缝隙连接蛋白43和E-钙黏附素表达与喉癌生物学行为关系的研究

OBJECTIVE: To investigate expression of connexin43 (Cx43) and E-cadherin (E-cad) and its relationship with the biological behavior in Laryngeal carcinomas. METHODS: Immunohistochemistry staining (PicTure two steps method) was used to detect connexin 43 and E-cadherin expression in 60 paraffin-embedded laryngeal carcinomas and 10 normal epithelia around tumors. All the patients were followed up more than five years. RESULTS: Cx43 and E-cad were expressed by normal epithelia with typical membranous staining 10 normal epithelia strongly expressed Cx43 and E-cad. The reduction rate of Cx43 expression in laryngeal carcinomas was 30.0%. The significant relationship was observed between low Cx43 expression and differentiation, lymph node metastasis and recurrence (chi2 = 15.09, 6.41, 3.86, P < 0.01, 0.05, 0.05), but there was no significance between low Cx43 expression and prognosis (chi2 = 2.65, P > 0.05). 41.7% laryngeal carcinoma showed reduced or no expression of E-cad. Tumor cell dedifferentiation correlated with reduced expression for E-cad (chi2 = 15.07, P < 0.01). Absent or low E-cad expression was observed more frequently in patients with local recurrence and lymph node metastasis and with less than 5-year survival period (chi2 = 5.35, 6.65, 5.14; P < 0.05, 0.01, 0.05). There was a positive relationship between the expression of Cx43 and E-cad in same sample (r = 0.63, P < 0.0001). CONCLUSIONS: Laryngeal cancer presented inactivation of Cx43 gene and E-cad gene and down regulation of Cx43 and E-cad proteins. The level of Cx43 and E-cad may be a sensitive predictor of differentiation, invasion, lymph node metastasis and recurrence. E-cad is also a prognostic factor for patients with laryngeal cancer.     

喉癌E－钙粘附素蛋白表达

目的探讨上皮钙粘附索蛋白表达与喉鳞状细胞癌的临床和病理特征关系。方法应用免疫组化SP法检测60例喉癌中上皮钙粘附素(E—cad)蛋白表达情况,并将其表达与喉癌临床分型、临床分期、病理分化程度及颈淋巴结转移情况作统计学分析。结果E-cad蛋白在喉癌中表达下降,其表达与喉癌的临床分期、病理分化程度以及颈部淋巴结转移有关,与肿瘤原发部位无关。结论E-cad异常表达在喉癌的发生发展特别是颈淋巴结转移中发挥了重要作用,可作为判断喉癌恶性程度和淋巴结转移的一个生物学指标。     

三种癌基因与喉癌生物学行为关系的研究

为探讨癌基因在原发性喉癌中的增殖调控作用，采用免疫组化ＳＡＢＣ方法对３６例原发性喉癌行Ｐ１６、Ｒｂ和周期蛋白Ｄ１（ＣｙｃｌｉｎＤ１）的检测，结果：Ｐ１６在肿瘤中阳性率３０．６％与癌旁组织阳性率６１．１％之间差异有显著性（Ｐ＜０．０５），Ｒｂ、ＣｙｃｌｉｎＤ１阳性率分别为６１．１％和４７．２％。Ｐ１６与Ｒｂ之间阳性率差异有显著性（Ｐ＜０．０５），多数情况下当Ｐ１６阳性时Ｒｂ阴性，反之亦然。经秩相关检验Ｒｂ与ＣｙｃｌｉｎＤ１阳性呈正相关。Ｐ１６、Ｒｂ在肿瘤高、低分化之间表达差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。同一抗体在不同的临床分期及肿瘤部位和同一分期及部位在不同的抗体中表达差异不显著。结果显示：由Ｐ１６、Ｒｂ及ＣｙｃｌｉｎＤ１等形成的反馈调节链在喉癌的增殖调控中起重要作用。     

喉癌上皮细胞钙黏素和α-连环素的表达与临床因素的关系

目的探讨上皮细胞钙黏素（E-cadherin,E-cad）、α-连环素（α-catenin,α-cat）与喉癌各临床因素及预后的相关性.方法采用免疫组化检测79例喉癌患者肿瘤组织和10例正常喉黏膜的E-cad、α-cat表达.结果正常喉组织中E-cad、α-cat蛋白均呈阳性表达,喉癌中E-cad、α-cat阳性表达率分别为34.18%和40.51%,与正常喉组织比较有显著性差异（P=0.000）.喉癌E-cad、α-cat阳性表达组的5年生存率分别为63.80%、81.74%,而阴性表达组的5年生存率分别为50.68%和41.09%,阳性表达组的5年生存率均明显高于阴性表达组（P＜0.05和P=0.000）.α-cat蛋白表达与喉癌分型、颈淋巴结转移、临床分期、T分期、复发相关（P＜0.05）.结论E-cad、α-cat异常表达在喉癌的恶性进展过程中可能发挥重要作用,检测α-cat对喉癌患者预后评估有一定意义.     

