血红素氧合酶在去势大鼠阴茎海绵体的表达

目的:研究血红素氧合酶(HO)在去势大鼠阴茎海绵体的表达,探讨其在雄激素缺乏的勃起功能障碍发生中的机制。方法:40只10周龄雄性SD大鼠随机分成:假手术2周组(A组),假手术4周组(B组),去势2周组(C组),去势4周组(D组)。术后2、4周检测血清睾酮水平,免疫组化及RT-PCR技术检测HO及nNOS在大鼠阴茎海绵体的表达。结果:去势组大鼠较假手术组血清睾酮水平显著下降,[AvsC:(283.222±117.171)ng/dlvs(7.117±3.700)ng/dl;BvsD:(289.280±87.413)ng/dlvs(48.826±19.477)ng/dl](P<0.01)、HO-1、HO-2蛋白表达明显降低(P<0.01),去势组HO-1、HO-2及nNOSmRNA表达较假手术组显著降低(P<0.01)。结论:雄激素可能通过HO-CO系统部分调控阴茎勃起功能。     

血红素氧合酶2在慢性肾衰大鼠阴茎海绵体中的表达

目的:检测血红素氧合酶2(HO-2)在慢性肾衰(CRF)大鼠阴茎海绵体中的变化,探讨HO-2在阴茎勃起过程中的作用及与睾酮的关系。方法:采用10周龄雄性SD大鼠行5/6肾切除术构建CRF模型成功后,测定对照组(CTL组,n=15)、CRF组(n=15)平均颈动脉压(MAP)及海绵体内压最大值(ICPmax)、血清睾酮,并检测阴茎海绵体中eNOS、nNOS、HO-2的表达。结果:CRF组在3V、5V电刺激海绵体神经后ICPmax/MAP(0.121±0.084,0.135±0.088)均显著低于对照组(0.263±0.147,0.244±0.089,P<0.01),CRF组血清睾酮浓度[(1.190±0.946)nmol/L]显著低于对照组[(7.800±5.001)nmol/L,P<0.01],CRF组海绵体中nNOS、eNOS表达低于对照组,CRF组海绵体中HO-2表达(0.510±0.397)显著低于对照组(2.672±1.720,P<0.01),海绵体中HO-2表达下降与血清睾酮下降存在相关性(r=0.902,P<0.01)。结论:CRF组大鼠阴茎海绵体中nNOS、eNOS、HO-2、血清睾酮水平降低等可能是CRF并发勃起功能障碍机制之一。     

低雄激素通过抑制大鼠阴茎海绵体组织Tie2的表达抑制勃起功能

目的:研究雄激素是否通过富含内皮的外膜内皮细胞激酶2(Tie2)/磷酸激酶(AKT)调控大鼠阴茎海绵体组织内皮一氧化氮合酶(eNOS)的表达,并影响阴茎勃起功能。方法:将8周龄雄性SD(Sprague Dawley)大鼠随机分为6组(n=6):假手术组、去势组、睾酮替代组(去势1 d后隔日1次丙酸睾酮3 mg/kg皮下注射)、假手术+Tie2转染组(去势术后4周大鼠阴茎海绵体注射20 ul携带Tie2基因的慢病毒,滴度1×10⁸TU/ml)、去势+Tie2转染组、去势+空载体组。去势术后5周,测定各组大鼠的最大阴茎海绵体内压与平均动脉压比值(ICPmax/MAP)、血清睾酮(T)水平、一氧化氮(NO)含量,以及Tie2、AKT、P-AKT、eNOS、P-eNOS在各组大鼠阴茎海绵体中的表达水平。结果:去势组大鼠的T、阴茎海绵体组织中NO的含量和ICPmax/MAP明显低于假手术组大鼠(P<0.01)。而经过Tie2过表达慢病毒转染后,去势+Tie2组大鼠的NO含量及ICPmax/MAP明显高于去势组大鼠(P<0.01)。去势组大鼠阴茎海绵体组织中Tie...     

