阴沟肠杆菌等细菌超广谱β-内酰胺酶检测的探讨

目的检测肠杆菌科细菌中除肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌、大肠埃希菌以外的其它细菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),以了解其检出情况和耐药性.方法采用VITEK ESBLs检测系统和双纸片协同试验同时进行ESBLs的实验.结果280株细菌中,用VITEK506卡检出ESBLs菌96株,其中大肠埃希菌34.5%,肺炎克雷伯菌43.1%,阴沟肠杆菌35.4%,产气肠杆菌25%,费劳地枸橼酸杆菌37.5%.用双纸片协同实验检出91株,检出率略低.在沙雷菌、变形杆菌、摩根菌中未检出ESBLs菌.对头孢西丁药敏试验中,产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌高度敏感,而其余细菌表现耐药.结论对大肠埃希菌,肺炎克雷伯菌可以用VITEK系统和双纸片协同试验作常规ESBLs的试验,而对肠杆菌科中其余的细菌是否可参照应用尚需研究.     

双纸片协同法与GNS—506卡法检测超广谱β—内酰胺酶比较

目的：比较双纸片协同法与法国生物酶里埃公司VTEK GNS－506药敏分析卡法对肠杆菌科细菌所产超广谱β-内酰胺酶（Extended-spectrum β-Lactamases,ESBLs）的实用性。方法：以头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南为指示底物的双纸片协同法和GNS－506卡法同时检测临床分离的125株肠杆菌科细菌的ESBLs的产生情况。结果：从125株肠杆菌科细菌中用双纸片协同法出49株ESBLs阳性;用GNS－506卡法只从95株大肠埃希菌和克雷伯菌属（肺炎克轩伯菌与产酸克雷伯菌）中检出38株ESBLs阳性,两种方法对大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBLs的检测结果X^2检验,P＞0．05,结果无显著差异,结论双纸片协同法检测ESBLs操作方便,结果可靠,成本低,检测范围广,在已具备VITEK系统的实验室可作为GNS－506卡法的监测和补充,在一般的实验室适合常规应用。     

双纸片协同法与GNS-506卡法检测超广谱β-内酰胺酶比较

目的比较双纸片协同法与法国生物梅里埃公司VITEK GNS-506药敏分析卡法对肠杆菌科细菌所产超广谱β-内酰酶(Extended-spectrum β-Lactamases,ESBLs)的实用性.方法以头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南为指示底物的双纸片协同法和GNS-506卡法同时检测临床分离的125株肠杆菌科细菌的ESBLs产生情况.结果从125株肠杆菌科细菌中用双纸片协同法出49株ESBLs阳性;用GNS-506卡法只从95株大肠埃希菌和克雷伯菌属(肺炎克雷伯菌与产酸克雷伯菌)中检出38株ESBLs阳性.两种方法对大肠埃希菌和克雷伯菌属产ESBLs的检测结果x2检验,P＞0.05,结果无显著差异.结论双纸片协同法检测ESBLs操作方便,结果可靠,成本低,检测范围广,在已具备VITEK系统的实验室可作为GNS-506卡法的监测和补充.在一般的实验室适合常规应用.     

产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的检测

目的研究大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药谱。方法收集2002年8月至2003年6月间从嘉善县第一人民医院分离的167株大肠埃希菌、154株肺炎克雷伯菌和67株阴沟肠杆菌，用头孢噻肟或头孢他啶药敏纸片筛选产ESBLs可疑株；用头孢噻肟和头孢噻肟加克拉维酸或头孢他啶和头孢他啶加克拉维酸双纸片扩散法检测ESBLs；采用K-B法进行药敏试验。结果符合CTX筛选标准的有158株，符合CAZ筛选标准的有94株，两者都符合的有76株，共176株产ESBLs可疑株。CTX和CTV／CA双纸片检出115株阳性，CAZ和CAZ／CA双纸片检出62株阳性，两种双纸片法都为阳性的有51株，共检出126株产ESBLs菌株。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的ESBLs检出率分别为30%（50／167）、34％（52／156）和36％（24／67）。产ESBLs株对氨苄西林、阿齐霉素和克林霉素的耐药率近乎100％，对阿米卡星、环丙沙星和呋喃妥因的耐药相对较低，除2株产ESBLs肺炎克雷伯菌耐亚胺培南外，其余均为敏感。结论大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的产ESBLs率较高，耐药性严重。筛选产ESBLs可疑株的最佳纸片为CTX，表型确证产ESBLs菌株的最佳双纸片为CTX和CTX／CA，阴沟肠杆菌的产ESBLs率超过肺炎克伯菌成为主要产ESBLs菌。     

