生长激素对小鼠子宫内膜容受性的影响

目的观察生长激素对着床期小鼠子宫内膜组织LIF、整合素仅αvβ3,及MMP-9表达的影响,以探讨改善子宫内膜容受性的方法。方法随机将50只雌性小鼠平均分成两组,对照组为生理盐水（NS）组,实验组为生长激素（GH）组,取妊娠第4d子宫内膜,用免疫组化技术检测子宫内膜LIF、整合素αvβ3及MMP-9的表达。结果GH组子宫内膜LIF、整合素αvβ3,及MMP-9的表达呈强阳性,NS组表达弱于GH组,两组差异有显著性（P〈0．05）。结论生长激素可以增强着床期子宫内膜LIF、整合素αvβ3,及MMP-9的表达,从而改善子宫内膜容受性,提高临床妊娠率。     

中药抑抗汤含药血清对子宫内膜容受性的影响

目的探讨中药抑抗汤含药血清对体外培养的小鼠子宫内膜容受性的影响。方法40只实验小鼠随机分为两组,分别用中药抑抗汤0.8ml和等量生理盐水灌胃28d,制备含药血清和空白血清。提取妊娠第4天(D4)雌鼠子宫内膜细胞后分为含药血清(A组)、胎牛血清(B组)和空白血清(C组)三组进行细胞培养。黏附实验检测子宫内膜细胞的黏附能力,ELISA法检测细胞培养液白血病抑制因子(LIF)水平,Western blot检测整合素ανβ3蛋白水平。结果 A组细胞黏附能力、LIF和整合素ανβ3蛋白表达均较B、C组显著增加(P<0.05)。结论抑抗汤可能是通过增强细胞黏附功能,增加LIF和整合素ανβ3的表达来改善子宫内膜容受性。     

αvβ6整合素在子宫内膜异位症中的表达及生物学意义

目的 在基因及蛋白水平分析αvβ6整合素在子宫内膜异位症(endometriosis, EM)的在位内膜、异位内膜及对照组正常在位子宫内膜的表达状况,探讨其表达的生物学意义.方法 用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫组化法对34例EM患者在位和异位内膜,28例非EM患者的在位子宫内膜αvβ6整合素的表达进行半定量、定位分析,并与EM临床分期、类型及部位相联系.结果 αvβ6整合素基因和蛋白在EM患者异位内膜、在位内膜及对照组正常在位内膜的腺上皮中均有不同程度的表达.异位内膜αvβ6整合素mRNA表达显著高于EM在位内膜(P<0.01);EM在位内膜αvβ6整合素mRNA表达显著高于对照组正常在位内膜(P<0.01).EM异位内膜αvβ6蛋白质阳性表达率高于在位内膜(P<0.05),EM在位内膜阳性表达率高于对照组正常在位内膜(P<0.05).卵巢子宫异位囊肿壁αvβ6整合素mRNA值与腹膜红色样病变相比差异无统计学意义(P>0.05),2组与宫骶韧带结节αvβ6整合素mRNA值相比差异有统计学意义(P<0.01).增殖期与分泌期在位内膜αvβ6整合素基因及蛋白的表达比较差异无统计学意义(P＞0.05).不同期别αvβ6基因及蛋白表达比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 αvβ6整合素参与了EM的发病过程,不同部位异位内膜的αvβ6整合素表达量有显著不同.     

Effect of traditional Chinese medicine YiKang decoction on endometrial receptivity

目的 探讨中药抑抗汤含药血清对体外培养的小鼠子宫内膜容受性的影响.方法 40只实验小鼠随机分为两组,分别用中药抑抗汤0.8ml和等量生理盐水灌胃28d,制备含药血清和空白血清.提取妊娠第4天(D4)雌鼠子宫内膜细胞后分为含药血清(A组)、胎牛血清(B组)和空白血清(C组)三组进行细胞培养.黏附实验检测子宫内膜细胞的黏附能力,ELISA法检测细胞培养液白血病抑制因子(LIF)水平,Western blot检测整合素ανβ3蛋白水平.结果 A组细胞黏附能力、LIF和整合素ανβ3蛋白表达均较B、C组显著增加(P＜0.05).结论 抑抗汤可能是通过增强细胞黏附功能,增加LIF和整合素ανβ3的表达来改善子宫内膜容受性.     

