益气护卫汤对哮喘小鼠气道炎症及细胞因子水平影响的研究

益气护卫汤是洪广祥教授根据哮喘发病特点所创制．用于防治哮喘的有效方剂。通过观察益气护卫汤对哮喘模型小鼠肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞及白介素—4(IL—4)、γ—干扰素(IFN—γ)水平的影响，探讨其防治哮喘的作用机理。     

益气护卫汤对哮喘小鼠Th1/Th2型细胞因子水平的影响

益气护卫汤是著名中医内科专家洪广祥教授根据哮喘的发病特点创制的用于哮喘防治的有效方剂[1] ,以往的实验研究表明益气护卫汤可以降低哮喘豚鼠的气道高反应性(ＡＨＲ) ,显著延长豚鼠卵蛋白雾化引喘潜伏期[2 ] ;降低豚鼠血浆可溶性细胞间粘附分子 1(ｓＩＣＡＭ 1)水平[3 ] ;调节Ｔ淋巴细胞亚群比例平衡 ,并能有效抑制Ｔ细胞活化[4] 。本研究通过观察益气护卫汤对哮喘小鼠肺泡灌洗液 (ＢＡＬＦ)中白介素 4 (ＩＬ 4 )、γ 干扰素 (ＩＦＮ γ)水平的变化 ,探讨其对Ｔｈ1/Ｔｈ2细胞亚群反应的影响及防治哮喘的作用机理。1　材料1.1　药物及试…     

益气温阳护卫汤对哮喘豚鼠气道反应性的影响

益气温阳护卫汤是著名中医专家洪广祥教授用于哮喘防治的有效方剂。本实验观察了该汤剂对哮喘豚鼠气道反应性作用 ,以探讨其防治哮喘的疗效机制。1　材料和方法1.1　材料1.1.1　动物　健康豚鼠 ,雄性 ,体重 40 0 ｇ左右 ,年龄为 5～7月龄 ,上海畜牧兽医学会科技咨询服务部供应。合格证号 :0 176 3。1.1.2　实验用药　 (1)实验用温阳益气护卫汤的制备 :将生黄芪、白术、防风、桂枝、白勺、生姜、大枣、炙甘草、仙茅、仙灵脾等 10味药按 2∶1.5∶1.5∶1∶1∶1∶1∶0 .5∶1∶1.5比例配伍 ,其中白术、防风、桂枝、白芍、生姜提取挥发油。然后取 …     

温阳益气护卫汤预防哮喘发作的临床研究

支气管哮喘属中医"哮证"范畴,是由嗜酸性粒细胞、肥大细胞和T淋巴细胞等多种炎性细胞参与的气道慢性炎症.其主要特征是气道高反应性,气道炎症是导致气道高反应的主要因素.嗜酸性粒细胞(EOS)浸润是哮喘的特征之一.嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)是EOS激活后释放对呼吸道上皮具有直接损伤作用的毒性蛋白,是造成气道炎症(AAI),导致气道高反应(AHR),诱发和加重哮喘的重要物质.ECP水平的变化能直接反映哮喘气道炎症的情况.为了预防哮喘发作,洪广祥教授创制了温阳益气护卫法,笔者对29例患者在服用温阳益气护卫汤前及1个疗程后的证候表现、气道反应性、诱导痰中EOS计数、ECP的含量以及疗程结束后1月内哮喘有关症状与上年同期比较等作了较为深入的研究.观察报告如下.     

