东方田鼠三个脂肪肝相关基因的克隆及分析

目的以C57BL／KsJ—db／＋表型正常小鼠为对照组,研究自发性Ⅱ型糖尿病动物C57BL／KsJ—db／db小鼠的体生长曲线、糖代谢曲线、血清胰岛素水平变化、主要脏器重量、脏器系数等部分生物学特性,并探讨其肝脏、肾脏和胰腺等组织病理学变化。方法实验为期20周,从第4周开始,每周测定db／db以及db／＋小鼠体重、血糖,每2周测定血清胰岛素水平,20周龄处死,脏器、脂肪称重,部分组织用10％中性甲醛固定,制作病理切片。结果①db／db小鼠体重、血糖和血清胰岛素水平比同龄对照组高（P〈0．01）;②db／db小鼠各脂肪系数明显大于db／＋小鼠（P〈0．01）,而脾脏、胰腺以及肾脏则相对萎缩,特别是脾脏和雌性小鼠的胰腺与对照组相比差异极显著（P〈0．01）;③db／db小鼠肝细胞大片坏死、脂肪变性、炎细胞浸润、纤维组织增生;肾问质组织充血、水肿,肾小管内见蛋白管型、上皮细胞脂肪变性;胰岛数量明显减少、体积缩小,岛内细胞数量也相对减少。结论db／db小鼠是一种肥胖的,伴有高血糖、高度胰岛素抵抗,肝脏、肾脏病变和胰岛功能不足的适用性Ⅱ型糖尿病动物模型。     

2型糖尿病模型db/db小鼠肾上腺超微结构观察

目的 观察人类2型糖尿病动物模型--C57BL/KsJ db/db(db/db)小鼠肾上腺超微结构变化.方法 糖尿病组为6周龄C57BL/KsJ(db /db )小鼠10只,尾静脉空腹血糖高于11.1 mmol/L,且肥胖.对照组为非糖尿病小鼠C57BL/KsJ(?/ )5只,尾静脉空腹血糖低于6.0 mmol/L,体质量正常.于30周龄及54周龄(成模第6月末和第12月末)时,在透射电镜下观察肾上腺皮质束状带超微结构.结果 糖尿病小鼠超微结构发生显著改变包括线粒体变性,脂滴减少,细胞核变型、染色质边集等.病变程度与病程正相关.结论 2型糖尿病所致肾上腺超微结构改变可能与糖尿病下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能受损有关.     

C57BL/KsJ小鼠的繁殖性能及部分生化指标的测定

目的在相对稳定的饲养环境下，观察C57BL／KsJ杂合仔（＋／db）小鼠的生长繁殖能力，同时对纯合仔（db／db）、杂合仔（＋／db）小鼠进行部分生化指标的测定。方法将20对＋／db小鼠饲养在层流柜中，进行繁殖试验，记录胎间隔、产仔数、离乳数，测周重并采血进行血糖、胆固醇、甘油三酯、血胰岛素的测定。结果从6周开始纯合仔与杂合仔小鼠的体重出现了明显的差异（P〈0．01），db／db小鼠的体重明显高于＋／db小鼠的体重；db／db小鼠的血糖较＋／db小鼠明显升高（P〈0．01），在19周时db／db小鼠的血糖、血肌酐达高峰，15周时血胰岛素达高峰。结论该小鼠在我科繁育成功，纯合仔表现出Ⅱ型糖尿病的特征，且高血糖已造成肾脏一定程度的损伤。     

C57BL／KsJ杂合仔小鼠的生物净化

目的应用腹宫产方法取得C57BL／KsJ仔鼠，用SPF级ICR小鼠代乳可达到生物净化。方法对妊娠20d左右的孕鼠在临产前进行剖宫手术再用SPF级ICR小鼠代乳，净化后的C57BL／KsJ杂合仔进行繁殖扩群，对后代进行微生物、寄生虫监测。结果剖腹净化的后代微生物、寄生虫检测符合清洁级国家标准，通过遗传繁殖测试，也符合该小鼠的生产繁殖规律。结论用SPF级ICR小鼠代乳净化C57BL／KsJ小鼠可以得到生物净化的目的，繁殖保持不变。     