E-cadherin表达与喉癌浸润、转移及复发关系的研究

为研究喉癌细胞浸润及颈淋巴结转移的机制,探讨喉癌转移或复发的早期诊断方法.用免疫组化方法,借助图像分析技术,研究了40例喉癌E-cadherin(E-CD)表达与喉癌细胞分化、转移及复发的关系.结果表明:E-CD蛋白表达与喉癌细胞的分化程度及浸润性有关.高分化癌细胞具有较强的E-CD蛋白表达,低分化癌表达较弱,转移或复发癌缺乏E-CD蛋白表达.因此,E-CD蛋白表达与喉鳞状细胞癌分化呈正相关,通过对喉原发癌中E-CD的检测,可以早期预测喉癌具有浸润、转移倾向.     

E-钙黏蛋白和组织蛋白酶D与血管内皮生长因子在喉鳞癌转移中的作用

目的探讨E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)和组织蛋白酶D(cathepsinD,Cath-D)在喉鳞癌淋巴结转移中与血管内皮生长因子(vascularendothe-lialgrowthfactor,VEGF)的关系。方法通过免疫组化SP法对60例喉鳞癌标本中E-cad、VEGF、Cath-D进行了检测。结果喉鳞癌中E-cad、VEGF、Cath-D的阳性表达率分别为75%、83%、66%。VEGF表达与Cath-D、E-cad表达相关(P<0.05)。在有淋巴结转移的喉鳞癌中E-cad、VEGF、Cath-D阳性率明显高于非转移组(P<0.05)。而E-cad与Cath-D在喉鳞癌中的表达无直接相关性;在E-cad、Cath-D表达阳性中VEGF表达较高,并多见于淋巴结转移的喉癌。结论E-cad、VEGF、Cath-D可能是喉鳞癌淋巴结转移的重要生物学指标,VEGF、Cath-D和E-Cad具有协同作用。     

喉癌组织中细胞黏附分子和尿激酶型纤溶酶原激活剂的表达及在预后评估中的价值

目的 研究喉癌组织中细胞黏附分子E-cadherin(ECD)和尿激酶型纤溶酶原激活剂(urokinase-type plasminogen activator,uPA)的表达及其在喉癌患者临床预后评估中的价值.方法 采用免疫组化Envision二步法分别检测ECD、uPA在51例喉癌切除标本组织中的表达情况并结合临床随访,分析其与临床病理参数及患者预后的关系.结果 ECD在51例喉癌中阴性表达24例(47.1%),uPA阳性表达26例(51.0%),ECD的表达缺失或下降、uPA的高表达与喉癌的淋巴转移有关(X~2值分别为5.545和5.790,P值分别为0.019和0.016).ECD阳性者生存率为74.1%,ECD阴性者生存率为54.2%,两者差异无统计学意义(X~2=2.534,P＞0.05).uPA阳性者生存率为50.0%,uPA阴性者生存率为80.0%,两者差异有统计学意义(X~2=6.259,P＜0.05).按照二者表达的不同分为4组:ECD(-)/uPA(-)、ECD(+)/uPA(-)、ECD(-)/uPA(+)、ECD(+)/uPA(+),ECD(-)/uPA(+)组与另外3组比较,有明显的淋巴转移倾向(X~2=11.937,P=0.008).ECD(+)/uPA(-)组生存率为78.6%,ECD(-)/uPA(+)组患者生存率为30.8%,两组差异有统计学意义(X~2=6.559,P=0.01).Cox多因素回归分析显示,ECD和uPA的表达及临床分期是影响患者预后的独立因素.结论 ECD和uPA表达的联合分析可有助于评估喉癌发生转移的危险性,并有助于为评估临床预后提供参考.     

