苏木乙酸乙酯提取物对心脏移植模型大鼠ICAM-1和LFA-1蛋白表达的影响

目的:通过观察苏木乙酸乙酯提取物对同种异位心脏移植急性排斥反应模型大鼠移植心肌ICAM-1和LFA-1蛋白表达的影响,探讨其免疫抑制作用的机理,为苏木的新药研发提供重要的理论和实验依据。方法:以Wistar大鼠为供体,SD大鼠为受体,制备大鼠同种异位心脏移植模型,造模成功后,用Western Blot法测定ICAM-1和LFA-1蛋白含量变化。结果:模型对照组比较,苏木组、CsA组及苏木加半量CsA组均能降低ICAM-1和LFA-1蛋白的表达,差异有统计学意义;与CsA组比较,苏木组作用效果较弱,差异有统计学意义,而苏木加半量CsA组作用效果相当,无统计学意义。结论:在大鼠心脏移植模型中,苏木乙酸乙酯提取物具有降低同种异位心脏移植模型大鼠心肌ICAM-1和LFA-1蛋白的表达,减轻移植心脏的急性排斥反应。     

右归丸含药血清对THP-1源性泡沫细胞胆固醇代谢的影响及机制研究

目的 观察右归丸含药血清对THP-1源性泡沫细胞内SREBP-1c和ABCA1因子表达的影响,以探讨右归丸对泡沫细胞内胆固醇代谢的影响及机制.方法 THP-1细胞诱导分化成巨噬细胞后,在ox-LDL刺激48 h,使巨噬细胞转化为泡沫细胞,给予右归丸大、中、小剂量含药血清干预,通过油红O染色检测细胞内脂滴的形态,大小和数...     

基于SCAP/SREBP-2通路探讨电针对高脂血症大鼠胆固醇代谢的影响

目的:观察电针对高脂血症(HLP)大鼠固醇调节元件结合蛋白裂解活化蛋白(SCAP)、固醇调节元件结合蛋白-2(SREBP-2)及其下游胆固醇代谢靶基因3羟基3甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGCR)、前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)、低密度脂蛋白受体(LDLR)表达的影响,探讨电针调节胆固醇代谢从而治疗HLP的机制。方法:SD大鼠随机挑选10只作为空白组饲喂基础饲料,其余大鼠饲喂高脂饲料28 d建立HLP模型。造模成功大鼠随机分为模型组、电针组,每组10只。电针组电针双侧“丰隆”“阴陵泉”,留针30 min,每天治疗1次,治疗28 d。全自动生化分析仪测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量及谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)活性;高效液相色谱法检测肝组织的TC含量;Western blot法检测肝组织SCAP、SREBP-2及HMGCR、PCSK9、LDLR的蛋白表达水平;荧光定量PCR法检测肝组织SCAP、SREBP-2及HMGCR、PCSK9、LDLR mRNA表达水平;免疫荧光法检测肝组织SC...     

黄荆子乙酸乙酯提取物及其活性成分对人卵巢癌CoC1细胞生长的影响

目的：观察黄荆子乙酸乙酯提取物EVn-50及从中分级分离获得的4种黄荆子木脂类化合物Comp6、Comp7、Comp8、Comp10对人卵巢癌CoC1细胞生长的影响;方法：体外培养人卵巢癌CoC1细胞,分为5个实验组及三个对照组（溶媒对照组、空白对照组及DDP对照组）,以不同浓度的提取物及活性成分孵育48小时,台盼蓝染色后计数活细胞数,计算细胞存活率（％）及IC50值,检测量效关系;以同一有效浓度的提取物及活性成分分别作用Oh、24h、48h、72h、96h,台盼蓝染色后计数各时间活细胞数,计算平均数,绘制生长曲线,检测时效关系;结果：EVn-50、Comp6、Comp7、Comp8、Comp10对人卵巢癌CoC1细胞生长具有抑制作用,且呈浓度及时间依赖性,其中,以Comp8效价最高,其IC50为1．40μg／mL;其次为EVn-50,其IC50为1．56μg／mL;结论：黄荆子乙酸乙酯提取物EVn-50及黄荆子木脂类化合物具有抑制人卵巢癌CoC1细胞生长作用。     