益气温阳护卫汤对缓解期哮喘患者气道反应性的影响及作用机理研究

目的:探讨益气温阳护卫汤对缓解期哮喘患者气道反应性的影响及作用机理.方法:将62例支气管哮喘缓解期患者随机分为益气温阳护卫汤组(治疗组)和普米克气雾剂组(对照组)两组,每组各31例.治疗组服用益气温阳护卫汤治疗,对照组使用普米克气雾剂吸入治疗,两组连续用药6个月.两组治疗前后检测PC20-FEV1作为气道反应性指标.并进行痰液EOS计数;采用双抗体夹心ELISA法测定痰液IFN-γ、IL-5;采用瑞典PharmaciaCAP System荧光酶标法测定ECP.结果:治疗后两组PC20-FEV1值与治疗前比较均有显著性差异(P＜0.01);但两组治疗后比较无统计学意义(P＞0.05).治疗后两组患者痰液IFN-r、IL-5、EOS、ECP与治疗前比较有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01);且治疗后两组患者痰液IL-5、EOS、ECP比较无显著性差异(P＞0.05),但痰液IFN-γ治疗组明显高于对照组(P＜0.05).结论:益气温阳护卫汤具有明显降低哮喘患者气道反应性的作用,其可能通过减轻气道炎症实现.     

益气温阳护卫汤对哮喘大鼠IFN-γ_mRNA表达的影响

目的:探讨益气温阳护卫汤对哮喘大鼠IFN-γ_mRNA的影响。方法:40只清洁级雄性SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、益气温阳护卫组、地塞米松组,每组10只。采用SYBR Green Realtime PCR测定各组外周血单个核细胞(PBMC)中IFN-γ_mRNA的表达变化。结果:哮喘模型组PBMC中IFN-γ_mRNA表达显著低于正常对照组(P<0.01),益气温阳护卫组、地塞米松组PBMC中IFN-γ_mRNA的表达显著高于哮喘模型组(P<0.01),且与正常对照组PBMC中IFN-γ_mRNA的表达相当。结论:益气温阳护卫汤可以上调IFN-γ_mRNA的表达,益气温阳护卫汤防治哮喘的作用途径可能是通过该机制实现。     

益气温阳护卫汤对哮喘豚鼠BALF Th1、Th2细胞因子产生及调节的影响

目的观察益气温阳护卫汤对哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)Th1、Th2细胞因子产生及调节影响.方法将豚鼠随机分为正常组、哮喘组、地塞米松组、玉屏风散组及益气温阳护卫汤低剂量组、中剂量组、高剂量组;于诱喘后24小时采集标本,并采用双抗体夹心ELISA法测定Th1细胞分泌的细胞因子干扰素-γ(IFN-γ);Th2细胞分泌的细胞因子白细胞介素-4,5(IL-4,IL-5);采用比色法测定各组BALF一氧化氮(NO)含量.结果益气温阳护卫汤各剂量组均能提高IFN-γ水平,降低IL-4,IL-5水平.中、高剂量组与地塞米松组IL-4水平无明显差异(P＞0.05);高剂量组IL-5水平虽低于地塞米松组,但无明显差异(P＞0.05),与其他各组均有差异(P＜0.05).高剂量组IFN-γ浓度与其他各组比较有显著性差异(P＜0.05),中、低剂量组、玉屏风散组与地塞米松组比较无显著性差异(P＞0.05),但这四组均高于哮喘组(P＜0.05).BALF NO水平,以高剂量组最低,但与中剂量组及地塞米松组比较无显著性差异(P＞0.05),三者与其他组比较有显著性差异(P＜0.05).结论益气温阳护卫汤可以促进Th1细胞分泌IFN-γ,抑制Th2细胞分泌IL-4,IL-5;调节Th1、 Th2细胞因子产生的可能有效途径之一,是通过降低NO水平实现.     

苏子降气汤对哮喘模型气道高反应性的影响及作用机制研究

以卵白蛋白注射雾化吸入法复制哮喘模型,通过吸入组胺溶液(变应原)引起气道反应强弱及HE染色法,观察苏子降气汤对哮喘大鼠气道高反应性(AHR)及哮喘大鼠肺组织形态学的影响。并通过拆方配伍研究,研讨降气化痰法、温肾纳气法对哮喘模型的作用机制。结果表明,各造模组吸入组胺溶液后均出现不同程度AHR,苏子降气汤能显著降低哮喘大鼠的气道反应性,并明显改善哮喘大鼠肺组织病理形态学。     

益气温阳护卫汤对哮喘大鼠Thl7/Treg细胞及细胞因子的影响

目的 研究益气温阳护卫汤对哮喘大鼠Thl7/Treg细胞及其细胞因子的影响.方法 将144只SPF级雌性SD大鼠随机分为正常对照组(A组),模型组(B组),益气温阳护卫汤低、中、高剂量组(C、D、E组),地塞米松组(F组).除A组外其他组卵蛋白(OVA)氢氧化铝溶液腹腔致敏,并每天雾化吸入OVA激发,致敏后第16天开始...     