雄激素对大鼠阴茎海绵体平滑肌中兰尼碱受体1和电压门控钙离子通道1.3表达的影响研究

目的:研究兰尼碱受体1(RyR1)和电压门控钙离子通道1.3(CaV1.3)在去势大鼠阴茎海绵体平滑肌的表达,探讨其在去势后勃起功能障碍发生中的作用。方法:40只8周龄雄性SD大鼠随机均分成:假手术2周组(A组),假手术4周组(B组),去势2周组(C组),去势4周组(D组)。术后实验各组检测血清睾酮(T)水平,免疫组化及RT-PCR技术检测RyR1和CaV1.3在大鼠阴茎海绵体平滑肌中的表达。结果:血清T水平C组[(15.97±5.67)nmol/L]和D组[(2.03±1.57)nmol/L]分别较A组[(90.54±20.13)nmol/L]和B组[(120.35±30.32)nmol/L]显著下降(P<0.05)。RyR1、CaV1.3在各组大鼠阴茎海绵体平滑肌中均有表达,RyR1 mRNA相对表达量灰度比值C组(0.51±0.24)和D组(0.33±0.15)分别较A组(1.53±0.25)和B组(1.37±0.23)显著降低(P<0.05);CaV1.3 mRNA相对表达量灰度比值C组(0.50±0.12)和D组(0.32±0.07)分别较A组(1.33±0.05)和B组(1.25±0.03)显著降低(P<0.05)。RyR1蛋白积分光密度值(IA)C组(120.36±25.78)和D组(67.39±30.54)分别较A组(300.96±135.12)和B组(330.38±128.59)显著降低(P<0.05);CaV1.3蛋白IA C组(103.37±39.52)和D组(67.56±20.15)分别较A组(298.68±126.35)和B组(327.35±117.37)显著降低(P<0.05)。雄激素水平与RyR1、CaV1.3在阴茎海绵体平滑肌中的表达水平具有正相关性。结论:雄激素可能通过RyR1、CaV1.3的表达调控阴茎勃起功能。     

细胞外信号调节激酶和蛋白激酶B在去势大鼠阴茎海绵体的表达

目的:研究细胞外信号调节激酶(Erk1/2)和蛋白激酶B(PKB/Akt)在去势大鼠阴茎海绵体中的表达及活性,探讨其在去势大鼠勃起功能障碍(ED)发生中的作用机制。方法:20只8周龄雄性SD大鼠随机分成假手术组(A组)和去势组(B组),术后4周检测两组大鼠血清睾酮(T)水平,免疫组化及RT-PCR检测磷酸化Erk1/2和磷酸化PKB/Akt活性蛋白(累积光密度/面积,IA/Area)及Erk1/2、Akt mRNA(内参为GAPDH)在大鼠阴茎海绵体中的表达。结果:术后4周B组血清T水平[(1.339±0.642)nmol/L]较A组[(10.090±3.026)nmol/L]显著降低(P<0.05),Erk1/2和PKB/Akt在两组大鼠阴茎海绵体中均有表达,Erk1、Erk2的mRNA和磷酸化Erk1/2蛋白的相对表达量在B组(0.840±0.062、0.876±0.141、0.142±0.020)较A组(0.479±0.090、0.599±0.100、0.119±0.029)显著升高(P均<0.05);PKB/Akt mRNA和磷酸化PKB/Akt蛋白的相对表达量在B组(0.974±0.040、0.164±0.036)与A组(0.942±0.054、0.162±0.025)差异无显著性(P>0.05)。结论:Erk1/2及PKB/Akt在去势组及假手术组大鼠阴茎中均有表达。去势大鼠阴茎海绵体磷酸化Erk1/2表达增强与ED发生有关。     

