人凝血因子Ⅷ活性测定中2种APTT试剂的比较

目的比较进口与自制APTT试剂,在FⅧ∶C检测中的应用.方法人凝血因子Ⅷ活性测定一期法.结果自制APTT试剂在性能上与进口APTT试剂差异无显著性,相关系数(r)均值分别为0.994、0.995;样品重复测定变异系数(CV%)均值为4.22、4.84;样品稳定性CV(%)均值为1.36、1.46.结论自制APTT试剂亦能用于FⅧ制品生产的质量监控以及止血与血栓的研究.     

APS分析仪定量测定尿液转铁蛋白及其临床应用

以速率散射比浊法在APS仪上用自制试剂对定量测定尿液转铁蛋白的方法学及临床应用作了探讨。APS仪测定尿液转铁蛋白的灵敏度：最低检测值为0．02mg／dl，尿液TRF在0.10～4．12mg／dl范围内线性良好（r＝0.903）；准确度：回收试验的平均回收率为97．6％；精密度：批内平均CV3．09％，批间平均CV4.44％；干扰试验：黄疸（总胆红素120umol／L）使结果升高0．02mg／dl。40例正常人尿液转铁蛋白参考仅为0．47±0．19mg／mmol肌酐，30例糖尿病患者尿液转铁蛋白含量为1．67±2．86mg／mmol肌酐。经统计，正常人与糖尿病患者尿液TRF含量相差显著（P＜0．05）。尿液转铁蛋白测定是反映糖尿病患者早期肾损害的敏感指标。     

获得性血友病A的临床分析与实验室检查

为了提高获得性血友病A（acquired hemophilia A）的诊断水平,对1例获得性血友病患者的临床表现、影象学、实验检查结果进行了分析。具体包括了解患者病史,复习静脉彩超记录和分析实验室检查结果。实验室检查项目有：活化部分凝血激酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、凝血酶（TT）时间、血浆FⅧ：C、FⅨ：C、FⅪ：C和FⅫ：C。结果表明：APTT99．3秒,PT13秒,TT13．5秒,FⅧ：C2％、FⅨ：C7％、FⅪ：C9％、FⅫ：C21％。患者血浆加等量正常新鲜血浆不能使APTT延长完全纠正;患者血浆和等量正常新鲜血浆混合后于37℃温育情况下,APTT随温育时间延长而延长;患者血浆稀释10倍后加等量未稀释正常血浆重复测定结果显示：FⅧ：C6％、FⅨ：C75％、FⅪ：C95％、FⅫ：C123％。抑制物滴度测定表明：FⅧ抑制物〉32 Bethesda 单位／ml。获得性血友病A确诊后,经强的松、硫唑嘌呤治疗1月余,复查APTT为33．3秒、FⅧ：C为128％、FⅧ抑制物消失。结论：详细询问病史、分析影象学所见,进行APTT纠正试验、稀释试验和抑制物滴度测定,能减少获得性血友病的误诊和误治,免疫抑制治疗能消除FⅧ抑制物,恢复正常凝血功能。     

酶偶联法测定肌酐与苦味酸法的比较

目的：评价肌酐酶－氧化酶偶联法测定肌酐（以下简称酶法）。方法：同时用ROCHE公司和LABO公司的两种酶法试剂盒测定肌酐并与苦味酸法进行比较。结果：LABO酶法测定肌酐的线性范围为25μmol/L-2210μmol/L，ROCHE为49μmol/L－4420μmol/L，苦味酸法为92μmol/L－520μmol/L。LABO试剂的批内CV＜0．54％，批间CV＜2．06％，回收率为95％；ROCHE试剂的批内CV＜0．88％，批间CV＜2．30％，回收率为99％；苦味酸法批内CV＜1．13％，批间CV＜3．23％，回收率为93％。溶血、黄疸对两种酶法测定肌酐的干扰率＜4％；抗坏血酸对苦味酸法产生正干扰，当其＞0．625g/L时，干扰率≥11．2％，抗坏血酸≥1．25g/L时，对ROCHE试剂测定结果的干扰率≥5．58％；药物头孢曲松钠≥1．00g/L时，对苦味酸法产生正干扰，干扰率≥7．11％，对其它两种试剂无干扰。结论：酶法测定肌酐优于苦味酸法，可作为临床常规测定方法。同时，临床实验室需根据自己的实际情况选择合适的酶法试剂盒。     