苏木乙酸乙酯提取物对大鼠外周血细胞因子的影响

目的:通过观察苏木乙酸乙酯提取物对健康大鼠外周血细胞因子IL-1、IL-2、IL-12及IFN-γ含量的影响,探讨其免疫抑制的作用机制。方法:健康Wistar大鼠32只,随机分为空白组、高剂量组、中剂量组、低剂量组,每组8只大鼠。高、中、低剂量组分别按照2.3g/kg/d、1.15g/kg/d、0.58g/kg/d剂量给予苏木乙酸乙酯提取物灌胃,空白组给予同体积橄榄油灌胃,连续灌胃7天,眼球取血,采用ELISA法检测大鼠血清IL-1、IL-2、IL-12及IFN-γ含量。结果:苏木乙酸乙酯提取物高、中、低剂量组与空白组比较,IL-1的表达无明显差异;高、中剂量组IL-2、IFN-γ的表达均降低,与空白组比较有显著性差异(P<0.05)。高、中、低剂量组IL-12的表达均降低,与空白组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:苏木乙酸乙酯提取物具有免疫抑制作用,其作用机理可能与抑制细胞因子IL-2、IL-12、IFN-γ的表达有关。     

锁阳乙酸乙酯提取物对Aβ_(25-35)诱导损伤PC12细胞的影响北大核心CSCD

目的:探讨锁阳乙酸乙酯提取物对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤的影响。方法:将48只大鼠随机分为空白组、锁阳乙酸乙酯提取物83mg/kg、8. 3mg/kg、0. 83mg/kg剂量组,采血制备空白血清和含药血清;以Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤造模,锁阳乙酸乙酯提取物含药血清处理PC12细胞后,通过MTT法检测细胞活力,Hoechst 33342染色、流式细胞术检测PC12细胞凋亡情况,用相应的试剂盒测定细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮合酶(NOS)和一氧化氮(NO)的活性及含量。结果:与空白血清组相比,锁阳乙酸乙酯提取物各组10%血清显著提高细胞存活率,使细胞凋亡率明显下降,显著提高了SOD活性,显著降低了MDA、NOS、NO含量。结论:锁阳乙酸乙酯提取物对Aβ_(25-35)致PC12细胞损伤具有保护作用,其保护机制与其增强SOD活性,降低MDA含量,降低NOS活性,减少NO生成,减轻氧化应激对细胞的损伤有关。     

疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝组织SREBP-1c mRNA及蛋白表达的影响

目的:观察疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝组织SREBP-1c mRNA及蛋白表达的影响,并探讨其机制。方法:选雄性SPF级SD大鼠55只,随机分为模型组、正常对照组和3个中药干预组,分别为疏肝组、健脾组及合方组。除正常对照组外,各组采用脂肪乳剂灌胃8 w复制大鼠NAFLD模型,同时各药物干预组给予不同药物干预(10 mL/kg),正常对照组和模型组给予等体积蒸馏水灌胃。8 w后处死动物取肝组织,HE染色观察肝脏病理变化;RT-PCR方法检测肝组织SREBP-1c mRNA的表达;免疫组织化学方法检测肝组织SREBP-1c的蛋白表达水平和分布。结果:模型组大鼠肝组织SREBP-1c mRNA表达水平及SREBP-1c蛋白阳性表达率较正常对照组显著升高(P<0.01);各中药干预组大鼠肝组织SREBP-1c mRNA表达水平及SREBP-1c蛋白阳性表达率较模型组显著降低(P<0.05或P<0.01);疏肝组、健脾组大鼠肝组织SREBP-1c mRNA表达率较合方组显著降低(P<0.01)。病理观察显示疏肝、健脾组大鼠肝组织脂肪变最轻。结论:疏肝健脾方药可能是通过下调SREBP-1c mRN...     

