蛋白酶体抑制剂调控癌性恶病质的实验研究

目的:探讨蛋白酶体抑制剂对恶病质小鼠炎症细胞因子的合成和调控作用。方法:采用C26结肠癌细胞接种小鼠皮下,诱导恶病质模型,每天监测小鼠体重、食物摄入量和肿瘤体积,于肿瘤接种后第6、9、12和15天,每天给予荷瘤鼠腹腔注射生理盐水和不同剂量的蛋白酶体抑制Bortezomib(0.1、0.5和1.0mg/kg),第16天处死小鼠,检测肿瘤组织NF-κB活性、IL-6以及血清IL-6和IL-10水平。结果:第16天时,生理盐水组出现显著的体重和去瘤体重的下降(P0.01)、腓肠肌萎缩及附睾脂肪的降解(P0.01),同时血清IL-6、IL-10和肿瘤组织IL-6水平显著升高(P0.01)。Bortezomib不同程度地抑制了去瘤体重、腓肠肌和附睾脂肪的降解。Bortezomib剂量依赖性地抑制了肿瘤组织NF-κB的激活及IL-6的合成,以1.0mg/kg组最显著。0.5mg/kg组显著抑制了血清IL-6水平的升高(P0.01)。0.5和1.0mg/kg组明显抑制肿瘤生长(P0.01)。结论:蛋白酶体抑制剂通过抑制肿瘤组织NF-κB的激活,从而抑制癌性炎性反应和组织成分降解,改善恶病质。     

钙蛋白酶抑制剂治疗癌性恶病质小鼠的实验研究

目的:研究钙蛋白酶抑制剂ALLN (N-acetyl-Leu-Leu-Norleucinal)对癌性恶病质小鼠的治疗作用.方法:将24只小鼠随机分成三组,即A组(健康对照组)、B组(荷瘤对照组)和C组(荷瘤+钙蛋白酶抑制剂治疗组),每组8只.将小鼠结肠腺癌Colon26(C26)细胞接种于B、C组小鼠右前腋窝皮下,建立恶病质模型后,C组小鼠用钙蛋白酶抑制剂ALLN干预7d.每天监测小鼠体质量、摄食量、肿瘤体积.干预结束后,处死小鼠,检测去瘤体质量、腓肠肌和附睾脂肪湿重、血生化和细胞因子水平、骨骼肌中Calpain-1和泛素mRNA的表达. 结果:与A组小鼠比,B组小鼠终末体质量、去瘤体质量、右后腓肠肌和双侧附睾脂肪湿重、血清总蛋白(TP)、清蛋白(ALB)和血糖(Glu)明显下降(P＜0.01);三酰甘油(TG)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和C-反应蛋白(CRP)明显升高(P＜0.01);肌肉组织中钙激活蛋白酶-1(Calpain-1)和泛素mRNA表达升高(P＜0.01).C组与B组比,血糖差异无统计学意义(P＞0.05),其他各指标均有不同程度的改善. 结论:钙蛋白酶抑制剂可能是通过抑制钙蛋白酶,减少肌肉蛋白消耗,从而改善癌性恶病质.     

NF-κB活化在四氢吡咯二硫代氨基甲酯对抗全氟异丁烯吸入性肺损伤中的预防作用

目的研究四氢吡咯二硫代氨基甲酯(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对抗小鼠全氟异丁烯(perfluoroisobutylene,PFIB)吸入性急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的预防作用机制.方法采用小鼠动态吸入PFIB周身暴露染毒装置对实验小鼠进行染毒,应用电泳泳动分析法(electrophoretic mobility shift assays,EMSA)检测肺组织核因子-kappaB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)的表达情况;采用RIA检测血清中IL-1β、IL-8的含量变化.结果 PFIB吸入染毒后,肺组织内NF-κB的表达明显高于正常组,染毒前30 min PDTC(120 mg/kg)预防可以显著抑制NF-κB的表达;小鼠血清中IL-1β、IL-8的含量在PFIB染毒后显著升高,染毒前30 min PDTC(120 mg/kg)预防可以显著地抑制这种升高.结论 PDTC对小鼠PFIB吸入性肺损伤具有预防作用可能是基于其对NF-κB的抑制,进而抑制前炎症细胞因子IL-1β、IL-8等的过度表达,从而抑制了过度炎症的进一步发展.     