纤维蛋白原检测试剂的质量考察与评价

目的　考察自制纤维蛋白原检测试剂质量。方法　用自制和进口纤维蛋白原检测试剂测定标准曲线及两种试剂对样品纤维蛋白原含量、不同稀释度正常参比血浆凝固时间的测定结果加以比较并考察自制试剂稳定性。结果　自制与进口试剂测定标准曲线相关系数r >0O - 0 .990O(P <0 .0 1 ) ,测定样品纤维蛋白原含量差异无显著性意义 (P >0 .0 1 )。同批或连续 3批试剂测定不同稀释度正常参比血浆凝固时间的变异系数 (CV) <5 %。稳定性试验显示 :试剂 4℃存放 2 .5年 ,37℃存放 1 0d相关指标无明显变化 ;试剂溶解后 4℃存放 1 4d ,2 2℃存放 8d和 37℃存放 8h ,凝血酶凝固活性无明显变化。结论　自制试剂可代替进口试剂进行纤维蛋白原含量的检测     

凝血酶生成试验在血友病患者中的应用

目的：探讨凝血酶生成试验在血友病患者中的应用。方法：收集134例血友病患者[其中血友病A（HA）114例，血友病B（HB）20例1的临床资料，根据FⅧ：C／FIX：C不同，将无FⅧ／FⅨ抑制物的132例HA／HB患者分成重型（FⅧ：C／FIX：C〈1％）、中型（FVIU：C／FIX：C1％～5％）及轻型（FⅧ：C／FIX：C6％～25％）3组，检测凝血酶生成、FⅧ：C／FIX：C及其抑制物。结果：重型HA／HB患者与轻型者比较，出血频度及凝血酶生成各指标差异均有统计学意义（P〈0．01）；而重型者与中型者比较，除延迟时间和达峰时间差异有统计学意义外（P〈0．01），其余指标差异均无统计学意义；中型者与轻型者比较，除延迟时间和达峰时间差异无统计学意义外，其余指标差异均有统计学意义（P〈0．01）。HA／HB患者的出血频度与FⅧ：C或FIX：C无关（P=0．16），而与凝血酶生成潜力（ETP）密切相关（P=0．0001）：结论：凝血酶生成试验可作为预测HA／HB患者出血风险的有效手段。     

近红外颗粒速率免疫透射法测定血胱抑素C的性能评价

目的应用美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）的评价方案，客观地对近红外颗粒速率免疫透射比浊法测定血液中胱抑素C（CystatinC,Cys C）的性能进行评价。方法利用IMMAGE800特定蛋白仪的近红外颗粒速率免疫透射比浊法（以下简称免疫透射比浊法），对方法进行精密度、线性、干扰试验及与AULYMPUSAU2700全自动生化仪免疫透射法进行比较分析。结果Cys—C浓度的低值,高值两者分别为：批内CV为2.3％、2．09％；批间CV为3．31％、2．42％;日间CV为3．93％、2．48％：总CV为4．85％、2．85％日均值为0．891mg／dl、5．381mg／dl。样本在F—Bil干扰物试验中。浓度为0．11～1.13μmol／L，测定结果无干扰；在C—Bil干扰物试验中，浓度在0．12～1．16μmol／L，测定结果无干扰。在Hb干扰物试验中，浓度在0．4858～4．858g／L测定结果无干扰。在乳糜浊度干扰物试验中．浓度在155～1550度．测定结果无干扰。与AULYMPUS AU2700全自动生化仪的免疫透射比浊法比较有良好的相关性。Y=0．992X＋0．186，γ=0．990，P〈0．01。免疫透射比浊法测定结果略低，两种方法的平均偏差为0．1720mg／L；多于95％的测定值落在0．1073mg／L到0．2367mg／L。结论建立在IMMAGE800特定蛋白仪上用国产免疫透射试剂的近红外颗粒免疫透射比浊检测方法，进行方法学评价，证明该方法的重复性、准确性是符合临床检测要求的。     

