建立胃癌高发区胃癌血清蛋白指纹图谱诊断模型的探讨

目的 应用表面加强激光解吸离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术分析胃癌血清蛋白质指纹图谱,筛选胃癌特异性血清蛋白组合,建立胃癌诊断模型.方法 利用强阴离子交换芯片(Q10)分别对山东省临朐县胃癌高发区36例胃癌患者和46例浅表性胃炎患者的血清蛋白指纹图谱进行检测,采用ZUCIPDAS蛋白芯片数据分析系统,建立高发区胃癌血清蛋白指纹图谱诊断模型,并利用盲筛法验证模型的正确性.结果 通过对26例胃癌患者及37例浅表性胃炎患者血清蛋白指纹图谱进行检测,筛选出差异具有统计学意义的6个蛋白质峰,质荷比分别为8587、6945、8243、3899、7035和9943,并建立胃癌蛋白指纹图谱诊断模型,该模型诊断胃癌的灵敏度达88.5%,特异度达97.3%.在完成建模后,选择19例患者血清进行盲筛,其中胃癌患者10例,浅表性胃炎患者9例.通过盲筛验证,该模型诊断胃癌的灵敏度为80.0%,特异度为88.9%.结论 初步建立了胃癌高发区胃癌血清蛋白指纹图谱诊断模型,该模型诊断胃癌的灵敏度和特异度均达到80%以上,该方法为胃癌的诊断提供了新的思路.     

血清蛋白质谱结合人工神经网络在宫颈癌诊断中的应用

目的:采用蛋白质芯片表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测宫颈癌病人血清蛋白指纹图谱,通过差异蛋白组学筛选特有的蛋白标记物。方法:应用SELDI-TOF-MS技术和WCX2(弱阳离子)芯片采集58例宫颈癌患者和57例健康人血清蛋白质指纹图谱,采用Biomarker Wizard软件筛选差异蛋白质组。将115例血清随机分为两组:以训练组30例宫颈癌患者和30例健康人建立人工神经网络(ANN)模型,以验证组28例宫颈癌患者和27例健康人血清标本用于模型的双盲法验证。结果:宫颈癌患者与对照组血清蛋白质指纹图谱有145个差异表达的蛋白质峰(P0.05),筛选出质荷比(M/Z)分别为5912、5642、8702、4320、6432的标志蛋白(P10-6),建立人工神经网络模型,其对宫颈癌的诊断敏感性为92.86%,特异性为88.89%,阳性预测值为89.66%,阴性预测值为92.31%。结论:特征蛋白在宫颈癌患者较正常人血清明显的高表达或低表达,可能对宫颈癌的早期诊断和治疗后随访具有重要的指导意义。     

血清蛋白质谱结合人工神经网络在胃癌诊断中的研究

目的 建立筛选胃癌血清蛋白质谱的人工神经网络(ANN)诊断模型.方法 将84例胃癌患者和75例对照者的血清样本按照随机数字表法随机分为训练集(106例)和测试集(53例).首先应用表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术及弱阳离子交换表面芯片(CMl0)检测练集样本,结合反向传播ANN的方法建立诊断模型,进一步检测测试集样本并评价该模型的诊断价值.结果 胃癌患者与对照者血清蛋白质谱图有5个明显表达差异的蛋白质峰(P<0.05),质荷比分别为7567、6742、5262、4869、4256 m/z,5个蛋白质峰作为标志蛋白建立ANN诊断模型.利用该模型对胃癌患者进行盲法预测,结果表明其对胃癌的诊断灵敏度和特异度分别为90.0%和91.3%.结论 胃癌血清蛋白质谱结合ANN建立的诊断模型对胃癌诊断具有较高的灵敏度和特异度,可用于胃癌早期诊断与肿瘤标志物筛选研究.     

