HPLC-ECD检测尿儿茶酚胺方法的优化

本文介绍自制氧化铝微柱提取样品，改良洗脱条件与流动相配比，用高效液相色谱分离及电化学检测器（ＨＰＬＣ－ＥＣＤ）分析尿儿茶酚胺。去甲肾上腺素、肾上腺素、多巴胺的回收率分别为９１．２％、８０．７％和１１０．９％，线性范围３．３～３３３３μｍｏｌ／Ｌ，批内和批间变异系数均＜５％。此法简便、经济、快速、特异性强、回收率高，便于临床和实验室推广应用。     

HPLC-FD法检测尿儿茶酚胺

目的 :建立一种简便、灵敏度高、重复性好的尿儿茶酚胺检测方法。方法 :应用高效液相色谱 (HPLC)系统和荧光检测器 ,探索检测 2 4h尿去甲肾上腺素、肾上腺素和多巴胺含量的最佳条件以及回收率、线性范围、精密度、最低检测线。结果 :流动相甲醇与 0 .0 2mol·L- 1 磷酸二氢钾的比为 2∶98、pH值为 3 .0时测定效果最佳。去甲肾上腺素、肾上腺素和多巴胺回收率依次为 69%～ 78%、63 %～ 73 %及 60 %～ 71% ,最低检测线依次为 0 .0 15、0 .0 0 8、0 .0 0 3 μmol·L- 1 ,RSD为 4.9%～ 10 .6%。结论 :HPLC FD法用于临床检测尿儿茶酚胺简便易行 ,灵敏度高 ,重复性好 ,易于临床推广     

高效液相色谱—电化学检测法测定心肌组织中的儿茶酚胺

儿茶酚胺(CAs)包括肾上腺素(A),去甲肾上腺素(NA)及多巴胺(DA),是人体含量极微而又具有重要生理活性的激素和神经递质,为生理学及临床医学上重要研究对象。测定这些物质国内外曾有报道用高效液相色谱(HPLC)、气质联用、放射免疫和酶免疫等分析方法,但这些方法分别存在操作手续麻烦,价格昂贵等缺点。近几年兴起的HPLC—电化学检测分析法,具有快速、简便、灵敏、能同时测     

高效液相色谱法测定血浆中儿茶酚胺

目的：建立用高效液相色谱（HPLC）电化学检测器同时测定血浆中儿茶酚胺水平的方法,以诊断哮铬细胞瘤和神经母细胞瘤。方法：利用离子对提取血浆中儿茶酚胺,电化学检测器检测血浆中儿茶酚胺水平,并测定其回收率,线性范围,精密度及最低检查限度,参考18例正常人儿茶酚胺水平建立正常参考范围。结果：肾上腺素,去甲肾上腺素回收率分别为86．2％和90．5％,该方法测定肾上腺素在0．2－11．6nmol.L^-1内呈良好线性关系,最低检查限度为0．05nmol.L^-1,批内,批间变异系数别小于10．7％和11．1％。结论：本法肜于检测血浆中儿茶酚胺水平具有准确,灵敏,简便的特点,适合临床诊断。     

高效液相色谱法检测糖尿病肾病尿儿茶酚胺含量

目的: 研究一种简便、准确、易于临床推广的儿茶酚胺(CAs)检测方法,进行尿中 CAs测定,探讨 2 型糖尿病肾病(DN)动态血压(ABP)与尿儿茶酚胺(UCA)的关系。方法: 利用高效液相色谱及荧光检测器,对正常人和糖尿病肾病病人24 h尿中去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)和多巴胺(DA)进行测定。结果: NE浓度在3~15 ng/ml范围及E浓度在0.3~1.5 ng/ml、DA浓度在1.5~120 ng/ ml范围内时,与色谱峰峰高的线性关系良好( r=0.999 1);NE、E回收率为 75%~82%,DA回收率为 76%;NE、E、DA的精密度 RSD(%)分别为 1.11%、7.21%、1.43% (n=5)。结论: 高效液相色谱法检测尿CAs具有简单、准确、特异性高的优点。通过对正常人及糖尿病肾病病人24 h尿样分析,不能认为交感神经肾上腺髓质系统活性与糖尿病肾病高血压及血压昼夜节律异常之间有相关性。     

