射频消融对兔肝VX2移植瘤的影响

目的 探讨射频消融(RFA)对兔肝VX2移植瘤细胞凋亡的影响.方法 以种植瘤组织悬液法成功建立20只兔VX2肝癌模型,移植瘤直径达(2.5±0.5)cm后随机均分为四组:A组直接处死取肝脏标本;B、C、D组分别于RFA后4、12及24 h处死取出肝肿瘤组织.HE染色观察组织病理结构改变,dUTP缺口末端标记测定(TUNEL)法检测肿瘤凋亡,电镜下观察凋亡细胞的形态学表现.结果 VX2肿瘤呈浸润性生长.B、C、D组见肿瘤中央射频消融区呈现大片坏死,残癌细胞皱缩,染色质浓聚边集,凋亡小体形成,周围见炎性反应带,外围癌组织残留.A组肿瘤细胞凋亡指数为0.14±0.04;B、C、D组肿瘤细胞凋亡指数分别为0.47±0.03、0.68±0.04和0.49±0.05,均明显高于A组(P＜0.05).结论 RFA治疗能消融局部肿瘤,促进坏死周围残存肿瘤凋亡,遏制肿瘤活性.     

奥沙利铂长循环脂质体制备工艺优选

目的研究奥沙利铂长循环脂质体的处方筛选和制备工艺,并研究其稳定性。方法采用乙醇注入法制备奥沙利铂长循环脂质体,以包封率为评价指标,采用正交设计优化处方和制备工艺,高效液相色谱法测定脂质体包封率。结果最佳工艺处方为卵磷脂与胆固醇质量比5：1,奥沙利铂10 mg,聚乙二醇2000浓度0.05%,平均包封率（51.87±0.90）%。结论该制备方法较简单,经优化制备的奥沙利铂长循环脂质体处方合理,工艺可行,稳定性好。     

注射用奥沙利铂对比奥沙利铂脂质体Beagle犬的解剖病理学评价

目的:比较注射用奥沙利铂和奥沙利铂脂质体对Beagle犬毒性作用的解剖病理学改变,为抗癌药物脂质体制剂的临床前安全性评价提供重要的形态学参考数据。方法:Beagle犬分为阴性对照组、空载体脂质体组、注射用奥沙利铂组、奥沙利铂脂质体低、高剂量组。静脉滴注每2周给药1次,共4次,恢复期1个月。解剖动物进行组织病理学检查。结果:与脂质体、注射用奥沙利铂和奥沙利铂脂质体相关的组织病理学变化分别为多组织器官的泡沫细胞聚集;睾丸生精细胞数量减少,附睾精子减少症和胸腺、脾脏萎缩;肝脏小肉芽肿,胸腺、脾脏萎缩。结论:通过以上同一抗癌药物不同剂型对Beagle犬的解剖病理学评价比较,为抗癌药物脂质体剂型临床前安全性评价提供了重要的形态学参考数据。     

奥沙利铂经区域性动脉灌注化疗治疗晚期胰腺癌临床分析

目的探讨奥沙利铂经区域性动脉灌注化疗在治疗晚期胰腺癌中的临床应用价值。方法选择我院收治的21例未经化疗或者放疗的晚期胰腺癌患者,使用区域性动脉灌注化疗方法进行3～5个疗程的治疗后,评价临床治疗效果。结果经过治疗,3例患者症状完全缓解,5例部分缓解,稳定11例,肿瘤增长2例,治疗总有效率为38.09%。总的临床收益率为71.4%。主要不良反应是恶心呕吐(18例),其他为感觉性神经炎、中性粒细胞计数减少、血红蛋白水平下降、腹泻。毒副反应主要以1级和2级为主。经过2年随访,死亡18例,存活3例。结论奥沙利铂经区域性动脉灌注化疗在治疗晚期胰腺癌中具有一定的应用价值。     