超排卵着床期小鼠子宫内膜LIF表达与雌孕激素的关系

目的 研究超排卵对围着床期小鼠子宫内膜UF表达的影响及其与雌孕激素的关系,探讨超排卵是否影响子宫内膜容受性的形成.方法 将实验动物随机分为超排卵妊娠组和正常妊娠对照组,分别选取动情周期当天、合笼后发现阴道栓第2天、第4天、第6天、第8夫共五个时间点取小鼠子宫内膜,用免疫组化和原位杂交法测定小鼠子宫内膜LIF的蛋白表达和LIF mRNA的表达.同时分别测定小鼠血清雌、孕激素水平.结果 正常妊娠组小鼠LIF蛋白在围着床期子宫内膜上的表达动情周期较低,在妊娠之后开始上升,在妊娠第4天(即小鼠孕卵着床当天)达到最高峰(P<0.05),继之在子宫内膜的表达下降.在妊娠第8天降到非孕期水平:超排卵组小鼠围着床期子宫内膜LIF蛋白随着妊娠天数而表达增加,在妊娠第2天达到最高峰(P<0.05),继之在子宫内膜的表达下降,在妊娠第8天降至非孕期水平.超排卵组与对照组相比较,其在妊娠第2天的表达明显高于对照组(P<0.05),在妊娠第4天的表达明显低于对照组(P<0.05);超排卵组和对照组小鼠血清雌、孕激素浓度均随妊娠天数的增加逐渐升高.在各时间点超排卵组的雌、孕激素水平明显高于对照组(P<0.05).小鼠子宫内膜LIF蛋白的表达与雌激素水平在一定范嗣内成正相关,超过一定临界水平后呈负相关(P<0.05),而与孕激素未发现有相关性(P>0.05).结论 超排卵可能对小鼠围着床期子宫内膜LIF蛋白的表达有影响,使其表达峰值提前,由此推测影响子宫内膜容受性的建立;体内雌激素水平与同着床期子宫内膜LIF蛋白的表达有相关性,但尚不能排除孕激素水平与其有相关性,说明LIF蛋白的表达与雌激素的调控有关,并且可能存在一定的数量关系.     

整合素β3在子宫内膜异位症中的表达与分析

整合素是一类细胞黏附分子,它们是异二聚体糖蛋白,由非共价联系的α和β亚单位组成[1],在正常月经周期中,整合素在子宫内膜上皮细胞表面呈现时间及空间上的特异性表达.据报道α1,α4,β3整合素亚单位在腺上皮和腔上皮表达呈周期性,这三种整合素亚单位作为子宫内膜容受性的标志.β3亚单位出现在黄体中期以后子宫内膜腺上皮,直至分泌期末,近几年研究表明β3亚单位的变化,在内异症的发生发展和不孕中起着重要作用.     

P-STAT3在子宫内膜异位症中表达的初步研究

目的研究子宫内膜异位症中磷酸化信号传导和转录激活因子3（P-STAT3）蛋白的表达和意义。方法采用免疫组化SP法检测P-STAT3蛋白在子宫内膜异位症患者的在位内膜、异位内膜和正常子宫内膜各40例中的表达情况。结果P-STAT3蛋白在子宫内膜异位症的在位内膜和异位内膜中的表达强度高于正常子宫内膜,P-STAT3蛋白在子宫内膜异位症异位内膜中的表达强度高于在位内膜,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论P-STAT3在子宫内膜异住症的发病中有重要意义。     

