肝细胞生长因子对慢性肝损伤时肝部分切除术后肝细胞影响的实验研究

目的：研究肝细胞生长因子对慢性肝损伤时肝部分切除术后肝再生和肝功能的影响。方法：本实验以四氯化碳和乙醇联合诱导慢性肝损伤模型,行30%肝部分切除术,术后10d,经腹腔注射肝细胞生长因子（分对照组、小剂量组、大剂量组）,同时建立正常对照组。观察不同剂量肝细胞生长因子对肝再生,肝功能和肝储备功能的影响。结果：①小剂量组与对照组的总蛋白、白蛋白、AST、ALT、总肝固醇、动脉血酮体比进行比较后,P＞0.05,小剂量的肝细胞生长因子无明显改善肝功能的作用。②大剂量组与对照组的AST、ALT、总胆固醇、动脉血酮体比进行比较后,P＜0.01,大剂量的肝细胞生长因子能显著改善肝功能。同时通过电镜和光镜观察,大剂量的肝细胞生长因子能促进肝再生。结论：①正常肝脏,或伴有慢性肝损伤的肝脏行部分肝功除术后,肝功能及肝储备功能,均有一定程度的,肝脏再生亦有障碍。②应用大剂量外源性肝细胞生长因子,维持一段时间,可明显改善肝功能和肝储备功能,促进肝细胞再生。     

促肝细胞生长素对慢性肝损伤鼠肝部分切除术后肝细胞的影响

目的　 研究促肝细胞生长素 (主要成分为肝细胞生长因子 )对慢性肝损伤时肝部分切除术后肝再生和肝功能的影响。 方法　 以四氯化碳和乙醇联合诱导大鼠的慢性肝损伤模型 ,对其行 30 %肝部分切除术 ,术后 10d经腹腔注射促肝细胞生长素 (分对照组、小剂量组、大剂量组 ) ,同时建立正常对照组。观察不同剂量促肝细胞生长素对肝再生、肝功能和肝储备功能的影响。 结果　 小剂量组与对照组的总蛋白、白蛋白、谷丙转氨酶 (AST )、谷草转氨酶 (ALT)、总胆固醇、动脉血酮体比比较 ,差异无显著性 ( P >0 .0 5 )。大剂量组与对照组的AST ,ALT ,总胆固醇、动脉血酮体比的比较差异显著 ( P <0 .0 1)。电镜和光镜观察显示 ,大剂量的促肝细胞生长素能促进肝再生。 结论　 应用大剂量促肝细胞生长素可明显改善肝功能和肝储备功能 ,促进肝细胞再生     

大鼠肝切除术后肝损伤程度与肝再生状态的动态对比研究

目的：探讨肝切除术后肝损伤程度与肝再生状态的关系。方法：Wistar大鼠随机分为三组：（1）假手术组；（2）正常大鼠肝切除组；（3）肝硬化大鼠肝切除组，建立大鼠肝切除模型，观察围手术期血清和肝组织匀浆液中丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平、肝重／体重、肝再生率，以及应用免疫组化方法（SABC法）检测肝组织中增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。结果：与正常大鼠相比，肝切除后肝硬化大鼠血清ALT和AST水平升高显著，持续时间较长（P＜0．05）；PCNA在肝切除后肝组织的表达显著延迟（P＜0．05），血清ALT和AST水平与肝再生率呈显著负相关（P＜0．05）。结论：肝损伤程度和肝再生状态呈负相关，肝损伤的程度影响肝再生状态，肝切除后检测血清ALT、AST水平的变化可以间接的了解肝再生情况。     