近红外颗粒速率免疫透射法测定血胱抑素C的性能评价

目的应用美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）的评价方案，客观地对近红外颗粒速率免疫透射比浊法测定血液中胱抑素C（CystatinC,Cys C）的性能进行评价。方法利用IMMAGE800特定蛋白仪的近红外颗粒速率免疫透射比浊法（以下简称免疫透射比浊法），对方法进行精密度、线性、干扰试验及与AULYMPUSAU2700全自动生化仪免疫透射法进行比较分析。结果Cys—C浓度的低值,高值两者分别为：批内CV为2.3％、2．09％；批间CV为3．31％、2．42％;日间CV为3．93％、2．48％：总CV为4．85％、2．85％日均值为0．891mg／dl、5．381mg／dl。样本在F—Bil干扰物试验中。浓度为0．11～1.13μmol／L，测定结果无干扰；在C—Bil干扰物试验中，浓度在0．12～1．16μmol／L，测定结果无干扰。在Hb干扰物试验中，浓度在0．4858～4．858g／L测定结果无干扰。在乳糜浊度干扰物试验中．浓度在155～1550度．测定结果无干扰。与AULYMPUS AU2700全自动生化仪的免疫透射比浊法比较有良好的相关性。Y=0．992X＋0．186，γ=0．990，P〈0．01。免疫透射比浊法测定结果略低，两种方法的平均偏差为0．1720mg／L；多于95％的测定值落在0．1073mg／L到0．2367mg／L。结论建立在IMMAGE800特定蛋白仪上用国产免疫透射试剂的近红外颗粒免疫透射比浊检测方法，进行方法学评价，证明该方法的重复性、准确性是符合临床检测要求的。     

FⅧ基因内含子1倒位及X染色体非随机灭活导致的女性血友病A1例

目的：对1例女性血友病A（HA）患者进行基因分析，探讨其分子发病机制，并对其表姐进行携带者诊断．方法：测定1例女性HA患者的活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）、FⅧ活性（FⅧ：C）、FⅨ活性（FⅨ：C）及血管性血友病因子（vWF）等，并进行HA表型诊断；采用长距离PCR及序列特异PCR检测其FⅧ基因内含子22及内含子1倒位，并对FⅧ基因的所有外显子及其侧翼序列进行测序。对FⅧ基因内外的8个多态性位点进行遗传连锁分析．应用凝胶电泳法检测PCR产物分析DXS52（ST14）位点多态性，采用多重荧光PCR法检测7个STR位点（F8Civs13、CA22、DXS15、DXS9901、G6PD、DXS1073及DXS1108）的多态性。应用甲基化敏感的HpaⅡ内切酶，对基因组DNA进行酶切；荧光PCR法对HpaⅡ酶切前后的基因组DNA进行人雄激素受体基因（HUMARA）CAG重复序列扩增：荧光扫描法对扩增产物进行检测，并根据酶切前后PCR产物的峰值变化，分析判断X染色体的随机灭活模式。结果：表型检测先证者APTT延长（128．5s），FⅧ：C活性明显下降（〈1％），家系另2例患者FⅧ：C活性亦明显下降（〈1％）。该家系成员FⅧ内含子22倒位检测均为阴性；1例位检测则显示该女性HA患者为阳性携带者，该家系另2例男性患者均显示为该倒位阳性：该女性HA患者FⅧ基因测序未发现突变。遗传连锁分析发现，该女性患者携带致病基因的染色体遗传自其母亲：其X染色体为非随机灭活，遗传自父亲的X染色体被大部分灭活，而遗传自母亲的X染色体保留3大部分活性．结论：该女性HA患者存在FⅧ基因内含子1倒位的X染色体来自其母亲，且在X染色体非随机灭活中保留了活性。FⅧ基因内含子1倒位及X染色体非随机灭活导致了女性HA的发生。     

