14例鲍温样丘疹病皮损人类乳头瘤病毒DNA原位杂交的检测

应用地高辛标记的 HPV6B/11、16、18型 DNA探针对 14例鲍温样丘疹病进行原位杂交检测。结果显示 14例中 7例 HPV 6B/11和 18型阳性 ,两者反应强度相似 ,即强阳性 3例 ,弱阳性 4例 ,而6B/11、18型阳性同时伴 16型阳性的仅 3例 ,且 16型反应较弱 ,表明有半数鲍温样丘疹病的发病与 6B/11、18型 HPV感染有关     

尖锐湿疣、鲍温样丘疹病及鲍温病皮损中人乳头瘤病毒感染与P16蛋白表达的关系

目的：探讨鲍温样丘疹病（BP）、鲍温病（BD）及尖锐湿疣（CA）皮损中高、低危人乳头瘤病毒（HPV）感染对P16蛋白表达的影响。方法：用荧光定量PCR（FQ－PCR）方法检测30例CA病损及12例正常人皮肤粘膜中HPV6／11、HPV16／18DNA；用原位杂交方法检测30例BP、15例BD中HPV16DNA；用免疫组化方法检测上述组织中P16蛋白、Ki-67蛋白的表达。结果：在HPB感染皮损中，P16蛋白、Ki-67蛋白的表达均增高（P＜0．05），且在HPV16阳性的BP、BD中的表达高于HPV6／11感染的CA（P＜0．05）；P16蛋白表达与Ki-67蛋白表达呈正相关（P＜0．05）。结论：HPV感染皮损中，P16蛋白的过度表达可能是机体对HPV感染引起细胞异常增殖的一种反馈调节；P16蛋白表达的不同可能是由于高、低危HPV引起的Rb蛋白功能失活不同。     

原位杂交检测鲍温样丘疹病及Bowen病中HPV16 DNA

采用生物素标记的核酸探针原位杂交技术,检测了30例鲍温样丘疹病、15例Bowen病中16型人乳头瘤病毒(HPV16)感染的组织定位及染色模式。结果显示,30例鲍温样丘疹病中,HPV16阳性13例;15例Bowen病中,HPV16阳性6例。鲍温样丘疹病、Bowen病中HPV16感染累及棘细胞全层;主要为核内团块状着色。Bowen病中,HPV16感染尚累及基底层细胞且存在HPV的点状染色模式。提示鲍温样丘疹病与Bowen病比较,HPV16感染的组织定位及染色模式均有所不同。     

鲍恩样丘疹病皮损中HPV16、18的检测

目的：探讨人乳头瘤病毒（HPV）16、18在鲍恩样丘疹病皮损中的感染情况。方法：采用杂交捕获试验筛选高危型HPV和低危型HPV阳性标本,对高危型HPV阳性标本经PCR技术检测其HPV16、18DNA阳性者。结果：45例鲍恩样丘疹病患者皮损中34（75.6%）例为高危型HPV阳性,在高危型HPV阳性标本中82.2%（28/34）为HPV16阳性,5.9%（2/34）为HPV18阳性,8.8%（3/34）HPV16、18均阳性,2.9%（1/34）未检测到HPV16及HPV18DNA。结论：多数鲍恩样丘疹病皮损中存在高危型HPV感染,尤其HPV16,故高危型HPV16感染与鲍恩样丘疹病的发生、发展密切相关。     

33例鲍温样丘疹病临床分析

鲍温样丘疹病（bowenoidpapulosis,BP）与人乳头瘤病毒（humanpapillomavirus,HPV）感染密切相关,由于此病的临床表现与尖锐湿疣相似,临床上易误诊为尖锐湿疣（condylomaacunfinatum,CA）,确诊需依靠组织病理检查。近年来鲍温样丘疹病的发病率逐年增加,它作为一种具有独立临床、病理特征的疾病越来越引起人们的重视。我们于2005年3月至2009年12月观察了33例病理诊断为鲍温样丘疹病的患者,现将情况总结如下。     

