E-test检测念珠菌对5种抗真菌药物敏感性试验

目的：评价E-test检测念珠菌和酵母菌对5种抗真菌药物敏感性的临床应用价值。方法：以白念珠菌ATCC90028为标准质控菌株，用E-test方法与NCCLS M27-A方法同时检测137株临床分离酵母菌对5-氟胞嘧啶、氟康唑、两性霉素B、伊曲康唑、酮康唑5种药物敏感性，观察两所测得结果符合率。结果：5-氟胞嘧啶和两性霉素B敏感性较高，MIC和MIC50值小，与M27-A方法测得结果的总符合率均为94．2％；氟康唑、伊曲康唑和酮康唑的MIC和MIC50值最大，出现一定耐药性，总符合率分别为83．0％、74．5％和79．6％。结论：E-test法检测念珠菌对5种抗真菌药物敏感性与NCCLSM27-A参考方法符合率较高，操作简单，结果可靠。     

应用M38—P方案测定皮肤癣菌对抗真菌药物的敏感性

目的 :　我们在国内首次应用 (NCCLS)M38 P方案测定临床近期分离的皮肤癣菌的药敏试验 ,以探讨该方案用于皮肤癣菌的可行性和重复性 ,比较不同抗真菌药物对皮肤癣菌的药物敏感性。方法 :　本试验共包括 5 2株临床近期分离的皮肤癣菌 ,其中红色毛癣菌 2 4株 ,须癣毛癣菌 14株 ,犬小孢子菌 11株 ,絮状表皮癣菌 3株 ,包括 8种抗真菌药物即伊曲康唑、益康唑、咪康唑、特比萘芬、克霉唑、氟康唑、5 氟胞嘧啶、制霉菌素。方法采用M38 P方案微量稀释法 ,并适当调整试验参数。结果 :　M38 P方案经过调整适用于皮肤癣菌药敏实验 ;伊曲康唑、特比萘芬、益康唑、咪康唑对皮肤癣菌的MIC值较低 ,其几何均数分别为伊曲康唑 0 .2 8± 0 .5 4μg ml,特比萘芬 0 .0 0 32± 0 .0 0 μg ml,益康唑 0 .3± 1.14μg ml,咪康唑 0 .31±0 .17μg ml,不同抗真菌药物对皮肤癣菌的药敏有明显差别 (P <0 .0 0 1)。结论 :　M38 P方案适用于皮肤癣菌药敏实验 ,具有重复性和稳定性 ;伊曲康唑、特比萘芬、益康唑、咪康唑对皮肤癣菌的MIC值较低 ,未发现交叉耐药现象     

申克孢子丝菌双相体外药物敏感试验研究

目的：研究双相真菌申克孢子丝菌分别在菌丝相和酵母相两种形态下对常用抗真菌药物的敏感性。方法：分别采用Roseo纸片扩散法及微量液基稀释法对临床分离的4株申克孢子丝菌的两种形态（菌丝相及酵母相）进行体外药敏试验。测定的抗真菌药物为：两性霉素B、伊曲康唑、氟康唑、特比萘芬。结果：除AMB二者一致外，其余各抗真菌药的MIC，菌丝相30℃孵育比酵母相35℃孵育高。结论：申克孢子丝菌的生长形态（菌丝相或酵母相）及孵育温度（30℃或35℃）对其药敏试验MIC值有明显影响。     

体外观察特比萘芬联合伊曲康唑对须癣毛癣菌甲侵袭的抑制作用

目的：体外观察特比萘芬联合伊曲康唑对须癣毛癣菌甲侵袭的抑制作用。为临床联合用药提供参考依据。方法：用浸泡过不同浓度的特比萘芬、伊曲康唑及两者混合药液的健康甲片，接种须癣毛癣菌作为甲模型，27℃孵育观察不同时间甲模型真菌生长抑制现象及超微结构变化，确定各药的MIC。结果：特比萘芬和伊曲康唑联合药液MIC较伊曲康唑为低；联合用药部分抑菌浓度指数（FICI）〉1但〈2。结论：特比萘芬联合伊曲康唑对须癣毛癣菌有一定抑制相加作用。     