纤维粘连蛋白及其受体整合素β1在子宫内膜异位症中的表达

子宫内膜异位症是指本来该长在子宫最内层的内膜组织，却异常地生长在子宫内膜层以外的地方。本文对纤维粘连蛋白及其受体整合素β1在子宫内膜异位症中的表达进行探讨。     

整合素ανβ3和血管内皮生长因子在子宫内膜异位症中的临床研究

目的：通过检测子宫内膜异位症患者整合素ανβ3和血管内皮生长因子（VEGF）的表达,探讨其在子宫内膜异位症的发病机制。方法采用免疫组化方法检测40例异位内膜、在位内膜中整合素ανβ3和VEGF的表达,并和30例正常子宫内膜作对照。结果异位内膜组整合素ανβ3阳性表达率为80%,在位内膜为62.5%,正常内膜组为16.67%;异位内膜VEGF阳性表达率为82.5%,在位内膜为50%.正常对照组为20%。异位内膜组整合素ανβ3和VEGF高于在位内膜组,在位内膜组二者水平则高于正常内膜组,差异有统计学意义（P〈0.05）。异位内膜整合素ανβ3与VEGF表达呈正相关。结论整合素ανβ3与VEGF在异位内膜和在位内膜的异常表达,在子宫内膜异位症的发病过程中起着重要作用,二者可能存在协同作用,促进病变的进一步发展。     

整合素β_1和层粘连蛋白在不孕症患者子宫内膜和正常早孕蜕膜组织中表达的研究

目的:检测整合素β1(Integrinβ1)和层粘连蛋白(Laminin,LN)在不明原因不孕妇女子宫内膜、正常子宫内膜和宫内早孕蜕膜组织中的表达情况。方法:采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(S-P)法检测30例不明原因不孕症子宫内膜组织,20例宫内早孕蜕膜组织及20例正常宫内膜组织中整合素β1和LN的表达水平及分布。结果:整合素β1和LN在宫内早孕蜕膜腺上皮细胞中表达水平增高;整合素β1在不明原因不孕子宫内膜各期腺上皮、基质细胞表达水平显著减低,LN在不明原因不孕子宫内膜表达程度最高。结论:整合素β1和LN在子宫内膜的表达异常可使子宫内膜容受性降低、子宫内膜与胚泡发育不同步,从而使着床失败,导致不孕。     

935MHz微波电磁辐射对小鼠着床期内膜细胞LIF蛋白表达的影响

目的:研究935MHz微波电磁辐射对小鼠着床期内膜细胞LIF蛋白表达的影响。方法:将受精后小鼠暴露于不同时间、不同强度的935MHz辐射波连续辐射3天,于受孕第4天取孕鼠子宫内膜,运用Western blot方法检测细胞内LIF蛋白的表达。结果:在辐射时间相同的情况下,高强度4h/d组和中强度4h/d组子宫内膜腺上皮细胞内膜LIF表达量明显下降;辐射强度相同时,中强度4h/d组与中强度2h/d组组比较、高强度4h/d组组与高强度2h/d组比较,LIF表达量也有明显减弱,显示辐射时间的长短可能影响LIF的表达,且微波对LIF表达的抑制作用具有蓄积效应。结论:935MHz微波电磁辐射通过影响孕鼠胚胎着床期子宫内膜细胞内LIF蛋白的表达,导致子宫内膜容受性发生改变,进而影响胚胎着床过程。     

输卵管积水性不孕症患者子宫内膜形态及容受性评估IVF-ET妊娠结局的临床研究

目的 探究输卵管积水性不孕症患者动态子宫内膜形态及容受性在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)妊娠结局中的评估作用。方法 选取输卵管积水性不孕症患者99例,均行拮抗剂方案助孕,根据第一周期IVF-ET妊娠结局分为妊娠组(43例)和未妊娠组(56例),比较2组子宫内膜形态及血流动力学指数,同时采集取卵周期“着床窗”内膜活检标本,采用免疫组织化学染色检测同源框基因A10(HOXA10)和整合素家族(α_vβ3)表达。结果 2组患者子宫位置和子宫内膜形态情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。COH周期启动日(D1)时,妊娠组子宫动脉PI低于未妊娠组;HCG注射日(D2)时,妊娠组子宫内膜厚度大于未妊娠组,子宫动脉PI和RI均低于未妊娠组(P<0.01);妊娠组患者内膜组织中HOXA10和α_vβ3表达高于未妊娠组(P<0.05)。D2时子宫动脉RI、内膜组织HOXA10和α_vβ3表达是影响患者IVF-ET妊娠结局的独立因素(P<0.05);内膜组织HOXA10和α_vβ3表达预测患者I...     