用新色原双试剂结合速率法测定血清葡萄糖浓度

利用新色原建立测定血清葡萄糖浓度的方法．以葡萄糖氧化酶为基础用双试剂结合速率法进行定量分析．结果：葡萄糖浓度达50．0mmol／L反应仍呈良好的线性；回收率为99．9％，日内CV为0．88％，日间CV为2．03％，除高浓度的血红蛋白外，能有效地避免血清中氧化物、浊度、色素等物质的干扰，测定结果与葡萄糖氧化酶／酚法和葡萄糖激酶法有良好的相关性，参考值范围为3．88～5．56（4．72±0．43）mmol／L．结论：该方法由于试剂稳定，成本低，测定方法可靠，适合在具有双试剂分析功能的自动生化分析仪上使用．     

同位素稀释液相色谱串联质谱法测定血清总胆固醇

目的建立同位素稀释液相色谱串联质谱（LC／MS／MS）测定血清总胆固醇的方法。方法血清样品中加入[3，4-^13 C2]-胆固醇作内标，用氢氧化钠水解血清胆固醇酯为胆固醇，用三氧化铬—硫酸氧化胆固醇为胆甾-4-烯-3，6-二酮，用LC／MS／MS分析胆固醇氧化产物，采用大气压化学电离源，用多反应监测（MRM）模式和选择离子监测（SIR）模式检测，用修正标准曲线法对血清样品进行定量。结果两种检测模式的峰面积比与胆固醇浓度的线性相关系数均大于0．9999。MRM模式测定血清总胆固醇的平均批内变异系数（CV）为0．95％（范围0．92％～0．99％），平均总CV为0．86％（0．82％～0．89％）；SIR模式平均批内CV为0．64％（0．54％～0．77％），平均总CV为0．69％（0．62％～0．81％）。测定国际或国家标准物质结果与靶值的平均偏差在MRM模式下为0．23％（0．14％～1．00％），SIR模式为0．24％（0．07％～1．27％）。结论成功建立了LC／MS／MS测定血清总胆固醇的方法，方法特异、精密、简便，可望用作血清胆固醇测定的参考方法。     

应用化学抑制剂和酶偶联比色法直接测定LD1

本文应用1－6已二醇作为LD分子中M亚基的专一抑制剂，采用双试剂法，由自动生化分析仪直接将一定浓度的1．6－己二醇溶液（第一试剂）与血清样品同时加入反应比鱼池（加人1．6已二醇的最终浓度为1．16mol／L），于30C保温5分钟后再加入第二试剂，用酶偶联比色法测定LD；。LD同工酶电泳图谱表明在上述条件下，LD2～LDs的活性全部被抑制。用本法同常规电泳法平行检测51例血清LD，结果相关良好．r＝0．9885，Y＝0．87X＋189；平均回收率104.4％，线性范围至少可达到470U／L；批内CV（％）为3．83～4．08。     

