CD34抗原阴性的造血干细胞

即往研究表明造血干细胞(HSC)存在于CD34~ 的细胞组群中,但最近研究发现在鼠和人体内存在有CD34~-的HSC。本文对CD34~-HSC的认识现况作了一简要的概述。     

造血干细胞的发生及生物学特性

造血干细胞来源于胚胎发育期的全能干细胞,是一群处于不同发育阶段,具有自我更新能力,增殖分化潜能和潜在可塑性的异质性细胞。     

造血干细胞的发生及生物学特性

造血干细胞来源于胚胎发育期的全能干细胞,是一群处于不同发育阶段,具有自我更新能力,增殖分化潜能和潜在可塑性的异质性细胞。     

人脐血非造血干细胞的基本特性

目的：通过对体外培养人脐血来源非造血干细胞生长特性的观察和对细胞免疫表型的检测，探讨人脐血来源非造血干细胞的一般特性，为进一步研究人脐血来源非造血干细胞提供依据。 方法：实验于2005-01／10在首都医科大学北京神经科学研究所和首都医科大学组织学胚胎学教研室实验室完成。脐带血由首都医科大学附属天坛医院提供，经密度梯度离心法分离新鲜脐带血，获取的单个核细胞进行培养。①倒置显微镜下观察细胞形态。②培养基中加入白血病抑制因子或用Mescencult间充质干细胞培养基进行培养，记录细胞生长状况。③流式细胞术分析脐血单个核细胞的免疫表型。 结果：①人脐血非造血千细胞形态观察：较低密度接种细胞并不能形成大量贴壁细胞，而以5&;#215;10^6细胞密度接种则在48-72h后出现贴壁的梭形细胞：培养过程中细胞形态逐渐形成均一梭形。②生长特性：人脐血非造血干细胞接种5d后增殖速度加快，随后的几天内保持较快的增殖速度，15d后进入平台期。高糖DMEM培养基＋胎牛血清和高糖DMEM培养基＋胎牛血清＋白血病抑制因子，两种培养体系在细胞增殖上未显示差异，白血病抑制因子并没有显著改善人脐血非造血干细胞生长增殖速度。③免疫表型：新鲜脐血经分离得到的单个核细胞中有少量CD34阳性细胞，CD90，CD166阳性细胞比例分别为（24．18&;#177;5．46）％和（36．44&;#177;6．26）％；人脐血非造血干细胞体外培养10d左右无CD34阳性细胞，CDl66阳性细胞的比例达（76．48&;#177;4．54场，较单个核细胞中CDl66阳性细胞比例明显增高，并且表达HLA-ABC，而少量表达HLA-DR。 结论：合适的细胞接种密度有利于人脐血非造血干细胞贴壁生长。白血病抑制因子并不能增加体外培养的人脐血非造血干细胞的生长增殖速度。人脐血非造血干细胞体外培养10d左右可以获得纯度较高的CD166阳性细胞．     

人脐血非造血干细胞的基本特性

目的:通过对体外培养人脐血来源非造血干细胞生长特性的观察和对细胞免疫表型的检测,探讨人脐血来源非造血干细胞的一般特性,为进一步研究人脐血来源非造血干细胞提供依据。方法:实验于2005-01/10在首都医科大学北京神经科学研究所和首都医科大学组织学胚胎学教研室实验室完成。脐带血由首都医科大学附属天坛医院提供,经密度梯度离心法分离新鲜脐带血,获取的单个核细胞进行培养。①倒置显微镜下观察细胞形态。②培养基中加入白血病抑制因子或用Mescencult间充质干细胞培养基进行培养,记录细胞生长状况。③流式细胞术分析脐血单个核细胞的免疫表型。结果:①人脐血非造血干细胞形态观察:较低密度接种细胞并不能形成大量贴壁细胞,而以5×106细胞密度接种则在48～72h后出现贴壁的梭形细胞,培养过程中细胞形态逐渐形成均一梭形。②生长特性:人脐血非造血干细胞接种5d后增殖速度加快,随后的几天内保持较快的增殖速度,15d后进入平台期。高糖DMEM培养基 胎牛血清和高糖DMEM培养基 胎牛血清 白血病抑制因子,两种培养体系在细胞增殖上未显示差异,白血病抑制因子并没有显著改善人脐血非造血干细胞生长增殖速度。③免疫表型:新鲜脐血经分离得到的单个核细胞中有少量CD34阳性细胞,CD90,CD166阳性细胞比例分别为(24.18±5.46)%和(36.44±6.26)%;人脐血非造血干细胞体外培养10d左右无CD34阳性细胞,CD166阳性细胞的比例达(76.48±4.54)%,较单个核细胞中CD166阳性细胞比例明显增高,并且表达HLA-ABC,而少量表达HLA-DR。结论:合适的细胞接种密度有利于人脐血非造血干细胞贴壁生长。白血病抑制因子并不能增加体外培养的人脐血非造血干细胞的生长增殖速度。人脐血非造血干细胞体外培养10d左右可以获得纯度较高的CD166阳性细胞。     