三种方法检测超广谱β—内酰胺酶的结果评价

目的：评价VITEK－AMS专用药敏卡检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs)的可靠性。同时比较纸片扩散筛选法、双纸片协同法检测ESBLs的临床应用价值。方法：以纸片扩散确证法为标准,用VITEK－AMS、纸片扩散筛选法、双纸片协同法检测大肠埃希 肺炎克雷伯菌产ESBLs情况。结果：仪器检测为阳性的73株大肠矣希菌和24株肺炎克雷伯菌,用纸片扩散确证法、纸片协同法、纸片扩散筛选法检测也均为阳性。仪器检测为阴性的131株大肠埃希菌和46株肺炎克雷伯菌,用三种方法分别检出一定数量的阳性株。结论：仪器检测ESBLs易造成假阴性,纸片扩散筛法会造成假阳性,而双纸片协同法由于同时用四种底物检测,其敏感性、特异性均较理想、适合临床应用。     

VITEK—自动微生物鉴定仪检测超广谱β—内酰胺酶的结果评价

目的 评价VITEK－自动微生物鉴定仪（AMS）专用药敏卡检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs)的可靠性。方法 同时用纸片扩散确证法和VITEK－AMS专用药敏卡GNS－506对临床分离的204株大埃希菌和70株肺炎克雷伯菌进行ESBLs检测。结果 纸片扩散确证法检测为ESBLs阳性的97株大肠埃希菌和28株肺炎克雷伯菌,用VITEK－AMS检测分别检出ESBLs阳性株73株和24株。确证为ESBLs阴性107株大肠埃希菌和42株肺炎克雷伯菌,用VITEK－AMS检测也均为阴性。结论 VITEK－AMS检测ESBLs虽然特异性好,但灵敏度低,易造成漏检。     

产ESBLs细菌在我地区流行状况及耐药性

目的：了解本地区2000年－2001年产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌流行状况，为临床经验用药提供更合理的选择抗生素药物依据。方法：收集我院2000年－2001年各科室送检标本中分离的肺炎克雷伯菌568株，大肠埃希菌649株；选用双纸片协同试验及表型确证试验检测，结果：ESBLs检出，大肠埃希菌164株，肺炎克雷伯菌214株，分离率分别为25．2％和37．6％，总分离率为31％，产ESBLs细菌对抗生素的耐药性比非产ESBLs细菌有不同程度增加，但亚胺培南对所有产ESBLs细菌的是敏感的，结论：我院地处黑龙江中心地区，省内各市县危重患一般都送我院进行治疗，我院耐药率基本代表黑龙江省的耐药率，在ESBLs检测中，肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌分离率最高，产ESBLs细菌对18种抗生素耐药比率不产ESBLs高，并出现多重耐药，所有菌株对亚胺培南均敏感。     

