电位（MAP）,研究发现低钾时与血钾正常时相比,索他洛尔增加跨室壁心肌复极离散度（TDR）的作用更明显;更易引起Mid发生早期后除极（EAD）;低血钾组尖端扭转性室速（TdP）的发生率亦更高。     

肾上腺髓质素前体肽段(45-92)的心血管效应

目的：观察肾上腺髓质素前体肽段45-92（proAdm45－92）的心血管效应。方法：离体大鼠血管灌流，离体心脏灌流和整体动物心血管功能测定。结果：人proAdm45-92呈浓度依赖地（10-10~10-7mol／L）舒张大鼠胸主动脉，且具有部分内皮依赖性。对于离体心脏，2．5X10－8mol／LproAdrn45－92可使冠脉流量增加（54．4±2．3）％（P＜0.05），使左室内压增加（21±4）％（P＜0.05），但对心率、LVdP／dtmax无明显影响。静脉注射5nmol／kgproAdm45－92可降低大鼠平均动脉血压（1．4±1．0）kPa（P＜0．05），对心率和左室内压无明显作用。结论：人proAdm45－92对大鼠具有舒张血管、轻度降低血压的作用，对心肌可能无直接作用。     

氯沙坦与卡托普利联用对高血压左室肥厚的逆转作用

目的 观察氯沙坦与卡托普利联用对高血压左室肥厚（LVH）的逆转作用。方法 90例高血压LVH患者随机分为A、B、C三组，A组给予氯沙坦50～100mg／d，B组给予卡托普利50～100mg／d，c组给予氯沙坦25～50mg／d加卡托普利25～50mg／d治疗6个月，观察血压、LVH改善情况。结果 A、B两组均能使左室质量指数较治疗前明显减低（P〈0．01），而C组减低左室质量指数的程度更大（P〈0．01）。结论 氯沙坦与卡托普利联用对逆转LVH有协同作用。     

尿毒症维持血透伴左室肥厚患者的左室舒张功能研究

采用超声心动图检测20例尿毒症维持血透伴左室肥厚（HD）患者的左室舒张功能，并与11例高血压性心脏病（HHD）、11例肥厚性心肌病（HCM）和11例正常人比较。结果发现，HD、HHD和HCM组的E／A分别为0.91±0.35，1.01±0.52和0.62±0.15（P＜0.05）；Ei/Ai分别为1．10±0.54，1．60±1．09和0.60±0.35（P＜0．05）IRT分别为114±13，101±27和132±23（P＜0．05）。左室心肌重量指数（LVMI）、E／A分别与患者血压呈正、负相关，而与尿毒症毒素不相关。提示：HD患者心脏损害与HHD相似，控制高血压对防治左室肥厚（LVH）、改善心功能有一定意义。