女性鲍恩样丘疹病患者外阴皮损及宫颈HPV感染情况

近年研究发现,鲍恩样丘疹病的发生与人乳头瘤病毒(HPV)感染有关,尤其是高危型HPV。高危型HPV与宫颈癌的发生密切相关。为探讨女性鲍恩样丘疹病外阴皮损及宫颈HPV的感染情况,我们对18例女性鲍恩样丘疹病患者的外阴皮损及宫颈进行了低危型HPV6/11及高危型HPV16、18DNA检测。     

趾间人乳头瘤病毒16,18阳性鲍恩样丘疹病

报告1例趾间鲍恩样丘疹病(BP)。患者男,26岁,双足趾间斑疹4个月余。皮肤科检查:双足第三、四趾间均可见青灰色斑疹,外生殖器部位未见新生物、糜烂及溃疡。皮肤镜检查:皮肤镜下可见褐色斑及鳞屑,表面可见少许小球状血管。皮损组织病理检查:表皮角化过度伴角化不全,不规则增生,表皮全层细胞排列紊乱,大小不一,可见异常核分裂象及细胞空泡化;真皮浅层有淋巴细胞及组织细胞浸润。人乳头瘤病毒(HPV)原位杂交检测:HPV16及HPV18均(+),HPV6及HPV11均(-)。结合皮损组织病理检查及HPV检测,诊断为鲍恩样丘疹病。     

外生殖器部位皮肤肿瘤临床病理和HPV感染的相关性

目的:探讨外生殖器部位皮肤肿瘤和人乳头瘤病毒(human papilloma viruses,HPV)感染的相关性。方法:采用通用型引物-PCR方法对89例外生殖器部位皮肤肿瘤进行HPV DNA的检测,应用限制性内切酶酶切片段长度多态性(RFLP)方法进行HPV DNA分型。结果:40例鲍温样丘疹病中22例(55%)HPV DNA阳性,其中20例为HPV16,1例为HPV31,1例为HPV6+16;5例鲍温病HPV DNA全部阳性(100%),其中4例为HPV16,1例为HPV6+16;6例Queyrat增殖性红斑中2例(33.3%)HPV DNA阳性,均为HPV16。18例外生殖器鳞状细胞癌中5例(27.8%)HPV DNA阳性,均为HPV16;20例乳房外Paget病HPV DNA为阴性。结论:外生殖器部位皮肤肿瘤中鲍温样丘疹病、鲍温病、Qu-eyrat增殖性红斑的发生可能与HPV16感染有密切关系;外生殖器鳞状细胞癌中,HPV16感染可能是多种致癌因素中的一个重要因素;外生殖器部位乳房外Paget病的发病可能与HPV感染无关。     

鲍温样丘疹病患者人类乳头瘤病毒分型及疗效分析

目的探讨鲍温样丘疹病(BP)皮损中人乳头瘤病毒(HPV)感染类型与患者疗效的关系。方法用基因芯片法检测BP皮损组织中HPV感染类型,再用艾拉光动力和二氧化碳激光两种不同手段治疗鲍温样丘疹病患者并进行对照。结果92例BP中HPV高危型感染48例,占52.17%;高低危混合感染者28例,占30.43%;低危感染16例,占17.4%;采用不同的治疗方法治疗表明,艾拉光动力是治疗鲍温样丘疹病的有效方法,总有效率达92.75%,其中治愈率为85.5%。结论 BP的发生与发展和HPV感染密切相关。治疗效果与病毒感染类型无直接关系。采用二氧化碳激光加艾拉光动力治疗BP疗效优异,副作用小,是值得推广的治疗方法。     

