P~(53)基因突变及P~(53)突变蛋白在卵巢上皮肿瘤中表达检测方法的探讨

采用改进的ａＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术和ＳＰ免疫组化技术检测３６例卵巢上皮癌，１２例卵巢上皮交界瘤和１５例良性卵巢上皮肿瘤的Ｐ５３基因的突变和突变蛋白的表达。结果卵巢上皮癌Ｐ５３基因突变率为３０．６％，突变蛋白表达为５８．４％。Ｐ５３基因突变主要发生在外显子５～８上，以第７外显子突变率最高。交界性肿瘤个别出现Ｐ５３基因突变和突变蛋白表达，而在良性肿瘤无一例出现。提示Ｐ５３基因突变是卵巢癌形成过程中的晚期事件。Ｐ５３基因突变可作为肿瘤标记物判定卵巢癌的预后。ａＰＣＲ－ＳＳＣＰ非同位素基因突变技术克服了常规ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测方法的缺陷，可提高准确性。     

P53蛋白和增殖细胞核抗原在NSCLC中表达的免疫组化研究

Ｐ５３蛋白和增殖细胞核抗原在ＮＳＣＬＣ中表达的免疫组化研究刘卫民，李应珍，陈朝伦，周谦本文采用ＬＳＡＢ（ｌａｂｅｌｌｅｄｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎｂｉｏｔｉｎ）免疫组化方法，检测６５例ＮＳＣＬＣ中Ｐ５３蛋白和ＰＣＮＡ的表达并进行定量分析。结果与讨论Ｐ５...     

结直肠肿瘤P^53蛋白表达与细胞增殖

应用免疫组织化学ＡＢＣ法检测６９例结直肠癌，１１例腺瘤，３０例癌旁粘膜及１５例正常原Ｐ＾５３蛋白表达及增殖细胞抗原（ＰＣＮＡ），结果显示：Ｐ＾５３蛋白表达的结直肠癌细胞增殖指数高，腺瘤ＰＣＮＡ阳性细胞多集中于细胞增殖区，与Ｐ＾５３蛋白阳性表达区相仿；癌旁粘膜增殖指数与Ｐ＾５３表达无关。这表明：Ｐ＾５３蛋白表达与结直肠肿瘤细胞增殖及腺瘤恶性转化有关。     

p53蛋白在卵巢癌组织中的表达及其意义

目的：探讨ｐ５３蛋白表达与ＤＮＡ倍体、临床分期、病理分级及预后的关系。方法采用流式细胞仪双参数检测了５４例临床卵巢肿瘤手术标本的ＤＮＡ含量和Ｐ５３蛋白表达。其中良性肿瘤６例,卵巢癌４８例。同时采用免疫组化方法检测上述样本２０例的石蜡切片。观察Ｐ５３蛋白表达。结果经统计分析,采用免疫组化ＡＢＣ法和流式细胞仪法检测的Ｐ５３蛋白表达者有明显一致性（Ｐ〈０．０１）。良恶性肿瘤组织中ｐ５３蛋白表达有显著性差     

银染PCR—SSCP方法检测恶性纤维组织细胞瘤P53基因点突变

应用银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法检测常规石蜡包埋恶性纤维组织细胞瘤（ＭＦＨ）中ｐ５３基因点突变。结果显示，１６例ＭＦＨ中，９例ＳＳＣＰ阳性，表明这些病例相应ＤＮＡ片段中发生了点突变，其中第５、６、７、８外显子ＳＳＣＰ阳性出现的例次数分别为１、４、４、３次（２例转移的病例同时有６、７、８三个外显子异常）。微波处理ＡＢＣ法检测突变型ｐ５３蛋白表达，１０例为阳性，ＳＳＣＰ与ｐ５３蛋白表达的阳性符合率为９０．０％，ｐ５３基因点突变及蛋白表达与ＭＦＨ的组织学亚型无关。ｐ５３基因突变可能在ＭＦＨ的发生发展及转移中起作用。本研究结果表明，银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ是一简便、快速、有效的检测基因点突变的方法。     

胆管癌p53基因突变和蛋白表达的研究

目的了解胆管癌ｐ５３基因突变和蛋白表达的变化。方法应用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染技术检测胆管癌中ｐ５３基因突变，并用亲和素－生物素－过氧化物酶复合物（ＡＢＣ）免疫组织化学染色方法检测胆管癌ｐ５３蛋白的表达。结果１１例胆管癌中，３例胆管癌样品ＰＣＲ－ＳＳＣＰ单链电泳带迁移异常，依据ＤＮＡ单链构象与分子电泳迁移的关系，胆管癌ｐ５３基因５～８外显子的突变率为２７％；６例有ｐ５３蛋白异常表达，阳性率为５５％。结论导致ｐ５３蛋白异常表达的ｐ５３基因突变是胆管癌的一种分子结构改变，可能在胆管癌的发生和发展中起着一定的作用。     