HPLC法测定奥沙利铂脂质体中奥沙利铂的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定奥沙利铂脂质体中奥沙利铂含量的方法。方法:色谱柱为Hypersil C18(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇:水=5∶95(V/V),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为250 nm,柱温为30℃。结果:奥沙利铂的检测浓度在12.2～122.0μg·mL-1范围内线性关系良好;以峰面积(Y)为对浓度(C)进行回归分析,得回归方程为Y=78 575 C-4 811.8(n=5,r=0.999 9),奥沙利铂的检测浓度在12.2～122.0μg·mL-1范围内线性关系良好;检测限为97.6 ng·mL-1;平均回收率为98.58%,RSD=1.83%。结论:该方法操作简便、灵敏、准确,可用于奥沙利铂脂质体中奥沙利铂的含量测定。     

强力霉素与碘油栓塞对兔VX2肝种植瘤转移和MMP-2、MMP-9表达的影响

目的 观察经肝动脉强力霉素与碘油栓塞对兔VX2肝种植瘤生长、转移、基质金属蛋白酶2(MMP-2)及MMP-9表达的影响.方法 32只日本大耳白兔随机均分为4组,肿瘤种植后2周,经肝动脉插管分别给予不同处理:生理盐水组(A组)、碘化油组(B组)、阿霉素+碘化油(C组)及强力霉素+碘化油组(D组).肿瘤种植后5周处死取肝脏及双肺标本,计算肝脏肿瘤体积及坏死率,并观察双肺转移瘤情况,免疫组化方法测定瘤区的MMP-2和MMP-9表达强度.结果 肿瘤种植5周后,D组肿瘤体积小于与其他组(P＜0.05).D组双肺转移结节数目减少于其他各组(P＜0.05),残存肿瘤区MMP-2及MMP-9表达均减低(P＜0.05).MMP-2与MMP-9表达强度与双肺转移瘤数量间存在正相关.结论 强力霉素与碘油栓塞可降低残瘤MMP-2、MMP-9表达,在一定程度上抑制肿瘤生长及转移.     

抗肿瘤药奥沙利铂的合成工艺改进

目的合成抗肿瘤药物奥沙利铂。方法以氯亚铂酸钾为起始原料,先后与亚硝酸钠、（1R,2R）-环己二胺、硫酸肼、一水合草酸钾反应合成目标化合物。合成的化合物采用元素分析、质谱、红外光谱、核磁共振氢谱和比旋光度对其结构进行表征。结果与结论合成的化合物结构与标题化合物一致,精品收率为52％。本方法为奥沙利铂的合成提供了一条新型的工艺路线。     

中心静脉给药减轻奥沙利铂外周神经毒性的探讨

目的探讨采用中心静脉滴注奥沙利铂减轻外周神经毒性反应。方法抽取2009年10月至2010年5月的60例恶性肿瘤患者,对照组患者(n=30)接受第一、二周期化疗采取外周静脉给药(外周浅静脉留置针)治疗。实验组患者(n=30)第一、二周期化疗接受中心静脉给药治疗(PICC 20例,CVC 6例),两组均采用奥沙利铂加氟脲嘧啶行化疗,并按奥沙利铂Levi专用感觉神经毒性标准进行评价。两组在病种、文化层次、年龄、性别、病情及治疗方案比较,差异无显著性意义(P>0.05),具有可比性。结果外周浅静脉给药方法发生神经毒性反应的结果:0级5例1～3级的有25例;采用中心静脉给药(CVC、PICC)方法发生神经毒性反应的结果:0级18例1～3级的有12例,有显著差异(P<0.05)。结论中心静脉给药法能降低神经毒性反应的发生率或减轻奥沙利铂神经毒性反应的程度。     

256排CT JOG-H模式灌注扫描诊断兔VX2腹膜腔移植瘤的诊断价值评价

目的评估CT灌注对腹腔内移植瘤的诊断价值。方法制作兔VX2腹膜腔移植瘤模型,对瘤兔腹部进行CT灌注扫描获得影像学结果,以病理结果为金标准评价CT增强加CT灌注的诊断价值。结果在对<10 mm及对10~20 mm的腹腔种植瘤进行扫描对于病灶检出能力CT增强加CT灌注扫描要优于单纯CT增强扫描。结论对于20 mm以下的病灶CT增强加CT灌注扫描检出能力在敏感度、特异度、准确度方面优于单纯CT增强,而对于>20 mm的病灶CT增强与CT增强加CT灌注检出结果相同均与病理结果一致。     