吡咯烷二硫代氨基甲酸酯对免疫性肝损伤小鼠NF-κB的影响

目的探讨核转录因子-κB(nuclear fastor kappa B,NF-κB)在免疫性肝损伤小鼠模型中的作用。方法通过尾静脉注射BCG(125 mg/kg)14 d制备免疫性肝损伤小鼠模型。采用免疫组织化学法检测各组小鼠肝组织中NF-κB的表达程度。结果免疫组化结果显示,模型组肝细胞的NF-κB p65平均细胞阳性数明显增高,差异具有统计学意义(P0.05);PDTC干预组肝组织中NF-κB p65的表达显著低于模型组,差异有统计学意义(P0.05),且PDTC各剂量干预组之间肝组织中NF-κB p65的表达差异无统计学意义(P0.05)。结论 PDTC可显著抑制免疫性肝损伤小鼠肝组织中NF-κB的表达,明显改善免疫性肝损伤肝组织病理表现。提示可通过PDTC抑制NF-κB的活化,干预肝损伤过程。     

吲哚美辛对癌性恶病质小鼠肌肉泛素-蛋白质酶途径的影响

目的:研究泛素-蛋白质酶途径在癌性恶病质小鼠骨骼肌中的表达以及吲哚美辛(IND)对其的调控作用. 方法:利用鼠结肠癌26细胞株皮下接种BALB/c小鼠,建立癌性恶病质模型.将30只BALB/c小鼠随机分为五组:对照组、荷瘤 等渗盐水组、荷瘤 IND 0.25 mg/(kg·d)组、荷瘤 IND 0.5 mg/(kg·d )组、荷瘤 IND 2.0 mg/(kg·d)组.监测各组小鼠去瘤体重和腓肠肌重量;测量血清TNF-α和IL-6水平,体外腓肠肌肌蛋白降解速率以及泛素-蛋白质酶途径组分mRNA表达. 结果:恶病质小鼠去瘤体重和腓肠肌重量明显下降(P< 0.01),血清TNF-α和IL-6水平明显升高(P< 0.01),腓肠肌蛋白质降解速率以及泛素蛋白质酶组分mRNA表达,均明显升高(P< 0.01).IND 0.5 mg/(kg·d)可以明显缓解恶病质小鼠腓肠肌重量的下降(P< 0.01),降低血清TNF-α(P< 0.05)和IL-6水平(P< 0.01),抑制体外腓肠肌蛋白的降解以及泛素蛋白质酶组分mRNA表达(P<0.01). 结论:泛素-蛋白质酶途径在癌性恶病质的骨骼肌消耗中起重要作用,它受炎性细胞因子调控.适当剂量的IND可能通过减少炎性细胞因子产生,抑制泛素-蛋白质酶途径的激活,缓解肌蛋白的降解.     

不同剂量维拉帕米对内毒素血症大鼠肝细胞因子表达和NF-κB活化的影响

目的:观察不同剂量维拉帕米对内毒素(LPS)刺激的大鼠肝致炎/抗炎细胞因子的表达及对核因子κB(NF-κB)活化的调控作用.方法:56只SD大鼠随机分为七组:A组为等渗盐水对照组;B组为等渗盐水 LPS10mg/kg;C、D、E、F组为不同剂量维拉帕米组,分别给予维拉帕米1、2.5、5和10 mg/kg LPS 10 mg/kg;G组为维拉帕米对照组,维拉帕米10 mg/kg.取大鼠肝匀浆和血清,酶联免疫吸附法(ELISA)测定肝组织中炎性因子如肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)、IL-10.电泳迁移率变动分析实验(EMSA)测定肝NF-κB的表达,同时检测血清转氨酶水平.结果:内毒素可诱导肝组织中TNF-α、IL-6和IL-10表达增加(P＜0.01),血清谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)水平升高(P＜0.01),同时诱导肝组织NF-κB的活化(P＜0.01).维拉帕米可不同程度地降低内毒素诱导的肝TNF-α、IL-6和NF-κB的生成,降低血清ALT和AST水平,增加肝组织IL-10的表达,并且与维垃帕米剂量相关.结论:不同剂量维拉帕米以剂量依赖方式调节内毒素诱导的大鼠肝致炎/抗炎因子的表达,同时抑制NF-κB的活化,改善内毒素诱导的急性肝损伤.     