饮食能量对Kkay及Kk小鼠2型糖尿病发病的影响

目的：观察饮食能量对Kkay及Kk小鼠2型糖尿病发病的影响。方法：16—20周龄Kkay小鼠、Kk小鼠和C57BL／6小鼠随机分两组，分别进行高能量饮食(A)和一般饮食喂养(B)，分别于试验0和4周观察随机血糖等；对另一组A饮食喂养后血糖正常Kkay鼠、Kk鼠和C57BL／6鼠进行了口服葡萄糖耐量(OGTT)试验；另经A饮食喂养4周后Kkay鼠、Kk鼠和C57BL／6鼠，进行B饮食喂养8周后，测随机血糖和体重。实验结束时留取胰腺标本。结果：三种鼠A饮食后体重都有增加，Kkay小鼠糖尿病发病数(6／8)高于Kk小鼠(3／8)。OGTT试验示，Kkay鼠的血糖曲线峰值高于正常，但没有出现明显延迟，Kk鼠的血糖曲线明显增高，而且出现反应延迟；OGTT试验在血糖正常的8只Kkay鼠发现3例(37．5％)糖尿病鼠、在7例Kk鼠发现5例(71．4％)。A饮食鼠限食8周后，体重均有明显降低，Kkay和Kk鼠血糖明显降低，而C57BL／6鼠血糖无明显变化。A饮食后。Kkay和Kk小鼠的胰岛体积明显增大，细胞增生、肥大，限食后胰岛体积有所减小，但仍明显大于正常。结论：高能量饮食可使Kkay和Kk小鼠的血糖和糖尿病发病率明显增加，可使胰岛体积明显增大，限食后血糖又明显降低，胰岛体积有所减小；Kkay和Kk小鼠对OGTT试验的反应异常，尤其是Kk小鼠。     

两种自发性2型糖尿病小鼠生物学特性比较

目的 分别以C57BL/6JSlac和C57BL/KsJ-db/+表型正常小鼠为对照组,比较自发性2型糖尿病KK-Ay/Ta和C57BL/KsJ-db/db小鼠的体生长曲线、糖代谢曲线、血清胰岛素水平、主要脏器重量、脏器系数等生物学特性的差异,并探讨其肾脏、肝脏和胰腺等组织病理学变化.方法 在各自实验周期内,每2周测定实验组和对照组小鼠的体重、血糖以及血清胰岛素水平,实验结束后处死,脏器、脂肪称重,部分组织制作病理切片.结果 (1)KK小鼠体重远高于db/db小鼠,且同品系间雄性小鼠重于雌性小鼠(P＜0.05);(2)同品系问雄性小鼠的血糖值明显大于雌性小鼠(P＜O.05),db/db小鼠出现血糖异常症状比KK小鼠早,且血糖值大于KK小鼠(P＜0.05),而KK小鼠血糖异常持续时间则较db/db小鼠长;(3)KK小鼠的血清胰岛素水平明显高于db/db小鼠(JP＜O.05),同品系雌雄小鼠间没有明显差异(P＞O.05);(4)雄性KK小鼠脂肪系数及部分脏器萎缩程度大于雌性,而db/db小鼠雌雄间则无明显差异(P＞O.05),同时db/db小鼠脾脏和胰腺的萎缩程度及脂肪系数大于KK小鼠(P＜O.05),而KK小鼠肝脏的萎缩程度则大于db/db小鼠;(5)糖尿病模型小鼠肾脏、肝脏以及胰腺组织均出现明显病变.结论 KK-Ay/Ta和C57BL/KsJ-db/db小鼠均是肥胖的,伴有高血糖、高度胰岛素抵抗,肝脏、肾脏病变和胰岛功能不足的适用性2型糖尿病动物模型,且db/dh小鼠血糖出现异常比KK小鼠早、脂肪系数大,而KK小鼠血糖异常持续时间较db/db小鼠长,同时血清胰岛素水平远大于db/db小鼠.     

脉冲电磁场调控SREBP-1c及氧化应激改善db/db小鼠肝脂肪变性研究

目的:探究脉冲电磁场(PEMF)改善db/db小鼠肝脏脂肪变性的潜在机制,以期为PEMF用于改善非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)提供实验依据。方法:通过C57BL/KsJ db/db小鼠构建NAFLD模型,随机分为PEMF组和NAFLD组,对照组由8只C57BL/KsJ小鼠组成。PEMF组每天施加外源性PEMF(20 Gs,1 h)刺激,持续12周,其他组不做任何处理。实验结束后检测空腹血糖、血清胰岛素,计算HOMA-IR;检测肝脏甘油三酯、丙二醛、还原性谷胱甘肽及氧化型谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化物酶;检测SREBP-1c蛋白表达量。结果:PEMF组胰岛素抵抗水平降低约25%;丙二醛及氧化型谷胱甘肽水平显著下降,而还原性谷胱甘肽与谷胱甘肽过氧化酶水平明显上升;SREBP-1c的蛋白表达量较NAFLD组减少约35%左右;脂滴数量和大小均显著降低;肝脏TG含量降低至(4.49±0.86) mmol/gprot。结论:PEMF通过调控SREBP-1c及氧化应激改善db/db小鼠肝脏脂肪变性。     