应用原位杂交和聚合酶链反应方法检测生殖器外鲍温病中的人类乳头瘤病毒

人类乳头瘤病毒(HPV)16型相关DNA与生殖器鲍温病和鲍温样丘疹病发生有关。虽然组织学检查发现非生殖器部位鲍温病(EBD)中有病毒感染的证据,例如:病毒样包涵体和胞浆空泡化细胞,但迄今有关HPV存在于EBD中的报告则少有。为此,作者采用原位杂交技术(ISH)和聚合酶链反应(PCR)对20例EBD进行了HPV检测,调查HPV在EBD中的存在情况。     

p73第2外显子第4和14位基因多态性与人乳头状瘤病毒易感性的相关性研究

【摘要】 目的 探讨人乳头状瘤病毒（HPV）易感性与p73基因第2外显子第4和14位碱基多态性的相关性。 方法 收集南京地区尖锐湿疣患者83例、Bowen样丘疹病患者11例的皮损和血样,以在性病门诊进行健康体检的性病高危人群150例为阴性对照,采用直接测序法检测皮损中感染的HPV-DNA序列,并在Genbank Blast上进行比对,鉴定HPV型别,抽提尖锐湿疣和Bowen样丘疹病患者以及阴性对照组的血样DNA,以shP73引物对p73基因片段进行扩增和测序,检测患者和阴性对照组的p73第2外显子第4和14位基因的多态性,分析HPV易感性和宿主p73基因多态性之间的相关性。 结果 83例尖锐湿疣患者皮损中HPV-6型35例占42.2%,HPV-11型34例占41.0%;11例Bowen样丘疹病患者皮损中HPV-16型5例（5/11）,HPV-6型3例（3/11）。p73基因多态性检测,83例尖锐湿疣患者血样测序阳性83例,11例Bowen样丘疹病患者血样测序阳性11例,对照组150例血样测序阳性132例。与对照组相比,三种基因型中,A4T14/A4T14 基因型感染HPV患尖锐湿疣（OR = 4.89,95% CI = 1.50 ~ 15.91）或Bowen样丘疹病（OR = 7.11,95% CI = 1.144 ~ 44.20）的风险更高。G4C14/G4C14基因型与其他两种基因型相比,感染HPV后患Bowen样丘疹病的风险较低（OR = 0.16,95% CI = 0.04 ～ 0.65）。 结论 p73第2外显子携带A4T14基因增加了Bowen样丘疹病和尖锐湿疣的患病风险,但其第4和14位碱基的多态性与罹患高危型与低危型HPV之间并无明显的相关性。     

鲍温样丘疹病中hTERT蛋白表达与高危型HPV感染的相关性研究

目的研究hTERT蛋白在鲍温样丘疹病中的表达及与高危型HPV存在的相关性。方法通过原位杂交法研究HPV的存在和免疫组化法检测hTERT蛋白在鲍温样丘疹病中的表达,并探讨hTERT蛋白表达与高危型HPV存在的相关性。结果在26例鲍温样丘疹病标本中,18例(69.2%)为HPV16/18阳性,其中1例HPV16/18阳性标本也有HPV6/11阳性。3例(11.5%)为HPV31/33/35阳性,2例(7.7%)为未定型HPV阳性,21例有高危型HPV存在的标本是hTERT阳性,16例高危型HPV感染的标本呈现了强而弥漫性hTERT蛋白表达。hTERT蛋白表达与高危型HPV的存在显著相关。结论高危型HPV可能诱导了hTERT蛋白的高表达。     

人乳头瘤病毒与皮肤Bowen病的相关性

目的 探讨人乳头瘤病毒(HPV)与皮肤Bowen病发病的相关性.方法 41例皮肤Bowen病患者皮损以及48例健康对照皮肤,采用多对引物,应用巢式PCR进行HPV DNA检测,同时应用半定量PCR进行病毒定量,对HPV DNA阳性标本进一步采用原位杂交方法分析组织内病毒的分布状况.结果 41例皮肤Bowen病患者皮损HPV DNA阳性检出率为12%(5例),其中黏膜型3例(2例HPV16,1例HPV33),病毒定量相当于101～103拷贝,原位杂交显示在多数肿瘤细胞核中有广泛阳性表达,而肿瘤邻近的正常组织无信号表达;皮肤型2例(HPV27和HPV76各1例),原位杂交均无阳性表达.此外,对照组中有1例检出HPV DNA,属于疣状表皮发育不良相关型HPV23,检出率为2.1%,与皮肤Bowen病皮损中HPV检出率比较,差异无统计学意义.2例患者皮肤型病毒定量较低,与正常对照组中检出的1例HPV23相似,均相当于10-2～10-3拷贝.结论 某些皮肤Bowen病的发病与黏膜型HPV密切相关.     

