液相色谱-质谱联用测定鼠血浆中的23-羟基白桦酸

 目的建立测定小鼠血浆中23-羟基白桦酸的液相色谱-质谱联用法(LC-MS)。方法取血浆,加入内标物枸橼苦素,经二氯甲烷-水(6∶1)提取后,40℃水浴中氮气吹干,残渣用甲醇溶解,进行LC-MS测定。色谱柱为Intersil C₈(2.1mm×250mm,3.5μm);体积分数为70%乙腈为流动相(其中三乙胺为体积分数0.05%);流速0.2mL·min^-1;柱温30℃;电喷雾离子源(ESI),负离子检测(23-HBA,m/z 471;柠檬苦素,m/z 469)。结果23-羟基白桦酸的线性范围为10～1000μg·L^-1(r=0.9998),最低定量限为10μg·L^-1,方法平均回收率>88%,日内、日间精密度(RSD)均小于8%。小鼠血浆样品-20℃放置至少3周内稳定。结论本方法专属性强,灵敏度高,线性范围宽,操作简便,适用于药动学研究。     

中药白头翁中23-羟基白桦酸对照品的制备及鉴定

目的:研究中药白头翁中对照品23-羟基白桦酸的制备方法。方法:以酸水解的方法从白头翁药材中提取总三萜,以硅胶柱层析和重结晶的方法从总三萜中分离、制备对照品,采用波谱方法对其进行结构鉴定。结果:从白头翁总三萜中分离出23-羟基白桦酸对照品。结论:该对照品可作为控制白头翁总三萜制剂质量的指标成分。     

23-羟基白桦酸体内抗肿瘤作用实验研究

目的 :研究白头翁皂甙元 ( 2 3 -羟基白桦酸 )对小鼠HepA瘤株的抑制作用。方法 :称取定量的 2 3 -羟基白桦酸 ,用食用植物油配制成所需浓度的溶液。将已接种HepA瘤株的小鼠模型 2 4小时后随机分组 ,各组均连续给药 10天 ,停药后 1天将小鼠脱颈椎处死 ,剥取瘤称重 ,结果 :该甙元有明显抑制HepA实体瘤的作用 ,高、中、低剂量组抑瘤率均在 3 0 %以上 ,说明该单体在抑制肿瘤上有研究前景。结论 ;2 3 -羟基白桦酸有一定的抗肿瘤活性     

23-羟基白桦酸对血管内皮细胞增殖和迁移的影响

目的:探讨23-羟基白桦酸(23-HBA)对血管内皮细胞(ECV-304)形态变化,增殖和迁移的影响。方法:SRB方法测定23-HBA对ECV-304细胞的增殖抑制率,体外琼脂法检测内皮细胞的迁移能力,并用光镜观察内皮细胞形态变化。结果:23-HBA对ECV-304细胞的IC50为39.74μg/ml。当23-HBA浓度提高到20μg/ml以上,ECV-304细胞的凋亡现象非常明显。23-HBA浓度在1μg/ml时即能抑制细胞的迁移。结论:23-HBA对ECV-304增殖和迁移均有显著抑制作用。     

HPLC法测定枣仁安神颗粒中白桦酸的含量

目的 建立枣仁安神颗粒中白桦酸的含量测定方法.方法 采用高效液相色谱法对枣仁安神颗粒中白桦酸进行含量测定.色谱柱:Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水-冰醋酸(85∶15∶0.08);流速:1.0 mL· min-1;检测波长为210 nm.结果 白桦酸在0.775 ～ 15.5 μg范围内呈良好线性关系,r=0.9991,平均加样回收率为98.1％,RSD=2.29％(n=5).结论 该方法准确、操作简单、重现性良好,可用于枣仁安神颗粒的质量评价.     

23-羟基白桦酸在Caco-2细胞模型中的吸收特性研究

 目的研究23-羟基白桦酸在Caco-2细胞模型中的吸收特性,为设计合理的给药方式提供依据。方法利用MTT实验筛选出23-羟基白桦酸在Caco-2细胞中的安全浓度,然后用Caco-2细胞单层模型研究23-羟基白桦酸的双向转运,采用同位素示踪法检测药物浓度,计算其表观渗透系数,考察时间、药物浓度对23-羟基白桦酸吸收的影响。结果23-羟基白桦酸在Ca- co-2细胞模型中的转运中对应时间点表观渗透系数值(P_app)A→B约等于(P_app)B→A,随时间增加P_app逐渐下降,而在所测浓度范围内P_app值基本保持恒定。结论23-羟基白桦酸在Caco-2细胞模型中的吸收机制主要是被动转运。     