经皮瘤内注射联合肝动脉灌注热碘油治疗兔肝VX_2瘤

目的评价经皮穿刺瘤内注射联合肝动脉灌注60℃热碘油治疗兔VX2瘤的抑瘤效果。方法将VX2瘤细胞接种于24只新西兰白兔左肝内,随机分为3组,经皮穿刺瘤内注射联合肝动脉灌注60℃热碘油3 ml为联合组,经肝动脉灌注常温25℃碘油3 ml为常温组,经肝动脉灌注化疗药物为对照组。术后10 d计算瘤体坏死率,观察荷瘤兔的存活期及血清AST水平。结果联合组肿瘤的生长率(0.85±0.31)%与对照组(3.16±0.65)%和常温组(1.52±0.36)%相比有显著性差异(P<0.05)。联合组的存活期(48.3±3.0)d与常温组(39.2±2.5)d和对照组(31.5±3.5)d相比有显著性差异(P<0.05);术后10 d血清AST,联合组与常温组及对照组相比无显著性差异(P>0.05)。结论经皮穿刺瘤内注射联合肝动脉灌注60℃热碘油治疗兔VX2瘤较单纯肝动脉栓塞或化疗更有效,能降低肿瘤生长率,延长存活时间。     

兔VX2肺癌模型的建立及鉴定

目的利用CT引导下构建兔VX2肺肿瘤模型。方法家兔50只,cT引导下将载有VX2肺肿瘤组织悬液的亲水凝胶接种于家兔右肺内。自接种后7d起,每3天进行1次CT扫描观察肿瘤生长和胸腔内转移的情况,并对模型成功的家兔进行病理检查确认。结果接种的50只家兔中,1例麻醉后穿刺死亡（2％）,3例发生气胸（6％）,6例发生多发结节生长并出现胸腔积液（12％）,剩余41只（82％）符合肺癌模型的标准。成功兔肺癌模型的肿瘤长到约1cm的时间为（11±2．2）d。结论利用CT引导下构建兔VX2肺肿瘤模型,方法简便。为进一步应用,奠定了良好的基础。     

三维适形放疗联合奥沙利铂化疗治疗肝转移癌的临床观察

目的分析三维适形放疗(three-dimensional conformal radiotherapy 3-DCRT)联合奥沙利铂化疗治疗肝转移癌的临床疗效。方法 30例肝转移癌静脉滴入奥沙利铂130 mg/m2,第1天静脉滴入;5-氟尿嘧啶300 mg/m2和亚叶酸钙200 mg/m2第1～5天静脉滴入,间隔3周重复,共2个疗程。同步进行三维适形放疗,设4～6个弧形或非共面适形固定野照射,参考剂量曲线选定为80%。放疗处方剂量45～55 Gy,中位剂量50 Gy3,～4 Gy/次,3次/周。结果治疗后3～6个月内复查增强CT或MRI,30例中,3例完全缓解(CR),16例部分缓解(PR),7例无变化(NC)4,例恶化(PD),总有效率(CR+PR)为63.3%,肿瘤局部控制率为78.5%,中位生存期15个月,1、2、3年生存率分别为65.3%、31.1%和10.6%,全组无严重并发症发生。结论三维适形放疗联合奥沙利铂治疗肝转移癌能提高肿瘤局部照射剂量和增加肿瘤局部控制率,是一种安全、有效的治疗手段。     

兔VX2肝癌模型的改良制作及其生长特性

目的：探讨兔VX2肝癌模型的改良种植方式，并分析该肿瘤的生长特性。方法：将30只新西兰白兔随机分为3组，每组10只。再将瘤块组织经剖腹途径植入肝脏。观察肿瘤7、14、21、28、35天时的体积（B超测），并计算肿瘤生长率，大体及镜下（光镜）痛组形态特征以及VX2移植性肝癌的CT影像特征。结果：2～3周生长最旺盛，其体积迅速增大，进行实验研究时，不宜太晚。一般不超过4周为宜，以免因肿瘤坏死和转移影响实验结果。结论：改良的肿增种植方式是建立兔肝癌模型的可靠方式，该模型是肝癌的基础及临床的理想动物模型。     