新疆维吾尔族宫颈癌蛋白质组图谱分析

目的:探讨筛选并建立新疆维吾尔族子宫颈癌血清蛋白质组图谱诊断模型可能的临床价值。方法:采用CM10蛋白芯片和SELDI-TOF-MS技术检测40例子宫颈鳞癌、30例宫颈上皮内瘤变Ⅲ级和15例健康人的血清蛋白质组图谱,ZUCI-蛋白芯片数据分析系统分析并建立维吾尔族子宫颈癌蛋白质组图谱诊断模型。结果:宫颈癌与宫颈上皮内瘤变Ⅲ级患者和健康人存在139种差异蛋白质质谱峰,有分类意义的蛋白质7种。其中质荷比为6 467.26、6 993.199在正常对照组、上皮内瘤变组和宫颈癌组中表达逐渐降低;1 081.275、1 083.193、1 122.849、8 929.189、15 939.86在正常对照组、上皮内瘤变组和宫颈癌组中表达逐渐增高。这7个质荷比峰建立了维吾尔族宫颈癌蛋白质组图谱诊断模型,其准确度85.00%,敏感度72.73%。结论:该组建立的诊断模型可以有效区分维吾尔族宫颈癌患者和正常妇女,为新疆维吾尔族宫颈癌癌的诊断与筛查提供了一条崭新途径。     

飞行时间质谱技术在HIV诊断应用性研究

[目的]用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI TOF MS）技术分析HIV感染者和健康人血清标本的多肽指纹图谱，建立HIV血清多肽指纹图谱诊断模型并探究其临床价值。[方法]选取的血清样本经Zip Tip C18层析预分离，运用MALDI TOF MS分析检测，获得HIV感染者和健康人血清标本的多肽指纹图谱，用SPSS13．0软件对数据进行分析，建立诊断模型。[结果]在分子量为800—4000Da范围内，共发现500个多肽峰，其中11个多肽峰在HIV感染组、正常对照组中表达均有显著差异（P〈0．05），5个在HIV感染组中表达上调（m／z1418．67，1465．67，1777．82，1864．82和2080．23），6个在HIV感染组中表达下调（m／z904．71，920．73，1076．73，1521．79，1552．75和2080．78）；（m／z2080．78＋2080．23＋1777．82＋1465．67）组合的P〈0．05，回归系数、相对危险度都比较理想，其ROC曲线下面积是1．0，以此建立了HIV血清多肽指纹图谱诊断模型。[结论]本研究建立的诊断模型可以有效区分HIV感染者和健康人，为HIV的诊断与筛查提供了一条崭新途径。     

质谱在乳腺癌血清蛋白组中的应用及其临床意义

目的研究乳腺癌患者血清蛋白,筛选候选肿瘤标志物并建立诊断模型,初步探讨所建立的诊断模型在乳腺癌早期诊断中的临床意义。方法对48例乳腺浸润性导管癌患者和26例乳腺良性肿瘤患者与52名健康人血清,采用弱阳离子交换型(WCX)纳米磁珠联合基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱,检测各血清标本获得蛋白指纹图谱;用Biomarker Wizard找出差异蛋白,再用Biomarker Patterns建立诊断模型;扩大样本量,通过盲法分析进一步验证诊断模型。结果初步筛选出6个差异蛋白峰,差异有统计学意义(P<0.01),建立由3164、3403 m/z两个差异蛋白峰组成的乳腺癌诊断模型,其敏感率为90.0%,特异性为93.3%;扩大样本盲法验证结果其敏感性为77.8%,特异性为90.9%;另外26例乳腺良性肿瘤患者中有21例可以检出。结论由两个差异表达蛋白及其特定组合构成的诊断模型可以区分乳腺浸润性导管癌、乳腺良性肿瘤患者与健康人。     

液体芯片飞行质谱技术与人工神经网络模型在矽尘接触人群诊断中的应用

目的 筛选矽尘接触人群诊断相关血清差异蛋白并建立诊断矽尘接触人群的人工神经网络模型.方法 应用液体芯片飞行时间质谱技术检测I期矽肺组25例,非接触正常对照组、矽尘接触组及O+期组每组30例,共115例样本的血清蛋白质质谱,结合人工神经网络建立矽尘接触人群诊断模型.结果 筛选出2021,2554,5066,8600四个差异蛋白质峰,建立矽尘接触人群诊断模型.其区分矽尘接触人群与正常对照组的特异性为100%,敏感性为90%.准确率为92.3%;该模型对研究样本中接尘组、O+期组和I期矽肺组的样本识别率分别为100%、93%和96%.结论 成功建立了矽尘接触人群诊断模型,该模型在矽尘接触人群的诊断中具有较高的识别率.     