产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的检测

目的研究大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶情况及耐药谱.方法收集2002年8月至2003年6月间从嘉善县第一人民医院分离的167株大肠埃希菌、154株肺炎克雷伯菌和67株阴沟肠杆菌,用头孢噻肟或头孢他啶药敏纸片筛选产ESBLs可疑株;用头孢噻肟和头孢噻肟加克拉维酸或头孢他啶和头孢他啶加克拉维酸双纸片扩散法检测ESBLs;采用K-B法进行药敏试验.结果符合CTX筛选标准的有158株,符合CAZ筛选标准的有94株,两者都符合的有76株,共176株产ESBLs可疑株.CTX和CTV/CA双纸片检出115株阳性,CAZ和CAZ/CA双纸片检出62株阳性,两种双纸片法都为阳性的有51株,共检出126株产ESBLs菌株.大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的ESBLs检出率分别为30%(50/167)、34%(52/156)和36%(24/67).产ESBLs株对氨苄西林、阿齐霉素和克林霉素的耐药率近乎100%,对阿米卡星、环丙沙星和呋喃妥因的耐药相对较低,除2株产ESBLs肺炎克雷伯菌耐亚胺培南外,其余均为敏感.结论大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和阴沟肠杆菌的产ESBLs率较高,耐药性严重.筛选产ESBLs可疑株的最佳纸片为CTX,表型确证产ESBLs菌株的最佳双纸片为CTX和CTX/CA.阴沟肠杆菌的产ESBLs率超过肺炎克伯菌成为主要产ESBLs菌.     

细菌产超广谱β内酰胺酶的调查及耐药监测

目的：监测产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)菌株的现状，指导临床合理用药。方法：从本院2002年3月-2002年10月各临床标本中分离的大肠埃希菌115株及肺炎克雷伯菌49株，用双纸片法初筛和纸片扩散法确证试验检测ESBLs；用琼脂扩散法作药敏实验。结果：总检测菌株164株，共检出ESBLs阳性株50株，总阳性率为30．5％，其中大肠埃希菌为29．6％，肺炎克雷伯菌为32．7％，产ESBLs菌株对亚胺培南未发现耐药，对头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-三唑巴坦以及头孢西丁耐药率较低。结论：本组中大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌产ESBLs高达30．5％，且阳性株对抗生素的耐药性严重，医生应重视ESBLs的检测报告，在临床上合理应用抗生素，有效地控制ESBLs菌株在医院内的扩散。     

产超广谱β内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌耐药性检测

【目的】了解临床分离肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌超广谱β内酰胺酶（ESBLs）产生情况及耐药性。【方法】用VITEK32型全自动细菌鉴定分析系统对临床标本中分离的123株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌进行鉴定，ESBLs采用双纸片扩散法检测，采用KB纸片法选用13种抗菌药物进行药敏分析。【结果】产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌检出率分别为46．2％和40．5％，以呼吸道感染为主占50％。产ESBLs菌对多种抗生素的耐药性较非产酶株显著升高，对β一内酰胺类喹诺酮类和青霉素类抗生素几乎全部耐药，但对亚胺培南的敏感性为100％，对头孢西丁的敏感率〉60％。【结论】治疗产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌首选是碳青霉烯类和头霉素类；应重视ESBLs的检测，合理使用抗生素。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测和耐药性分析

目的了解大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的耐药特性,指导临床合理使用抗菌药物。方法采用法国生物梅里埃ATB细菌鉴定仪对218株大肠埃希菌和235株肺炎克雷伯菌进行检测,用纸片扩散法(K-B)及美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的双纸片协同试验确认,并对药敏结果进行分析。结果 218株大肠埃希菌中检出产ESBLs大肠埃希菌97株,检出率为44.5%;235株肺炎克雷伯菌中检出产ESBLs肺炎克雷伯菌75株,检出率为31.9%。结论产ESBLs菌株是目前县级医院临床常见致病菌,成为主要耐药菌株,而且耐药谱广。应加强临床合理使用抗菌药物的管理,严防耐药菌株引起医院感染和流行。     

下呼吸道感染细菌产AmpC酶和超广谱β内酰胺酶的检测

目的：了解临床下呼吸道感染标本常见革兰阴性杆菌分离株中AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的检出情况。方法：通过酶提取物三维试验检测单产AmpC酶、同时产AmpC酶和ESBLs菌株；采用美国国家临床实验室标准委员会(NC—CLS)表型筛选和确认试验检测单产ESBLs菌株。结果：从临床下呼吸道标本分离对第一、二代及一种以上第三代头孢菌素耐药的226株常见革兰阴性杆菌，包括阴沟肠杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中，分别检出单产AmpC酶、同时产AmpC酶和ESBLs及单产ESBLs细菌34株、15株、109株，总检出率分别为15．0％、6．6％、48．2％。AmpC酶检出率在阴沟肠杆菌中最高，为57．9％；ESBLs检出率以肺炎克雷伯菌最高，其次为大肠埃希菌，分别为78．5％、77．8％。结论：下呼吸道产AmpC酶和ESBLs细胞感染常见，前以阴沟肠杆菌为主，后多见于肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌。     