核因子-κB及细胞因子在百草枯致大鼠肺损伤中的动态变化

目的 观察急性百草枯(PQ)中毒大鼠细胞因子白介素-1β(IL-1β)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血小板源性生长因子(PDGF)和肺组织核因子-kappa B(NF-κB)的变化及四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)的干预效果,以探讨百草枯致肺损伤机制.方法 SD大鼠随机分为对照组6只、PQ染毒组56只、PDTC干预组46只.染毒组和十预组给予生理盐水稀释PQ80 mg/kg一次性灌胃后2 h,染毒组给予等量生理盐水腹腔注射,PDTC干预组给予PDTC 100 mg/kg一次性腹腔注射;对照组给予生理盐水1 ml/kg灌胃后2h,给予等量生理盐水腹腔注射.ELISA法测定大鼠血清IL-1β、TGF-β1、TNF-α及PDGF水平,并分析它们分别与肺脏系数、羟脯氨酸含量的关系;电泳迁移率改变分析法测定肺组织NF-κB活性.结果 与对照组比较,染毒组IL-1β含量1、3、7 d明显升高,TGF-β1、TNF-α含量各时段均明显升高,PDGF含量7、14、28、5 6d明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01);IL-1β、TNF-α分别与肺脏系数成正相关(r=0.37,0.46,P<0.05或P<0.01),TGF-β1、PDGF分别与羟脯氨酸含量成正相关(r=0.56,0.89,P<0.01);与对照组比较,染毒组肺组织NF.KB活性1、3.7、14 d明显升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).与染毒组比较,干预组血清IL-1β、TGF-β1、TNF-α、PDGF含量明显降低,相应时点差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);肺组织NF-κB活性1、3、7、14 d明显降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 NF-κB活化及细胞因子IL-1β、TGF-β1、TNF-α、PDGF的过度表达是参与PQ致肺损伤的重要机制;PDTC通过抑制NF-κB活化进而抑制上述细胞因子的表达,减轻PQ中毒大鼠的肺损伤.     

已酮可可碱对SIRS大鼠核因子活性的影响

目的 探讨已酮可可碱(PTX)对全身炎症反应综合征(SIRS)大鼠核因子-κB(NF-κB)的调控.方法 腹腔注射内毒素建立SIRS大鼠实验模型,随机分为正常对照组、SIRS组、PTX组,实验0、1、2、3、4及6 h用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆NF-κB活性及肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-10(IL-10)含量水平.结果 与正常对照组比较,SIRS组大鼠NF-κB活性和TNF-α、IL-10表达明显升高(P＜0.05);与SIRS组比较,PTX组大鼠NF-κB活性和TNF-α表达明显降低(P＜0.05);而IL-10表达明显升高(P＜0.05).在PTX组,NF-κB的活性与TNF-α呈显著正相关(r=0.77,P＜0.05),与IL-10无明显相关性(r=-0.13,P＞0.05).结论 PTX可明显抑制SIRS大鼠的促炎症介质,其作用机制可能是抑制NF-κB的活性.     