门冬氨酸鸟氨酸对肝硬化肝癌术后肝功能的影响

目的：观察门冬氨酸鸟氨酸（LOLA）对肝癌合并肝硬化半肝切除术后肝功能的影响。方法：通过随机、对照的方法,将66例肝癌合并肝硬化行半肝切除患者分为2组,仅治疗组于术后1～7 d静脉应用LOLA。全部患者分别在术前及术后1、3、5、7、10、14 d抽外周静脉血检查谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆红素（TB）、直接胆红素（DB）。结果：治疗组术后1、3、5 d ALT明显低于对照组（P〈0.05）,术后3、5 d AST明显低于对照组（P〈0.05）。治疗组术后7 d ALT恢复正常的比率高于对照组。LOLA对术后TB、DB无影响。两组术后肝功能不全的发生率无差异（P=0.557）。结论：LOLA能促进肝癌肝硬化半肝切除术后肝脏功能的早期恢复。     

含胆酸的肠内营养在肝硬化大鼠肝切除术后的应用

目的探讨含胆酸的肠内营养在肝硬化大鼠肝切除术后的应用。方法24只肝硬化大鼠随机分为术前组、肝切除术后1d组、肝切除术后行不含胆酸的肠内营养5d组、肝切除术后行含胆酸的肠内营养5d组,各6只。并选择6只正常大鼠作为正常对照组,测大鼠肝功能、炎症反应、脂质过氧化、肝组织白蛋白（ALB）mRNA的表达和肝组织Ki67蛋白的表达。结果与不含胆酸的肠内营养5d组比较,含胆酸的肠内营养5d组血清AST、ALT、ALP显著下降（P〈0.05）,血清ALB、IGF-1显著升高（P〈0.05）,血清IFN-γ、TNF-α、MDA显著下降（P〈0.05）,血清SOD活性显著升高（P〈0.05）,肝组织ALBmRNA表达显著升高（P〈0.05）,肝组织Ki67蛋白表达显著升高（P〈0.05）。结论含胆酸的肠内营养可以加快肝硬化大鼠肝切除术后肝功能的恢复,减轻炎症反应和脂质过氧化损伤,促进肝脏蛋白合成和残肝再生。     

肝星状细胞对大鼠肝部分切除术后肝再生修复的影响

目的 探讨肝星状细胞（hepatic stellate cells,HSCs）在大鼠肝部分切除术后对肝损伤修复的影响.方法 体外实验部分：将大鼠肝星状细胞（HSCs）与大鼠肝细胞系（BRL-3A）共培养,CCK-8比色法检测细胞增殖情况;ELISA法检测培养肝星状细胞上清液中细胞因子,即肝细胞生长因子（hepatic growth factor,HGF）、胰岛素样生长因子（insulin growth factor,IGF）、表皮细胞生长因子（epidermal growth factor,EGF）、转化生长因子-α（transfactor growth factor-α,TGF-α）含量.体内实验部分;将45只260 ～330 g健康雄性SD大鼠随机分为三组：正常组（生理盐水组）、对照组（肝星状细胞培养液组）、实验组（肝星状细胞培养上清液组）.各组分别于肝大部切除术后第3、7、12天取血清检测肝功能情况并计算肝再生指数;HE染色切片显微镜下观察肝脏病理结构改变情况;免疫组织化学染色法检测增殖细胞核抗原（proliferating cell nucleus antigen,PCNA）、平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）、甲胎蛋白（a1pha feta1 protein,AFP）及白蛋白（albumin,ALB）的表达情况.结果 ①CCK-8法检测肝星状细胞能促进肝细胞增殖（P＜0.05）;②上清液较培养液中细胞因子HGF、TGF-α含量多,差别有统计学意义（P＜ 0.05）;③实验组肝再生指数比对照组大,差别具有统计学意义（P＜0.05）;④实验组大鼠AST随着时间的推移,较对照组下降明显,差别有统计学意义（P＜0.05）;⑤实验组PCNA表达量较正常组、对照组增多,差别有统计学意义（P＜ 0.05）;⑥平滑肌肌动蛋白、白蛋白、甲胎蛋白三组间差别不显著（P＞ 0.05）.结论 ①体外肝星状细胞能促进肝细胞增殖;②肝星状细胞培养上清液能促进大鼠肝部分切除术后肝再生,其分泌的多种细胞因子在肝损伤再生修复中起了重要作用.     