林县食管癌中p53基因突变与P^53高表达相关性的研究

用免疫组织化学染色和ＰＣＲ直接测序法分别检测了食管癌高发区林县食管癌组织中Ｐ５３蛋白表达水平和基因突变以及二者的相关性。在３３例食管癌标本中，２３例发现有Ｐ５３的高表达，１０例未发现可检测到的Ｐ５３蛋白，其阳性率为６９．７％。Ｐ５３基因第５→８外显子出现点突变和缺失者１２例，其频率为３６％。在１２例ｐ５３基因突变的病例中，９例均有Ｐ５３蛋白的高度表达，提示ｐ５３基因突变与Ｐ５３蛋白的表达密切相关，并是造成Ｐ５３高表达的重要原因之一。Ｐ５３突变和Ｐ５３蛋白表达在食管癌组织中发生的高频率说明：Ｐ５３的改变是食管癌癌变过程中重要的生物学事件之一。     

NSCLC患者配对肺癌组织和淋巴结P~（53）基因产物表达及意义

采用Ｓ～Ｐ快速免疫组化法检测了４８例ＮＳＣＬＣ患者肺癌组织和配对淋巴结组织。Ｐ（５３）蛋白产物表达，结果显示：ＮＳＣＬＣ患者中。Ｐ（５３）蛋白异常表达占７２％（３５／４８例），其中，鳞癌为８１．８％（１８／２２），腺癌为６５．４％（１７／２６）各期肺癌原发灶均有异常表达，但转移淋巴结中除１例阳性外，其余均为阴性。提示肺癌发生与Ｐ（５３）基因异常改变关系尤为密切。Ｐ（５３）基因改变在肺癌可能是一个早发事件。原发癌和转移癌的Ｐ（５３）基因表达产物可能有所不同。     

卵巢恶性肿瘤p53基因表达产物及检测p53第七外显子突变的初步 …

为探讨ｐ５３基因突变表达产物与卵巢恶性肿瘤临床生物学行为以及ｐ５３第七外显子突变情况之间的关系，采用聚合酶链反应单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）对５０例卵巢恶性肿瘤中的２３例病人新鲜组织标本进行了ｐ５３基因突变蛋白表达检测，结果显示：卵巢恶性肿瘤免疫组化ｐ５３阳性表达率２４％，２３例新鲜组织标本中４例ＰＣＲ－ＳＳＣＰ检测第七外显子异常。提示ｐ５３阳性表达可能与遗传因素有关（Ｐ＝０．０３８），     

肝细胞癌组织中Ｎｕｍｂ、ｐ５３蛋白的表达及其意义*

目的　观察Ｎｕｍｂ蛋白和ｐ５３蛋白在肝细胞癌（ＨＣＣ）组织中的表达情况及其两者的关系。方法　采用免疫组化ＳＰ法检测３０例ＨＣＣ组织及其癌旁组织、８例肝硬化组织和９例正常肝组织中的Ｎｕｍｂ蛋白和ｐ５３蛋白的表达情况。结果　Ｎｕｍｂ蛋白在ＨＣＣ组织中的阳性表达率为４４.７％,明显低于癌旁组织、肝硬化组织及正常肝组织,差异有统计学意义（Ｐ＜０.０５）;ｐ５３蛋白在ＨＣＣ组织中的阳性表达率为６６.７％,明显高于癌旁组织、肝硬化组织及正常肝组织,差异有统计学意义（Ｐ＜０.０１）;在ＨＣＣ组织中,Ｎｕｍｂ蛋白表达与ｐ５３蛋白表达呈负相关（ｒ＝－０.４６６７,Ｐ＜０.０５）。结论　ＨＣＣ组织中Ｎｕｍｂ蛋白和ｐ５３蛋白表达与非ＨＣＣ组织比较均有变化,两者可能均参与了ＨＣＣ的发生发展过程。     