白芍总苷对大鼠佐剂关节炎抗炎作用及机制研究

目的 探讨白芍总苷(total glucosides of paeonia:TGP)对佐剂关节炎大鼠足爪组织中核转录因子NF-κB/p65蛋白表达的抑制作用和对大鼠足爪组织病理改变的影响及血清中血管内皮生长因子(VEGF)和白介素-17(IL-17)含量的影响.方法 建立Ⅱ型胶原诱导的佐剂关节炎大鼠模型,用免疫组化染色法检测足爪组织中NF-κB/p65蛋白的表达.病理切片观察不同剂量的TGP对佐剂关节炎大鼠的治疗效果.用ELISA法检测佐剂关节炎大鼠血清中VEGF和IL-17的含量.结果 大、中剂量组的胞浆内NF-κB/p65的阳性表达比模型对照组明显降低(P＜0.01),TGP大、中剂量治疗组与地塞米松组能明显改变佐剂关节炎大鼠皮下组织细胞排列、炎性细胞浸润及血管增生现象,TGP小剂量组对改善佐剂关节炎大鼠足部皮肤的病理状况无明显作用.中、大剂量的TGP组和地塞米松组血清VEGF和IL-17的含量明显降低(P＜0.01).结论 TGP能抑制佐剂关节炎大鼠的炎症反应,其机制可能是TGP可下调NF-κB/p65蛋白的表达,降低炎性细胞因子IL-17和血清VEGF的产生,最终抑制血管增生及炎性细胞浸润.     

NF-κB对小鼠冠状病毒性肝炎致病作用

目的探讨肝脏核因子-κB(NF-κB)和血清辅助性T淋巴细胞(Th1/Th2)细胞因子方面对小鼠冠状病毒性肝炎的致病机制。方法采用4周龄雄性BALB/c小鼠,以鼠肝炎冠状病毒(MHV-A59)和大肠埃希菌作为生物致病因子,建立MHV-A59鼠肝炎模型和大肠埃希菌鼠肝炎对照模型,以正常健康小鼠为空白对照,采用免疫组化法检测小鼠肝脏NF-κB表达[吸光度(A)值],ELISA法检测小鼠血清白介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)水平。结果冠状病毒模型组、大肠埃希菌对照组小鼠肝脏NF-κB表达分别为A=0.305,A=0.245;外周血Th1/Th2(IFN-γ/IL-4)比值分别为(2.17±0.16),(2.09±0.06)pg/mL,均比正常组有明显升高,差异有统计学意义(P0.05或P0.01),但冠状病毒模型组升高更明显。结论肝脏NF-κB表达增强及血清Th1/Th2细胞因子失衡可能是小鼠冠状病毒性肝炎的致病机制之一。     

氧化应激及核因子-κB在百草枯致大鼠肺损伤中的变化

目的 观察急性百草枯(PQ)中毒大鼠氧化应激及肺组织核因子-κB(NF-κB)的变化,探讨四氢吡咯二硫代氨基甲酸酯(PDTC)的治疗机制.方法 SD大鼠144只随机分为对照组6只、PDTC对照组36只、pQ染毒组56只、PDTC治疗组46只.染毒组和治疗组予生理盐水稀释PQ 80mg/kg一次性灌胃后2 h,治疗组给予PDTC 100 mg/kg一次性腹腔注射,染毒组予等量生理盐水腹腔注射;对照组和PDTC对照组于生理盐水1 ml/kg灌胃后2 h,PDTC对照组予PDTC 100 mg/kg一次性腹腔注射,对照组予等量生理盐水腹腔注射.不同处理后1、3、7、14、25、56 d观察大鼠肺组织病理改变;测定血清中丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、髓过氧化物酶(MPO)活力;测定肺组织中羟脯氨酸(Hyp)含量及NF-κB p65的表达.结果 与对照组比较,染毒组血清中MDA含量和MPO活力升高,GSH-Px、CAT、SOD活力降低,相应时点差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);肺组织NF-κB活性在1、3、7、14 d明显升高,肺组织Hyp含量在14、28、56d明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01).PDTC治疗组血清中MDA含量降低,GSH-Px、CAT、SOD活力升高,与染毒组比较,相应时点差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),在14 dMPO活力为(119.56±21.23)U/L,明显低于染毒组,差异有统计学意义(P<0.05);与染毒组比较,治疗组在1、3、7 d肺组织中NF-κB活性明显降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);治疗组肺组织中Hyp含量在28、56d分别为(0.89±0.05)、(0.93±0.13)μg/mg,明显低于染毒组,差异有统计学意义(P<0.01);病理检查结果显示,治疗组肺组织炎症及纤维化程度均较轻.结论 氧化应激及NF-κB活化是参与PQ致肺损伤的重要机制;PDTC能纠正氧化还原失衡,抑制NF-κB活化,减轻PQ中毒大鼠的肺损伤.     