IL-6强化的肠外营养对肝硬化大鼠肝切除术后残肝的影响

目的 探讨白细胞介素-6(IL-6)强化的肠外营养(PN)对肝硬化大鼠肝切除术后残肝的影响.方法 6只正常大鼠为正常对照组(A组),24只肝硬化大鼠随机分为4组(B～E组,n＝6);B组:肝硬化术前组,C组:肝切除+颈内静脉插管术后1 d组,D组:肝切除术后行PN 5 d组,E组:肝切除术后行PN+IL-6 5d组.测大鼠肝功能,炎症反应和脂质过氧化指标.肝组织ALB mRNA的表达.结果 与D组比较,E组血清AST、ALT、ALP显著下降(P＜0.05),血清ALB显著升高(P＜0.05);血清IFN-γ、TNF-α、MDA显著下降(P＜0.05),血清SOD活性显著升高(P＜0.05);肝组织ALB mRNA表达显著升高(P＜0.05).结论 PN+IL-6可以加快肝硬化大鼠肝切除术后肝功能的恢复,减轻炎症反应和脂质过氧化损伤,促进肝脏蛋白合成.     

胆酸对肝硬化大鼠肝大部分切除术后肝脏功能的影响

目的探讨胆酸对肝硬化大鼠肝切除术后肝脏功能的影响。方法24只肝硬化大鼠肝切除术后随机分为胆酸组和对照组喂养1周,每组12只。对照组给以标准饲料喂养,胆酸组给以含0.2%胆酸的饲料喂养。1周后检测大鼠胆汁分泌速度及胆汁总胆汁酸（TBA）含量,检测肝功能、有丝分裂指数（MI）、增殖细胞核抗原（PCNA）标记指数、细胞核DNA含量。结果胆酸组胆汁分泌速度、胆汁TBA含量、血清ALB含量、MI、PCNA标记指数、细胞核DNA含量均高于对照组（P〈0.01）,血清谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）含量均低于对照组（P〈0.01）。结论胆酸可以增加肝硬化大鼠肝切除术后胆汁分泌速度及胆汁TBA含量,促进大鼠肝功能恢复和肝再生。     

微生物酵素和促肝细胞生长素对肝切除后肝功能的影响

目的观察微生物酵素对大鼠部分肝切除后肝再生过程中肝功能的影响。方法采用大鼠部分肝切除（Partial Hepatectomy,PH）模型,通过与对照组和促肝细胞生长素（Hepatocyte Growth-Promoting Factor,pHGF）组比较,在PH后12小时、24小时、48小时、72小时、120小时和168小时,留取血清,检测血清天门冬氨酸氨基转移酶（aspartate aminotransferase,AST）、血清丙氨酸氨基转移酶（alanine aminstransferase,ALT）、血清总胆红素（total bilirubin,TB）、血清白蛋白（albumin,ALB）。结果在PH12小时-120小时,促肝细胞生长素组AST低于对照组,差异有统计学意义,微生物酵素组在48小时和72小时低于对照组,差异有统计学意义;促肝细胞生长素组在12小时、24小时、72小时和120小时ALT低于对照组,差异有统计学意义,微生物酵素组在12小时、48小时和72小时ALT低于对照组,差异有统计学意义;在PH后24小时、72小时～168小时,促肝细胞生长素组TB是低于对照组,差异有统计学意义;在PH后24小时、120小时,微生物酵素组与对照组相比TB是降低的,差异有统计学意义;促肝细胞生长素在72小时和120小时ALB高于对照组,差异有统计学意义,微生物酵素组在168小时ALB高于对照组,差异有统计学意义。结论在PH后的某些时间点上,微生物酵素同促肝细胞生长素一样具有降低AST、A坍、TB和提高ALB合成,促进肝功能恢复的作用。     