利拉鲁肽对单纯肥胖鼠和肥胖2型糖尿病鼠影响的差异研究

目的：观察利拉鲁肽对单纯肥胖鼠和肥胖2型糖尿病鼠体重、血糖、血清胰岛素、IR的影响以及差异。方法：将C57BL/6J鼠和db/db鼠随机分为C57干预组、C57未干预组、空白组和db干预组及db未干预组。对两C57组给予高脂饲料喂养建立单纯肥胖模型。建模后对两干组进行利拉鲁肽干预12周,每周测定各组体重、血糖,干预结束后检测各组血清胰岛素,计算HOMA-IR。结果：干预后两干预组体重下降,db干预组血糖降低。C57干预组胰岛素水平升高而db干预组降低,但两干预组HOMA-IR均下降。结论：利拉鲁肽在降低肥胖糖尿病鼠的血糖的同时可改善单纯肥胖鼠和肥胖糖尿病鼠的肥胖及IR,但对两小鼠的作用和机制不完全相同。     

KK-A^y/Ta小鼠的相关生物学特性测定

【摘要】目的对KK-A^y／Ta小鼠进行生物学特性研究。方法随机选取实验鼠配对繁殖,统计繁殖性状数据,并对其生长曲线、空腹血糖、随机血糖以及糖耐量进行测试。结果KK—A^y／Ta小鼠从3周龄开始体重迅速增加,显示中度肥胖和糖尿病症兆,随着年龄增大其血糖值逐步上升呈现中度高血糖趋势。结论KK-A^y／Ta小鼠是一种中度高血糖、高度胰岛素抵抗,胰岛功能不足且伴随肥胖的适用于Ⅱ型糖尿病研究的动物模型。     

白藜芦醇通过Mst1/Sirt3信号通路介导的细胞自噬改善糖尿病心肌损伤的机制研究

目的:观察白藜芦醇(Resveratrol)对2型糖尿病模型小鼠心肌细胞损伤及其对Mst1/Sirt3信号通路介导的细胞自噬的影响.方法:C57BL/KSJ db/db小鼠随机分为小鼠模型组、Resveratrol组及西药组,C57BL/KSJ db/m为空白对照组,每组10只.Resveratrol组和西药组分别给予...     

C57BL／6J亚系Nnt部分功能基因丢失的检测

目的介绍一种判定C57BL／6小鼠亚系中烟酰胺核苷酸转氢酶（Nnt）基因是否丢失的PCR检测方法。方法用PCR方法分别对5只购自杰克逊的C57BL／6J小鼠以及10只本公司C57BL／6背景的转基因小鼠基因组DNA进行扩增,对扩增产物进行分析。结果从杰克逊实验室购得的5只C57BL／6J小鼠基因组以及本公司抽取的3只C57BL／6小鼠Nnt部分功能基因丢失,本公司C57BL／6中有6只小鼠含有Nnt基因未丢失,另外还有1只小鼠为Nnt基因杂合小鼠。结论在选择C57BL／6作为代谢性实验的模型时,应考虑选择适当的亚系。     

生脉散对db／db小鼠心肌组织病理变化的影响

目的：探讨生脉散对糖尿病心肌病小鼠心肌组织病理变化的影响。方法：将8周龄db／db小鼠随机分为模型组和生脉组,另设背景系小鼠C57BLKS／J为正常组。生脉组给予4．5g·kg^-1·d^-1生脉散灌胃,干预24周后检测小鼠空腹血糖、体质量、心脏质量、血流动力学指标,并以HE染色及透射电镜观察心肌组织形态变化、Masson染色观察心肌组织胶原纤维。结果：与正常组比较,模型组db／db小鼠空腹血糖、体质量、心脏质量及心肌胶原容积分数（CVF）显著升高（P〈0．05）,左室内压最大下降速率（-dp／dt）明显下降（P〈0．05）;生脉组db／db小鼠心脏质量与CVF较模型组明显减轻（P〈0．05）,而-dp／dt较模型组明显增加（P〈0．05）。组织学检查显示,模型组db／db小鼠存在心肌细胞肥大、室壁增厚、间质纤维化、微血管病变及线粒体损伤,生脉组上述变化有一定程度的改善。结论：生脉散对db/db小鼠心肌损伤具有保护作用。     