雌激素对子宫内膜异位症患者在位子宫内膜间质细胞合成NGF及COX-2的影响及传导通路研究

目的 观察雌激素(E2)对子宫内膜异位症(EMs)患者在位子宫内膜间质细胞(ESC)合成神经生长因子(NGF)及环氧化酶-2(COX-2)的影响,以及阻断核因子-κB(NF-κB)信号通路后ESC合成NGF及COX-2的变化,探讨雌激素导致EMs患者疼痛的可能信号传导通路.方法 体外分离培养42例EMs患者在位ESC,用10-8 mol/L E2(E2组)、25 μmol/L NF-κB抑制剂(PDTC)+ 10-8mol/L E2(E2+PDTC组)处理细胞24h后,采用Western blot及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术分别检测ESC合成NGF、COX-2蛋白及mRNA水平的变化.结果 E2组NGF、COX-2的蛋白及mRNA均高于对照组,差异均有统计学意义(t值分别为4.745、6.317、3.465、5.443,均P＜0.05).E2+ PDTC组NGF、COX-2的蛋白及mRNA均低于E2组,差异均有统计学意义(t值分别为3.675、5.319、7.132、8.514,均P＜0.05),但仍高于对照组,差异均有统计学意义(t值分别为3.526、4.733、4.261、5.513,均P＜0.05).结论 在体外,雌激素可促进EMs患者在位ESC中NGF、COX-2表达,PDTC可部分抑制这种作用,说明NF-κB通路参与了雌激素调节EMs在位ESC中NGF、COX-2表达调控,阻断和调控NF-κB信号通路的活性可能为治疗EMs提供新策略.     

益气固本胶囊对哮喘小鼠模型中IKK、IκBa、NF-κBp65含量的影响

目的通过观察益气固本胶囊对哮喘小鼠血清、肺泡灌洗液中IKK、IκBa、NF-κBp65含量的变化,探讨益气固本胶囊对核因子-κB (NF-κB)活性的影响。方法将小鼠制备成哮喘模型,给予益气固本胶囊进行干预,观察哮喘小鼠血清、肺泡灌洗液中IKK、IκBa、NF-κBp65的含量变化,比较差异性。结果与正常组比较,哮喘模型组血清IKK含量升高,IκBa含量降低(P0. 05);肺泡灌洗液中IKK、NF-κBp65含量升高,IκBa含量降低(P0. 05)。与模型组相比较,益气固本胶囊组血清IKK含量降低,IκBa含量升高(P0. 05);肺泡灌洗液中IKK、NF-κBp65含量降低,IκBa含量升高(P0. 05)。结论益气固本胶囊可以有效调节哮喘小鼠模型体内IKK、IκBa、NF-κBp65的含量,因此推测益气固本胶囊治疗哮喘的作用机制可能和调节IKK、IκBa、NF-κBp65含量从而抑制NF-κB活性有关。     

儿童川崎病合并肺炎支原体感染与细胞因子/NF-κB信号通路变化及冠状动脉损伤的关系

目的 分析川崎病(KD)合并肺炎支原体(MP)感染患儿细胞因子/核因子(NF)-κB信号通路指标变化,并探讨其对川崎病合并肺炎支原体感染患儿冠状动脉损伤(CAL)的影响。方法 选择2018年1月-2020年1月医院收治的KD合并MP感染患儿102例为KD合并MP组,根据心脏彩超有无CAL分为CAL组和无CAL组,另选择同期住院的KD患儿50例为对照组,采用酶联免疫吸附测定法检测各组患儿血清白细胞介素-10(IL-10)、IL-17、IL-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、核因子(NF)-κB/P65、NF-κB/P50、NF-κB抑制蛋白(IκBα)以及IκB激酶(IKK)β水平,并分析各指标与KD合并MP感染患儿CAL的相关性,评估各指标诊断KD合并MP感染患儿CAL的效能。结果 KD合并MP组患儿血清IL-10水平低于对照组患儿(P<0.001),IL-17、IL-1β、TNF-α、NF-κB/P65、NF-κB/P50、IκBα以及IKKβ水平高于对照组患儿(P<0.001);CAL组血清IL-10水平低于无CAL组(P<0.001),IL-17、IL-1β、T...     