肝细胞癌肿瘤抑制基因p53过度表达及点突变的研究

应用一种敏感的ＡＲＦ免疫组经和ＰＣＲ、银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法检测了本地区３８例肝细胞癌组织中肿瘤抑制基因ｐ５３的过度表达及点突变，结果发现１６例有ｐ５３蛋白过度表达（４１．２％），７例有ｐ５３基因２４９位密码子点突变，２例２４９位密码子外第７外显子点突变。９例ｐ５３基因有突变的肝癌中８例ｐ５３蛋白阳性，两者符合率为８８．９％，ｐ５３基因蛋白过度表达和点突点与ＨＣＣ分化和转移有关。本组ＨＣＣ ｐ５     

P^53和P^16基因产物在卵巢恶性生殖细胞肿瘤的表达

为探讨Ｐ＾５３，Ｐ＾１６基因表达产物与卵巢恶性生殖细胞肿瘤的关系，本文用Ｐ＾５３癌基因单克隆抗体和Ｐ＾１６多克隆抗体采用免疫组化ＡＢＣ法，对８２例卵巢恶性生殖细胞肿瘤和２０例正常卵巢组织的Ｐ＾５３和Ｐ＾１６基因蛋白表达进行了研究。结果显示：在正常卵巢组织中Ｐ＾５３蛋白均无表达，Ｐ＾１６几乎全表达，而在卵巢恶性生殖细胞肿瘤中，Ｐ＾５３蛋白表达率为２４．３９％，其阳性定位于胞核；Ｐ＾１６蛋白表达率为５     

膀胱癌中CD15与p53的表达及相关性研究

目的研究ＣＤ(１５)和抑癌基因蛋白产物在膀胱癌组织中的表达及与病理分级、临床分期、复发和转移的关系,并探讨ＣＤ(１５)与抑癌基因蛋白表达的相关性。方法应用微波－ＬＳＡＢ免疫组织化学法,检测５２例膀胱癌组织中ＣＤ(１５)和ｐ５３的表达水平。结果在膀胱癌中ＣＤ(１５)和ｐ５３阳性表达率分别为６９．２％和４８．１％。其表达均与肿瘤分级、分期、复发和转移相关（Ｐ＜０．０５）。ＣＤ(１５)和Ｐ５３表达里正相关。结论ＣＤ(１５)和Ｐ５３均是膀胱癌高度恶性和预后不良的重要生物学指标。膀胱癌ＣＤ(１５)表达与Ｐ５３蛋白表达可能具有相互协同作用。     

儿童白血病脑脊液p53蛋白和ras癌基因蛋白表达及比值分析

目的 探讨ｐ５３蛋白和ｒａｓ癌基因蛋白在白血病儿童脑脊液（ＣＳＦ）中的表达水平及与白血病化疗的关系。方法 应用Ｗｅｓｔｅｒｎ斑点印迹法检测５４例儿童急性白血病ＣＳＦ中ｐ５３蛋和ｒａｓ癌基因蛋白表达水平，并计算ｐ５３／ｒａｓ比值。结果 白血病儿童危象期ＣＳＦ中ｐ５３蛋白明显高于非肿瘤对照水平（Ｐ〈０．０１）。缓解期ｐ５３蛋白和ｒａｓ癌基因蛋白与危象期比有增高趋势（Ｐ〈０．０１），同时高于非肿瘤对照水     

肺癌中MTS1/P~(16)和P~(53)基因产物的表达与细胞增殖关系的研究

应用Ｓ—Ｐ免疫组织化学方法研究６２例（男性５１例，女性１１例，年龄３４～６８岁，平均年龄５３．７岁）肺癌组织中Ｐ１６蛋白和Ｐ５３蛋白的表达情况，并进行增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）检测，计算细胞增殖指数（Ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎｄｅｘ，ＰＩ）。６２例肺癌组织中Ｐ１６蛋白和Ｐ５３蛋白阳性率分别为５８．１％和５９．７％。腺癌Ｐ１６蛋白的阳性率明显高于小细胞癌（Ｐ＜０．０５）；淋巴结转移阳性组Ｐ１６蛋白的表达显著低于阴性组（Ｐ＜０．０５）；ＰＩ分级为Ⅱ级的Ｐ１６蛋白表达显著高于Ⅳ级（Ｐ＜０．０５）。不同组织类型肺癌中Ｐ５３蛋白的表达未见明显差异，淋巴结转移阳性组Ｐ５３蛋白的表达高于阴性组（Ｐ〈０．０１）；不同ＰＩ分级中Ｐ５３蛋白的表达，Ⅳ级明显高于Ⅰ级（Ｐ〈０．０５）和Ⅱ级（Ｐ〈０．０５），Ⅲ级明显高于Ⅰ级（Ｐ〈０．０５）和Ⅱ级（Ｐ〈０．０５）。Ｐ１６蛋白低表达和Ｐ５３蛋白过表达之间未见明显相关。揭示Ｐ１６蛋白低表达和Ｐ５３蛋白过表达均有促进肺癌细胞增殖的作用，Ｐ１６蛋白的表达与肺癌的细胞分化有关，Ｐ５３蛋白过表达对肺癌细胞的转移起重要作用。抑癌基因Ｐ５３对ＭＴＳ１／Ｐ１６基因无明显调控作用，检测Ｐ５３蛋白表达     

