2种超广谱β-内酰胺酶测定方法与确诊试验的比较

随着对质粒介导的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)研究的深入,人们认识到检测ESBLs的重要性,但这些产ESBLs菌株往往不能用常规药物敏感试验来区别,以至于延误了临床治疗,或造成地区的流行.ESBLs检测分筛选和确诊2个层次.我们通过双纸片协同试验、E-test和纸片确诊试验对ESBLs的测定作一探讨.     

用Vitek-ESBL试验检测超广谱β-内酰胺酶的建议

目的 观察Vitek药敏试卡检测ESBL（超广谱β－丙酰胺酶）的准确性，探讨能弥补其不足的检测方法。方法 用Vitek-GNS-NT卡（试卡法）和纸片扩散法（扩散法），对从临床标本中分离的268株大肠埃菌和208株克雷伯菌属细菌进行ESBL检测，对结果存在差异的菌株再用琼脂稀释法（稀释法）检测，并增加2种其他参考方法。结果 476被检测菌中，有18株菌试卡法与扩散法和稀释法有差异。其中有15株菌试卡法检测ESBL阴性，扩散法和稀释法检测ESBL阳性，特点为，加棒酸（CA）的复合药物比单药的MIC虽降低3个以上对倍稀释度，但未降至0．μg/ml。有2株菌试卡法和稀释法ESBL阴性，扩散法可疑阳性；有1株菌试卡法ESBL阳性，扩散法和稀释法阴性。参考方法显示，除了试卡法单独阳性的那株菌外，其他17株菌都为既产ESBL又产AmpC酶的菌株。结论 用试卡法检测ESBL，可检出大多数产ESBL的细菌，但对同时产AmpC等其他高活性酶的菌株，会造成ESBL检测的假阴性。补救措施为：试卡法结果一代头孢耐药，而ESBL阴性的那部分菌，将Labreport（实验报告）窗调至Rawdatereport（原始资料报告）窗，观察CTX（头孢噻肟）、CTX／CA和CAZ（头孢他啶）、CAZ／CA孔的A值，只要其中有一对A值同时下降40％左右，宜采用纸片法重复ESBL的检测。     

对产超广谱β—内酰胺酶细菌的三年监测分析

目的：对1998－2000年超广谱β－内酰胺酶（ESBLs)阳性细菌进行检测，并对其耐药情况作分析。方法：采用该酶确证试验。结果：1998年阳性率为13．4％，1999年为18．5％，2000年为25．1％，结论：超广谱β－内酰胺酶阳性细菌呈逐年上升的趋势，阳性菌对第三代头孢菌素和单环类抗生素耐药。     

质粒介导的超广谱β-内酰胺酶的检测

由于 β 内酰胺酶 (ESBLs)类抗生素的广泛应用 ,耐药菌株不断增加 ,因此我们开展了超广谱 β 内酰胺酶的检测 ,现报道如下。1　材料与方法1.1　标本来源　分离菌株为我院检验科 2 0 0 0年 1至 2月血、中段尿、痰、脓汁标本。1.2　培养基　Mueller Hinton琼脂。1.3　药敏纸片　北京天坛生物技术公司提供。1.4　接种　按标准片法的规定进行[1] 。初筛试验 :将菌液涂布于M N琼脂平板上贴上药敏试纸 ,头孢泊肟 10 μg或头孢他啶 30 μg或氨曲南 30 μg或头孢曲松 30 μg或头孢噻肟 30 μg(使用一种以上的药物进行筛选将会提高检测的灵敏度 )…     

超广谱β—内酰胺酶的两种实验室检测方法比较

医院实验室多数采用双纸片协同试验检测超广谱 β -内酰胺酶 (ＥＳＢＬｓ) ,而ＮＣＣＬＳ推荐双纸片增效试验为ＥＳＢＬｓ的确证试验。我们根据ＮＣＣＬＳ推荐的纸片扩散法筛出可疑产ＥＳＢＬｓ的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌 ,再用双纸片协同试验与双纸片增效试验方法进行测试 ,结果分析如下。1　材料与方法1 1　菌株　我院 1999年 10月～ 2 0 0 0年 1月从临床各类标本中分离鉴定出的Ｅ ｃｏｌｉ(大肠埃希菌 )和Ｋ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ(肺炎克雷伯菌 ) ,根据ＮＣＣＬＳ 1999年版推荐的纸片扩散法 ,头孢噻肟 (ＣＴＸ)≤ 2 7ｍｍ、头孢他啶 (Ｃ…     

两种方法提取超广谱β—内酰胺酶的比较

目的 比较两种方法提取超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）的可靠性。方法 分别用ＥＤＴＡ／溶菌酶法和超声波粉碎法对１０株产ＥＳＢＬｓ的大肠埃菌进行酶的提取,以头孢噻肟为底物,用紫外分光光度计进行酶活性的测定。结论 超声波粉碎法是有效的提取ＥＳＢＬｓ的方法,其效果明显优于ＥＤＴＡ／溶菌酶法。     