白介素-18水平及核因子-κB活性变化与早产儿脑室周围白质软化相关性研究

目的:探讨白介素-18(IL-18)及核因子-κB(NF-κB)在早产儿脑室周围白质软化(PVL)发病机制中的作用,并为预防和治疗早产儿PVL提供可能的理论依据。方法:经头颅B超诊断为PVL的早产儿21例,并根据PVL病变程度分为Ⅰ级PVL组早产儿8例、Ⅱ级PVL组6例,Ⅲ、Ⅳ级PVL组7例;对照组早产儿20例。分别取出生6h内静脉血应用酶联免疫吸附试验测定血清IL-18水平及单核细胞NF-κB活性。结果:①Ⅰ级PVL组早产儿血清IL-18水平及外周血单核细胞NF-κBp65活性明显高于对照组(P<0.05);②Ⅱ级PVL组早产儿血清IL-18水平明显高于Ⅰ级PVL组(P<0.05);③Ⅲ、Ⅳ级PVL组早产儿血清IL-18水平及血单核细胞NF-κBp65活性明显高于Ⅱ级PVL组(P<0.05);④PVL组早产儿血清IL-18水平与单核细胞NF-κBp65活性呈正相关性(P<0.01)。结论:PVL早产儿血清IL-18水平及单核细胞NF-κB活性增高,且PVL病变越重,IL-18水平及NF-κB活性越高,提示IL-18与NF-κB在早产儿脑损伤机制中可能发挥了重要的作用,为进一步研究拮抗NF-κB活性,减少IL-18表达以预防和治疗早产儿PVL开辟新的思路。     

HMGB1/TLR2/NF-κB在溃疡性结肠炎小鼠结肠组织中的表达及意义

目的 探讨HMGB1/TLR2/NF-κB在溃疡性结肠炎(UC)小鼠结肠组织中的表达及作用机制.方法 BALB/C小鼠随机分为正常对照组及模型组,每组12只;正常对照组不造模,模型组用恶唑酮(OXZ)灌肠复制UC模型.观察两组实验小鼠体质量变化、大体及组织病理学改变;RT-PCR检测结肠组织HMGB1mRNA的表达变化;免疫组织化学和流式细胞术检测结肠组织中HMGB1、TLR2、NF-κB蛋白的表达变化.结果 与正常对照组小鼠相比,模型组小鼠出现不同程度的腹泻和便血,结肠黏膜明显充血、水肿,可见较大溃疡病灶;模型组小鼠结肠组织中HMGB1mRNA及蛋白表达升高,主要位于细胞浆和细胞外;模型组小鼠结肠组织TLR2和NF-κB蛋白表达亦明显升高;HMGB1蛋白与TLR2蛋白表达呈显著正相关(r=0.81,P＜0.01);TLR2蛋白与NF-κB蛋白表达呈显著正相关(r=0.78,P＜0.01).结论 HMGB1在小鼠溃疡性结肠炎中的致炎作用可能部分通过结合其受体TLR2,激活NF-κB信号途径而实现的.     

铍病大鼠肺组织TNF-α的水平和NF-κB的表达及其意义

目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及核因子-κB(NF-κB)在铍病发病中的作用.方法 采用一次性非暴露式气管注入法染毒建立铍病模型.用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺组织匀浆及支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α水平,免疫组化法测定肺组织NF-κB的表达.同时HE染色观察肺组织的大体病理改变.结果 大鼠模型组肺组织的病理改变基本符合人类铍病的特点.模型组大鼠肺组织匀浆及BALF中TNF-α水平、肺组织中NF-κB的表达较生理盐水对照组明显升高(P＜0.01);且模型组内TNF-α的水平、NF-κB的表达,60 d组明显高于20 d组(P＜0.05).结论 TNF-α和NF-κB相互作用,在铍病的发病机理中起着重要作用,并可作为判定疾病活动性的一项重要参考指标.     