Polybutylcyanoacrylate nanoparticles as a carrier for mitomycin C in rabbits bearing VX2-liver tumor

Polybutylcyanoacrylate nanoparticles (PBCA-NP) were prepared by addition of the monomer to an aqueous phase containing dextran 70 and loaded with mitomycin C (MMC-PBCA-NP), a highly effective anticancer drug. When injected into mice, MMC-PBCA-NP accumulated more in the liver than did free MMC. In contrast, MMC-PBCA-NP accumulated less in the heart and kidney than did free MMC. However, when MMC-PBCA-NP and MMC were administered to rabbits bearing VX2 cells implanted into the liver, the antiproliferative effects on the tumor cells of both drugs were similar. Histological analyses indicated that organization of myocardial filaments was disrupted and vacuolization was observed in the MMC treated group, whereas MMC-PBCA-NP treatment did not appear to damage the host's heart. Hydropic degeneration of renal tubular epithelia was observed in the MMC treated group and not in the control group, whereas MMC-PBCA-NP treatment did not appear to damage the host's kidney.     

肝动脉 门静脉化疗栓塞治疗兔VX2肝癌后残癌新生血管的研究

目的 研究经导管肝动脉化疗栓塞（TACE）联合选择性门静脉栓塞（SPVE）治疗兔VX2肝癌对残癌组织新生血管生成的影响。方法 42只实验兔,采用随机数表法分为实验组（A组）和对照组（B组）,每组21只。A组行TACE联合SPVE治疗,B组单纯行TACE治疗。A、B两组于第14、21天,行CT平扫＋增强扫描,第15天行TACE治疗,第18天分别行SPVE和门静脉数字减影血管造影（DSA）检查,第22天开腹行直接穿刺肝动脉和门静脉DSA检查并处死,取肿瘤周边残癌组织,检测血管内皮细胞生长因子（VEGF）及微血管密度（MVD）的表达情况。结果 A组VEGF、MVD值分别为（120.7±10.99）、（58.9±9.05）,B组VEGF、MVD值分别为（136.5±15.45）、（71.8±12.06）,两组差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 门静脉对周边的肝癌组织具有部分血供,且TACE联合SPVE能够提高肿瘤的坏死程度,抑制新生血管的生成。     

奥沙利铂联合方案介入治疗肝癌的研究

目的评价奥沙利铂方案介入治疗肝癌的安全性和疗效。方法经肝动脉灌注奥沙利铂,氟脲苷(FUDR),丝裂霉素(MMC),碘油和明胶海绵颗粒,治疗前后做肝肾功能、血常规和肝脏B超或CT检查并与顺铂方案对照评价其安全性和疗效。结果采用奥铂方案治疗后两周内患者ALT值,总胆红素值和白细胞数升高,差异有显著性(P<0.05)一月后恢复到治疗前水平,差异无显著性(P>0.05)。尿素氮值、肌酐值、红细胞数、血小板数与治疗前比较差异无显著性(P>0.05),与顺铂方案对照,除肌酐值用顺铂方案治疗后有明显升高,差异有显著性(P<0.05)外,余差异无显著性(P>0.05)。与顺铂方案比较近期疗效无明显差异(P>0.05)。结论采用奥铂方案对肝功能和血液系统有一定影响,但与顺铂方案比较无明显差异,其对肾功能无影响,较顺铂方案为优,对部分肝癌患者有一定疗效。     