止喘汤对哮喘大鼠气道炎症和气道重塑的影响

[目的]观察早期应用中药复方对哮喘气道炎症和气道重塑的治疗作用。[方法]40只SD大鼠随机分为4组:正常组、哮喘组、布地奈德(BUD)组及止喘汤组,采用卵蛋白(OVA)致敏加激发法复制慢性哮喘模型,观察各组大鼠外周血(PB)、支气管肺泡灌洗液(BAL)中嗜酸性粒细胞(EOS)计数的变化情况,同时对肺组织切片行苏木精-伊红(HE)染色测定支气管壁周围EOS个数及气道壁厚度。[结果]哮喘组与正常组比较:PB、BAL和气道壁周围EOS的计数水平明显升高,气道壁明显增厚(P0.01)。药物干预后,干预组与哮喘组比较:PB、BAL和气道壁周围EOS的计数水平明显降低,气道壁明显变薄(P0.01);且药物干预组之间相比较无统计学差异(P0.05)。[结论]止喘汤不但能抑制哮喘气道炎症,而且还具有干预气道重塑的作用。     

地龙汤对实验性哮喘豚鼠气道炎症的影响

目的：观察地龙汤对实验性支气管哮喘豚鼠气道炎症的作用,并探讨其作用机制。方法：豚鼠48只随机分为正常组,模型组,地塞米松组,小青龙汤组,地龙汤高(12 g·kg^-1)、低(6 g·kg^-1) 剂量组。除正常组外,其他各组动物经10%卵白蛋白(ovalbumin,OVA)腹腔注射致敏和1%气道吸入激发建立哮喘模型。正常组给予等量生理盐水致敏和治疗。各组分别给予药物治疗后,观察动物肺泡灌洗液(bronchoaveolar lavage fluid,BALF)和外周血中总细胞数、嗜酸性粒细胞(eosinophil,Eos)、淋巴细胞(lymphocyte,Ly)、嗜中性粒细胞(neutrophil,Neu)比率。肺组织病理学主要观察Eos数目及其凋亡情况。结果：模型组动物血中及BALF中Eos,Ly,Neu和总细胞数显著增高,与正常组比较,差异十分显著(P＜0.01)。地龙汤高剂量组对外周血及BALF中Eos,Ly,Neu及总细胞数均较模型组有非常显著的差异(P＜0.01),显示出与地塞米松组相似的结果；地龙汤低剂量组亦显示出一定的差异性(P＜0.05)。模型组支气管黏膜水肿明显,部分支气管内皱褶减少伴部分上皮脱落,支气管壁、管周及肺泡区见炎性细胞浸润,其中较多Eos浸润,支气管壁增厚。电镜下可见模型组细支气管破坏,肺泡Ⅱ型细胞变性,肺泡内Eos浸润。地龙汤高剂量组以上改变显著较轻,并见BALF中Eos凋亡；地龙汤低剂量组改变程度低于高剂量组,并见部分Eos凋亡。结论：地龙汤可减轻哮喘豚鼠气道炎症,其作用与抑制Eos浸润,并促进Eos凋亡有关。作用强弱与剂量呈正比例关系。     

