高效液相色谱法制备连翘酯苷对照品

目的 研究从中药材连翘中分离制备连翘酯苷对照品的高效液相色谱方法。方法 连翘药材经水提醇沉淀后,经聚酰胺柱层析得粗提物,粗提物用RP-HPLC法分离制备连翘酯苷单体。结果 分离制备的连翘酯苷纯度可达98%。结论 该方法上样量大,操作简单,提取物纯度高,可用于连翘酯苷对照品的大量制备。     

独一味中洋丁香苷和连翘酯苷B对照品的制备

目的 研究从独一味中分离制备连翘酯苷B和洋丁香苷对照品的方法。方法 结合大孔吸附树脂、葡聚糖凝胶、制备HPLC法分离制备独一味中连翘酯苷B和洋丁香苷单体。结果 分离制备的连翘酯苷B的质量分数达98.93%,洋丁香苷的质量分数达 99.91%。结论 该方法所得洋丁香苷和连翘酯苷B质量分数高,可用于制备中药定性、定量分析使用的对 照品。     

D101型大孔树脂分离纯化连翘酯苷的工艺研究

目的：开发一种高效实用的分离纯化连翘酯苷的技术,使分离纯化工艺达到最优化。方法：以连翘酯苷含量为指标,考察D101型大孔树脂分离纯化连翘酯苷的最佳吸附及洗脱条件。结果：D101型大孔树脂分离纯化连翘酯苷的最佳工艺为上样液浓度为含连翘生药1．2g／mL,用6BV的30％乙醇液进行洗脱,二次洗脱后,连翘酯苷的含量可达60％以上。结论：该技术能显著提高连翘酯苷的纯度,具有吸附量大,洗脱容易,经济环保等优点,适合于规模化生产。     

正交试验优选-大孔树脂分离连翘酯苷的工艺

目的建立连翘中连翘酯苷的最佳提取和分离工艺。方法确定提取溶剂后，以正交试验法考察加醇量、回流时间、回流次数、醇浓度4个因素及大孔树脂分离技术对连翘酯苷收率的影响。结果连翘的最佳提取工艺为：加7倍量70％乙醇，回流提取3次，每次1．5h，大孔树脂洗脱液为40％乙醇。结论该工艺连翘酯苷收率为9.1％～10.6％（以药材计），连翘酯苷的含量为18．3％～22．5％，适合工业化生产。     

HPLC测定不同产地连翘中连翘苷和连翘酯苷的含量

目的建立中药连翘中连翘苷和连翘酯苷的HPLC含量测定方法。方法采用MerckC18柱(250mm×4.6mm,5μm),连翘苷测定流动相为乙腈-水(25:75),检测波长为277nm;连翘酯苷测定流动相为甲醇(含1%四氢呋喃)-0.01mol·L-1磷酸二氢钾水溶液(用磷酸调pH至3.2)梯度洗脱,检测波长为332nm。结果理论板数以连翘苷和连翘酯苷计算均不低于5000,两物质色谱峰与相邻峰之间分离度大于1.5,对称因子均在0.95～1.05之间。连翘苷和连翘酯苷的线性范围分别为50.4～252.2mol·L-1和20.5～102.5mol·L-1,平均回收率为100.3%和99.2%,RSD分别为1.52%和1.86%。结论本实验建立的色谱方法灵敏、准确、重现性好,可用于中药材连翘的质量控制。     

不同产地连翘的连翘苷及连翘酯苷A的含量比较

目的：研究分析不同产地连翘的连翘苷及连翘脂苷A含量,进行质量评价。方法：按《中国药典》方法,采用HPLC法测定山西、陕西、河南、河北、山东产地连翘的连翘苷及连翘脂苷A的含量。结果：5个产地的连翘均符合《中国药典》规定,山西的连翘苷、连翘酯苷A含量明显高于其他产地。结论：连翘苷、连翘酯苷A的含量反映了连翘药材的基本质量。最佳的采收时间、合理的栽培管理、规范的产地加工是保证连翘质量的重要因素。     