高效液相色谱法测定血浆中儿茶酚胺

目的 :建立用高效液相色谱 (HPLC)电化学检测器同时测定血浆中儿茶酚胺水平的方法 ,以诊断嗜铬细胞瘤和神经母细胞瘤。方法 :利用离子对提取血浆中儿茶酚胺 ,电化学检测器检测血浆中儿茶酚胺水平 ,并测定其回收率、线性范围、精密度及最低检查限度 ,参考 18例正常人儿茶酚胺水平建立正常参考范围。结果 :肾上腺素、去甲肾上腺素回收率分别为 86 .2 %和 90 .5 %。该方法测定肾上腺素在 0 .2～ 10 .6nmol·L-1内呈良好线性关系 ,最低检查限度为 0 .0 5nmol·L-1,批内、批间变异系数别小于 10 .7%和 11.1%。结论 :本法用于检测血浆中儿茶酚胺水平具有准确、灵敏、简便的特点 ,适合临床诊断。     

高效液相色谱法测定人血浆中芬太尼的浓度测定分析

目的建立高效液相色谱（HPLC）法测定芬太尼血药浓度的方法。方法本实验以乙腈：磷酸盐（0．015ol／LNaH2PO4,pH=5）=40：60为流动相,流速3ml／min,紫外吸收波长为200nm。结果高效液相色谱法对血浆中药物的最低检测浓度为1ng／ml,线形范围6-300ng／ml。对芬太尼方法回收率均大于95％,日间日内相对标准偏差均小于10．0％。结论高效液相色谱法简便、准确,能满足临床对芬太尼血药浓度的测定。     

高效液相色谱法测定人血浆中二甲双胍的浓度

目的建立HPLC法测定人血浆中二甲双胍的浓度。方法用乙腈作为蛋白沉淀剂,色谱柱为150 mm×4．6 mm,5μm,流动相为V(乙腈)：V(甲醇)：V(水)：V(1．5%SDS)=35：15：42．5：7．5,流速1．0 mL/min,DAD检测波长234 nm。结果二甲双胍的线性范围为0．154～2．316μg/mL,最低检测限为0．111μg/mL(s/n＞3),样品平均回收率为97．8%,批内、批间精密度的RSD均小于8．0%。结论该法准确、快速、简便,可用作人血浆中二甲双胍浓度测定方法。     

反相HPLC法测定人血浆中盐酸伪麻黄碱浓度

目的:建立反相高效液相色谱法测定人血浆中盐酸伪麻黄碱浓度的方法。方法:以苯丙醇胺为内标,血浆样品经NaOH碱化,甲基叔丁基醚二次萃取后常温氮气挥干,100μl流动相溶解,50μl进样分析。色谱柱:ZORBAX SB-C18柱(4.6×150mm,5μm),柱温28℃;流动相:甲醇-水相(5∶95,内含0.75%的三乙胺,以H3PO4调节pH值至6.6),流速1.0m l.m in-1,检测波长213nm。结果:盐酸伪麻黄碱在0.05~1 mg.L-1范围内线性关系良好,回归方程为Y=1.6151X-0.0804(r=0.998),相对回收率为94.4%~118.2%,日内、日间RSD均小于9.8%。结论:该方法简便、灵敏、稳定性好,可用于盐酸伪麻黄碱血药浓度的测定。     

HPLC法测定大鼠血浆中小檗碱的浓度

目的建立测定大鼠血浆中小檗碱浓度的高效液相色谱法。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),以乙腈-水(每100 ml含乙酸铵1.54g,磷酸二氢钾0.14g,三乙胺0.2 ml)(35∶65)为流动相,流速1.0ml/min,检测波长346nm。结果小檗碱在0.005～1.0μg/ml(r=0.9997,n=7)的范围内线性关系良好,定量下限0.005μg/ml,提取回收率80.03%～102.35%,相对回收率84.0%～100.3%,日内、日间精密度RSD均<11.1%。结论本方法快速、灵敏、准确,可用于小檗碱在大鼠体内的药物动力学研究。     

RP-HPLC-ECD检测血浆尿液中儿茶酚胺及其临床应用

目的 建立一种简便、准确、灵敏、易于临床推广的测定血尿中儿茶酚胺(CAs，包括NE、E、DA)的检测方法，并进行了临床血浆及24小时尿液标本中CAs测定。方法 采用活性氧化铝吸附标本中CAs，酸解吸附后，以3，4-二羟基苄胺(13HBA)为内标，利用离子对反相高效液相色谱及电化学检测器进行测定。结果 显示NE、E、DA在0．156—100ng／ml浓度范围内与响应值(色谱峰面积对内标峰面积之比)线性关系良好(r分别为0．9998、0．9999、0．9998)，其方法回收率分别为63．2％—93．4％、65．6％—103．7％、70．4％—111．3％，CV值为1．23％—19．52％，在嗜铬细胞瘤患者中CAs有显著升高。结论 该实验方法简单、准确、灵敏、特异性高，不失为一种敏感、可靠的诊断嗜铬细胞瘤的方法。     