益气固本汤对小鼠哮喘发作及小鼠血清IL-4 IL-13含量影响的实验研究

目的:通过对比实验组与对照组小鼠哮喘发作的时间以及血清中IL-4、IL-13的含量变化,评定益气固本汤是否可以减轻气道炎症反应,从而延缓或防止哮喘发作,为益气固本汤在临床上的应用提供理论依据。方法:在同一条件下,将40只小鼠以普通饲料适应性喂养3天,后按随机数字表法分成4组,每组10只,分别为空白对照组(简称空白组)、生理盐水对照组(简称盐水组)、益气固本汤小剂量组(简称小剂量组),益气固本汤大剂量组(简称大剂量组)。空白对照组喂食普通饲料,另外三组在此基础上,生理盐水组每日给0.3ml生理盐水灌胃1次;小剂量组每日给0.3ml浓度为0.56g/ml的益气固本汤灌胃1次;大剂量组每日给0.3ml浓度为1.12g/ml的益气固本汤灌胃1次;共灌胃30天。自实验第21天开始做哮喘激发,各小鼠腹腔注射1ml 4%卵蛋白致敏,连续注射7天,然后将每只小鼠单独放于密闭、透明的有机玻璃罩内,将含1%卵蛋白的等渗盐水雾化后吸入10分钟,连续3天,于实验第30天雾化吸入后,观察各小鼠出现哮喘症状的时间并检测血清中IL-4、IL-13含量。结论:益气固本汤可以减轻气道炎症反应,延缓造模小鼠哮喘发作。     

朝医山药补肺元汤对哮喘模型小鼠气道炎症的影响

目的:探讨朝医山药补肺元汤对哮喘小鼠气道炎症和Thl/Th2类细胞因子变化的影响及其可能机制。方法:雄性BALB/c小鼠32只随机分成4组。分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)和蛋白质印迹检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-4(IL-4)、IL-5、IL-13及γ-干扰素(IFN-γ)含量,观察BALF中炎症细胞和肺组织病理学改变。结果:与正常对照组比较,哮喘模型组小鼠BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平和IFN-γ水平显著降低(P0.05)。与哮喘模型组比较,朝医山药补肺元汤低、高剂量组小鼠BALF中炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平降低,IFN-γ水平显著上升(P0.05)。朝医山药补肺元汤能明显减轻哮喘小鼠肺组织病理学改变,朝医山药补肺元汤低、高剂量组之间比较,无显著差异。结论:朝医山药补肺元汤对哮喘小鼠具有保护作用,其机制可能与调节IL-4/IFN-γ平衡失调、减轻炎症细胞浸润有关。     

益气化瘀汤对大鼠慢性肾炎的实验研究

供试药物 益气化瘀汤(水蛭、蝉蜕、僵蚕、益母草、党参、太子参、旱连草等)中药制剂，大连中医医院制剂室提供。批号：20020524。     

益气化瘀汤对早期糖尿病肾病细胞因子水平干预的研究

目的:探讨益气化瘀汤对早期糖尿病肾病(DN)血细胞因子的影响。方法:将105例早期糖尿病肾病随机分为对照组(50例)与观察组(55例)。对照组用洛汀新片:10mg/次,1次/日,口服;观察组在对照组基础上加用益气化瘀汤每天1剂,8周为1疗程。治疗前后检测血白介素(IL-8)、IL-18、肿瘤生长因子a(TNF-a)水平。并附50例健康对照组。结果:两组治疗前炎性细胞因子比较差异无统计学意义(P0.05),但明显高于健康组(P0.01);观察组自身治疗前后细胞因子水平比较均明显下降(P0.01);治疗后两组比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论:IL-8、IL-18、TNF-a与糖尿病肾病的发生发展相关,益气化瘀汤可能在抑制早期糖尿病肾病发展过程中起着积极的作用。     

五味地龙汤对哮喘豚鼠炎症细胞和细胞因子的影响

目的 探讨五味地龙汤治疗哮喘的作用及其机制.方法 采用卵白蛋白喷雾引喘制作动物模型,致敏15天后开始灌胃给药,每日1次,连续8天.取血分别进行白细胞总数、嗜酸性粒细胞(EOS)、淋巴细胞分类计数、γ-干扰素(IFN-γ)和二羟酸白三烯(LTB4)测定.结果 哮喘模型组白细胞总数、EOS、淋巴细胞均显著升高,与五味地龙汤各剂量组比较,差异均具有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).哮喘模型组动物血清LTB4含量明显升高,IFN-γ水平明显降低,给予五味地龙汤后,大、中、小3个剂量组均使血清LTB4含量降低、IFN-γ上升(P＜0.05或P＜0.01).结论 五味地龙汤能抑制哮喘状态下的炎症细胞浸润和扩散,对LTB4和IFN-γ有调节作用,其可能是五味地龙汤治疗哮喘的重要机制之一.     