IGF-1、IGF-bp-3在去势大鼠阴茎海绵体中的表达及其意义

目的探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGF-BP-3)在去势大鼠阴茎海绵体中的表达及其意义。方法取16只成年雄性大鼠随机分为去势组、对照组。1周后取阴茎海绵体, 比色法测定阴茎海绵体一氧化氮(NO)含量(ΜG／G);原位细胞凋亡标记检测细胞凋亡数;逆转录多聚酶链聚合反应检测IGF-1、IGF-BP-3MRNA表达。结果 IGF-1MRNA在对照组中表达(1．44±0．29)而在去势组未检测到表达。IGF-BP-3MRNA在去势组表达量(3．52±1．4)较对照组(1．10±0．51)升高(P<0．01)。去势组阴茎海绵体细胞凋亡数(26．02±5．25)较对照组(12．51±1．81)高(P<0．05);凋亡细胞积分光密度去势组(33931．54±2459．36)较对照组(18766．37±3040．42)高(P<0．05)。去势组阴茎海绵体 NO浓度(14．45±2．38)较对照组(39．8±3．28)显著降低(P<0．01)。结论去势1周后阴茎海绵体细胞发生凋亡。去势后阴茎海绵体细胞凋亡可能与IGF-1MRNA表达降低及IGF-BP-3MRNA表达增高有关。     

Rho激酶及血红素氧合酶在自发性高血压大鼠阴茎海绵体中的表达

目的:探讨NOS/NO、HO/CO、RhoA/Rho激酶等信号通路在自发性高血压大鼠(SHR)阴茎海绵体中的表达及相互关系。方法:健康成年雄性SPF级SHR与对照组WKY大鼠各7只,16周龄,体重250~300g。麻醉后颈动脉和海绵体内插管连续监测平均动脉压(MAP)和海绵体内压(ICP)。利用电刺激海绵体神经,记录ICP/MAP比值变化。利用免疫组化和Western印迹方法分析ROCK2、HO-2、eNOS在阴茎海绵体中的表达变化。结果:SHR组在利用电刺激海绵体神经后ICP/MAP比值升高不明显(P>0.05),海绵体组织中ROCK2蛋白表达水平升高显著(P=0.017),HO-2表达水平则降低显著(P=0.006)。HO-2主要位于阴茎海绵体的平滑肌细胞及神经细胞内,eNOS则主要位于阴茎海绵体血管内皮细胞,两者在SHR组表达明显降低。结论:NOS/NO、HO/CO、RhoA/Rho激酶与SHRED有关,并且可能互相影响。     

P-Erk1/2和P-Akt1在高血压大鼠阴茎海绵体中的表达

目的:了解磷酸化Erk1/2(P-Erk1/2)和磷酸化Akt1(P-Akt1)在自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压大鼠阴茎海绵体中的表达及与勃起功能的关系。方法:健康成年雄性SPF级SHR与对照组WKY大鼠各8只,14周龄,体重250～300g。麻醉后颈动脉和海绵体内插管连续监测平均动脉压(MAP)和海绵体内压(ICP),利用电刺激海绵体神经,记录ICP/MAP比值变化;免疫组织化学及RT-PCR技术检测P-Erk1/2和P-Akt1在大鼠阴茎海绵体的表达。结果:3V和5V电刺激海绵体神经后SHR组ICP/MAP比值(0.26±0.06、0.28±0.04)均较WKY组(0.46±0.12、0.76±0.13)显著降低(P均<0.05),P-Erk1、P-Erk2mRNA和P-Erk1/2蛋白的相对表达量在SHR组(0.81±0.05、0.91±0.06、54.22±10.05)较WKY组(0.42±0.04、0.68±0.14、7.05±1.45)显著升高(P均<0.05);P-Akt1mRNA和P-Akt1蛋白的相对表达量在SHR组(0.90±0.05、11.17±2.21)与WKY组(0.92±0.06、10.91±1.86)无显著差异(P均>0.05)。结论:高血压性勃起功能障碍的发生与阴茎海绵体P-Erk1/2的过度表达有关,而与P-Akt1的表达水平无明显相关。     