大孔吸附树脂分离纯化连翘酯苷A的工艺研究

目的 筛选出一种高效实用的分离纯化连翘酯苷A的大孔吸附树脂,并使分离纯化工艺达到最优化。 方法 以连翘酯苷A质量浓度为指标,考察多种型号大孔吸附树脂纯化连翘酯苷A的吸附及洗脱条件。 结果AB-8型大孔吸附树脂为分离纯化连翘酯苷A的最佳大孔吸附树脂,最佳工艺为：上样质量浓度为生药0.3 g/mL,最大上样量为树脂的2倍体积,洗脱剂为30%乙醇,洗脱剂的用量为6倍量树脂柱体积。 结论 AB-8型大孔吸附树脂能显著提高连翘酯苷A的质量分数,具有吸附量较大,洗脱率高,经济环保等优点,适合于规模化生产。     

连翘提取物含量测定及其对脓毒症大鼠死亡率的影响

目的:建立连翘提取物中连翘苷、连翘酯苷A的含量测定方法并研究其对脓毒症大鼠死亡率的影响。方法:采用高效液相梯度洗脱法测定连翘提取物中连翘苷、连翘酯苷A含量,选用Promosil C18柱,流动相:乙腈-水,流速:1.0mL/min,进行梯度洗脱,检测波长:210 nm;采用大鼠盲肠结扎穿孔(CLP)模型,尾静脉注射连翘提取物,观测SD大鼠CLP术后48、72h死亡率及1周存活情况。结果:连翘酯苷A在32.55~195.3μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 5),连翘苷在64.3~385.8μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 5)。平均回收率连翘酯苷A为:99.24%,RSD=1.11%,连翘苷为:99.33%,RSD=1.58%;给予连翘提取物50%乙醇大孔树脂洗脱部位的CLP大鼠死亡率相对于其他各组均显著降低(P<0.05)。结论:所建立的方法准确可靠,适合于测定连翘提取物中连翘苷、连翘酯苷A的含量;连翘提取物50%乙醇大孔洗脱部位是降低脓毒症大鼠死亡率的有效部位。     

连翘酯苷对·OH引发的DNA损伤的防护作用

目的:了解连翘酯苷对DNA损伤的防护作用。方法:采用紫外分光光度法、TBA法在脱氧核糖水平上研究连翘酯苷对Phen-CuSO4-Vc系统引起的DNA损伤的防护效能,同时设甘露醇作对照。结果:连翘酯苷能明显减轻Phen-Cu-SO4-Vc系统对脱氧核糖的降解,能抑制脱氧核糖的损伤,且抑制作用随浓度增大而增强,对由Phen-CuSO4-Vc系统引起的DNA损伤的抑制率优于甘露醇。结论:连翘酯苷对·OH引发的DNA损伤有保护作用。     

连翘化学成分研究

目的：研究连翘Forsythia suspens（aThunb.）Vahl的化学成分,为其药理作用的研究奠定物质基础。方法：采用硅胶柱色谱及制备薄层色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据（1H-NMR、13C-NMR等）鉴定化合物的结构。结果：分离得到6个化合物,分别鉴定为：丁二酸（succinic acid,1）、槲皮素（quercetin,2）β-谷甾醇（β-sitosterol,3）、对羟基苯乙酸（p-HydroxyPhenyl acetie acid,4）、连翘酯苷A（Forsythoslde A,5）、连翘苷（phillyrin,6）。结论：对连翘中所含的化学成分得到进一步验证。     

连翘果实干物质与有效成分积累规律研究

目的研究不同生长期连翘果实干物质及叶和果实中有效成分的积累规律。方法采用百果质量研究果实干物质的积累,HPLC法测定连翘叶与果实中有效成分的量。结果5~7月是连翘果实干物质积累的重要时期。在整个生长过程中,种子、叶和壳中连翘酯苷、连翘苷、芦丁的量均呈下降趋势。8月下旬至9月上旬,果实干物质积累已趋缓,种子和壳中有效成分的量稳定,变异小。壳中有效成分的量经9~10月的快速下降后,10月20日左右质量分数趋于稳定且达最低。青翘中有效成分的量高于老翘,青翘中连翘酯苷、连翘苷与芦丁的比例与老翘存在显著差异。结论在北京地区,8月下旬至9月上旬,为青翘最佳采收期;10月20日左右为老翘的最佳采收期。     