小檗碱合用厚朴酚类对THP-1泡沫细胞胆固醇外流的影响

目的 研究小檗碱合用厚朴酚类作用于THP-1源性泡沫细胞后对细胞内胆固醇含量及ABCAl mRNA表达的影响.方法 采用HPLC-MS法测定总胆固酵,抗干扰Lowery法测定总蛋白质,以油红O染色法镜下现察泡沫化程度,实时荧光定量RT-PCR法检测ABCAl mRNA的表达.结果 小檗碱合用厚朴酚类作用于泡沫细胞后,细胞内总胆固醇明显减少,总蛋白质明显降低,泡沫化程度减轻,ABCA1 mRNA表达升高,是对照组近2倍,是模型组近5倍.结论 小檗碱合用厚朴酚类通过上调ABCA1表达促进细胞内胆固醇外流.     

苏木乙酸乙酯提取物对大鼠心脏移植慢性排斥模型血清TGF-β1的影响

目的:通过观察苏木乙酸乙酯提取物对大鼠同种异位心脏移植慢性排斥反应血清中TGF-β1水平的影响,为进一步探讨苏木乙酸乙酯提取物对慢性排斥反应的作用机制奠定基础。方法:以Wistar大鼠为供体,以SD大鼠为受体,Ono术式建立心脏移植模型。将上述大鼠术后24h给予35mg/kg/d环孢素A(CsA)灌胃,连续21天,以抑制急性排斥反应。21天后选择心脏跳动良好者随机分组。Ⅰ组为对照组,无药物治疗,灌服等体积的橄榄油;Ⅱ组为CsA组,按CsA12mg/kg/d灌服给药;Ⅲ组为苏木乙酸乙酯提取物组,按生药1.15g/kg/d灌服给药。给药7天后采集血液,用ELISA法检测血清中TGF-β1的含量。结果:与对照组相比,CsA组和苏木乙酸乙酯提取物组大鼠血清中TGF-β1的含量明显降低,差异具有统计学意义(P0.01),苏木乙酸乙酯提取物组与CsA组相比,无显著差异(P0.05)。结论:苏木乙酸乙酯提取物能降低心脏移植慢性排斥大鼠血清TGF-β1的含量,这可能是其抗慢性排斥反应作用的机制之一。     

乌蕨乙酸乙酯部位化学成分

目的：研究乌蕨乙酸乙酯部位的化学成分。方法：利用硅胶柱色谱及 Sephadex LH-20 柱色谱对乌蕨乙酸乙酯部位进行分离、纯化。通过理化性质和波谱数据对化合物进行结构解析。结果：从乌蕨的乙酸乙酯部位分离、纯化得到13个化合物,分别鉴定为：β-谷甾醇（1）,4-羟基-2,6-二氧甲基-苯甲酸（2）,胡萝卜苷（3）,芹菜素（4）,芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）,4-羟基-3-甲氧基苯甲酸（6）,丁香酸（7）,原儿茶醛（8）,2,5-二羟基苯甲酸（9）,原儿茶酸（10）,秦皮素（10）,6-氯-芹菜素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（12）,牡荆素（13）。结论：化合物6,12为首次从该属中分离得到。     

生藤乙酸乙酯部位化学成分

目的:研究生藤中乙酸乙酯部位的化学成分。方法:采用硅胶柱色谱、MCI和Sephadex LH-20等分离手段对乙酸乙酯萃取部分进行分离纯化,通过波谱数据分析(1H-NMR、13C-NMR)进行结构鉴定。结果:从乙酸乙酯萃取部分分离5个化合物,分别鉴定为丁香脂素(Ⅰ),diasyringaresinol(Ⅱ),表丁香脂素(Ⅲ),justiciresinol(Ⅳ),threo-4’,4″,7″,9″-tetrahydroxy-3,3’,3″,5-tetramethoxy-4,8″-oxy-7,9’∶7’,9-diepoxylignan(Ⅴ)。结论:5种化合物均为首次从该植物中分离得到。     