肺纤维化对大鼠阴茎勃起功能的影响

目的:研究肺纤维化对大鼠勃起功能的影响及其机制。方法:12周雄性SD大鼠40只,随机分为4组:正常对照4周组(A组)、6周组(B组)和肺纤维化大鼠4周组(C组)、6周组(D组)各10只,分别用生理盐水(A、B组)及博莱霉素(5 mg/kg)气管内注入,饲养4周(A、C组)、6周(B、D组)后,测定大鼠血清睾酮、动脉血气分析、阴茎海绵体内压/平均颈动脉压(ICP/MAP),取阴茎标本测定NOS活性及cGMP含量,实时荧光PCR检测eNOS、iNOS和nNOS的mRNA在阴茎海绵体的表达,W estern印迹检测阴茎海绵体eNOS蛋白的表达。结果:电刺激的3 V,5 V C组ICP/MAP×100(16.37±2.19,27.19±3.18)较A组(30.78±2.66,50.09±6.97)显著降低(P<0.05),D组ICP/MAP×100,3 V,5 V(10.17±1.31,17.40±1.74)较B组(31.45±3.07,51.23±7.23)显著降低(P<0.05),D组ICP/MAP×100值较C组显著降低(P<0.05)。C组PaO2(75.50±13.87)mmHg较A组(103.80±6.88)mmHg显著降低(P<0.05),D组PaO2(83.60±5.50)mmHg较B组(102.70±5.77)mHg显著降低(P<0.05)。C组血清睾酮水平(391.1±264.7)ng/d l较A组(175.9±53.0)ng/d l显著升高(P<0.05),D组血清睾酮水平(745.4±408.8)ng/d l较B组(177.8±52.3)ng/d l显著升高(P<0.05),同时D组血清睾酮水平较C组显著升高(P<0.05)。C组NOS活性及cGMP含量[(1.50±0.14)U/mg prot,(35.69±3.64)pmol/mg]较A组[(2.66±0.39)U/mg prot,(51.10±7.22)pmol/mg]显著降低(P<0.05),D组NOS活性及cGMP含量[(1.40±0.20)U/mg prot,(34.55±4.30 pmol/mg)]较B组[(2.75±0.36)U/mg prot,(52.15±6.86)pmol/mg]显著降低(P<0.05),C组与D组比较NOS活性及cGMP含量无显著性差异(P>0.05)。C组eNOS蛋白表达量(0.79±0.01)较A组(0.87±0.01)显著降低(P<0.01),D组eNOS蛋白表达量(0.71±0.02)较B组(0.88±0.01)显著降低(P<0.05),D组较C组eNOS蛋白表达量显著降低(P<0.05)。C组eNOS mRNA表达量(4.46±0.92)较A组(2.61±0.68)显著升高(P<0.05),D组eNOS mRNA(2.79±0.60)表达量与B组(2.69±0.65)无显著性差异(P>0.05),nNOS及iNOS的mRNA表达量在A、B组与C、D组间均无显著性差异(P>0.05)。结论:肺纤维化可通过抑制阴茎海绵体eNOS蛋白的表达、降低总NOS活性及cGMP含量等机制抑制阴茎勃起功能。     