上皮钙黏蛋白及其复合体的表达与垂体腺瘤侵袭性的相关性

目的探讨上皮型钙黏蛋白（E-cadherin,E-cad）及其与连环蛋白复合体（cadherincatenin complex,CCC）的表达与垂体腺瘤侵袭性的关系.方法垂体腺瘤78例,按Cottier等提出的鞍区MRI影像学判定标准将其分为侵袭性垂体腺瘤和非侵袭性垂体腺瘤.其中侵袭性垂体腺瘤44例,非侵袭性垂体腺瘤34例.免疫组织化学SP法检测E-cad及其复合体在侵袭性垂体腺瘤和非侵袭性垂体腺瘤中的表达.分析E-cad及其复合体的表达与垂体腺瘤激素分泌、是否伴有瘤卒中、坏死、囊性变及肿瘤大小等生物学行为的关系.结果44例侵袭性垂体腺瘤中30例（68.2%）表现为E-cad、α-cat和β-cat一致性低表达,14例（31.8%）表现为E-cad、α-cat和β-cat高、低表达特征无一致性.E-cad、α-cat在侵袭性垂体腺瘤和非侵袭性垂体腺瘤之间的表达差异有统计学意义（χ^2=13.969,P＜0.01）;β-cat在侵袭性垂体腺瘤的表达较非侵袭性垂体腺瘤表达低,但差异无统计学意义（χ^2=0.430,P＞0.05）;E-cad、α-cat在大腺瘤组较微腺瘤组表达低,两组之间差异有统计学意义（χ^2=5.038,P＜0.05）.E-cad在无功能垂体腺瘤较激素分泌性垂体腺瘤表达低,两组之间差异有统计学意义（χ^2=4.614,P＜0.05）.β-cat在伴有瘤卒中、坏死、囊性变组较不伴有组表达低,两组之间差异有统计学意义（χ^2=6.701,P＜0.05）.结论E-cad及其复合体的低表达或表达缺失与垂体腺瘤的侵袭性有关.     

表皮钙黏素基因表达与鼻咽癌浸润和转移

目的探讨表皮钙黏素(E-cadherin,E-CD)基因在鼻咽癌组织中的蛋白表达及其意义。方法用免疫组化技术检测了38例鼻咽癌和43例鼻咽炎症黏膜组织中E-CD蛋白的表达。结果E-CD蛋白在鼻咽炎症黏膜组织中表达率(81.4%),明显高于鼻咽癌中的阳性表达率(55.3%),P<0.05。E-CD蛋白表达与鼻咽癌临床分期相关不明显,P>0.05。与肿瘤的浸润转移呈负相关,即有颈淋巴结转移的鼻咽癌中E-CD表达率(45.8%),明显低于无颈淋巴结转移的鼻咽癌中表达率(71.4%),P<0.05。结论E-CD蛋白表达程度与鼻咽癌浸润、转移有关,通过E-CD蛋白的检测可了解鼻咽癌生物学特性及判断其预后提供有价值的指标。     

喉癌中上皮型钙黏蛋白和β-连环素的表达及其意义

目的:探讨上皮钙黏蛋白和β-连环素在喉癌组织中的表达及其临床意义.方法:应用免疫组织化学PicTureTM二步法,检测上皮钙黏蛋白和β-连环素在喉癌组织和癌周正常喉组织中的表达.结果:60例喉癌患者中,上皮钙黏蛋白和β-连环素的异常表达率为55.00%(33/60)和66.67%(40/60),按喉癌的临床分期、颈部淋巴结转移情况分组比较,均差异有统计学意义(均P＜0.05),喉癌的组织学分级比较,差异有统计学意义(P＜0.01),喉癌的原发部位及患者的性别、年龄差异无统计学意义(P＞0.05).同一标本中上皮钙黏蛋白和β-连环素表达有显著的相关性和一致性(P＜0.01).结论:上皮钙黏蛋白和β-连环素的异常表达与喉癌分化、分期、转移密切相关.     

喉癌细胞外基质糖蛋白的表达

目的 :探讨细胞外基质糖蛋白 (tenascin ,TN)在喉部良、恶性病变中的表达 ,及其与喉肿瘤发生及发展的关系。方法 :将 5 8例石蜡包埋喉部病变组织用鼠抗人单克隆抗 TN抗体行免疫组化染色 ,用HPIAS 10 0 0型医学彩色全自动图像分析系统进行分析。结果 :TN在喉部良性病变及正常组织的细胞外间质中无阳性染色 ,在喉的原位癌组织的细胞外间质中有弱阳性染色 ,且二者差异有显著性意义 (P <0 .0 0 1)。在喉的侵袭性鳞状细胞癌组织的细胞外间质中有强的TN染色 ,且在有淋巴结转移的肿瘤组织中染色更强 ,染色面积更广。在喉癌的各病理分级之间阳性染色差异无显著性意义 (P >0 .0 5 )。结论 :提示TN与喉癌的发生、发展和转移有关 ,而与其病理分级无关。     

p16蛋白表达与喉癌临床病理关系的研究

目的探讨p16蛋白表达与喉鳞状细胞癌的临床病理关系. 方法应用免疫组化SP法检测60例喉鳞癌组织中p16的蛋白表达情况. 结果 p16蛋白在喉鳞癌组织中的阳性表达率明显低于正常喉黏膜组织(P<0.05).随着临床分期的进展及组织学分化程度的降低,p16蛋白表达进一步降低.有颈淋巴结转移的喉癌组织p16蛋白阳性表达低于无转移的喉癌组织. 结论检测p16蛋白表达状况对喉癌的早期诊断和预后评估有临床参考价值.     