人类白细胞抗原配型不合造血干细胞移植病人的护理

[目的]探讨亲缘人类白细胞抗原(HLA)配型不合造血干细胞移植(HSCT)的护理。[方法]对12例血液病病人进行亲缘HLA至少1个位点不合的HSCT。预处理分别采用改良白消安(Bu)/环磷酰胺(Cy) 抗胸腺淋巴细胞球蛋白(ATG),氟达拉宾(Flu) Cy ATG,阿糖胞苷(Ara-C) Bu Flu ATG方案。[结果]病人移植后造血均恢复顺利,除1例骨髓增生异常综合征伴骨髓纤维化病人植入失败自身恢复外,均达完全供者型植入。10例发生急性移植物抗宿主病(aGVHD)(10/12),其中Ⅰ度4例,Ⅱ度3例,Ⅲ度1例,Ⅳ度2例,Ⅱ度～Ⅳ度的aGVHD累积发生率为51.4%,Ⅲ度～Ⅳ度aGVHD累积发生率为16.8%。巨细胞病毒(CMV)感染5例,累积发生率41.8%,其中1例为CMV间质性肺炎。[结论]亲缘HLA配型不合HSCT是治疗血液病的有效方法之一,但需警惕移植后GVHD及机会性感染的发生。精心的护理能有效降低各种并发症的发生及临床病死率。     

人类白细胞抗原配型不合造血干细胞移植病人的护理

[目的]探讨亲缘人类白细胞抗原（HLA）配型不合造血干细胞移植（HSCT）的护理。[方法]对12例血液病病人进行亲缘HLA至少1个位点不合的HSCT。预处理分别采用改良白消安（Bu）/环磷酰胺（Cy）＋抗胸腺淋巴细胞球蛋白（ATG）,氟达拉宾（Flu）＋Cy＋ATG,阿糖胞苷（Ara-C）＋Bu＋Flu＋ATG方案。[结果]病人移植后造血均恢复顺利,除1例骨髓增生异常综合征伴骨髓纤维化病人植入失败自身恢复外,均达完全供者型植入。10例发生急性移植物抗宿主病（aGVHD）（10/12）,其中Ⅰ度4例,Ⅱ度3例,Ⅲ度1例,Ⅳ度2例,Ⅱ度～Ⅳ度的aGVHD累积发生率为51.4%,Ⅲ度～Ⅳ度aGVHD累积发生率为16.8%。巨细胞病毒（CMV）感染5例,累积发生率41.8%,其中1例为CMV间质性肺炎。[结论]亲缘HLA配型不合HSCT是治疗血液病的有效方法之一,但需警惕移植后GVHD及机会性感染的发生。精心的护理能有效降低各种并发症的发生及临床病死率。     

造血干细胞移植

近十年来 ,造血干细胞移植 (ＨＳＣＴ)广泛应用于恶性血液病、非恶性难治性血液病、遗传性疾病和某些实体瘤的治疗 ,并取得较好的疗效。欧洲血液和骨髓移植组统计资料显示 ,1998年共进行 2 0 892例ＨＳＣＴ ,而 1990年仅进行 4 2 34例移植。在我国ＨＳＣＴ也得到迅速发展 ,截止到 1998年 8月 ,全国已有 6 8个单位开展ＨＳＣＴ ,其中 30个单位已开展异基因ＨＳＣＴ(ａｌｌｏ ＨＳＣＴ)。现将ＨＳＣＴ技术作一概述。1　ＨＳＣＴ的种类1.1　按造血干细胞 (ＨＳＣ)来源分为骨髓移植 (ＢＭＴ)、外周血干细胞移植 (ＰＢＳＣＴ)和脐血移植 (ＵＣＢ…     

外周血造血干细胞来源微泡的生物学特性

目的:探讨正常人外周血造血干细胞(PB-HSC)分泌的微泡(microvesicle,MV)的免疫调节功能及对造血集落形成的影响。方法:采用密度梯度离心法分离PB-HSC并培养,收集第48 h上清液,使用超速离心法分离提取MV。通过电子显微镜观察MV形态;采用BCA法定量检测MV蛋白分泌量;采用流式细胞术检测其表面标志物。将MV与正常人外周血单个核细胞(PB-MNC)共培养,共培养12 h后通过共聚焦扫描电子显微镜观察MV与PBMNC的作用方式;共培养48 h后采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)法检测上清中IL-2,IL-6,IL-8,IL-10,IFN-γ及TNF-α的分泌量;采用流式细胞仪检测T细胞亚群、T细胞激活变化及不同亚群细胞胞内细胞因子染色情况。用甲基纤维素半固体培养基检测MV及MV与PB-MNC共培养48 h后上清液对外周血造血干细胞集落形成的影响。结果:电子显微镜观察分离得到的MV为卵圆形膜性小囊泡,BCA法检测MV蛋白分泌量为29-110μg。流式细胞术测得MV带有混合标志,其中高表达特异性标志CD63(85.86%)与干细胞标志CD34(33.52%)。共培养12 h后共聚焦扫描电子显微镜显示,MV与PB-MNC二者相融合。共培养48 h后,ELISA法检测结果表明,MV可促进PB-MNC分泌IL-6,IL-8,IL-10与TNF-α,而IL-2和IFN-γ水平均无变化明显。流式细胞术结果显示,T细胞亚群及T细胞的激活无明显改变。胞内因子染色结果表明,CD11c+细胞内IL-8因子显著增多。集落培养实验表明,MV及MV与PB-MNC共培养48 h后上清液可促进造血集落形成。结论:PB-HSC来源的MV具有免疫调节及促进造血集落形成的作用。     