E-test法检测申克氏孢子丝菌对抗真菌药物敏感性的研究

为探讨申克氏孢子丝菌的体外抗真菌药敏试验方法的重复性及准确性,观察申克氏孢子丝菌对两种抗真菌药的敏感性,我们采用美国临床实验室标准委员会（NCCLS）颁布的M27-P方案中的E-test法检测申克氏孢子丝菌分别在菌丝相和酵母相时对伊曲康唑、氟康唑的MIC值。结果：25℃菌丝相时氟康唑、伊曲康唑的MIC值范围分别为：2～256μg/mL、0.012～8.0μg/mL。37℃酵母相时氟康唑、伊曲康唑的MIC值范围分别为：4～256μg/mL、0.125～32μg/mL。申克氏孢子丝菌菌丝相的MIC值较低,酵母相的MIC值较高。申克氏孢子丝菌25℃菌丝相和37℃酵母相时对伊曲康唑、氟康唑的敏感性存在差异。对伊曲康唑的敏感性高于氟康唑。     

2%三氯醋酸治疗浅部真菌病的实验及临床研究

目的：寻找一种新的、安全有效、价格低廉、便于推广的抗浅部真菌病的药物。方法：采用2％三氯醋酸制剂进行体外抗真菌作用及最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MFC）测定，并用此药治疗60例浅部真菌病患者。全部患者均做真菌镜检和真菌培养。结果：鉴定出菌株46株，分别为红色毛癣菌、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌。三氯醋酸对红色毛癣菌、须癣毛癣菌、絮状表皮癣菌的MIC范围分别为0.06-0.12mg/mL,0.30-0.60mg/mL,0.06-0.12mg/mL。2％三氯醋酸治疗浅部真菌病（手足癣、体股癣）60例，治愈率50％，有效率90％。结论：试验结果和临床观察显示三氯醋酸治疗浅部真菌病均有良好的疗效。     

少见真菌致海洋作业人员甲真菌病2例首报

患者均为男性,渔民和海洋航道工人,分别出现指甲和趾甲病变,时间不一。病甲屑真菌直接镜检阳性,真菌培养有棕黑色和灰白色绒毛样丝状真菌生长,经形态学和分子生物学鉴定分别为对半新柱顶孢和帚状曲霉。药敏试验显示对半新柱顶孢对伏立康唑MIC值最低(0.25μg/mL);帚状曲霉对伊曲康唑和泊沙康唑以及棘白菌素类抗真菌药MIC较低。提示这几类药物可以做为临床治疗的首选药物。     

抗真菌药物单独和联合应用对曲霉体外药敏试验研究

目的:探讨两性霉素B(AmB)、特比萘芬(TBF)、伊曲康唑(ICZ)、氟胞嘧啶(5-FC)和氟康唑(FCZ)在单独和联合用药时对曲霉的敏感性.方法:应用美国临床实验室标准化委员会制定的M38-A方案,单独用药时AmB、TBF和ICZ取100%生长抑制为最小抑菌浓度(MiC),5-FC和FCZ取50%生长抑制为最小抑菌浓度,联合用药时取100%生长抑制为最小抑菌浓度,以部分抑菌浓度(FIC)来判定药物间的相互作用,药物间的相互作用解释为FIC≤0.5为协同作用,0.5＜FIC≤1.0为相加作用,1.0＜FIC≤2.0为无关作用,FIC＞2.0为拮抗作用.结果:TBF对烟曲霉的MIC值明显高于黄曲霉和黑曲霉,ICZ对黄曲霉的MIC值较低,AmB对黑曲霉的MIC值较低,而对黄曲霉MIC值较高,差异具有统计学意义.TBF联合ICZ、AmB联合ICZ对曲霉菌属产生较好的协同相加作用.AmB联合TBF对曲霉主要表现为相加作用,5-FC和FCZ与其他药物联合应用对曲霉菌属表现为拮抗和无关作用.结论:单独用药时不同抗真菌药物对曲霉菌种的敏感性具有差异.TBF联合ICZ、AmB联合ICZ在体外对曲霉具有协同和相加作用,其效果优于其他药物的联合应用.     