HPLC法测定丹红注射液中丹参素的含量

应用反相高效液相色谱法测定丹工注射液中丹参素的含量。用Ｃ１８－ＯＤＳ,以水－甲醇－冰醋酸（９４：４：０．６）为流动相,检测波长：２７８ｎｍ,用外标法进行定量分析,平均加增样回收率为１００．９０％,ＲＳＤ为１．４１％（ｎ＝５）。     

23-羟基白桦酸通过抑制髓源性抑制细胞对小鼠结肠癌生长的影响

目的 探讨23-羟基白桦酸(23-HBA)通过干预髓源性抑制细胞(MDSCs)抑制小鼠结肠癌生长的作用机制。方法 体内实验,建立小鼠结肠癌CT-26皮下移植瘤模型,阳性对照组5-FU腹腔注射3 d(2次),实验组23-HBA尾静脉每日注射,连续给药18 d。末次给药后处死小鼠,检测小鼠体质量、移植瘤质量及体积、脏器指数、血常规的变化,流式细胞术检测肿瘤组织MDSCs、CD8⁺T细胞比例,RT-qPCR法检测肿瘤组织MDSCs细胞免疫抑制功能相关细胞因子精氨酸酶1(Arg1)、一氧化氮合酶(iNOS),以及CD8⁺T细胞杀伤功能相关细胞因子颗粒酶B(GZMB)、穿孔素1(PRF1)、干扰素-γ(IFN-γ) mRNA的表达。体外实验,CCK8法检测骨髓(BM)细胞、MDSCs细胞存活率,确定23-HBA的安全作用浓度;采用40 ng/mL粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和40 ng/mL白细胞介素-6(IL-6)诱导BM向MDSCs分化,同时加入不同浓度23-HBA(0、10.5、21、42μmoL/L)干预4 d,流式细胞术检测M...     

HPLC法测定苦参素注射液中苦参素的含量

目的建立苦参素注射液中苦参素的含量测定方法.方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Lichro-spher5-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-硫酸盐缓冲液(7:93),流速为1.0 mL/min,柱温为30℃,检测波长为220 nm,进样量为20μL.结果苦参素浓度在3.63～116.04μg/mL范围内,峰面积与进样量呈良好线性关系,r=1.0000;平均回收率为100.1%(RSD=0.86%,n=6).结论该方法简便,重现性好,可用于苦参素的含量测定.     

HPLC法测定中药化瘀通脉注射液中丹参素的含量

化瘀通脉注射液具有活血化瘀,行气止痛之功,临床治疗冠心病、心绞痛、缺血性血管疾病、高血脂症疗效满意。方中主药丹参中的水溶性成分丹参素、原儿茶醛均经药理证明具有抗心肌缺血等生理活性,为治疗冠心病的有效成分。为能有效评价该制剂的内在质量,确保临床疗效,我们对丹参素进行了含量测定,方法简便、快速,数据可靠。１仪器与试药Ｗａｔｅｒｓ液相色谱仪：５１０高压液相输液泵,Ｕ６Ｋ进样器,Ｍ４４１紫外检测器,７３０数据积分处理机。丹参素：上海医科大学天然药化室提供;化瘀通脉注射液：本院制剂室生产;试剂均为分析纯;…     

HPLC法测定清开灵注射液中猪去氧胆酸的含量

目的建立清开灵注射液中猪去氧胆酸的含量测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱为UltimateXB-C18(5μm,250mm×4.6mm),流动相为乙腈-水-磷酸(35∶65∶0.1),流速为1mL/min,柱温为40℃,检测波长为192nm。结果猪去氧胆酸在0.20135～1.00675mg/mL范围内线性关系良好,r=0.9996,平均加样回收率为98.25%,RSD=1.26%。结论方法准确、可靠,重复性好,可用于清开灵注射液的质量控制。     

HPLC法测定茵栀黄注射液中水解产物没食子酸

目的建立灵敏度高、专属性强的茵栀黄注射液中鞣质的检测方法。方法以茵栀黄注射液为模型药物,采用高效液相色谱法测定注射液中水解没食子酸。Diamonsil ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.05%磷酸水溶液(5︰95);体积流量1.0 mL/min;检测波长271 nm;柱温室温;进样量20μL。结果没食子酸进样量在36.125～231.20 ng与峰面积线性关系良好,平均回收率为99.6%,RSD为1.77%。茵栀黄注射液中不能检测出游离没食子酸,而水解没食子酸量较高,提示茵栀黄注射液中含有一定量的可水解鞣质。结论通过测定注射液中水解没食子酸,可以达到间接控制注射液中鞣质残留量的目的。     