鼠曲草乙酸乙酯部位化学成分研究

目的：研究鼠曲草中乙酸乙酯部位的化学成分。方法：采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20等分离手段结合对鼠曲草乙酸乙酯萃取部位的E₁~E₃进行分离纯化,通过波谱数据分析（¹H-NMR,¹³C-NMR）进行结构鉴定。结果：从乙酸乙酯萃取部位的Fr₁~Fr₃分离了8个化合物,分别鉴定为正三十四烷醇（1）、paoriscabratine（2）、单棕榈酸酯（3）、9,16-二羰基-10,12,14-三烯-十八碳酸（4）、tithoniamide B（5）、corchoionol C（6）、胡萝卜苷（7）、2,3,5,4-四羟基反式二苯乙烯-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（8）。结论：化合物 3 为首次从鼠曲草属植物中分离到,化合物 1,2,4~6,8 为首次从菊科植物中分离到。     

美花筋骨草乙酸乙酯部位化学成分分析

目的:研究美花筋骨草(Ajuga ovalifolia var. calantha)95%乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位的化学成分。方法:将美花筋骨草药材用95%乙醇渗漉,合并渗漉液减压浓缩得到浸膏,加水分散浸膏后用石油醚萃取,得到石油醚萃取部位和水层,再用乙酸乙酯对水层进行萃取,得到乙酸乙酯萃取部位。利用硅胶,LH-20型羟丙基葡聚糖凝胶(Sephadex LH-20),小孔树脂(MCI),ODS等色谱柱及半制备型高效液相色谱等方法对美花筋骨草的乙酸乙酯萃取部位分离纯化,并利用NMR,ESI-MS等波谱手段对化合物进行结构鉴定。结果:从美花筋骨草中分离得到17个已知化合物,分别鉴定为蜂斗菜内酯-E(1),黑麦草内酯(2),异黑麦草内酯(3),(E)-linalool-1-oic acid(4),伞形花内酯(5),连翘脂素(6),1-(4-hydroxyphenyl)-ethanol(7),(2E)-8-hydroxy-2,6-dimethyl-2-octenoic acid(8),1H-吲哚-3-羧酸(9),ajugarin I(10),ajugalactone(11),木犀草素(12),20-hydroxyecdysone-2-acetate(13),benzyl-4'-hydroxy-benzoyl-3'-O-β-D-glucopyranoside(14),harpagide(15),6-deoxy-8-acetylharpagide(16),acteoside(17)。结论:其中化合物1,3～4,6～9,14均为初次在该属植物中分离得到,化合物2,5,10,13,15～16均为初次在该植物中分离得到。     

菝葜叶绿体基因组的组装分析与分子标记研究＊

目的 采用高通量测序数据和新组装手段对药用植物菝葜的叶绿体基因组进行精细组装，并以此为基础厘清其分类地位，开发分子鉴定标记。方法 利用两种测序手段重新测定并精细组装菝葜叶绿体基因组；重建菝葜近缘物种在时间尺度下的系统发育关系；分析菝葜叶绿体基因组一级结构并检测编码区选择压力；筛选并验证具备种群特异性的SSR引物。结果 混合组装结果显示菝葜叶绿体基因组全长157959 bp，内含编码基因86个。菝葜族与油点草族和百合族互为姐妹群；其内部约26.5Mya开始出现分化。在accD、rbcL及rpl20基因中存正选择信号。247个SSR位点中的3个具备作为菝葜分子鉴定标记的潜力。结论 利用短读长和长读长共同组装菝葜叶绿体基因组的结果更佳。已探明的3个SSR位点能为筛选分子标记提供数据支撑。     

臭椿皮乙酸乙酯部位化学成分研究

目的:研究臭椿皮中乙酸乙酯部位的化学成分.方法:采用硅胶和Sephadex LH-20等柱色谱对乙酸乙酯萃取部分进行分离,通过波谱数据分析进行结构鉴定.结果:从乙酸乙酯部位分离6个化合物,分别鉴定为3-甲氧基-4-羟基苯甲酸(1),延胡索乙素(2),马兜铃酸内酰胺AⅡ(3),槲皮素(4),阿魏酸(5),齐墩果酸(6).结论:化合物1～4,6为首次从该植物中分离得到.     