肝硬化大鼠肝切除术后不同营养支持途径的对比研究

目的 探讨肝硬化大鼠肝切除术后不同营养支持途径的作用.方法 6只正常大鼠作为正常对照组,30只肝硬化大鼠随机分为术前组6只,肝切除+颈内静脉插管术后1d组6只,肝切除+颈内静脉插管术后行PN 5 d组6只,肝切除+胃造瘘术后1 d组6只,肝切除+胃造瘘术后行EN 5 d组6只.测大鼠肝功能、免疫功能、炎症反应和脂质过氧化指标.结果 与PN 5 d组比较,EN 5 d组血清AST、ALT、ALP显著下降(P＜0.05),血清ALB、IGF-1显著升高(P＜0.05),外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+显著升高(P＜0.05),血清IL-6、IFN-γ、TNF-α、MDA显著下降(P＜0.05),血清SOD活性显著升高(P＜0.05).结论 EN可以加快肝硬化大鼠肝切除术后肝功能的恢复,避免胆汁淤积,促进肝脏蛋白合成,改善术后免疫功能低下,减轻炎症反应和脂质过氧化损伤.     

异甘草酸镁对肝硬化大鼠肝部分切除术后肝功能及肝再生的影响

目的 研究异甘草酸镁对肝硬化大鼠部分肝切除术后肝功能和肝再生的影响.方法 45只肝硬化Wistar大鼠行2/3肝部分切除,并随机分为对照组(A组)、治疗组(B组)、术前3 d治疗组(C组).手术当天起,B组给予腹腔注射异甘草酸镁(60mg·kg-1·d-1),A组给予同等剂量生理盐水,C组在手术前3 d即给药(60 mg·kg-1·d-1).各组大鼠分别于术后1、2、7 d处死,检测肝功、血清肝细胞生长因子(HGF)及磷脂酶A2(PLA2)、5-溴脱氧尿苷(BrdU)标记指数、肝再生率.结果 A组在术后第1天,BrdU标记指数及HGF均低于C组(分别t=2.831,3.427,均P＜0.05),而PLA2高于B、C组(分别t=2.794,2.902,均P＜0.05);在术后第2天A组BrdU标记指数均低于B、C组(分别t=2.736,3.083,均P＜0.05),HGF水平与其他两组比较,差异均无统计学意义,PLA2仍高于B、C组(分别t=2.794,2.902,均P＜0.05);A组术后第1、2天ALT、AST、TP水平及肝再生率与B、C组比较,差异均无统计学意义;术后第7天A组AST高于其他两组(A组与B组比较t=4.508,P＜0.05;A组与C组比较t=2.967,P＜0.05),TP水平及肝再生率则均低于B、C组(TP:A组与B组比较t=2.838,P＜0.05;A组与C组比较t=2.743,P＜0.05);肝再生率:(A组与B组比较t=3.316,P＜0.05;A组与C组比较t=4.093,P＜0.05),而BrdU标记指数、HGF、PLA2三组间比较,差异均无统计学意义.B组术后第1天BrdU标记指数及HGF均低于C组(t=2.831,P＜0.05;t=2.836,P＜0.05).结论 异甘草酸镁可降低肝硬化大鼠部分肝切除术后转氨酶水平,改善肝脏功能,促进肝细胞增生.     