造血干细胞的基因治疗

许多疾病尤其是一些遗传性疾病与造血干细胞的内在缺陷有关,随着造血于细胞移植与基因技术的发展,一条试图有机融合上述两者技术的全新的治疗方法——造血干细胞的基因治疗已成为目前研究的热点。本文就该领域中造血干细胞及载体的选择、基因转染条件的优化等方面的研究进展进行综述。     

造血干细胞的研究进展

造血干细胞具有自我更新和多向性分化潜能,尤其神经干细胞移植后能产生各种血细胞类型以及CD34^-Lin^-细胞群体,经HESS－5基质细胞滋养并补充生长因子,转移得到CD34^ ,SRC检测人－鼠造血干细胞异体移植重建造血,为进一步认识和研究干细胞创建新开端。     

造血干细胞的研究进展

近年来，随着造血干细胞输注的广泛应用，对它的研究也不断深入。本文就造血干细胞的免疫表型分类，粘附分子表达，分离纯化以及体外扩增等方面做一综述。     

造血干细胞的研究进展

造血干细胞具有自我更新和多向性分化潜能,尤其神经干细胞移植后能产生各种血细胞类型以及CD34~-Lin~-细胞群体,经HESS-5基质细胞滋养并补充生长因子,转换得到CD34~+,SRC检测人-鼠造血干细胞异体移植重建造血,为进一步认识和研究干细胞创建新开端。     

造血干细胞的基因治疗

许多疾病尤其是一些遗传性疾病与造血干细胞的内在缺陷有关，随着造血干细胞移植与基因技术的发展，一条试图有机融合上述两者技术的全新的治疗方法－－造血干细胞的基因治疗已成为目前研究的热点。本文就该领域中造血干细胞及载体的选择、基因转染条件的优化等方面的研究进展进行综述。     

造血干细胞的研究进展

近年来,随着造血干细胞(HSC)输注的广泛应用,对它的研究也不断深入。本文就造血干细胞的免疫表型分类、粘附分子表达、分离纯化以及体外扩增等方面做一综述。     

造血干细胞的动员

引言 造血干细胞(HSC)移植的潜在优点包括避免骨髓的穿刺和麻醉,能扩大适宜病人群,包括那些骨髓已被肿瘤罹患或先前骨盆接受放射疗法的病人,这些常妨碍骨髓采集。另一优点是髓细胞和血小板的植入加快,明显降低临床支持要求,如使用血制品,抗生素和缩短了住院治疗时间。     

造血调控与造血干细胞移植

造血干细胞移植（HSCT）技术的日趋成熟和广泛应用已使其成为治疗某些血液病、恶性肿瘤、遗传性疾病和自身免疫性疾病的有效方法之一。作为最早开展研究的干细胞，造血干细胞在临床应用、细胞移植研究等方面取得了许多成果，但在造血干细胞的基础研究中还有不少尚待解决的问题，如造血干细胞的获取、扩增，造血重建能力的维持，体外对造血微环境的模拟等，而这些问题的深入研究将为临床细胞移植实践，如体外大量扩增造血干细胞解决移植细胞来源、优化治疗流程、改造体内造血微环境、选择植入时间窗等提高造血干细胞动员和植入效率等提供重要的理论支持。为此，现将目前造血干细胞生物学特性研究作一简单阐述，以期对临床移植工作有所启发。     

间质干细胞与造血干细胞移植

近年来，人们对骨髓中非造血干细胞研究的兴趣日益增加，间质干细胞（mesenchymal stem cells)是和线个从骨髓中分离的非造血干细胞，除支持造血功能外，间质干细胞能分化成成骨细胞，软骨细胞，腱细胞，脂肪细胞，平滑肌细胞，神经元细胞等，其具体外高度扩增，多向分化，可被移植等特性，在造血干细胞移植，组织修补，基因治疗等领域有着广泛的临床应用前景，本文就间质干细胞生物学特性为其在造血干细胞移植中的应用前景作一综述。     

间质干细胞与造血干细胞移植

近年来,人们对骨髓中非造血干细胞研究的兴趣日益增加.间质干细胞(mesenchymal stemcells)是第一个从骨髓中分离的非造血干细胞,除支持造血功能外,间质干细胞能分化成成骨细胞、软骨细胞、腱细胞、脂肪细胞、平滑肌细胞、神经元细胞等.其具有体外高度扩增、多向分化、可被移植等特性.在造血干细胞移植、组织修补、基因治疗等领域有着广泛的临床应用前景.本文就间质干细胞生物学特性及其在造血干细胞移植中的应用前景作一综述.