双相性马尔尼菲青霉菌的体外药敏试验研究

比较马尔尼菲青霉菌（Penicillium mareffei，PM）分别在25℃菌丝相和37℃酵母相时的MIC值，研究PM菌丝相和酵母相的相位改变对药物敏感性的影响。采用M27-p方案中的E-test法测定6株PM分别在25℃菌丝相（mycelial）和37℃酵母相（yeast）时对伊曲康唑、酮康唑、氟康唑、5-氟胞嘧啶、两性霉素B等5种药物的MIC值。25℃菌丝相时伊曲康唑、酮康唑、5-氟胞嘧啶、氟康唑、两性霉素B的MIC值范围分别为：0.002-0.032цg/mL、0.016-0.19цg/mL、0.008-0.19цg/L、1.0-8.0цg/L、0.125-6.0цg/mL，仅两性霉素B出现耐药株各2株。37℃酵母相时伊曲康唑、酮康唑、5-氟胞嘧啶、氟康唑、两性霉素B的MIC值范围分别为：0.002-0.75цg/mL、0.012-0.125цg/mL、0.012-0.25цg/mL、1.5ц6.0цg/mL、0.047-2.0цg/mL，对氟康唑耐药株1株，5-氟胞嘧啶和两性霉素B出现耐药株各2株。结果示伊曲康唑敏感性最强，其次是酮康唑和5-氟胞嘧啶，两笥霉素B敏感性最弱。PM在25℃菌丝相和37℃酵母相时抗真菌药物敏感性存在差异，但菌丝相和酵母相的相位改变不影响其敏感性。     

动物源性皮肤癣菌病32例患者病原菌体外药敏试验

目的了解动物源性皮肤癣菌病病原菌对常用抗真菌药物的敏感情况。方法收集2013年10月—2014年11月就诊于川北医学院附属医院皮肤科、确诊为动物源性皮肤癣菌病的32例患者的菌株。参照美国临床实验室标准化研究所(CLSI)的M38-A2方案,测定收集的临床菌株对灰黄霉素、伊曲康唑、特比萘芬及氟康唑的最低抑菌浓度(MIC)值。结果灰黄霉素、伊曲康唑、特比萘芬和氟康唑对犬小孢子菌的药敏试验MIC值范围分别为0.125 0～4.000 0μg/ml、 0.031 3～1.000 0μg/ml、0.002 0～0.031 3μg/ml和2.000 0～32.000 0μg/ml,对须癣毛癣菌复合体的药敏试验MIC值范围分别为0.062 5～1.000 0μg/ml、0.0313～0.500 0μg/ml、0.001 0～0.062 5μg/ml和4.000 0～32.000 0μg/ml,对石膏样小孢子菌的药敏试验MIC值范围分别为0.031 3～2.000 0μg/ml、0.062 5～1.000 0μg/ml、0.003 9～0.0625μg/ml和0.500 0～16.000 0μg/ml。结论灰黄霉素、伊曲康唑、特比萘芬和氟康唑对犬小孢子菌、须癣毛癣菌复合体和石膏样小孢子菌的体外药敏试验提示,特比萘芬的抗真菌效果最好,其次为伊曲康唑和灰黄霉素,氟康唑抗真菌效果较差。     

采用葡萄糖消耗法快速测定念珠菌对唑类药物的敏感性

目的:探讨采用葡萄糖消耗法进行快速念珠菌药敏试验的实用性和优越性。方法:采用葡萄糖消耗法快速检测104株念珠菌对氟康唑和伊曲康唑的敏感性,并和NCCLS M27-A方案微量法进行比较。受试菌株主要分离自临床深部真菌感染的患者,包括白念珠菌(C. albicans)45株、近平滑念珠菌(C. parapsilosis)24株、热带念珠菌(C.tropicalis)17株、克柔念珠菌(C.krusei)10株、光滑念珠菌(C. glabrata)8株。结果:对于氟康唑,两种方法在±1个、±2个稀释度范围内的一致性为76.0％和89.4％;对于伊曲康唑,两种方法的一致性分别为82.7％和89.4％。结论:葡萄糖消耗法和NCCLS M27-A方案微量法的一致性较高,可以用于念珠菌药敏的快速测定。     

微量稀释法检测申克孢子丝菌酵母相体外抗真菌药物敏感性

目的用液基微量稀释法观察双相真菌申克孢子丝菌酵母相体外抗真菌药物敏感性。方法将54株申克孢子丝菌临床株于脑心浸液琼脂培养基连续传代获得酵母相,参考美国临床实验室标准化委员会(CLSI)的微量稀释法M27-A2检测菌株酵母相对碘化钾、氟康唑、伊曲康唑和特比萘芬的体外敏感性,并观察碘化钾对伊曲康唑和特比萘芬体外抑菌作用的影响。质控株为克柔念珠菌ATCC6258。结果碘化钾体外无抑菌作用;氟康唑最小抑菌浓度(MIC)几何均数大于64μg/mL;伊曲康唑和特比萘芬MIC几何均数分别为0.98μg/mL和0.17μg/mL。伊曲康唑及特比萘芬的MIC值分别高于伊曲康唑+碘化钾及特比萘芬+碘化钾(P均<0.05)。来源皮肤固定型的菌株与来源皮肤淋巴管型菌株相比MIC值差异无统计学意义(P>0.05)。结论改良的M27-A2方法适用于检测申克孢子丝菌酵母相体外敏感性;酵母相时碘化钾对伊曲康唑、特比萘芬体外抑菌作用有一定的加强效应。     