某国产纤维蛋白原试剂在 Sysmex CA1500血凝仪的临床性能验证

目的：某国产纤维蛋白原凝固法-Clauss 法试剂在日本 Sysmex CA1500血凝仪上的临床性能验证。方法国产纤维蛋白原试剂为 A 试剂，德国西门子 Dade Thrombin Reagent 试剂为 D 试剂，均采用 Clauss 法，分别测试两个水平质控品的批内精密度、批间精密度；165例正常临床样本用 A 试剂进行参考值范围验证；用 A 试剂和 D 试剂的200例临床样本纤维蛋白原结果比对，进行显著性检验和等效性检验。结果A 试剂和 D 试剂两个水平质控的批内精密度 CV 分别为4．28％、6．98％和3．45％、5．22％，A 试剂和 D 试剂两个水平质控的批间精密度 CV 分别为6．23％、10．34％和6．20％、9．89％，差异均无统计学意义（P ＞0．05）；A 试剂参考值范围为2．08～3．92 g/L；A 试剂和 D 试剂临床样本的纤维蛋白原结果比对，差异有统计学意义（P ＝0．025）；但是，两组试剂结果均数之差的90％双侧可信区间（90％CI ：-0．09，0．15）位于等效区间（-0．27，0．27）内。结论国产纤维蛋白原凝固法-Clauss 法试剂结果可靠，适用于日本 Sysmex CA1500血凝仪，和德国西门子 Dade 试剂临床应用等效。     

载脂蛋白A1与载脂蛋白B液体双试剂性能评价

目的对伊利康生物技术有限公司载脂蛋白A1（ApoA1）、ApoB检测试剂盒进行性能评价。方法通过试剂的批内精密度、批间精密度、线性范围、稳定性、回收率、干扰试验等进行系统评估。结果伊利康ApoA1、ApoB试剂盒测定ApoA1批内变异系数（CV）值分别为0．98％、1．23％、2．56％,批间Cy值分别为0．99％、1．18％、2．33％;ApoB批内CV值分别为1．23％、1．57％、2．46％,批间CV值分别为1．17％、1．43％、2．29％。与进口试剂相比,ApoAl的相关系数（r）=0．9989,相关方程为Y=0．9998X＋0．0168;ApoB的r=0．9994,相关方程为Y=0．9909X＋0．0108,测定结果呈显著相关性,差异有统计学意义（P〈0．05）。当三酰甘油的浓度小于15mmol／L、抗坏血酸小于4．5mmol／L、血红蛋白小于4．5g／L、胆红素小于540μmol／L时,其对本法无显著性干扰。结论该试剂完全符合临床诊断试剂要求,能适用于各种全自动生化分析仪。     

雅培ARCHITECT ci8200全自动生化免疫分析仪FlexRate法检测酶活性评价

目的 评价雅培ARCHITECT ci8200全自动生化免疫分析仪启动FlexRate法检测超高酶活性样本的可靠性。方法 用雅培原装配套试剂和国产利德曼试剂分别以FlexRate法测定丙氨酸转氨酶（ALT）、门冬氨酸转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰转移酶（GGT）、淀粉酶（AMY）5种常用酶的重复性、线性范围，与其他仪器作方法学对比。结果 5种酶用雅培试剂检测批内变异系数（CV）：常规法为0．48％～1．06％，FlexRate法为0．23％～0．48％；利德曼试剂检测批内CV：常规法为0．63％～1．14％，FlexRate法为0．21％～0．68％。仪器启用FlexRate功能，ALT、AST、ALP、GGT、AMY的可报告范围分别至少延伸至3896U／L、3324U／L、6530U／L、6872U／L、8972U／L。2种试剂的FlexRate法与贝克曼LX20比较有良好的相关性，经同一酶校准品校正后5种酶的系统误差均〈5％。结论 以FlexRate法在测定超高酶活性样本时，结果可靠，避免假阴性错误，提高工作效率，同时适用于原装配套及国产试剂。     

血清过氧化氢酶活性比色测定法

介绍一种简便、快速的血清过氧化氢酶活性的比色测定方法。探讨了其比色波长的选择，H2O2、钼酸铵试剂浓度与吸光度的关系，溶血、脂血、黄疸标本对测定结果的影响，以及标本与试剂的存放等因素。该法精密度试验批内CV为4．6％，批间CV为5．0％。对47例新生儿脐血清标本的过氧化氢酶活性测定平均值是：147．7±59．9ku／L（42．0～236．4）。测定了977例健康人的血清过氧化氢酶活性为：52．7±17．0ku／L（15．2～118．2）。试验结果表明：男性血清过氧化氢酶活性较女性高16．6％，其结果有随年龄增长而增高的趋势。     