二巯基丁二酸修饰的Fe3O4纳米磁液联合碘油动脉栓塞热疗治疗兔VX2肝癌

目的评估二巯基丁二酸修饰的Fe3O4(DSMA-Fe3O4)纳米磁液联合碘油动脉栓塞热疗治疗兔VX2肝癌的疗效。方法 25只开腹肝左叶种植VX2瘤的实验兔,随机等分为五组:对照组(A组)、碘油栓塞组(B组)、DSMA-Fe3O4纳米磁液+碘油栓塞组(C组)、DSMA-Fe3O4纳米磁液+热疗组(D组)、DSMA-Fe3O4纳米磁液+碘油栓塞+热疗组(E组)。成瘤2周后各组行CT扫描并测量,随后行肝动脉栓塞,D、E组栓塞后诱导热疗。分别在术后7、14d行CT检查,计算肿瘤生长比率、肿瘤增长体积。14dCT扫描结束后每组处死部分实验兔,取完整的肝、肾、脾及肺作病理检查。各组分别在术前1d,术后1、3、7d经兔耳缘静脉采血测ALT和AST。结果所有肝癌模型均建立成功。五组术前肿瘤体积、术前1d、术后7dALT、AST水平均无统计学差异(P>0.05)。术后14d,E组肿瘤体积平均缩小26.7%,而B、C、D三组肿瘤体积分别平均增大了200.7%、209.4%和422.5%。结论 DSMA-Fe3O4纳米磁液联合碘油动脉栓塞热疗兔VX2肝癌有效、安全。     

Stimulation of tumor growthin vitro andin vivo by suramin on the VX2 model

Suramin is an antitrypanosomal compound with confirmed efficacy against several human malignancies. It is generally assumed that its mechanism of action includes the interaction with different growth factors, unlike most of the anticancer drugs. Its anticancer activity has not been testedin vivo against squamous cell carcinoma. The purpose of this study was to assess the efficacy and toxicity of suraminin vivo andin vitro on the VX2 tumor model at therapeutic monitored plasma concentrations. We determined the pharmacokinetics of suramin in rabbits, and modelized its administration in order to obtain plasma concentrations between 150 and 300 μg/ml throughout the treatment course of 3 weeks. Under these conditions, antitumor effects of suramin were evaluatedin vivo by comparing liver tumor involvement in suramin-treated and control rabbits. Liver involvement was quantified by image analysis andin vitro effects were also determined at the same concentrations.In vivo, suramin promoted liver tumor growth significantly (p<0.05), compared to untreated controls.In vitro, suramin significantly stimulated tumor cell growth at concentrations above 200 μg/ml (p<0.01). Suramin may have stimulatory effects on tumor growth in squamous cell carcinoma at relevant plasma drug concentrations. Caution should be taken in further trials in patients with squamous cell carcinomas.     

奥沙利铂联合Exosome诱导的效应性T细胞抑制HepG2细胞增殖的研究

目的观察奥沙利铂(OXA)联合负载HepG2细胞裂解物的Exosome诱导的效应性T细胞对肝癌HepG2细胞系增殖的抑制作用。方法自健康人外周血中提取单个核细胞和T淋巴细胞,并以GM-CSF+IL-4的培养方案获得树突状细胞(DC)。将反复冻融后产生的HepG2细胞裂解物体外致敏DC,收集培养上清后以超高速离心法分离得到Exosome,电镜下观察其形态特征。用致敏DC及其分泌的Exosome刺激T淋巴细胞的增殖和活化。以ELISA试验检测不同刺激环境下T细胞分泌IL-1β、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ和TNF-α的能力。以细胞杀伤实验(MTT法)检测不同因素刺激后的T细胞、OXA(2.5、5.0、10.0mg.L-1)以及两者联合应用对HepG2细胞生长的抑制效应。结果与未致敏DC及其分泌的Exosome相比,HepG2细胞冻融裂解物致敏的DC及其分泌的Exosome能显著促进T细胞的增殖,并使其活化和分泌大量的IL-1β、IL-2、IL-6、IFN-γ和TFN-α等Th1型细胞因子。活化后的T细胞、OXA以及两者联合应用对HepG2细胞体外增殖均有抑制作用,而活化T细胞联合10mg.L-1OXA对HepG2细胞的杀伤率最高,但与联合5 mg.L-1OXA的效应相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论负载肿瘤细胞抗原的DC所分泌的Exosome可在体外刺激T细胞,使其活化为具有抗肿瘤效应的细胞毒性T细胞,该细胞联合低浓度OXA能显著抑制肝癌细胞的体外增殖,并降低OXA的用量。