白血病抑制因子在原发性不孕患者黄体中期子宫内膜的表达及意义

目的检测白血病抑制因子(LIF)在原发性不孕、正常早孕蜕膜和正常子宫内膜中的表达,探讨其与原发性不孕及妊娠的关系。方法应用免疫组织化学S-P法检测LIF在30例原发性不孕患者的黄体中期子宫内膜、20例早孕流产蜕膜组织和15名正常黄体中期子宫内膜中的表达。结果 LIF在原发性不孕子宫内膜表达水平显著降低,与正常子宫内膜及宫内早孕蜕膜组织相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 LIF在原发性不孕子宫内膜中低表达可能会导致子宫内膜接受性的降低,使着床失败引起不孕。     

大肝癌TACE后肿瘤组织VEGF、αv整合素表达及MVD变化

目的观察大肝癌经导管动脉化疗栓塞（TACE）后残存肿瘤组织血管内皮生长因子（VEGF）、αv整合素表达及微血管密度（MVD）变化的意义。方法 96例大肝癌前瞻性分成术前TA-CE组40例（TACE组）与一期手术组56例（手术组）,用免疫组化方法检测96例手术切除标本肿瘤组织VEGF、αv整合素表达及MVD值。结果术前TACE组肿瘤组织VEGF、αv整合素表达免疫反应积分显著高于手术组（分别为P=0.042,P=0.033）,MVD两者无显著差异（P=0.103）。结论大肝癌术前TACE促使残存肿瘤组织VEGF及αv整合素的表达增高,有可能促进肿瘤细胞转移。     

壳聚糖中药复方防治非酒精性脂肪性肝炎的实验研究

目的探明壳聚糖中药复方拮抗非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的作用及其机制。方法健康雄性C57BL/6J小鼠18只,随机分为3组,每组6只。采用高脂、胆碱-蛋氨酸缺乏(high fat,methionine and choline deficient diet,MCD)饮食4周建立小鼠NASH模型,应用壳聚糖中药复方进行干预实验,并以胆碱-蛋氨酸充足饮食设立对照组。酶法测定血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、总胆固醇(total cholesterol,TC)和三酰甘油(triglyeride,TG)水平;双抗体夹心ELISA法测定血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-6(interleukin-6,IL-6)水平;光镜下观察肝组织脂肪变程度、炎症活动及纤维化程度;实时定量PCR法检测肝组织TNF-α和IL-6mRNA的表达。结果对照组小鼠肝脏未出现明显的脂肪变及炎症;模型组小鼠肝脂肪变及炎症明显,TNF-α和IL-6的表达显著升高(P<0.01);壳聚糖中药复方干预组肝组织脂肪变及炎性均较模型组明显减轻,TNF-α和IL-6的表达明显降低(P<0.01)。结论壳聚糖中药复方可通过抑制炎症因子TNF-α和IL-6的表达、纠正脂代谢紊乱来阻止或延缓非酒精性脂肪性肝炎的进展,是防治脂肪性肝病的有效措施之一。     

雌激素受体、孕激素受体及细胞凋亡调控因子在子宫内膜息肉组织中的表达及意义

目的 探讨雌激素受体α（ERα）、雌激素受体β（ERβ）、孕激素受体（PR）及细胞凋亡调控因子在子宫内膜息肉组织中的表达及意义.方法 选择50例子宫内膜息肉的患者为息肉组,并选择45例子宫内膜正常体检者作为对照组.采用酶联免疫测定法分别对两组的FSH、LH、E2、P、T及PRL六项水平进行检测.并对两组患者子宫内膜的ERα、ERβ、PR及Bcl-2的表达情况进行比较.结果 两组患者的FSH、LH、E2、P、T及PRL六项水平差异均无统计学意义（均P＞0.05）.增殖期的息肉组ERα、ERβ的表达水平与对照组均无统计学意义（均P＞0.05）,PR的表达水平（0.47±0.02）分,明显低于对照组的（0.53±0.02）分（t=10.383,P =0.000）,Bcl-2表达水平（0.53±0.04）分,明显高于对照组的（0.49±0.02）分（t=4.322,P=0.000）.分泌期的息肉组ERα、Bcl-2表达水平（0.46±0.07）、（0.43±0.04）分,明显高于对照组的（0.37±0.05）、（0.39±0.03）分（t=5.007,P=0.000;=3.834,P=0.000）,PR的表达水平（0.42±0.02）分,明显低于对照组的（0.46±0.01）分,两组的ERβ表达水平差异无统计学意义（t=8.486,P=0.000）.结论 ERα、Bcl-2表达水平的升高,以及PR表达水平的降低与患者发生子宫内膜息肉密切相关.     