我院对产超广谱β-内酰胺酶细菌的表型监测和耐药性分析

目的：监测分析2004年9月～2005年12月广东省中医院临床标本中分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs的状况及其耐药性，为临床的合理用药提供依据。方法：用美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐的确证实验进行ESBLs的检测，用纸片扩散法进行药敏分析。结果：从152株大肠埃希菌中检出ESBLs阳性65株（42．76％），从105株肺炎克雷伯菌检出ESBLs阳性41株（39．05％），产ESBLs株对亚胺培南，哌拉西林／他唑巴坦等药的敏感率较高。结论：我院分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs的状况较高，临床应该是在药敏试验的基础上针对具体的菌株和病人症状，选用亚胺培南，哌拉西林／他唑巴坦等药物进行治疗。     

常规筛查产超广谱β-内酰胺酶细菌及耐药性分析

[目的]在常规药敏试验中筛查产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌，了解其耐药性，为临床提供参考。[方法]采用纸片扩散法，双纸片协同法，检测587株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶阳性率，并对其体外抗生素耐药性作了初步研究。[结果]产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌总阳性率为24．7％。219株肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株66株，阳性率30．1％；368株大肠埃希菌中产ESBLs菌株79株，阳性率21．5％。ESBLs产酶株对头孢噻肟，头孢曲松，头孢他啶的耐药性高达86．4％-100．0％，较不产ESBLs菌株高74．6％-83．1％。所有受试菌对亚胺培南均敏感。[结论]治疗ESBLs细菌引起的感染，应用碳烯霉类，头霉烯类或加酶抑制剂的抗生素。     

三种方法检测超广谱β-内酰胺酶的结果评价

目的评价VITEK-AMS专用药敏卡检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的可靠性.同时比较纸片扩散筛选法、双纸片协同法检测ESBLs的临床应用价值.方法以纸片扩散确证法为标准,用VITEK-AMS、纸片扩散筛选法、双纸片协同法检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs情况.结果仪器检测为阳性的73株大肠埃希菌和24株肺炎克雷伯菌,用纸片扩散确证法、纸片协同法、纸片扩散筛选法检测也均为阳性.仪器检测为阴性的131株大肠埃希菌和46株肺炎克雷伯菌,用三种方法分别检出一定数量的阳性株.结论仪器检测ESBLs易造成假阴性,纸片扩散筛选法会造成假阳性.而双纸片协同法由于同时用四种底物检测,其敏感性、特异性均较理想,适合临床应用.     

产超广谱β-内酰胺酶细菌的耐药性研究

目的 了解我院产超广谱β-内酰胺酶(ESBIs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对临床常用抗菌药物的耐药情况,为临床治疗和控制ESBLs菌的感染提供依据.方法 采用VITEK全自动微生物分析仪进行细菌鉴定,KB纸片法测定11种抗菌药物的药敏,双纸片协同法检测ESBLs.结果 从2005年1月-2005年12月住院患者送检的标本中分离出大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌704株,其中大肠埃希菌282株,肺炎克雷伯菌422株.产ESBLs菌357株,非产ESBLs菌347株,总检出率为50.7%(357/704),其中产ESBLs肺炎克雷伯杆菌211株,检出率为50.0%(211/422),产ESBLs大肠埃希菌146株,检出率为51.77%(146/282).产ESBLs菌与非产ESBLs菌对亚胺培南100%敏感,除大肠埃希菌对哌拉西林胞唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦外,产ESBLs细菌对其他9种抗菌药物的耐药率均明显高于非产ESBLs细菌(P＜0.0236-P＜0.005之间).结论 产ESBLs菌对常用抗菌药物耐药率较高,碳烯霉烯类是治疗产ESBLs菌严重感染的首选药物.     