p53功能在肝癌中表达的意义

为探讨Ｐ５３功能及某些生物学行为肝癌中表达的意义。方法：收集１９９７年１月至１９９８年１２月５２例原发性肝癌的临床资料，并对这５２例手术切除的肝癌标本，分别用Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ结合ＤＮＡ损伤诱导的方法检测野生型Ｐ５３的功能，免疫组化检测Ｐ５３蛋白的表达，ＰＣＲ／ＳＳＣＰ方法检测Ｐ５３基因在第５－８外显子的丢失情况及免疫组化检测肿瘤增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）指数。结果：５２例标本中，３１例（５     

食管鳞癌P53基因蛋白与肿瘤细胞周期的研究

本文采用免疫组织化学，免疫电镜和流式细胞术（ＦＣＭ）的方法，研究食管鳞管Ｐ５３基因蛋白的表达与肿瘤细胞周期的关系，观察Ｐ５３基因蛋白在细胞超微结构内的定位，结果显示，１１１例食管鳞癌中４８例Ｐ５３蛋白阳性，总阳性率为４３．２％，其中低分化鳞癌的阳性率高达７７％。根据ＦＣＭ测定，二倍体鳞癌，Ｐ５３表达阳性率为１８％（２／１１），非整倍体鳞癌为５９％（２２／３７），细胞增殖指数（ＰＩ）在Ｐ５３表达阳性     

食管鳞状细胞癌形态发生中P53蛋白的积聚

采用ＣＭ—１和ＤＯ—７抗体免疫组化法，检测高发区河南省４３例食管鳞状细胞癌中的Ｐ５３蛋白积聚。在２６例中见ＣＭ—１阳性细胞（６０．５％）．３４例中有ＤＯ—７阳性细胞（７９．１％）．证实Ｐ５３蛋白积聚是食管鳞癌中一种常见的现象。虽然各例中表达Ｐ５３的癌细胞百分率差异甚大，但是大多数食管鳞癌都具有Ｐ５３阳性的细胞群体，而且阳性细胞多见于肿瘤活跃增生区。因此，作者认为食管鳞癌中Ｐ５３蛋白积累可能大多由于Ｐ５３基因突变所致。值得注意的是，Ｐ５３阳性细胞也可以经常在瘤旁增生，异型增生和原位癌灶中见到，其百分率随着病灶中细胞异型性的程度而逐渐增加。因此作者认为，食管鳞癌细胞中Ｐ５３基因的突变可能发生在癌前病变阶段。除此以外，绝大多数Ｐ５３阳性细胞经常也呈增殖细胞核抗原阳性，两种抗原表达的等级呈正相关。因此，免疫组化检测到的Ｐ５３蛋白积聚的食管鳞癌显示更加活跃的增生，可能具有影响患者预后的意义。     

P53在喉癌中的免疫组化研究及临床意义

本文用ＡＢＣ免疫组化方法，以抗Ｐ５３单抗对７０例喉良恶性标本研究，探讨Ｐ５３与喉癌生物学行为及预后的关系。结果表明：Ｐ５３蛋白在喉癌中的阳性表达率为６４．７％，Ｐ５３蛋白在良性病亦中无表达。Ｐ５３蛋白表达与喉癌病理分级，淋巴结转移，吸烟及预后相关；而与临床分期，年龄及生和剖位无关。     

结直肠肿瘤p~（53）蛋白表达与细胞增殖

应用免疫组织化学ＡＢＣ法检测６９例结直肠癌，１１例腺瘤，３０例癌旁粘膜及１５例正常粘膜的Ｐ￣５３蛋白表达及增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ），结果显示：ｐ￣５３蛋白表达的结直肠癌细胞增殖指数高，腺瘤ＰＣＮＡ阳性细胞多集中于细胞增殖区，与ｐ￣５３蛋白阳性表达区相仿；癌旁粘膜增殖指数与严ｐ￣５３表达无关。这表明：ｐ￣５３蛋白表达与结直肠肿瘤细胞增殖及腺瘤恶性转化有关。