E-test法和Rosco纸片法检测申克孢子丝菌对伊曲康唑和氟康唑的敏感性试验

目的探讨申克孢子丝菌的体外抗真菌药敏试验E-test法和Rosco纸片法的可比性,观察申克孢子丝菌对伊曲康唑和氟康唑的敏感性。方法采用临床实验室标准化协会(CLSI)颁布的M27-P方案中的E-test法检测和Rosco纸片法检测申克孢子丝菌在菌丝相时对伊曲康唑、氟康唑的MIC值。结果采用E-test法和Rosco纸片法检测20株临床分离株25℃菌丝相时,伊曲康唑的MIC值范围分别为:0.012～2.0μg/mL,14～29mm,氟康唑的MIC值范围分别为:256μg/mL,0mm。结论体外抗真菌药敏试验E-test法和Rosco纸片法有较好的一致性和重复性。申克孢子丝菌25℃菌丝相时对伊曲康唑、氟康唑的敏感性存在差异,对伊曲康唑的敏感性高于氟康唑。     

微量液基稀释法与琼脂稀释法测定马拉色菌体外抗真菌药物敏感性

目的 比较微量液基稀释法与琼脂稀释法检测马拉色菌体外对氟康唑、酮康唑及伊曲康唑敏感性的差异。方法 对临床分离的5种27株马拉色菌,分别用微量液基稀释法与琼脂稀释法测定氟康唑、酮康唑及伊曲康唑对这些马拉色菌的最低抑菌浓度（MIC）。结果 微量液基稀释法显示氟康唑MIC值范围0.25 ～ ≥ 64 mg/L,酮康唑≤0.03 ～ 0.5 mg/L,伊曲康唑≤0.03 ～ 0.125 mg/L;琼脂稀释法显示氟康唑MIC值范围2 ～ ≥ 64 mg/L,酮康唑≤0.03 ～ 0.5 mg/L,伊曲康唑≤0.03 ～ 0.25 mg/L。两种方法测定3种唑类抗真菌药对马拉色菌的活性由高到低为：伊曲康唑、酮康唑、氟康唑。两种方法测得氟康唑、酮康唑及伊曲康唑MIC值符合率分别为78.8%、85.2%、88.9%,组内相关系数分别为0.88、0.80、0.76。结论 氟康唑、酮康唑及伊曲康唑对马拉色菌均有较好的抗菌活性,以伊曲康唑对各菌种的抗菌活性最强。微量液基稀释法与琼脂稀释法相比具有良好的一致性,均适用于马拉色菌体外药敏试验。     

Etest法和NCCLS微量法检测念珠菌对氟康唑的敏感性

目的观察氟康唑对念珠菌的敏感性,并研究酵母菌的体外抗真菌药敏试验Etest法和美国国家临床试验标准化委员会(NCCLS)微量法的可比性。方法采用Etest法和NCCLS推荐的药敏试验方案的微量稀释法测定30株念珠菌对氟康唑M IC值。结果采用Etest法和NCCLS微量法测定6株氟康唑耐药株对氟康唑的最小抑菌浓度(M IC)值范围分别均>256μg/m l和>64μg/m l,23株临床分离株对氟康唑的M IC值的范围分别为0.05~2μg/m l和0.125~1μg/m l。Etest法和NCCLS微量法测定30株念珠菌对氟康唑的M IC一致率为83.3%。结论体外抗真菌药敏试验Etest法和NCCLS微量法有较好的一致性、重复性,Etest法可作为一种较好的体外抗真菌药敏试验方法在临床实验室推广使用。     

小檗碱体外对酵母相马尔尼菲篮状菌的抗菌活性检测

目的:体外检测小檗碱对酵母相马尔尼菲篮状菌（TM）的抗菌活性。方法:TM标准株（ATCC22019）1株,临床分离株10株,野生竹鼠分离株10株。TM以（1~5）× 10 3菌落形成单位/ml菌悬液接种于用微量稀释法制备的小檗碱、氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B、卡泊芬净药敏板,在37 ℃下培养48 ...     