纸片双抑制剂平行抑制试验有效分析阴沟肠杆菌产超广谱β内酰胺酶

目的 建立一种能快速有效分析阴沟肠杆菌是否产生超广谱β内酰胺酶（ESBLs）的方法。方法 质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922、肺炎克雷伯菌ATCC700603、阴沟肠杆菌029、阴沟肠杆菌029M和阴沟肠杆菌1194E。用纸片双抑制剂平行抑制试验（DDIST）、临床和实验标准协A／美国临床实验标准化委员会（CLSI／NCCLS）推荐的用于检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌ESBLs的纸片法和E-试验MIC法对本院连续的不重复的58株阴沟肠杆菌临床菌株进行ESBLs分析，用一系列ESBLs特异引物对其中27株耐头孢他啶或头孢噻肟的菌株进行扩增，以验证上述各种方法的准确性。结果PCR法从20／27株阴沟肠杆菌中扩增到ESBLs基因，DDIST法检出20株ESBLs产株，CISI／NCCIS法仅检出4株，E-试验MIC法检出0株。结论纸片双抑制剂平行抑制试验是一种能快速有效分析阴沟肠杆菌超广谱β内酰胺酶的方法。     

安徽淮北地区超广谱β-内酰胺酶细菌表型检测的底物选择

目的了解淮北地区产超广谱β-内酰胺酶细菌的表型分布及检测的最佳底物选择。方法用1999年NCCLS推荐的标准,采用纸片扩散法从147株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中筛选出可疑产ESBLs细菌,并用确证试验加以确认。结果116株大肠埃希菌和31株肺炎克雷伯菌中共检出69株产ESBLs细菌(46.9%),将初筛得到的可疑菌株用纸片扩散法进行确证试验,头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定,检出69株产ESBLs细菌,而用头孢他啶和头孢他啶/克拉维酸检测ESBLs阳性菌为32株。结论淮北地区进行ESBLs细菌检测时,应选择头孢噻肟和头孢曲松作为初筛试验的底物,选择头孢噻肟和头孢噻肟/克拉维酸测定作为确证试验的底物。     

临床分离16株耐碳青酶烯类肠杆菌科细菌耐药机制初步研究

目的了解佛山市第一人民医院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌耐药情况和耐药机制。方法 2013年1月至2015年12月收集16株耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌,其中大肠埃希菌11株,肺炎克雷伯菌4株,产酸克雷伯菌1株。利用VITEK2-compact微生物分析系统进行细菌鉴定及药敏试验。采用改良Hodges和MEM(美罗培南)-EDTA(乙二胺四乙酸)-Na2双纸片协同试验进行耐药表型筛选。采用PCR法检测耐药基因blaIMP、blaKPC、blaNDM、blaVIM、blaOXA-48。结果 16株细菌对亚胺培南、美罗培南均耐药。16株细菌Hodges均阳性,15株双纸片协同试验阳性。在11株大肠埃希菌,9株携带blaNDM-5,2株携带blaNDM-1。4株肺炎克雷伯菌携带blaNDM-5,1株产酸克雷伯菌携带blaKPC-2。结论我院耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌耐药机制以产blaNDM-5碳青霉烯酶为主。     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的了解并分析产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检出率及其耐药性,为临床合理用药提供依据。方法纸片琼脂扩散法做药敏试验,双纸片协同扩散法检测ESBLs,结果依据美国临床实验室标准化委员会相关文件进行判断。结果116株大肠埃希菌检出产ESBLs菌43株,检出率为37．1％;82株肺炎克雷伯菌检出ESBLs菌30株,检出率为36．6％。产ESBLs菌对多种抗生素的耐药率明显高于非产ESBLs菌,差异有统计学意义（P〈0．005）,对亚胺培南全部敏感。结论大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs严重,产酶菌株耐药率很高。合理使用抗感染药物是防止ESBLs产生的重要措施。