三种方法检测超广谱β—内酰胺酶的结果比较

比较三种文坛法检测广州地区１２家医院临床分离的大肠埃希菌和克雷伯各产超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）敏感性,用纸片扩散初筛法,初筛出１６７株可疑产ＥＳＢＬｓ的菌株,然后进行纸片扩散确证法,双纸片协同法和浓度梯度法（Ｅｔｅｓｔ法）,结果有１４７株菌产ＥＳＢＬｓ（３２％大肠埃希菌的４２．６％克雷伯菌属ＥＳＢＬｓ菌性）,纸片扩散确下法和双纸片协同法检出率相似,但双纸片协同法的缺点的纸片中心间距不好控制,ＥｔｅｓｔＥＳＢＬ初筛试条检测ＥＳＢＬｓ有一定局限性,纸片扩散确证法适合临床常规测定。     

肠杆菌科细菌超广谱β—内酰胺酶的检测

为了解临床分离菌株超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬ）的产生情况及不同的方法、不同指示剂的敏感性,我们对收集的肠杆菌科细菌１９５株进行研究。     

克拉维酸和舒巴坦两种酶抑制剂检测超广谱β—内酰胺酶的比较

为了比较克拉维酸和舒巴坦两种酶抑制检测超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬ）的差异。采用纸片扩散法检测了３０７株４种革兰阴性杆菌。两种酶抑制剂对大志埃希菌检测结果一致；肺炎克雷伯菌两种酶抑制剂共同检出８株，各单独检出２株；铜绿假单胞菌共同检出６株，克拉维酸单独检出１株，舒巴坦单独检出７株；鲍曼不动杆菌共同检出７株，舒巴坦单独检出１７株，克拉维酸单独未检出。底物的轮廓（ｓｕｂｓｔｒａｔｅ ｐｒｏｆｉｌｅ）对     

超广谱β内酰胺酶的分类

革兰阴性杆菌引起的严重感染是临床上造成病人死亡的主要原因之一,治疗这类感染的主要抗菌药物是第三代头孢菌素和单环β内酰胺类抗生素.随着这两类药物的开发和使用日益增多 ,细菌耐药率逐年增加,其主要耐药机制是细菌产生一类新的β内酰胺酶,由于这类酶能水解的抗生素比广谱β内酰胺酶多,故称之为超广谱β内酰胺酶( ESBLs).现将近年来有关ESBLs分类的研究进展综述如下 .     

大肠埃希菌超广谱β—内酰胺酶的检测及药敏分析

目的：了解本地区大肠埃希菌超广谱β－内酰胺酶（ESBLs)的耐药情况。以利于对产ESBLs菌的监控和治疗。方法：对本院分离出273株大肠埃希菌进行了ESBLs检测和对17种抗生素的耐药性测定。ESBLs检测采用VTIEK32全自动微生物分析仪,药敏试验采用K－B法。结果：273株大肠埃希菌中有53株产ESBLs,检出率为19．41％。结论：产ESBLs大肠埃希菌不容忽视,而对产ESBLs大肠埃希菌感染的治疗,亚胺培南应考虑作为首选的药物。     

66株阴沟肠杆菌超广谱β—内酰胺酶的检测

我们从 6 6株阴沟肠杆菌检出产超广谱 β 内酰胺酶 (ＥＳ ＢＬ) 8株 ,并对头孢噻肟、泰能等 8种抗生素作药敏试验 ,报告如下。1　材料与方法1.1　菌株　 6 6株阴沟肠杆菌从我院临床送检的 875份标本中分离得到 ,常规分离按《全国临床检验操作规程》 ,采用ＡＰＩ2 0Ｅ系统手工法鉴定。1.2　药敏纸片　头孢他啶 (ＣＡＺ) ,头孢他啶 /棒酸 ;头孢噻肟(ＣＴＸ) ,头孢噻肟 /棒酸 ,泰能安灭菌均为Ｏｘｏｉｄ产品。质控菌株ＡＴＣＣ 2 5 92 2大肠埃希菌及ＡＴＣＣ 70 0 6 0 3肺炎克雷伯菌。1.3　方法　药敏试验Ｋ Ｂ法。ＥＳＢＬ的检测程序为纸片扩…     

合肥地区超广谱β—内酰胺酶菌株的分布及药敏分析

超广谱 β 内酰胺酶 (ＥＳＢＬｓ)主要由肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌等肠杆菌科细菌产生 ,能水解三代头孢和氨曲南等抗生素 ,其耐药性可在细菌间传播 ,造成严重的耐药问题。另外 ,各地区产ＥＳＢＬｓ菌株的流行情况也存在着一定程度的差异[1 ] 。为了解合肥地区产ＥＳＢＬｓ菌株的发生率和耐药特征 ,以控制其传播和流行 ,我们对合肥地区近年来从临床标本分离的 2 5 4株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌进行了ＥＳＢＬｓ的检测 ,并对其进行药敏分析。材料与方法一、材料1 .菌株来源　 2 5 4株细菌来自 1 999年 5月至2 0 0 0年 7月间的各种临床标本 ,其…     