高糖环境诱导胰岛表达p25引起胰岛细胞损伤的研究

目的探讨在高糖环境中p25的表达及其对胰岛细胞损伤及胰岛素分泌的影响。方法实验分为db/db小鼠组(糖尿病组,n=5)和C57/BL小鼠组(正常对照组,n=5),进一步将从C57/BL小鼠胰岛分离的胰岛细胞组分为正常糖浓度糖刺组(5m M)和高浓度糖刺激组(30m M)。研究对象均为雄性小鼠,鼠龄13周,进行胰岛(islets)分离,培养及胰腺组织病理切片。用免疫印迹测定蛋白表达,酶联免疫法测定胰岛素分泌水平,免疫组化染色测定胰岛细胞凋亡。结果 p25在C57/BL组和C57/BL正常糖浓度刺激组的胰岛细胞均无表达,与之比较,p25在db/db组和C57/BL高糖刺激组的胰岛细胞均有明显的表达(P<0.05);与C57/BL组相比较,cleaved caspase3在db/db组胰岛细胞中的表达明显增加(P<0.05);与C57/BL组和C57/BL正常糖浓度组相比较,胰岛素分泌在db/db组和C57/BL高糖刺激组均明显减少(P<0.05)。结论高糖环境可刺激胰岛表达p25,引起胰岛细胞凋亡,减少胰岛素分泌。     

选择P815作为DBA／2小鼠H-2抗原靶细胞

采用DBA／2和C57BL／6二组主要组织相容性复合体不相同的近交系小鼠，将DBA／2小鼠的淋巴细胞植入C57BL／6体内，分别选用P815和DBA／2小鼠的淋巴细胞作为靶细胞，应用抗体-补体介导细胞杀伤的免疫学方法，研究P815作为DBA／2小鼠H-2抗原靶细胞的可行性，实验结果显示．P815可以替代DBA／2小鼠的淋巴细胞作为靶细胞。     

CBA、C57BL/6bkl小鼠对脉冲性噪音损伤敏感性的研究

目的研究CBA、C57BL／6bkl小鼠对脉冲性噪音损伤的敏感性。方法小鼠共分为8组，第1、2、3组为CBA小鼠（n分别为9、10、10）分别给予160 dB SPL 50、100、150次脉冲噪音暴露，第4、5、6组为C57BL／6bkl小鼠（n皆为10），分别给予160dB SPL 50、100、150次脉冲噪音暴露，第7、8组为CBA和C57BL／6bkl小鼠对照组（n=10），无噪音暴露。在噪音暴露前、噪音后24h及28d测听觉脑干诱发电位。结果给予160 dB SPL 50次脉冲噪音暴露后，CBA只出现暂时性阈值漂移，C57BL／6bkl出现暂时性和永久的阈值漂移，给予160 dB 100次和150次脉冲噪音暴露后，CBA和C57BL／6bkl均出现暂时性和永久性阈值漂移。对照组无阈值漂移。结论C57BL／6bkl小鼠对脉冲性噪音更敏感。耳蜗铺片形态学亦支持上述结论。     

2型糖尿病模型db/db小鼠胰岛B细胞超微结构观察

目的:观察2型糖尿病动物模型-C57BL/KsJ(db/db)小鼠的胰岛B细胞超微结构变化,探讨B细胞的病理改变在2型糖尿病发病中的作用.方法:分别选取3月、5月和8月龄尾静脉空腹血糖高于11.1 mmol/L,且肥胖的db/db自发性糖尿病小鼠,每组5只作为糖尿病组;选取相应年龄段尾静脉空腹血糖低于6.0 mmol/L,体重正常的db/ m表型正常小鼠,每组5只作为对照组.于相应年龄段取胰尾,透射电镜观察胰岛B细胞超微结构.结果:B细胞胞浆内的分泌颗粒数量明显减少,有的细胞甚至缺如,致密芯电子密度降低;线粒体数量减少,肿胀变形,粗面内质网不同程度扩张脱颗粒;细胞核不规则,染色质边集浓染;细胞间髓样小体增多,其严重程度随病情进展逐渐加重.结论:2型糖尿病动物模型db/db小鼠胰岛B细胞存在超微结构的病理改变,严重程度与病情的轻重有关,B细胞功能上的缺陷可能是2型糖尿病的一个重要因素.     