单侧输尿管结扎幼鼠肾间质纤维化中周细胞转分化趋势及意义

目的本实验旨在通过观察单侧输尿管结扎(UUO)幼鼠模型中周细胞标志物胶原Ⅰ型蛋白(coll1α1)、血小板源性生长因子β(PDGFRβ)、神经生长因子2(NG2)、平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平的变化,进而探讨周细胞转分化趋势,以及用雷公藤多苷治疗后的干预效果。方法采用UUO模型,将5⁶周龄90只雄性幼年SD大鼠,按随机数表法平均分为3组,即假手术组(行手术分离但不结扎左侧输尿管)、模型组(手术结扎左侧输尿管近肾盂段)和雷公藤多苷干预组。分别在术后1、2、3、7、14 d每组各取6只小鼠处死,留取左肾,采用免疫组织化学法检测周细胞标志物coll1α1、PDGFRβ、NG2、α-SMA在肾间质纤维化过程中的表达水平的变化,同时利用Masson染色观测绿染面积(胶原纤维)的大小变化。结果 UUO模型组中coll1α1、PDGFRβ、NG2、α-SMA的表达水平显著高于假手术组(P<0.01),随着梗阻时间的延长,其表达水平均呈增高的趋势,纤维化程度逐渐加重;UUO模型组中Masson染色蓝染面积随着实验时间的增加而增大;雷公藤多苷干预组各时间点coll1α1、PDGFRβ、NG2、α-SMA的表达水平均低于模型组(P<0.01),纤维化程度较其减轻,但仍高于假手术组(P<0.01)。结论肾间质纤维化过程中,周细胞发生了转分化,治疗组雷公藤多苷可能有一定的抑制周细胞转分化作用,从而延缓纤维化的进程。     

肾虚大鼠子宫内膜容受障碍免疫学机制的研究

目的建立肾虚型子宫内膜容受障碍大鼠模型,探讨其容受障碍的免疫学机制。方法以羟基脲建立肾虚型大鼠模型,比较模型大鼠与正常雌性大鼠动情期外周血自然杀伤（NK）细胞CD56＋CD16＋、CD56＋CD16、CD56CD16＋亚群水平,白细胞介素-2（IL-2）、白血病抑制因子（LIF）水平,以及内膜IL-2、LIF、各亚群NK细胞表达。大鼠羟基脲造模后妊娠第11天,比较其与正常妊娠大鼠外周血NK细胞、IL-2和LIF的量,以及蜕膜中IL-2、LIF、各亚群NK细胞表达。结果模型组大鼠外周血CD56CD16＋较正常大鼠明显增加、CD56＋CD16/CD56CD16＋明显减少（P〈0.05）;内膜CD56＋CD16＋、CD56＋CD16均明显减少（P〈0.05）,LIF明显减少（P〈0.05）;造模大鼠妊娠后,蜕膜LIF较正常妊娠大鼠明显减少（P〈0.05）。结论羟基脲致肾虚型大鼠模型子宫内膜容受障碍,其致病机制是全身和局部免疫功能异常,可影响妊娠结局。     

沙利度胺对子宫内膜异位症的内膜间质细胞体外表达VEGF的影响

目的:观察沙利度胺(ThD)对子宫内膜异位症病人内膜间质细胞的增殖及其血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:刮取子宫内膜异位症病人的子宫内膜组织,经体外分离、培养,用波形蛋白单抗进行免疫组化染色鉴定,应用四唑盐(MTS)分析肿瘤坏死因子α(TNF-α)和ThD对间质细胞生长的影响,以实时荧光定量PCR、Western Blot和定量ELISA分析在存在外源TNF-α的情况下,不同浓度ThD对间质细胞表达VEGF的影响。结果:TNF-α能促进子宫内膜间质细胞的增殖和分泌VEGF,而ThD能剂量依赖性抑制内膜间质细胞的增殖,并逆转TNF-α对VEGF的上调作用。结论:ThD可抑制体外培养的子宫内膜异位症内膜间质细胞的增殖及其VEGF的表达和分泌,提示ThD对于治疗子宫内膜异位症可能具有一定的作用。