HPLC测定菝葜茋类提取物在大鼠体内组织中的分布

目的：研究菝葜茋类提取物在大鼠体内的组织分布规律。方法：菝葜茋类提取物大鼠灌胃给药1 g·kg^-1 后,应用HPLC测定氧化白藜芦醇和白藜芦醇在大鼠心、肝、脾、肺、肾中的含量。色谱柱：Zorbax SB-C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相：(A)乙腈－(B)水进行梯度洗脱;流速1.0 mL·min^-1;检测波长320 nm;进样量10 μL;柱温40 ℃。结果：建立了氧化白藜芦醇和白藜芦醇在大鼠心、肝、脾、肺、肾中的含量测定方法。结论：本方法简便、准确、专属性强,可以成功应用于大鼠灌胃给药菝葜茋类提取物后,氧化白藜芦醇和白藜芦醇在大鼠体内组织分布的研究。     

波棱瓜子乙酸乙酯部位抗免疫性肝损伤活性谱效关系分析

目的:探讨波棱瓜子乙酸乙酯部位HPLC特征图谱与其抗免疫性肝损伤活性的相互关系。方法:采用硅胶柱色谱分离结合均匀设计获得不同化学成分组成的9批波棱瓜子乙酸乙酯部位样品,应用HPLC建立9批样品特征图谱并通过聚类分析评价9批样品的差异性;建立卡介苗+脂多糖诱导小鼠免疫性肝损伤模型测定给药组小鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性及肝组织匀浆中丙二醛(MDA)含量;结合灰色关联分析法及偏最小二乘回归分析法(PLSR)研究其谱效相关性。结果:9批不同组合的样品HPLC图谱有明显差异,从其共有模式中标定了16个特征峰。与模型组相比,9批波棱瓜子给药组小鼠血清中ALT,AST活性和肝匀浆中MDA含量明显降低。谱效相关性研究发现6,7,10,15,16号峰(分别代表化合物波棱甲素、波棱素、波棱醇、波棱酮、波棱醛)是与抗免疫性肝损伤作用关联性较大的正相关色谱峰。结论:各样品对免疫性肝损伤均具有治疗作用,其护肝作用主要活性成分为波棱甲素、波棱素、波棱醇、波棱酮、波棱醛。     

天麻乙酸乙酯提取物对PC12细胞氧化损伤的保护作用

目的: 探讨天麻乙酸乙酯提取物对氧化损伤神经细胞的保护作用,并初步探讨其保护机制。 方法: 以过氧化氢（50~100 μmol·L^-1）预孵PC12细胞2 h造成的细胞氧化应激损伤模型,通过观察细胞形态,测定细胞存活率（MTT法）、乳酸脱氢酶（LDH）泄漏率、细胞内活性氧（ROS）水平和总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性探讨了天麻乙酸乙酯提取物对PC12细胞氧化损伤的保护作用。 结果: 天麻乙酸乙酯提取物（20 mg·L^-1）能明显改善H₂O₂氧化损伤PC12模型细胞的形态,提高细胞存活率14.7%（P<0.01）;天麻乙酸乙酯提取物（20,40,80 mg·L^-1）降低模型细胞LDH泄漏率分别为22.0%,29.3%,20.2%（P<0.01）,明显提高细胞内T-SOD的活性（P<0.01）;天麻乙酸乙酯提取物（80 mg·L^-1）还降低细胞内ROS水平（P<0.01）。 结论: 天麻乙酸乙酯提取物在体外具有抗氧化损伤的作用。     

RP-HPLC同时测定菝葜中落新妇苷和黄杞苷的含量

 目的建立同时测定菝葜药材中落新妇苷和黄杞苷含量的HPLC方法。方法采用Agilent Extend-C₁₈(4.6 mm×250 mm,5μm)柱,以甲醇-水-磷酸溶液(35:65:0.1)为流动相,流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,检测波长为290nm。结果落新妇苷和黄杞苷分别在2.16×10^-3～1.08,3.176×10^-3～1.588μg内呈良好的线性关系;精密度试验RSD分别为0.75%,0.24%;重复性试验RSD分别为0.79%,0.89%;平均加样回收率分别为100.90%,98.71%。结论建立的方法可用于菝葜药材的质量控制。