原位杂交和PCR法检测鲍温病皮损中的人乳头瘤病毒

目的:检测鲍温病(BD)皮损中的人乳头瘤病毒(HPV)并探讨其在BD发病中的作用.方法:病例组BD皮损20例,其中女8例,男12例.对照组正常皮肤标本33例.用原位杂交(ISH)和PCR法检测组织切片中的HPV DNA,检测的类型为HPV6、11、16、18、31、33.结果:20例BD中仅有1例呈HPV DNA阳性,为HPV6型,系外阴部位皮损.手部、其他部位皮损组织均为阴性.对照组全部为阴性.结论:HPV16等6种黏膜型HPV可能并不参与生殖器外BD(EBD)的发病.     

利用重组HPV16L1蛋白检测鲍温病和鲍温样丘疹病血清中的抗体

目的用原核表达系统获得人乳头瘤病毒16型(HPV16)主要衣壳蛋白(L1),检测鲍温病和鲍温样丘疹病血清中的HPV16L1IgG抗体。方法PCR方法检测鲍温病和鲍温样丘疹病局部皮损中的HPVDNA,限制性片段长度多肽性方法进行HPV分型;用原核表达载体pET32a表达HPV16L1蛋白,亲和层析法对表达产物进行纯化,获得了HPV16L1蛋白抗原;ELISA法检测鲍温病和鲍温样丘疹病血清中的抗体。结果用原核表达系统和镍柱亲和层析获得了较纯的HPV16L1蛋白。鲍温样丘疹病血清中抗体的检测率为(20/50)40%,鲍温病血清中抗体的检测率为(8/30)26.7%,正常献血员组检测率为(2/50)4%。这两组分别与正常献血员组比较有统计学差异(P0.05)。两组HPV16DNAPCR检测法与血清HPV16L1抗体检测法有较好的一致性(P0.05)。结论利用原核表达系统获得纯化HPV16型L1蛋白,可用于鲍温样丘疹病和鲍温病血清中HPV16抗体的检出,为其临床上血清学诊断提供参考,进一步开发HPV相关皮肤恶性肿瘤高危人群的诊断试剂盒提供前沿基础研究。     

人乳头瘤病毒DNA在角化棘皮瘤中的表达

目的 探讨角化棘皮瘤组织中人乳头瘤病毒（HPV）感染率,及HPV DNA阳性细胞的分布特征。方法 原位杂交方法检测46例KA和34例正常人皮肤石蜡切片组织标本中HPV6/11、16/18、31/33亚型。结果 31例角化棘皮瘤黏膜型HPV DNA阳性,总阳性率67.39%,两种以上HPV混合感染达83.87％（26/31）,各亚型均以游离型为主;阳性信号位于细胞核内或核边缘,阳性细胞多分布于火山口底部棘层的浅中部及其周围唇部,分布形式多为带状、片状或灶状聚集。正常皮肤对照组HPV DNA各亚型检测均阴性。结论 角化棘皮瘤患者HPV6/11、16/18、31/33感染率高于正常人群,且以游离形式存在为主,推测HPV感染在角化棘皮瘤的发病机制中起作用。     