小体积肝切除促进肝硬化大鼠模型肝脏再生及肝功能恢复的实验研究

目的 观察小体积肝切除对肝硬化大鼠模型肝脏再生及肝功能恢复的影响.方法 采用CCl4腹腔注射方法制备肝硬化大鼠模型,肝硬化大鼠模型实施20％肝切除(n=30),以肝硬化假手术组(n=30)和正常大鼠20％肝切除组(n=30)作对照.在肝硬化模型制备至20％肝切除术后3个月的过程中,采用苏木精-伊红染色观察肝脏形态结构的变化,定期检测模型肝功能、凝血功能,采用Western blot、Re-al-time PCR检测肝细胞生长因子和转化生长因子-β以及增殖细胞核抗原在肝细胞中的表达情况,并与对照组进行比较.结果 在肝硬化模型制备过程中,苏木精-伊红染色提示大鼠肝脏逐渐呈现肝纤维化、肝硬化样改变;与正常大鼠比较,肝硬化动物模型中转化生长因子-β基因、蛋白表达逐渐增强.在接受20％肝切除术后3个月,肝硬化模型肝功能及凝血功能均较术前有所改善,同时TGF-β表达水平显著低于作为对照的肝硬化假手术组(P＜0.05),而肝细胞生长因子和增殖细胞核抗原基因、蛋白表达水平显著高于作为对照的肝硬化假手术组(P＜0.05).结论 小体积肝切除有助于促进肝硬化大鼠模型肝脏再生及肝功能的恢复,这为进一步深入开展小体积肝切除防治肝硬化进展的相关研究提供了新思路.     

重组人生长激素在治疗肝硬变大鼠肝部分切除术后低白蛋白血症中的作用

目的探讨重组人生长激素(rhGH)在治疗肝硬变大鼠肝部分切除术后低白蛋白血症中的作用。方法30只大鼠按编号法随机分为正常对照组、肝硬变组(LC组)、肝硬变切肝组(LCH组)、PN组(于肝叶切除术后行PN治疗)及rhGH PN组(于肝叶切除术后行rhGH PN治疗)．每组6只。检测大鼠肝功能、血糖．用RT-PCR法检测肝组织ALB mRNA的表达．肝组织行Ki67免疫组化染色。结果与PN组比较．rhGH PN组血清ALP降低，ALB、血糖升高．肝组织ALBmRNA表达水平及肝组织Ki67指数均升高。结论重组人生长激素可以改善肝硬变大鼠肝部分切除后低白蛋白血症。     

S-腺苷蛋氨酸对大鼠肝缺血再灌注损伤后清蛋白mRNA表达的影响

目的:探讨S-腺苷蛋氨酸(思美泰)对大鼠肝缺血再灌注损伤后清蛋白(ALB)mRNA表达的影响。方法:将72只SD大鼠随机均分为假手术组,肝缺血再灌注组(IR组),肝缺血再灌注+腺苷蛋氨酸干预组(SAM组)。IR组和SAM组均以肝脏缺血20 min后再灌注的方式造模。SAM组于术后1 h腹腔注射思美泰100 mg/(kg.d),假手术组和IR组予以等体积生理盐水。各组分别于术后1,4,7,10 d处死6只大鼠,用实时定量PCR方法测定肝组织ALB mRNA的含量。结果:术后第1天SAM组和IR组ALB mRNA相对表达量较假手术组明显降低(均P<0.05),但两组间差异无统计学意义(P>0.05);从术后第4天开始,SAM组ALB mRNA的相对表达量明显高于IR组(P<0.05),且至术后第10天明显超过假手术组(P<0.05)。结论:腺苷蛋氨酸能提高肝缺血再灌注损伤后ALB mRNA的合成,增强肝脏的合成功能。     

围手术期肠内免疫营养对肝硬化肝切除大鼠肝再生的影响

目的：探讨围手术期内使用肠内免疫营养支持对肝硬化肝切除大鼠肝再生功能的影响。方法：48只肝硬化大鼠随机均分为两组。A组为标准肠内营养组，B组为肠内免疫营养组。依标本采集时间的先后， A, B组再各分为4个亚组。两组大鼠用等热量肠内营养剂喂养8d 后行68％肝切除术，术后再喂养至取标本时间。分别于术前、术后1, 4和8d 取相应亚组大鼠肝组织标本，检测肝细胞有丝分裂指数(MI)和增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数。结果：两组大鼠肝切除术后残肝表现出一定的再生能力。B组肝细胞MI和PCNA阳性细胞计数在术后4d 和8d 显著高于A组(P<0.05)。结论：围手术期肠内免疫营养支持较之标准肠内营养支持更能增强肝硬化肝切除大鼠残肝再生能力，使肝再生在术后较长时间内保持高水平。     