雄激素调控ERK1/2通路改善去势大鼠勃起功能的机制研究

目的:研究细胞外信号调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)通路在雄激素缺乏引起的勃起功能障碍(ED)中的作用。方法:8周龄健康雄性SD大鼠30只,随机分成对照组(A组)、去势组(B组)、去势后补充雄激素组(C组)。B组和C组大鼠均手术去势,其中C组大鼠在去势1周后注射十一酸睾酮(TU)100 mg/kg,其余组则注射等量生理盐水。1个月后测各组大鼠血清睾酮浓度、平均颈动脉压(MAP)、阴茎海绵体内压(ICP),通过Western印迹检测大鼠阴茎海绵体ERK1/2、内皮型一氧化氮合酶(e NOS)的蛋白表达。结果:B组大鼠血清睾酮[(1.27±0.48)nmol/L]较A组[(17.14±1.07)nmol/L]和C组[(16.24±1.90)nmol/L]明显降低(P0.05),ICP/MAP比值B组较A组和C组明显下降(P0.05);Western印迹结果显示ERK1/2在各组中表达基本一致(P0.05),而磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶1/2(P-ERK1/2)在B组中表达高于A组和C组(P0.05),e NOS在B组中表达明显低于A组和C组(P0.05)。结论:雄激素可能通过调控ERK1/2通路改善去势大鼠的勃起功能。     

Effect of low androgen status on the expression of adenosine A2A and A2B receptors in rat penile corpus cavernosum

To investigate whether low androgen status affects erectile function by regulating the expression of adenosine A_2A and A_2B receptors in rat penile corpus cavernosum. Thirty‐six 8‐week‐old male Sprague‐Dawley rats were randomly divided into six groups: sham‐operated group (4w‐sham, 8w‐sham), castration group (4w‐cast, 8w‐cast) and androgen replacement group (4w‐cast+T, 8w‐cast+T). The rats in the androgen replacement groups were subcutaneously injected with testosterone propionate (3 mg/kg) every other day after castration. The maximum intracavernous pressure/mean arterial pressure (ICPmax/MAP), the expression of A_2A, A_2B, AKT and eNOS and the concentrations of cAMP and cGMP in the corpus cavernosum were detected at the 4th and 8th weeks after the operation. The serum testosterone level and the ratio of ICPmax/MAP decreased significantly in the castration group as compared to other groups (p < 0.01). There was no significant difference in the expression of A_2A receptor among groups, while the expression of A_2B, AKT and eNOS and the concentrations of cAMP and cGMP in the castration group were significantly lower than in other groups (p < 0.01). Low androgen status inhibits the AKT/eNOS/cGMP signalling pathways and the production of cAMP in the corpus cavernosum of castrated rats by down‐regulating the expression of A_2B receptor, and results in decreased of ICPmax/MAP.     

Effects of icariin on erectile function and expression of nitric oxide synthase isoforms in castrated rats

Aim： To investigate the effect of icariin on erectile function and the expression of nitric oxide synthase （NOS） isoforms in castrated rats. Methods： Thirty-two adult male Wistar rats were randomly divided into one shamoperated group （A） and three castrated groups （B, C and D）. One week after surgery, rats were treated with normal saline （groups A and B） or oral icariin （1 mg/[kg·day] for group C and 5 mg/[kg·day] for group D） for 4 weeks. One week after treatment, the erectile function of the rats was assessed by measuring intracavernosal pressure （ICP） during electrostimulation of the cavernosal nerve. The serum testosterone （ST） levels, the percent of smooth muscle （PSM） in trabecular tissue, and the expression of mRNA and proteins of neuronal nitric oxide synthase （nNOS）, inducible nitric oxide synthase （iNOS）, endothelial nitric oxide synthase （eNOS） and phosphodiesterase V （PDES） in corpus cavernosum （CC） were also evaluated. Results： ICP, PSM, ST and the expression of nNOS, iNOS, eNOS and PDE5 were significantly decreased in group B compared with those in group A （P 〈 0.01）. However, ICE PSM and the expression of nNOS and iNOS were increased in groups C and D compared with those in group B （P 〈 0.05）. Changes in ST and the expression of eNOS and PDE5 were not significant （P 〉 0.05） in groups C and D compared with those in group B. Conclusion： Oral treatment with icariin （〉 98.6 % purity） for 4 weeks potentially improves erectile function. This effect is correlated with an increase in PSM and the expression of certain NOS in the CC of castrated rats. These results suggest that icariin may have a therapeutic effect on erectile dysfunction.