金银花、连翘对溶珊瑚弧菌及其生物膜活性的影响

目的研究金银花、连翘对溶珊瑚弧菌及其生物膜活性的影响。方法采用纸片扩散法测定抑菌圈,采用结晶紫法检测金银花、连翘对溶珊瑚弧菌生物膜的作用。结果金银花为低敏药物,连翘为不敏药物。生物膜抑制率与质量浓度有剂量依赖的正相关关系,31、62.5、125 mg/mL金银花和连翘供试药液与菌膜对照组的差异有统计学意义（P〈0.05）;生物膜破坏试验发现,31、62.5、125 mg/mL金银花和连翘供试药液与菌膜对照组生物膜活菌百分比的差异有统计学意义（P〈0.05）。结论金银花有良好的抑菌、抑制细菌生物膜形成和破坏细菌生物膜活性;而连翘有良好的破坏溶珊瑚弧菌的生物膜活性和较好的抑制生物膜形成活性。     

连翘中松脂素的分离鉴定和含量测定

目的 分离鉴定连翘果实中的有效成分松脂素，并调定其含量。方法 采用乙醇回馏提取，硅胶柱分离，提取松脂素，采用薄层光密度法调定其含量。结果 调得松脂素在连翘中的含量为0．121％，并采用IR，NMR，MS等方法确证了其结构。结论 松脂素的含量用于评价连翘的质量是可行的。     

真空液相层析法在中草药有效成分分离中的应用

本文介绍了一种新的柱层析方法,即真空液相层析法。用此法作者从连翘中分离出连翘酯甙,并同传统的柱层析法作了比较。     

忍冬藤与其伪品金银忍冬藤、连翘茎的鉴别研究

目的:对忍冬藤与其伪品金银忍冬藤、连翘茎进行比较和鉴别。方法:按生药学常规方法对忍冬藤、金银忍冬藤及连翘茎在基源、性状、显微方面进行比较和鉴别。结果:忍冬藤、金银忍冬藤及连翘茎在基源、性状及显微特征方面均存在一定差异。结论:性状鉴别和显微鉴别方法简便、可靠,为保证忍冬藤药材质量提供了有效的鉴别方法。     

连翘抑制呼吸道合胞病毒作用的实验研究

目的 探讨连翘在细胞培养中抗呼吸道合胞病毒(RSV)的作用。方法 采用细胞培养技术,以病毒唑为阳性对照药,比较观察连翘水提液对RSV引起的细胞病变(CPE)的抑制作用。结果 连翘半数中毒浓度(TC50)为7．25mg/ml,其抗RSV的半数有效浓度(EC50)为0．15mg/ml,治疗指数(T1)为48．33,且对RSV抑制作用存在明显的量效反应关系;于感染RSV后0、2、4、6、8^加入连翘水提液均有抑制RSV活性作用。结论 连翘在Hela细胞中对呼吸道合胞病毒有抑制作用。     

连翘水提取物对小鼠S180肿瘤细胞和脾细胞体外增殖的影响

目的观察连翘水提取物及其各化学部位对S180肿瘤细胞以及脾细胞体外增殖的影响,为进一步的研究提供依据。方法细胞增殖程度采用MTT比色法。结果连翘水提取物（Fonythia suspensa totalex-traction,FSTE）及乙醇溶解部位（FsⅣa）具有较强的抑制S180细胞增殖的作用,其余部位的作用较弱或无;FSTE和FSⅣa对小鼠脾细胞的增殖有明显的抑制作用。结论连翘水提取物及其乙醇溶解部位对小鼠S180肿瘤细胞和小鼠脾细胞的体外增殖有明显抑制作用。     

连翘干燥叶片高质量DNA的提取方法研究

目的：探讨不同DNA提取方法对连翘干燥叶片的DNA质量及RAPD—PCR标记结果的影响,找出提取连翘总DNA的最佳方法。方法：分别用常规CTAB法、高盐低pH法和改良CTAB法提取连翘总DNA．分别进行琼脂糖凝胶电泳、紫外吸收A260／A280和RAPD—PCR分析,通过比较找出提取连翘总DNA的最佳方法。结果：以CTAB法为基础的改良CTAB法可获得较高质量的DNA进行PCR扩增。结论：改良CTAB法是一种分离高质量完整DNA的简便、快速方法。     

裂解色谱法测定连翘的指纹图谱

目的　研究比较不同产地的连翘指纹图谱 ,并考察了裂解温度、裂解时间对指纹图谱的影响。方法　采用裂解色谱法 (PGC)。结果　 13种样品的指纹图谱接近 ,重叠率在 89%以上 ,RSD<1.7%。结论　该方法具有快速、简便、准确等特点 ,裂解温度、裂解时间对实验起着重要作用。