喉癌中原癌基因c-met蛋白的表达

目的研究原癌基因c-met蛋白在人类喉癌组织中的表达,探讨c-met的蛋白表达与喉癌的临床病理特征之间的关系.方法应用免疫组化SABC法检测80例人类喉癌组织标本及60例声带小结、息肉中c-met的蛋白表达,并行统计学分析.结果原癌基因c-met蛋白在声带小结、息肉中的表达率为10%,在喉癌组织中的表达率为65%;c-met蛋白的表达与喉癌的临床分期、病理学分级、淋巴结转移均显著相关(P＜0.01).结论原癌基因c-met蛋白在喉癌组织中高表达且与喉癌淋巴结转移、病理学分期、组织分级密切相关.     

喉癌组织血管内皮生长因子的表达与喉癌临床病理关系

目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)的表达与喉鳞状细胞癌的临床病理关系。方法 :采用SP免疫组织化学染色技术 ,评价 87例喉鳞癌患者的肿瘤组织中VEGF的表达和微血管计数 (MVC)。资料分析采用SAS软件。结果 :在喉鳞状细胞癌中 ,VEGF的免疫反应主要发生于肿瘤细胞的胞浆内 ,其阳性率为 77.0 %。肿瘤侵犯范围越广 ,VEGF的表达越强 ,肿瘤侵犯范围越小 ,VEGF的表达越弱 (P <0 .0 5 ) ;肿瘤分化越差 ,VEGF的表达越强 ,肿瘤分化越好 ,VEGF的表达越弱 (P <0 .0 5 ) ;VEGF的表达越强 ,MVC越多 ,二者呈明显的正相关(P <0 .0 1) ,且肿瘤组织中的平均MVC明显高于切缘组织中的平均MVC(P <0 .0 1)。结论 :在喉鳞状细胞癌中 ,VEGF的表达与肿瘤的临床分期和分化明显相关 ,与MVC存在着明显的正相关 ,提示VEGF在喉鳞状细胞癌的进展中具有重要的作用     

喉癌P53蛋白表达的临床意义

以免疫组化方法，用单克隆抗体ＤＯ－７检测了３８例喉鳞癌和２９例喉部良性病变组织中的突变型Ｐ５３蛋白的表达情况。结果显示：①６６％（２５／３８）的喉鳞癌中检出突变型Ｐ５３蛋白，喉良性病突变型Ｐ５３蛋白的阳性率仅为７％（２／２９）。突变型Ｐ５３蛋白在喉癌中的高比率表达与喉癌的的发生有关。以该蛋白是否表达作为喉癌的诊断和鉴别诊断的辅助依据，具有一定价值。②在部分喉鳞癌的癌旁呈不典型增生的上皮中，也可见突     

PLOD2蛋白在喉癌组织中的表达及其与预后的关系

目的　研究前原胶原赖氨酸-2-酮戊二酸5-双加氧酶（Recombinant procollagen lysine-2-oxoglutarate-5-dioxygenase，PLOD2）蛋白在喉癌组织中的表达与患者临床病理特征的关系及其与预后的关系。方法　对114例喉癌患者肿瘤石蜡标本中PLOD2的表达情况采用免疫组化方法检测，并用χ2检验分析其与临床病理特征的关系、Kaplan-Meier法进行生存分析、Cox比例风险模型进行复发多因素分析。从病例中随机选出8例患者的新鲜冰冻标本，采用实时定量聚合酶链反应和蛋白质印迹方法对8例患者的肿瘤组织和癌旁正常组织中PLOD2的表达情况进行检测。结果　PLOD2蛋白与临床分期、T分级有关（P 均＜0.05）。实时定量聚合酶链反应中喉癌组织PLOD2蛋白的表达水平高于癌旁正常组织（P＜0.05）。蛋白质印迹方法中喉癌组织PLOD2蛋白表达水平要高于癌旁正常组织（P＜0.05）。Kaplan-Meier生存分析显示，PLOD2低表达与患者生存率有关（χ2=12.484，P＜0.001），多因素Cox回归分析显示，PLOD2蛋白表达和M分级是影响喉癌生长的 独立危险因素。结论　PLOD2蛋白表达的高低与临床分期、T分级呈正相关。PLOD2蛋白是影响喉癌生长的独立危险因素，PLOD2蛋白表达越高，患者预后越差生存率越低。PLOD2蛋白表达对喉癌的生长、预后可能起着重要作用，可能是判断喉癌生长和预后的一种新的分子标志物。     