芪仙汤对苯并芘加剧哮喘小鼠气道炎症及黏液高分泌的影响及机制研究

目的 观察芪仙汤(黄芪、仙灵脾、巴戟天等)对暴露于大气污染物苯并芘(BaP)的哮喘小鼠气道炎症及黏液分泌的影响,并探讨其分子机制。方法 将雌性BALB/c小鼠随机分为空白组、哮喘组[卵白蛋白(OVA)致敏]、BaP组(OVA+BaP)和芪仙汤组(OVA+BaP+芪仙汤37.5 g·kg^-1),每组10只。采用OVA致敏法复制小鼠哮喘模型,并以BaP滴鼻法模拟大气污染暴露。采用HE、AB-PAS染色法分别检测小鼠肺组织炎症及黏液分泌水平;qRT-PCR法检测肺组织白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素13(IL-13)mRNA表达;免疫组化法检测肺组织黏蛋白5AC(MUC5AC)及磷酸化ERK(p-ERK)蛋白表达;DCFH-DA探针法检测肺组织活性氧(ROS)水平。结果 与空白组比较,哮喘组小鼠的气道、血管周围炎症细胞明显增多,气道黏膜出现中断、不连续,炎症评分显著升高(P<0.01);小鼠肺组织IL-4、IL-13 mRNA表达明显上调(P<0.05);小鼠的气道黏液分泌显著增多(P<0.01);小鼠气道MUC5AC、p-ERK蛋白表达显著...     

益气涤痰化瘀方对哮喘小鼠气道炎症及Th17/Treg平衡调节作用的研究

目的:研究益气涤痰化瘀方对哮喘小鼠气道炎症及Th17/Treg平衡的影响,初步揭示该方防治哮喘的作用机制。方法:SPF级BALB/c雌性小鼠50只随机分成正常对照组、哮喘模型组,益气涤痰化瘀方低、中、高剂量组。卵清蛋白(OVA)腹腔注射及雾化激发法,复制哮喘模型,益气涤痰化瘀方干预治疗。观察各组小鼠行为学改变;制作肺组织病理切片进镜下观察;收集支气管肺泡灌洗液(BALF)进行白细胞总数及分类计数;取小鼠血清ELISA法检测IL-17的变化。结果:(1)与哮喘模型组比较,药物干预组哮喘症状有所减轻,肺组织炎性细胞浸润减轻。(2)益气涤痰化瘀方中剂量组小鼠BALF中白细胞总数和嗜酸性粒细胞(EOS)、中性粒细胞(NEU)、淋巴细胞(LYM)分类计数较哮喘模型组都有减少(P0.05)。(3)益气涤痰化瘀方各剂量组与哮喘模型组比较,小鼠血清IL-17浓度显著降低(P0.01)。结论:益气涤痰化瘀方治疗哮喘的作用机理之一是通过抑制哮喘小鼠IL-17的表达,减轻气道炎症反应,干预哮喘发作。     

苏子降气汤对哮喘模型EOS的数量及作用机理的影响

通过卵白蛋白注射雾化吸入法复制哮喘模型,观察苏子降气汤对大鼠血及BALF中EOS数量影响,并通过免疫组化法观察苏子降气汤对哮喘大鼠肺组织RANTES、ICAM-1蛋白表达的影响,以探讨其作用机理.结果表明,苏子降气汤对哮喘大鼠EOS数量有明显下调作用,作用机理与抑制RANTES、I-CAM-1蛋白表达有关.