邻苯二甲醛法血清尿素氮的测定

报道一种不用加热煮沸，室温条件下测定血清尿素氮的方法，并对该法进行了评价。该法尿素氮浓度在0～80mmol／L范围内呈线性；回收率为90％～98％；批内CV4．9％～6．4％，批间CV6．8％；与二乙酰一肟法相关性较好r＝0．9545，回归方程为y（本法）＝0．0719＋0．9937x；测定正常成人男40例、女30例，血清尿素氮参考值范围（x±1．96s）为4.39～14.21mmol／L。     

T淋巴细胞亚群分析全血质控物的评价及应用调查

目的对自制T淋巴细胞亚群分析全血质控物的均匀性和稳定性进行评价;发放质控物进行室间质量评价。方法依据ISOGuide35《标准物质／标准样品的定值一通用原则和统计原理》的要求,对自制质控物CD3^＋、CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋淋巴细胞百分比3个指标的均匀性、稳定性进行评价,同时以进口质控物作为对照。在组织淋巴细胞免疫表型分析项目室间质量评价活动中,向178家实验室同时发放进口质控物和自制质控物,并对调查结果进行分析和比较。结果自制20081027、20081111批号质控物及进口质控物的3个指标均匀性的不确定度范围分别为0．189％～0．318％、0．184％～0．280％、0．209％～0．284％。稳定性评价结果显示,自制质控物的3个指标随着保存时间变化的线性趋势无统计学意义（f）〉0．05）,自制20081027、20081111批号质控物及进口质控物的3个指标长期稳定性的不确定度范围分别为0．554%～1．515％、0．189％～1．006％、0．328％～1．786％。室间质量评价调查结果显示,BD公司仪器组自制质控物与进口质控物的各指标变异系数（CV）范围分别为：2．94％～8．17％、2．84％～6．89％;Beckman Coulter公司仪器组自制质控物与进口质控物的各指标CV范围分别为：3．07％～14．25％、1．84％～5．14％。结论自制质控物的均匀性、稳定性符合要求,可用于流式细胞仪T淋巴细胞亚群分析的质量控制。     

国产化学氧化法(综合氧化剂)测胆红素试剂盒的质量评估

目的 评价化学氧化法（综合氧化剂）测定血清中总胆红素和直接胆红素。方法 通过测定精密性、准确性、各种干扰和与钒酸试剂法的相关试验。结果 总、直胆精密度分别为批内CV1．01％与3．24％，日间CV为1．58％与2．31％；平均回收率总胆为100．8％，直胆为104．5％，与日本钒酸氧化法共测40例相关性为：总胆Y（综）＝1．05X（钒）－2．53，r=0.9992;直胆Y（综）＝1．19X（钒）－4．56，r=0.9985。Hb浓度＜300mg/dl，脂血在Intralipos指数5以下不受干扰。结论 该法简单、快速、稳定、完全适应临床使用。     

酶法测定镁离子的方法学研究

目的建立一个适合临床实验室作为常规应用的镁的酶法测定。方法对文献报告的四种镁的酶法测定的方法作了比较，选择HK—G6pDH法并对其作了某些改进，使其适合自动分析。结果本法的线性范围为0．05～3．40mmol／L：精密度：低值和高值标本的批内CV分别为2．23％和1．45％；总CV分别为3．34％和2．18％；准确度：低值质控品的测定偏差为-4．08％，中值质控品的测定偏差为1．00％和-1．05％。高值质控品的测定偏差为2．98％和0．00％；本法（y）与Xylidyl Blue法（x）比较，相关良好，回归方程y=0．9769x＋0．0066。γ^2=0．9886。结论本法的各项技术指标均较好，加之本法的特异性较好，体系温和．适合临床实验室作为常规应用。