声门上喉癌MMP-2和E-cadherin的表达与颈部淋巴结转移的相关性研究

目的:探讨MMP-2、E-cadherin在喉癌组织中的表达及其与喉癌颈部淋巴结转移之间的关系。方法:应用免疫组织化学SP法检测10例正常喉黏膜和48例原发性声门上喉癌组织中MMP-2和E-cadherin的表达。结果:MMP-2在声门上喉癌组织中的表达明显高于正常喉黏膜组织中的表达;淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组(P<0.05);E-cadherin在正常喉黏膜组织中的表达明显高于在声门上喉癌组织中的表达;在淋巴结转移组明显低于无淋巴结转移组(P<0.05)。MMP-2和E-cadherin在声门上喉癌组织中的表达呈负相关(r=-0.41)。分别用MMP-2( )、E-cadherin(-)及MMP-2( )与E-cadherin(-)联合来预测喉癌颈部淋巴结转移,MMP-2( )的敏感性最高(91.7%),特异性(58.3%)和阳性预测值(68.8%)最低。MMP-2( )与E-cadherin(-)联合的敏感性最低(79.2%),特异性(95.8%)和阳性预测值(95.0%)最高。E-cadherin(-)的各项指标介于两者之间。结论:MMP-2和E-cadherin蛋白的表达可以作为判断声门上喉癌淋巴结转移的有效指标,联合应用MMP-2和E-cadherin蛋白的检测能够提高判断声门上喉癌淋巴结转移的准确率,对于声门上喉癌的手术治疗具有指导意义。     

细胞周期蛋白G2在喉癌中的表达

目的探讨细胞周期蛋白G2(Cyclin G2)的表达与喉鳞状细胞癌的关系。方法收集2000年1月～2000年12月共81例喉鳞状细胞癌患者的临床资料和石蜡块,用免疫组化方法检测肿瘤组织、喉癌旁黏膜Cyclin G2表达:并分析Cyclin G2的表达与喉癌患者年龄、性别、临床分期、肿瘤分化程度以及预后等的关系。统计学分析采用SPSS12.0软件。结果Cyclin G2在喉癌中阳性表达率为67.9%,并随分化程度的降低而降低,有、无淋巴结转移者阳性率分别为38.4%和73.5%,差异均具有显著性(P>0.05)。结论Cyclin G2表达强度与喉癌的恶性程度及发展趋势明显负相关,可作为预测喉癌预后的生物学指标之一。     

三种癌基因与喉癌生物学行为关系的研究

为探讨癌基因在原当性喉癌中的增殖调控作用，采用免疫组化ＳＡＢＣ方法对３６例原发性喉部行Ｐ１６，Ｒｂ和周期蛋白Ｄ１的检测，结果：Ｐ１６在肿瘤中阳性率３０．６％，与癌旁组织阳性率６１．１％之间差异有显著性（Ｐ〈０．０５），Ｒｂ，Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１阳性率分别为６１．１％和４７．２％，Ｐ１６与Ｒｂ之间阳性率差异有显著性（Ｐ〈０．０５），多数情况下当Ｐ１６阳性归Ｒｂ阴性，反之亦然。经秩相关检验Ｒｂ与Ｃｙｃｌ     

凋亡抑制蛋白Livin在喉癌中的表达和意义

目的研究凋亡抑制蛋白Livin在喉癌周黏膜、喉不典型增生和喉鳞状细胞癌(简称喉癌)组织中的表达以及与喉癌各临床因素的相关性。方法采用免疫组织化学SP法检测10例喉癌周黏膜,12例喉不典型增生和61例喉癌中Livin蛋白的表达,分析其与喉癌发生、发展及预后的关系。结果Livin在喉癌中阳性表达率为67.21%(41/61);在喉不典型增生中为25% (3/12);在喉癌周黏膜中表达阴性。在喉癌组中Livin高表达与临床分期、T分期、病理分化程度呈显著相关(P<0.05);与年龄、部位、淋巴转移无显著相关(P>0.05),随访发现该蛋白的表达与患者5年生存率无显著相关(P>0.05)。结论凋亡抑制蛋白Livin在喉癌的发生、发展中起着重要作用,尚不能作为判断患者预后的一项指标,该基因有望成为喉癌基因治疗的一个新的有效的靶点。