生殖器上皮HPV感染皮损中p53蛋白过度表达的检测

采用免疫组化方法对６例鲍温样丘疹病和９例尖锐湿疣生殖器上皮人类乳头瘤病毒（ＨＰＶ）感染皮损进行了ｐ５３蛋白、ｐ２１蛋白和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达的检测。结果ｐ５３阳性率为：鲍温样丘疹病（３／６）、尖锐湿疣（６／９），ｐ５３阳性细胞多位于基底层以及棘细胞层的中下层，同时发现受ＨＰＶ感染的空泡样变性细胞核中有ｐ５３蛋白和ＰＣＮＡ的过度表达，说明ｐ５３蛋白表达与ＨＰＶ感染及角朊细胞异常增生有关。     

鲍温样丘疹病的临床及感染人乳头瘤病毒类型的研究

目的 研究鲍温样丘疹病(BP)的诊治及其感染人乳头瘤病毒(HPV)的类型。方法 对9例BP的临床表现、组织病理及治疗进行总结,用PCR法检测13例BP石蜡组织标本HPV16 L1基因。结果 BP表现为生殖器部位的褐色扁平丘疹,有线状排列趋势。病理表现为角化不全,棘层肥厚,角质形成细胞出现异型性并排列如伏麦状,基底膜完整。8例经疣体破坏、干扰素及免疫增强剂治疗,全部治愈;1例行手术局部扩大切除后复发,再经上述方案治疗而愈13例 BP标本有12例 HPV阳性,都为HPV16。结论 BP主要由HPV16感染引起,临床和病理表现特异,疣体玻坏结合干扰素及免疫增强剂治疗,疗效较好。     

皮肤鳞状细胞癌中人乳头瘤病毒的检测

目的:检测皮肤鳞状细胞癌(SCC)皮损中的人乳头瘤病毒(HPV)并探讨其在SCC发病中的作用.方法:用原位杂交(ISH)、聚合酶链反应技术(PCR)检测SCC患者43例,健康者28例标本组织切片中的HPV6、11、16、18、31、33.结果:43例SCC中有2例肢端部位皮损呈HPV DNA阳性,检出类型为HPV16和HPV33.其中1例标本中HPV16和HPV33同时阳性.对照组全部为阴性.结论:HPV16等6种黏膜型HPV可能与肢端以外SCC的发生无相关性,而与肢端部位SCC可能有关联性.     

牛痘样水疱病样皮肤淋巴瘤与慢性活动性EB病毒感染的关系

目的 报道6例牛痘样水疱病样皮肤淋巴瘤,并研究其与慢性活动性EB病毒感染的关系.方法 临床病理分析、皮损免疫组织化学染色、血清学分析、EB病毒编码RNA原位杂交、外周血EB病毒DNA测定.结果 6例患者皮损均为反复发作的丘疹、丘疱疹、坏死、痘疮样瘢痕,其中4例还伴有程度不同的颜面、手足水肿.所有患儿均有长期间断发热等症状.皮损病理可见表皮多房性水疱,真皮全层大量淋巴细胞浸润,细胞形态异形,可见病理分裂象.4例皮损病理免疫组化染色,可见大量CD56阳性细胞,散在的CD3和CD45RO阳性细胞,T细胞内抗原-1和粒酶B染色阳性,诊断为牛痘样水疱病样皮肤NK/T细胞淋巴瘤;2例组化染色CD3和CD45RO阳性,CD56阴性,诊断为牛痘样水疱病样皮肤T细胞淋巴瘤.6例皮损均可见EB病毒编码RNA原位杂交阳性肿瘤细胞,血清学检查EB病毒衣壳抗原IgG抗体滴度升高,其中2例滴度为1:5120,2例为1:2560,2例为1:1280;2例患者外周血EB病毒DNA拷贝数高于正常.6例患儿均证实患有慢性活动性EB病毒感染.结论 牛痘样水疱病样皮肤淋巴瘤主要表现为颜面手足肿胀、水疱、痘疮样瘢痕,病理表现主要为真皮异形淋巴细胞浸润和血管中心坏死,免疫表型以NK/T型多见.慢性活动性EB病毒感染与该型淋巴瘤发病密切相关.