In vitro activity of fluconazole,itraconazole, voriconazole and terbinafine against fungi causing onychomycosis

Background. Onychomycosis is one of the commonest dermatological diseases worldwide. The antifungal activity of current medications varies, and treatment failure occurs in 25–40% of treated patients. Aims. To evaluate the in vitro antifungal activity of itraconazole, fluconazole, terbinafine and voriconazole against isolates taken from patients with onychomycosis. Methods. Nail isolates were evaluated according to methods described in the protocols of the Antifungal Susceptibility Testing Subcommittee of the European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (AFST‐EUCAST) and the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLS M38‐A), and a CLSI M38‐A modified technique for dermatophytes. Antifungal agents tested included terbinafine, itraconazole, voriconazole and fluconazole. Results. In total, 103 isolates of Candida species (n = 58), Fusarium species (n = 10), Fusicoccum dimidiatum (n = 4), Scytalidium hyalinum (n = 1) and dermatophytes (n = 30) were evaluated. Itraconazole and voriconazole were the most active agents against Candida species, whereas terbinafine and voriconazole were most potent against dermatophytes. Fusarium species had the highest minimum inhibitory concentration (MIC) values with all antifungal agents. Conclusions. The aetiological agents of onychomycosis that we found differ from those found in other countries, suggesting that the heat and humidity of the Colombian climate could favour yeast nail infections. The lowest MICs for Candida species (obtained with voriconazole, followed by itraconazole) may be explained by emerging resistant strains. Against dermatophytes, the lowest MICs were obtained with terbinafine, followed by voriconazole. MIC values for the evaluated agents were higher for non‐dermatophyte filamentous fungi than for other fungi. As MIC breakpoints have not yet been established for onychomycosis therapies, it remains unclear if in vitro activities of antifungal drugs are predictive of clinical outcome. Well‐designed clinical studies are necessary to assist clinicians in choosing the best antifungal agents.     

特比萘芬体外抗丝状真菌药物敏感试验:菌体不同形态对MIC的影响

目的 观察特比萘芬对部分深部丝状真菌和皮肤癣菌的MIC及分别接种未发芽孢子、发芽孢子和菌丝对MIC的影响。方法 参考M38-P(丝状真菌稀释法抗真菌药物敏感性试验参考方案)试验方案及其改进方案,测定特比萘芬对7株曲霉、5株着色真菌、4株波氏假阿利什霉、4株尖端赛多孢子菌及5株皮肤癣菌的未发芽孢子、发芽孢子或菌丝的MIC,并比较相互间的差异。结果 受试菌株以未发芽孢子形态接种时,曲霉MIC范围为≤0.03~0.5μg/mL,暗色真菌的MIC范围为≤0.03~0.06μg/mL,波氏假阿利什霉及尖端赛多孢子菌的MIC均>16μg/mL,皮肤癣菌的MIC均≤0.03μg/mL,提示上述菌株中除波氏假阿利什霉及尖端赛多孢子菌外,其余菌株体外均对特比萘芬敏感。所有受试菌中,除杂色曲霉和疣状瓶霉接种发芽孢子时MIC与接种菌丝时的MIC相差4倍外,其余菌株接种发芽孢子或菌丝悬液时的MIC与接种孢子时的MIC差异无显著性。结论 受试曲霉、暗色真菌及皮肤癣菌体外均对特比萘芬敏感或较敏感。在丝状真菌的特比萘芬体外药物敏感试验中,接种易于获取并易于量化的未发芽孢子时的MIC可以反映特比萘芬体外对发芽孢子及菌丝的抗菌活性。     

伏立康唑与其他5种抗真菌药体外抗念珠菌活性的比较研究

目的比较伏立康唑与其他5种抗真菌药在体外抗深部致病念珠菌的活性。方法按NCCLS推荐的M27A方案(肉汤微量稀释法)检测伏立康唑等6种抗真菌药对6种共52株深部致病念珠菌临床分离株在体外的抗真菌活性。结果对受试菌株总体而言,伏立康唑的活性最高(MIC90≤0.5μg/ml)。伏立康唑对6种念珠菌的MIC90从小到大依次为白念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌、光滑念珠菌和法氏念珠菌。伏立康唑对各受试菌种的MIC90均低于氟康唑和特比萘芬;对白念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌和近平滑念珠菌的MIC90低于伊曲康唑;对克柔念珠菌和法氏念珠菌的MIC90低于两性霉素B。结论伏立康唑在体外能有效抑制深部致病念珠菌的生长,其抗菌谱较广,尤其对唑类药耐药的两种念珠菌——克柔念珠菌和光滑念珠菌也具有较好的抗真菌活性,部分菌种抗真菌活性甚至优于氟康唑和伊曲康唑。