应用SELDI-TOF-MS技术筛选肝癌血清标志物的研究

[目的]分析肝癌患者与慢性肝病患者血清蛋白指纹图谱的差异,建立肝癌和慢性肝病血清标志物诊断模型。[方法]采用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,应用弱阳离子结合芯片(weak cation exchange,WCX2)以及配套软件,对肝癌患者和慢性肝病患者的血清差异蛋白质进行检测分析,构建诊断模型。[结果]通过对肝癌患者术前血清与慢性肝病患者血清蛋白质谱分析发现共有38个蛋白质表达量有明显差异。并获得相对分子质量为M3815,M4678,M4703,M4881,M5304,M5716,M6203,M7789,M7988,M8168,M9312这11个蛋白质组成的模型,可将肝癌患者与慢性肝病患者正确分组,其准确率81.5%(53/65),灵敏度81.3%(39/48),特异度82.4%(14/17)。[结论]有分类意义的11个差异蛋白可能与肝癌发生发展密切相关。     

弱阳离子磁珠联合MALDI-TOF-MS在2型糖尿病大血管并发症检测中的应用探讨

目的弱阳离子(WCX)磁珠联合应用基质辅助激光解析电离化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术分析2型糖尿病大血管并发症患者血清蛋白组,筛选差异蛋白峰并建立决策树模型,初步探讨所建立的决策树模型在2型糖尿病大血管并发症早期鉴别诊断中的临床意义。方法 55例2型糖尿病大血管并发症患者,84例2型糖尿病无大血管并发症患者,采用WCX联合MALDI-TOF-MS技术获得其蛋白质谱,分析差异并建立决策树模型,扩大样本量,通过盲法验证诊断模型的可靠性。结果建立了由质荷比为16 062.20、31 883.60和7 986.76差异蛋白峰组成的2型糖尿病大血管并发症决策树诊断模型,扩大样本量盲筛敏感性为96.3%,特异性分别为100.0%。结论应用WCX磁珠联合MALDI-TOF-MS技术可筛选出2型糖尿病大血管并发症患者的差异蛋白峰,建立的决策树模型具有的一定的临床应用前景。     

SELDI-TOF-MS技术筛选胃癌血清标志物研究

[目的]筛选胃癌患者血清肿瘤标志物,用于胃癌早期诊断。[方法]应用表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术(Surface Enhanced Laser Desorption/Ionization Time-of-flight Mass Spectrometry,SELDI-TOF-MS),检测32例胃腺癌、22例消化性溃疡、32例胃炎患者和30名正常人(对照)的外周血清标本,筛选胃癌相关特异蛋白峰。[结果]与正常对照相比较,发现质荷比为2953、3267、5341、5912、5927的蛋白质分子在胃癌患者血清中上调,质荷比为4059、4213、4270、7160的蛋白质在胃癌患者中下调。4059、5341、5912、3267、4059及5341的蛋白质组成的波谱模型可以准确鉴别胃癌与正常对照。其中质荷比为5912的蛋白质在胃癌患者血清中有很高的表达,敏感性为81．25％,特异性为56．67％。4059的波谱峰可以在正常组中显示,但在胃癌组中几乎消失。[结论]SELDI-TOF-MS技术是一种快速、简便、易行且高通量的分析方法。本研究筛选出的4059、5341、5912、3267、4059及5341低分子量蛋白质有可能成为潜在的诊断胃癌的血清生物标志物。     

SELDI—TOF—MS技术筛选Paget病患者血清特异性蛋白质的研究

目的探讨表面增强激光解析电离飞行时间质谱（SELDI—TOF—MS）技术在Paget病的诊断价值。方法用弱阳离子蛋白芯片（WCx2）及表面加强激光解析电离飞行时间质谱技术（SELDI—TOF—MS）检测15例健康者、15例慢性湿疹和20例Paget病患者血清中蛋白的相对含量。结果Paget病患者与健康人相比,质荷比为3868Da和8876Da的2个蛋白峰差异有统计学意义（P〈0．01）;与慢性湿疹相比,质荷比为2911、3868、5097Da的3个蛋白质峰差异有统计学意义（P〈0．05）。结论SELDI—TOS—MS的特异性肿瘤标记物对Paget病的早期诊断和鉴别慢性湿疹具有诊断价值,无创安全。     