高效液相色谱法测定替考拉宁血药浓度

目的:建立高效液相色谱（HPLC）法检测人血浆中替考拉宁浓度的方法。方法:采用Waters System-C18色谱柱,以乙腈:0.01mol/L磷酸二氢钠缓冲液（25:75,V/V,H3PO4调pH值为2.53）为流动相,柱温40 ℃,流速1.2 mL/min;进样量20 L;检测波长215nm。结果:本方法得到标准曲线方程为y = 0.053x - 0.021（R2= 0.998）,人血浆中替考拉宁浓度在3.125～100 mg/L范围内具有良好的线性关系。回收率大于92%,精密度和稳定性的RSD均小于8%。结论:本研究建立的替考拉宁血药浓度HPLC测定法专属性好、操作简单、准确度高、重现性好、回收率和灵敏度高,适用于生物样本分析研究,可满足替考拉宁药动学研究的需要。     

二次萃取法测定人血浆中芬太尼浓度

目的探讨高效液相色谱法-紫外二次萃取法测定人血浆中芬太尼浓度的方法。方法本实验采用内标法,以盐酸瑞芬太尼为内标,以Zorbax-CN(250mm×46mm,5μm)为固定相,以含0.015mol/L磷酸氢二钠和0.05mol/L戊烷磺酸钠的乙腈-水溶液(70:30,v/v)为流动相,流速1.5mL/min,紫外检测波长200nm。结果标准曲线在1～100ng/mL范围内线性关系良好(r=0.999),最低检测浓度为1ng/mL,方法回收率为(91.45±4.55)%,提取回收率为(95.63±4.02)%,日内变异RSD(6.23±2.90)%,日间变异RSD(6.45±4.12)%。结论本方法简便、准确、检测浓度低,能够满足血浆中低浓度芬太尼的测定及临床药代动力学研究的要求。     

二次萃取法测定人血浆中芬太尼浓度

目的探讨高效液相色谱法一紫外二次萃取法测定人血浆中芬太尼浓度的方法。方法本实验采用内标法，以盐酸瑞芬太尼为内标，以Zorbax-CN（250mm×46mm，5μm）为固定相，以含0．015mol／L磷酸氢二钠和0．05mol／L戊烷磺酸钠的乙腈一水溶液（70：30，v／v）为流动相，流速1．5mL／min，紫外检测波长200nm。结果标准曲线在1～100ng／mL范围内线性关系良好忙0．999），最低检测浓度为lng／mL,方法回收率为（91．45±4．55）％，提取回收率为（95．63±4．02）％，日内变异RSD（6．23±2．90）％，日间变异RSD（6．45±4．12恸。结论本方法简便、准确、检测浓度低，能够满足血浆中低浓度芬太尼的测定及临床药代动力学研究的要求。     

高效液相色谱法同时测定人血浆中氯氮平与氟西汀的浓度

目的 建立同时测定人血浆中氯氮平、氟西汀浓度的高效液相色谱法.方法 以DiamonsilTM C18反相柱(150 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,流动相为30 mmol·L-1醋酸铵-甲醇(体积比24:76),流速为0.8mL·min-1,柱温为40℃,检测波长为254 nm,以乙酸乙酯-二氯甲烷(体积比80...     

HPLC法测定人血浆中两性霉素B的浓度

目的建立HPLC法快速测定人血浆中两性霉素B的血药浓度。方法色谱柱为Agilent TC-C18反相柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.03 mol·L-1乙酸铵水溶液（体积比44∶56,pH=4.8）,流速为0.8 mL·min-1,检测波长为410 nm,柱温为40℃。以小檗碱为内标。结果两性霉素B血药浓度在0.04～10μg·mL-1范围内与峰面积呈良好线性关系（r=0.997 2,n=7）。两性霉素B高（8μg·mL-1）、中（1μg·mL-1）、低（0.1μg·mL-1）3个血药浓度的方法回收率平均值分别为97.60%、93.90%和94.53%,日内（n=5）、日间（n=3）RSD值均小于10%。结论该方法简便、快速、灵敏,可用于两性霉素B的临床血药浓度监测和药动学研究。