胃袖状切除术改善2 型糖尿病小鼠脂肪组织胰岛素抵抗机制研究

目的 探讨胃袖状切除术（SG）对2 型糖尿病小鼠脂肪组织微囊蛋白1（caveolin -1）表达及胰岛素抵抗的影响。方法 实验于2015 年1 ～ 6 月在中国医科大学附属盛京医院中心实验室进行。选择30只肥胖2 型糖尿病小鼠（+db/+db,C57BL/KsJ）为研究对象,按体重随机等分为3 组：db/db 组（无处理）、db/db-SG 组（行SG）、db/db-sham 组（假手术）,每组10 只。术前3 d 和术后7、14、21 及28 d 测定动物体重及每100 g 体重摄食量。术前5 d 和术后30 d,测定小鼠空腹血糖（FBG）及口服葡萄糖耐量（OGTT）,ELISA 检测血浆胰岛素、三酰甘油（TG）、胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）;Western blot 和实时聚合酶链反应（Real-time PCR）检测内脏脂肪组织caveolin-1、GLUT4 蛋白及mRNA 表达。结果 db/db-SG组小鼠术后体重、摄食量、空腹血糖、OGTT 曲线下面积、胰岛素抵抗指数与db/db 组及db/db-sham 组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,db/db-SG 组小鼠术后体重及摄食量降低,空腹血糖下降,OGTT 曲线下面积减少,胰岛素抵抗指数下降;db/db-SG 组血清TG、TC、LDL 水平与db/db 组及db/db-sham 组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,db/db-SG 组小鼠下降;db/db-SG 组小鼠脂肪组织caveolin-1、GLUT4 蛋白和mRNA 表达与db/db 组及db/db-sham 组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,均升高。结论 SG 可在术后短期内有效降低2 型糖尿病小鼠体重及摄食量,降低TG、TC,改善胰岛素抵抗,可能与脂肪组织caveolin-1及GLUT4 水平下降有关。     

不同剂量GA对BALB／c和C57BL／6小鼠创伤耐受能力的影响

目的观察BALB／c和C57BL／6两品系小鼠的创伤耐受能力差异与热休克蛋白90（HSP90）的关系。方法观察在正常情况下和给予HSP90特异阻断剂格尔德霉素（geldanamycin，GA）后，二品系小鼠在全身冲击伤（whole-body blast injury，WBBI）时的整体死亡率和大体变化。结果WBBI后，C57BL／6小鼠的总体死亡率低于BALB／c小鼠（P〈0．05），GA处理后C57BL／6小鼠的总体死亡率无明显变化，而BALB／c小鼠总体死亡率随GA剂量增加而增大（P〈0．05）。结论两品系小鼠的HSP90对GA敏感性不同提示HSP90的差异可能是C57BL／6小鼠具有较强的创伤耐受能力的重要原因。     

载脂蛋白E基因缺陷对小鼠主动脉壁caveolin-1表达的影响

目的探讨高脂喂养的C57BL／6J小鼠和普饲喂养的apoE基因缺陷(apoE-／-)小鼠(品系为C57BL／6J)caveolin-1表达的差异。方法取apoE-／-小鼠作为研究对象，以普饲和高脂喂养的C57BL／6J小鼠为对照组，测定各组小鼠血脂和主动脉壁斑块的变化，Western—blotting检测caveolin-1在主动脉的表达。结果普饲喂养的apoE-／-组和高脂喂养的C57BL／6J组血脂水平较普饲喂养的C57BL／6J组明显升高；普饲喂养的apoE-／-组的主动脉形成明显的斑块，高脂喂养C57BL／6J组没有形成斑块，但血管壁平滑肌细胞出现增殖，普饲喂养的C57BL／6J组未见明显变化。Wester—blotting检测显示普饲喂养的apoE-／-小鼠和高脂喂养的C57BL／6J小鼠caveolin-1的表达与普饲喂养的C57BL／6J小鼠比较明显减弱。结论血管壁caveolin-1的表达下调可能是apoE-／-小鼠动脉粥样硬化形成的重要原因。     

麦冬多糖MDG-1对糖尿病小鼠模型的降糖作用

目的:观察麦冬多糖MDG-1对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠的降糖作用。方法:①将雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组,MDG-1高、中、低剂量给药组,二甲双胍组,考察药物对正常雄性C57BL/6小鼠空腹血糖的影响。②将雄性C57BL/6小鼠随机分为模型对照组,MDG-1高、中、低剂量给药组,二甲双胍组,采用腹腔注射STZ联合高脂饲料诱导复制2型糖尿病小鼠模型,药物干预后测定随机和空腹血糖、口服糖耐量和血清胰岛素水平。结果:各剂量组MDG-1对正常小鼠空腹血糖无影响,对糖尿病小鼠体质量有轻微降低作用;300 mg/kgMDG-1对糖尿病小鼠的随机血糖和空腹血糖均有显著降低效果,并可改善小鼠口服糖耐量和血清胰岛素水平。结论:MDG-1可降低由STZ诱导得到的糖尿病小鼠血糖,并对改善其胰岛素抵抗有一定作用。