Beneficial effect of hyperbaric oxygenation on liver regeneration in cirrhosis

BACKGROUND: Underlying hepatic injury and cirrhosis are leading factors that interfere with the post-operative liver regeneration and function. Hyperbaric oxygenation (HBO) has been reported to ameliorate the ischemia-reperfusion injury of the liver, to induce compensatory hypertrophy of the predicted remnant liver in rats after portal vein ligation and to augment liver regeneration after hepatectomy in non-cirrhotic rats. Our aim was to determine the effect of HBO treatment on liver regeneration after partial hepatectomy in normal and cirrhotic mice in this experimental study. MATERIALS AND METHODS: The effect of HBO on liver regeneration was studied in a mice model combining carbon tetrachloride induced cirrhosis and partial hepatectomy. Mice were divided into four groups: Control, cirrhotic, non-cirrhotic HBO-treated, and cirrhotic HBO-treated. All animals underwent 40% hepatectomy. Liver regeneration was evaluated by the proliferating cell nuclear antigen-labeling index. Serum aspartate aminotransferase and alanine aminotransferase levels were measured to evaluate liver injury. RESULTS: Serum alanine aminotransferase and aspartate aminotransferase levels were significantly decreased in HBO-treated cirrhotic group compared to cirrhosis group after hepatectomy (P = 0.001 and P = 0.014, respectively). The proliferating cell nuclear antigen labeling index was significantly higher in HBO treated cirrhotic group than in cirrhotic group after hepatectomy (P = 0.022). CONCLUSIONS: Our results suggest that HBO treatment improves liver functions and augments hepatocyte regeneration in cirrhotic mice after hepatectomy. Post-operative HBO treatment may have a beneficial effect on post-operative liver function and regeneration in cirrhotic patients.     

Combination gene therapy of HGF and truncated type II TGF-beta receptor for rat liver cirrhosis after partial hepatectomy

BACKGROUND: In a cirrhotic liver, the regenerative ability and specific functions are impaired; a hepatic resection increases the possibility of postoperative liver failure. Hepatocyte growth factor (HGF) stimulates liver regeneration, accelerates restoration of hepatic function, and improves fibrosis. A truncated type II transforming growth factor-beta receptor (TbetaTR), which specifically inhibits TGF-beta signaling as a dominant-negative receptor, appears to prevent the progression of liver fibrosis. We demonstrated the therapeutic efficacy of adenovirus-mediated HGF and TbetaTR gene transduction after partial hepatectomy for liver cirrhosis. METHODS: Rats were treated with dimethylnitrosamine for 3 weeks, and they all had severe cirrhosis. After partial hepatectomy (10%), we injected adenovirus expressing bacterial beta-galactosidase (AdLacZ), adenovirus expressing a truncated type II TGF-beta receptor (AdTbetaTR), adenovirus expressing hepatocyte growth factor (AdHGF), or AdTbetaTR + AdHGF into the portal vein, which was followed by an additional 2-week dimethylnitrosamine treatment. RESULTS: On histologic examination, fibrotic tissue had decreased in the livers of the AdTbetaTR + AdHGF-treated rats compared with rats that were treated by AdLacZ, AdTbetaTR alone, and AdHGF alone. Liver function, which included serum levels of alanine aminotransferase, improved significantly in AdTbetaTR + AdHGF-treated rats compared with all other groups. The number of hepatocytes that were positive for proliferating-cell nuclear antigen was greater (P < .05) in AdHGF alone and AdTbetaTR + AdHGF-treated rat livers than in AdLacZ- and AdTbetaTR-treated rats. All AdTbetaTR + AdHGF-treated rats survived >60 days, and AdTbetaTR + AdHGF treatment markedly improved the survival rate after a partial hepatectomy. CONCLUSION: Our results suggest that the combination of HGF and TbetaTR gene therapy may increase the possibility of hepatectomy in a cirrhotic liver by improving fibrosis, hepatic function, and hepatocyte regeneration.