飞行时间质谱技术筛查卵巢癌患者血清特异性蛋白的研究

目的:应用飞行时间质谱技术筛选卵巢癌患者与正常人血清中差异性蛋白,为卵巢癌的早期诊断提供理论依据。方法:应用弱阳离子芯片(WCX2)及表面增强激光解析电离飞行时间质谱仪(SELDI-TOF-MS)检测30例正常人(对照组)和30例卵巢癌患者(实验组)血清中蛋白质的含量,并作比较。结果:对照组与实验组在2 000～30 000 Da间质荷比为3 812.556 Da与7 237.904 Da的2个蛋白峰差异有统计学意义(P<0.05)。结论:SELDI-TOF-MS技术对卵巢癌早期诊断和特异性肿瘤标记物的筛选等方面具有一定价值。     

Screening of serum biomarkers and establishment of a decision tree in silica-exposed populations by surface-enhanced laser desorption ionization time-of-fly mass spectrometry

OBJECTIVE: To screen for serum biomarkers of silicosis and to study their roles using surface-enhanced laser desorption ionization time-of-fly mass spectrometry (SELDI-TOF-MS) techniques. METHODS: The serum protein/peptide profile on the CM10 proteinchip was acquired using SELDI-TOF-MS from workers classified by the Chinese national diagnostic standard for pneumoconiosis. Discriminant analysis was performed to establish a decision tree using protein/peptide peaks. RESULTS: Protein/peptide peaks changed much more in silica-exposed populations than they did in the control. Discriminant analysis using Wilks' lambda method could give high sensitivity and specificity in distinguishing the silica-exposed population from the control; the decision tree could give 100% sensitivity and 95% specificity in distinguishing the silicosis phase among the control group. CONCLUSIONS: Special proteins/peptides may change in silica-exposed workers and these changes may be used to distinguish silica-exposed populations from the control with the proper discriminant analytical method.     

Apo-AII is an elevated biomarker of chronic non-human primate ethanol self-administration

AIMS: Serum protein profiles were examined in na?ve, ethanol self-administering and ethanol abstinent cynomolgus monkeys (Macaca fasicularis) to search for differences in protein expression which could possibly serve as biomarkers of heavy ethanol consumption. METHODS: Surface-enhanced laser desorption ionization time-of-flight (SELDI-ToF) mass spectrometry was used for proteomic profiling of serum. RESULTS: Two proteins were identified by SELDI-ToF to be increased in ethanol self-administering compared with abstinent animals. These proteins were identified to be apolipoprotein AI (Apo-AI) and apolipoprotein AII (Apo-AII) by peptide mass fingerprinting and comparison with spectra of purified human Apo-AI and AII proteins. Immunoblot analysis of Apo-AI and Apo-AII was performed on a separate group of animals (within-animal ethanol-na?ve and self-administering) and confirmed a statistically significant increase in Apo-AII, while Apo-AI was unchanged. CONCLUSIONS: An open proteomic screen of serum and confirmation in a separate set of animals found Apo-AII to be increased in the serum of ethanol self-administering monkeys. These results are consistent with previous clinical studies of human ethanol consumption and serum apolipoprotein expression. Moreover, these results validate the use of non-human primates as a model organism for proteomic analysis of ethanol self-administration biomarkers.     

胃癌前病变及胃癌患者血清及胃组织幽门螺杆菌的检测及意义

目的 探讨幽门螺杆菌(Hp)感染与胃癌前病变、胃癌发生的关系;探讨血清与胃组织Hp表达的相符性,为胃癌前病变的监测和治疗提供依据.为早期发现、诊断和治疗胃癌提供参考指标.方法 采用免疫层析一步法检测血清Hp,免疫组织化学sP法检测胃组织Hp,对312例胃疾病患者进行检查分析,其中经病理确诊的胃癌111例,胃癌前病变170例,浅表性胃炎31例.结果 血清及胃组织中Hp的检出率以胃癌前病变最高(分别为80.6%、86.2%),胃癌次之(分别为52.3%、66.7%),浅表性胃炎中检出率较低(分别为32.3%、38.7%),三组之间比较差异均有统计学意义(P<0.01).胃组织Hp检出率明显高于血清.结论 Hp参与了胃癌前病变和胃癌的发病过程,可把血清及胃组织Hp检测作为对癌前病变的初步监测及治疗观察指标之一.血清Hp检测简便易行,可作为普查内容,对血清Hp阳性的患者建议做胃镜组织学检查及胃组织Hp检查.