HPLC法测定复方大青叶注射液中绿原酸的含量

目的建立复方大青叶注射液中绿原酸含量的HPLC测定法。方法采用十八烷基硅烷键合硅胶柱,流动相:乙腈-0.4%磷酸溶液(13∶87),流速为1.0 mL/min,检测波长为327 nm。结果线性范围:0.02~0.7 mg/mL(r=0.999 9)。精密度:RSD为0.21%(n=5)平均回收率为99.6%。结论试验表明,该方法简便,快速,结果准确,重现性好。     

HPLC测定注射用大川芎(冻干)中阿魏酸和天麻素的含量

目的:建立注射用大川芎(冻干)(川芎、天麻)中阿魏酸和天麻素的含量测定方法。方法:采用ODS柱,流动相分别为甲醇-水-冰醋酸(30∶68∶2)和水-冰醋酸(100∶1),检测波长为320nm和270nm。结果:阿魏酸在0.0316~0.5056μg范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率为98.43、RSD为1.52。天麻素在0.442~3.536μg范围内具有良好的线性关系,平均加样回收率为98.15、RSD为1.68。结论:本法简便、准确、重现性好,适用于该制剂的质量控制。     

HPLC法测定清肝注射液中芍药甙的含量

采用HPLC法测定清肝注射液中芍药甙的含量。用HypersilODS（250mm×4mmID）为色谱柱，以甲醇-异丙醇-冰醋酸-水（30：2：2：66）为流动相，检测波长为233nm。在此条件下，芍药甙的进样量在0．2μg～1．6μg时，与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9941）。平均回收率为98．5％，方法的日内和日间精密度分别为3．46％和4．72％。     

通关藤注射液酚酸类成分指纹图谱的HPLC测定

目的 :建立通关藤注射液的HPLC指纹图谱。方法 :选择ZorbaxSB C1 8色谱柱 (4.6mm× 2 50mm ,5μm) ,流动相为(A) 0 .0 5 %磷酸水、(B)乙腈 0 .0 5 %磷酸水 (1 3∶87)线性梯度洗脱 ,运行时间 80min ,检测波长为 2 54nm ,测定了通关藤药材、中间体及注射液的指纹图谱。结果 :确定了注射液的 2 2个共有峰 ,并得到了以tR4 8.5min的化合物为自身内标的相对保留时间和峰面积比值 ,非共有峰面积不超过总峰面积的 1 0 %。结论 :方法简单可靠 ,可作为通关藤注射液的质量控制指标。     

高效液相色谱法测定清开灵注射液中绿原酸和黄芩甙的含量

用HPLC法测定清开灵注射液中的有效成分绿原酸和黄芩甙的含量。方法简便快速,重现性好,为清开灵注射液质量控制提供了可靠的检测手段。检测波长340nm,ODSC—18 3.9mm×30cm不锈钢色谱柱,流动相为甲醇—水—四氢呋喃(25:57:18)。     

HPLC法测定银黄制剂中绿原酸的含量

目的建立高效液相色谱法测定银黄制剂-银黄片中绿原酸含量的方法;同时针对银黄口服液中绿原酸的含量测定,对HPLC法与UV法进行了比较,为制定更为确切的银黄制剂质量控制标准提供依据.方法采用Diamonsil C1 8色谱柱(5 μm,1 50 mm×4.6 mm);以甲醇-水-冰醋酸-三乙胺(1 5:85:1.5:0.3)为流动相;流速1.0 mL/min;检测波长327 nm.结果平均回收率为98.92%,RSD=i.45%.结论采用HPLC法可准确测定绿原酸的含量,方法简便、准确、稳定且无干扰,可作为该制剂的质量控制方法.而UV法测定的结果并不是银黄口服液中绿原酸的真实含量.     

高效液相色谱法测定妇科十味片中阿魏酸的含量

目的：建立高效液相色谱法测定妇科十味片中阿魏酸的含量测定方法。方法：色谱柱为Zorbaxl C18流动相为乙腈-0．085％磷酸溶液（17：83）,检测波长316nm,流速为1．0mL．min-1。结果：阿魏酸进样量在5．032～30．192μg．mL-1范围内线性关系良好（r=0.9998,n=6）。阿魏酸的平均回收率为98．76％,RSD为1．09％（n=6）。结论：本法简便、准确,重现性好,可作为妇科十味片的质量控制方法。