仪器法与纸片协同法检测超广谱β—内酰胺酶的结果比较

目的 了解ＶＩＴＥＫ－ＡＭＳ检测大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）的可靠性,并调查本院这两种菌的产ＥＳＢＬｓ情况。方法 用ＶＩＴＥＫ－ＡＭＳ专用药敏卡ＧＮＳ－５０６进行ＥＳＢＬｓ检测,并以头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶和氨曲南为底物,用纸片协同试验作对照。结果 仪器检测４８株肺炎克雷伯菌中有２４株ＥＳＢＬｓ为阳性,用纸片协同法对照结果一致。检测１０２株大肠埃希菌中,仪器检出４１株阳性,纸协同法对照也为阳性,但仪器检测的６１株阴性菌中,纸片协同法对照有１９株为阳性。结论 ＶＩＴＥＫ－ＡＭＳ检测本地区产ＥＳＢＬｓ菌株尚可能存在一定的局限性,建议各地根据感染菌株的特点及三代头孢菌素的使用情况,用多种底物检测ＥＳＢＬｓ。     

三种方法检测超广谱β-内酰胺酶的结果比较

比较三种方法检测广州地区1 2家医院临床分离的大肠埃希菌和克雷伯菌属产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)敏感性.用纸片扩散初筛法 ,初筛出167株可疑产ESBLs的菌株,然后进行纸片扩散确证法,双纸片协同法和浓度梯度法 (E test法)测定.结果有147株菌产ESBLs(32%大肠埃希菌和42.6%克雷伯菌属ESBL s阳性), 纸片扩散确证法和双纸片协同法检出率相似,但双纸片协同法的缺点是纸片中心间距不好控制,E test ESBL初筛试条检测ESBLs有一定局限性,纸片扩散确证法适合临床常规测定.     

超广谱β—内酰胺酶的研究进展

产生超广谱β-内酰胺酶是大多数细菌对β-内酰胺类抗生素耐药的重要机制。笔对超广谱β-内酰胺酶的产生机制、分类、检测方法、耐药谱及其主要的产生菌种等研究进展进行了综述。     

超广谱β—内酰胺酶检测的临床意义

目的：研究近3临床分离的肺炎克雷伯菌和大肠埃希氏菌的耐药性及产超广谱β－内酰胺酶（ESBL）的比率。方法：应用双纸片协同试验筛选超广谱β－内酰胺酶的细菌,确正实验采用头孢他啶联合克拉维酸纸片扩散法,结果：肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌对亚胺培南的敏感率均为1005,其次为头孢他啶分别为71．7％和91．1％,超广谱β－内酰胺酶的比分别为28．3％和8．95。结论：随着头孢三代抗生素等在临床应用的增多,临床分离的革兰阴性杆菌对头孢他啶等三代头孢的耐药性及超广谱β－内酰胺酶的比率呈上升趋势,准确的检测超广谱β－内酰胺酶对临床合理应用抗和 具有指导意义。     

产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌药敏试验结果分析

目的了解产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌分离株的耐药特点,为临床用药提供数据。方法收集我院临床分离的确证为产ESBLs的大肠埃希菌151株,应用聚合酶链反应(PCR)检测产ESBLs株质粒的CTX-M基因。采用NCCLS推荐的琼脂稀释法测定11种抗生素对所有产酶株的最低抑菌浓度(MIC),并对结果进行分析。结果PCR结果显示,151株产ESBLs大肠埃希菌中CTX-M阳性为139株。在139株产CTX-M大肠埃希菌中,亚胺培南的抗菌活性最强,敏感率为100%,MIC90为0·25μg/ml;其次为阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦,敏感率分别为92·1%和90·6%;头孢西丁对其也有一定的抗菌活性,敏感率为64·7%;环丙沙星和氨苄西林/舒巴坦抗菌活性非常低,敏感率分别为20·9%和0。结论本地区临床分离的大肠埃希菌所产的ESBLs大多为CTX-M型,亚胺培南、阿米卡星和哌拉西林/他唑巴坦对产CTX-M型ESBLs菌有很好的抗菌活性,氨苄西林/舒巴坦对其几乎没有抗菌作用。     

细菌超广谱β—内酰胺酶的产生、检测及控制

近年来 ,随着 β-内酰胺类抗生素在临床上的广泛应用 ,使细菌极易产生超广谱β-内酰胺酶 (extended spectrumβ-lactamases,ESBL s)。此酶能导致细菌对大多数青霉素类、头孢菌素类及单环类抗生素耐药。目前 ,产 ESBL s细菌在标本中的分离率有增加趋势 ,由其引起的医院暴发感染也时有报道 ,这给临床感染的治疗带来了新的难题。因此 ,了解产 ESBL s菌的流行 ,建立一套完善的检测方法及有效地控制 ,由产 ESBL s菌株引起的感染是十分必要的。1　 ESBL s的产生、发展及其分类1983年 ,德国报道了世界上首例对广谱头孢菌素耐药的临床分离株…