不同粒径汽车尾气颗粒物对A549细胞TNF-α等炎性因子及NF-κB的影响

目的 探讨并比较不同粒径汽车尾气颗粒物对人肺癌上皮细胞A549肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、核转录因子-κB(NF-κB)的mRNA及NF-κB蛋白表达的影响.方法 以不同粒径(0.18～3.2 μm)汽车尾气颗粒物混悬液(1 00 μg/ml)染毒A549细胞,48 h后RT-PCR法检测细胞TNF-α 、IL-6及NF-κB(P65)基因表达水平,Western Blot法检测胞浆及胞核内NF-κB(P65)蛋白表达水平.结果 与对照组相比,各染毒组细胞的TNF-α、IL-6及NF-κB(P65) mRNA表达水平均上升(P＜0.05),由高到低依次为0.56～、0.32～、0.18～、1.0～和1.8～3.2 μm组,两两之间(除0.18～和0.32～μ m组之间、1.0～和1.8～3.2 μm组之间)差异均有统计学意义(P＜0.05);各组TNF-α、IL-6 mRNA水平与NF-κB(P65) mRNA水平显著相关(r=0.944,0.890,P＜0.05).与对照组相比,除1.8～3.2 μm组无统计学意义外,其余各组胞浆NF-κB (P65)蛋白水平均降低(P＜0.05),由高到低依次为1.0～、0.18～、0.32～、0.56～μm组;而胞核NF-κB( P65)蛋白水平均升高(P＜0.05),由低到高依次为1.0～、0.18～、0.32～、0.56～μm组.结论 不同粒径汽车尾气颗粒物作用于A549细胞后均可使TNF-α、IL-6、NF-κB mRNA表达升高、NF-κB活化,活化的NF-κB由细胞质进入细胞核发挥其调控炎症反应的作用.各染毒组中以0.56～μm组炎性损伤效应最强,粒径是影响颗粒物毒性作用大小的重要因素之一.     

白藜芦醇对脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎性因子生成的调控

目的探讨白藜芦醇(Res)对脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)活化及炎性细胞因子[肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)]基因表达的调节。方法分别用1mg/LLPS或25mmol/LRes+1mg/LLPS处理体外培养的小鼠巨噬细胞,采用电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测细胞中NF-κB活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA和蛋白的表达。结果LPS组NF-κB活性和TNF-α、IL-1β、IL-6含量在刺激后6～12h明显高于正常对照组(P<0.001),而Res+LPS组NF-κB活性和TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著低于LPS组(P<0.005)。结论LPS可诱导巨噬细胞NF-κB活化,导致TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达增强,而Res能抑制NF-κB活化而调节TNF-α、IL-1β、IL-6基因的表达。     

1,25-(OH)_2D_3通过NF-κB通路对小鼠溃疡性结肠炎的影响

目的研究1,25-(OH)2D3对小鼠溃疡性结肠炎中核转录因子κB(nulear factor-κB,NF-κB)家族的影响,探讨其在小鼠溃疡性结肠炎中的作用。方法 6w龄雌性C57BL/6小鼠36只,随机分为正常对照组,溃疡性结肠炎模型组,1,25-(OH)2D3低、高剂量干预4组,除对照组外其余三组分别用葡聚糖硫酸钠(DSS)对小鼠进行溃疡性结肠炎造模,9d后处死小鼠,取血清和结肠组织。根据小鼠一般情况进行疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分,观察小鼠结肠大体形态和病理学损伤情况,对其进行组织病理学评分。酶联免疫吸附法(ELISA)法检测小鼠血清TNF-α、IL-6含量,免疫组化测定结肠组织磷酸化IκB激酶β(phosphorylated inhibitor of nuclear factor kappa-B kinaseβ,p-IKKβ)、磷酸化核转录因子κB抑制蛋白α(phosphorylated inhibitor of NF-κB,p-IκB)、NF-κBp65蛋白表达情况。结果与DSS模型组比较,1,25-(OH)2D3干预组结肠组织IKKβ磷酸化减少,IκBα降解明显降低,NF-κB活化减少,小鼠血清TNF-α、IL-6含量下降,小鼠溃疡性结肠炎大体形态改善,组织学损伤较轻。结论 1,25-(OH)2D3可以通过抑制NF-κB通路,对小鼠溃疡性结肠炎起保护作用。